Canine transmissible venereal tumor with spontaneous remission: case study with emphasis on clinical and cytopathological exams to monitor tumor evolution / Tumor venéreo transmissível canino com remissão espontânea: estudo de caso com ênfase aos exames clínico e citopatológico para monitoramento da evolução tumoral

The canine transmissible venereal tumor (TVTC) is a neoplasm transmitted mainly through copulation and with a high incidence in stray dogs in Brazil. In the process of tumor evolution of TVTC, the progression, stationary and regression phases are recognized. The host immunity is related to the disease's biological behavior, however, spontaneous regression observation in cases of naturally occurring TVTC is uncommon. A canine patient was attended, after beeing rescued from the street, due to an ulcerated mass in the external genitália and tick infestation. Cytopathological examination, which diagnosed TVTC, and laboratory tests that showed mild anemia and severe thrombocytopenia were performed. In view of the impossibility of carrying out other exams, it was made the presumptive diagnosis of canine monocytic ehrlichiosis (CME), and treatment was instituted. During follow-up it was observed quick improvement in clinical signs and laboratory changes, as well as a reduction in tumor mass. A new cytopathological evaluation was carried out, and was verified increase in mature lymphocytes and plasmocytes in the midst of the tumor cells, finding compatible with the stationary phase of the disease. From that moment on, it was decided to perform only clinical and cytopathological follow-up. In the following evaluations, continuous clinical remission and cytopathological findings compatible with those described in the regression phase were observed, until its complete remission. It is considered that the improvement in the general health of the patient after the treatment of CME is related to the spontaneous regression of TVTC, and that simultaneous performance of serial clinical and cytopathological exams may be feasible and useful for monitoring the stages of evolution of TVTC.

O tumor venéreo transmissível canino (TVTC) é uma neoplasia transmitida principalmente através da cópula, com elevada incidência em cães errantes no Brasil. No processo de evolução tumoral do TVTC, são reconhecidas as fases de progressão, estacionária e de regressão. O estado imunológico do hospedeiro está relacionado ao comportamento biológico da doença, contudo, a observação de regressão espontânea em casos de TVTC de ocorrência natural é incomum. Foi atendida uma paciente canina, resgatada da rua, por apresentar massa ulcerada na genitália externa e infestação por carrapatos. Foram realizados exame citopatológico, que diagnosticou TVTC, e exames laboratoriais que evidenciaram anemia discreta e grave trombocitopenia. Com isso e diante da impossibilidade de realizar outros exames, foi também estabelecido o diagnóstico presuntivo de erlichiose monocítica canina (EMC) e instituído tratamento para a hemoparasitose. Durante o acompanhamento, foi observada rápida melhora dos sinais clínicos e das alterações laboratoriais, bem como a redução espontânea da massa tumoral. Em sequência, foi realizada nova avaliação citopatológica do TVTC e verificado o aumento quantitativo de linfócitos maduros e plasmócitos, em meio as células tumorais, achado compatível com a fase estacionária da doença. A partir desse momento, optou-se por realizar apenas acompanhamento clínico e avaliação citopatológica da neoplasia. Foram observados contínua remissão clínica e achados microscópicos compatíveis com a fase de regressão do tumor, até sua remissão completa. Pondera-se que a melhora na saúde geral da paciente após o tratamento da EMC esteja relacionada à regressão espontânea do TVTC, e que realização simultânea de exames clínico e citopatológico seriados pode ser viável e útil ao acompanhamento das fases de evolução do TVTC.

Biochemical, microbiological and technological characteristics of type II sourdoughs produced with lactic acid bacteria single-strains / Características bioquímicas, microbiológicas e tecnológicas de sourdoughs tipo II produzidos com uma única cepa de bactéria ácido lática

The interplay between biochemical characteristics and the generation of volatile compounds in 11 type II sourdough fermented by single strains of lactic acid bacteria (LAB) was studied. Samples were collected at 0, 6, 9, 12, 15, 18 and 24h for analyses of microbial growth, pH, titratable acidity and CO2 production. During the first 12h, the LABs entered the stationary phase, and the formation of organic and carboxyl acids, alcohols, and esters were observed. Although acidity is an important characteristic of sourdough, in this work increasing the acetic acid content decreased yeast growth and the CO2 retention capacity of the doughs. The main carbohydrate consumed by autochthonous yeast was influenced by the LAB added (homo-or heterofermentative), as observed by correlation analysis. Maltose and glucose showed a strong and negative correlation with the yeast cell density in the dough fermented by homo and heterofermentative LAB, respectively. Moreover, LAB had an important effect on the aromatic profile, being the alcohols, aldehydes, alkanes, organics acids and esters mainly groups characterized. Altogether, 100 different volatile compounds were identified; however, each dough had a different volatile profile. This study shows, for the first time, the influence of a single strain of LAB on the characteristics of type II sourdough.(AU)

As características bioquímicas e a produção de compostos voláteis em 11 diferentes sourdough tipo II produzido com uma única cepa de bactérias do ácido láctico (BAL) em foi estudada. As amostras foram coletadas às 0, 6, 9, 12, 15, 18 e 24 h para análises de crescimento microbiano, pH, acidez titulável e produção de CO2. Durante as primeiras 12 h, as BAL entraram em fase estacionária, sendo observada a formação de ácidos orgânicos e carboxílicos, álcoois e ésteres. Embora a acidez seja uma característica importante do sourdough, neste trabalho o aumento do teor de ácido acético diminuiu o crescimento das leveduras e a capacidade de retenção de CO2 nas massas. Também foi observado que o principal carboidrato consumido pelas leveduras autóctones foi influenciado pela BAL adicionada (homo ou heterofermentativas), conforme observado pela análise de correlação. A maltose e a glicose apresentaram uma correlação forte e negativa com a densidade celular de levedura na massa fermentada por BAL homo e heterofermentativas, respectivamente. Além disso, a BAL teve efeito importante no perfil aromático, sendo os álcoois, aldeídos, alcanos, ácidos orgânicos e ésteres os principais compostos caracterizados. Ao todo, foram identificados 100 compostos voláteis diferentes; no entanto, cada massa apresentou um perfil volátil diferente. Este estudo mostra, pela primeira vez, a influência de uma única cepa de BAL nas características de sourdough tipo II.(AU)

Biofilm production and beta-lactamic resistance in Brazilian Staphylococcus aureus isolates from bovine mastitis

Staphylococcus spp. play an important role in the etiology of bovine mastitis. Staphylococcus aureus is considered the most relevant species due to the production of virulence factors such as slime, which is required for biofilm formation. This study aimed to evaluate biofilm production and its possible relation to beta-lactamic resistance in 20 S. aureus isolates from bovine mastitic milk. The isolates were characterized by pheno-genotypic and MALDI TOF-MS assays and tested for genes such as icaA, icaD, bap, agr RNAIII, agr I, agr II, agr III, and agr IV, which are related to slime production and its regulation. Biofilm production in microplates was evaluated considering the intervals determined along the bacterial growth curve. In addition, to determine the most suitable time interval for biofilm analysis, scanning electron microscopy was performed. Furthermore, genes such as mecA and blaZ that are related to beta-lactamic resistance and oxacillin susceptibility were tested. All the studied isolates were biofilm producers and mostly presented icaA and icaD. The Agr type II genes were significantly prevalent. According to the SEM, gradual changes in the bacterial arrangement were observed during biofilm formation along the growth curve phases, and the peak was reached at the stationary phase. In this study, the penicillin resistance was related to the production of beta-lactamase, and the high minimal bactericidal concentration for cefoxitin was possibly associated with biofilm protection. Therefore, further studies are warranted to better understand biofilm formation, possibly contributing to our knowledge about bacterial resistance in vivo.(AU)

Bartonella spp.: CURVA DE CRESCIMENTO EM MEIO TRYPTIC SOY BROTH (TSB) SUPLEMENTADO E AVALIAÇÃO DE TRANSMISSÃO TRANSOVARIANA E PERPETUAÇÃO TRANSESTADIAL ATRAVÉS DE INFECÇÃO in vitro EM Amblyomma sculptum (ACARI: IXODIDAE)

Bactérias do gênero Bartonella são agentes zoonóticos, podendo causar danos autolimitantes ou fatais aos seus hospedeiros. Essas bactérias infectam diversos animais, e são transmitidas por vetores como pulgas, piolhos, moscas e carrapatos. Além da diversidade de hospedeiros ser um desafio epidemiológico, essas bactérias são fastidiosas e seu isolamento em meio de cultura é uma constante dificuldade. O objetivo do presente estudo foi padronizar a curva de crescimento de Bartonella spp. em meio TSB (Tryptic Soy Broth) suplementado e verificar a ocorrência de transmissão transovariana e perpetuação transestadial em carrapatos da espécie Amblyomma sculptum, com sangue infectado por Bartonella spp., através de alimentação artificial. Para avaliar o crescimento de Bartonella spp. foi utilizado o meio de cultura (TSB), suplementado com soro fetal bovino, sacarose e anfotericina. As contagens de UFC para a formação da curva de crescimento foram realizadas em placas pelo método de superfície. Uma vez estabelecida a fase ótima de crescimento da bactéria, chegando na concentração 107 a mesma foi utilizada para infectar sangue de coelho previamente testado negativo para Bartonella spp. Fêmeas (49) de A. sculptum foram alimentadas artificialmente durante duas horas com o sangue infectado, por meio de tubos de microhematócrito, sendo, em seguida, alimentadas naturalmente em coelhos até o completo ingurgitamento. Ninfas (98) também foram alimentadas artificialmente durante quatro dias, por meio de membrana natural feita de pele de camundongo, para a avaliação da perpetuação transestadial de Bartonella spp. Após oviposição das fêmeas adultas alimentadas e adultos mudados das ninfas alimentadas artificialmente foram testados molecularmente detecção do DNA do patógeno. Os resultados da curva de crescimento da bactéria mostraram que no meio TSB houve um crescimento lento, porém bem delimitado, com a fase de latência se estendendo por 21 horas, fase exponencial ou log de 40 a 100 horas e fase estacionária se mantendo de 100 a 160 horas, e iniciando seu declínio após esse período. Ensaio de qPCR para Bartonella spp., baseado no gene nuoG dos ovos das 30 fêmeas sobreviventes após alimentação artificial, mostraram-se negativos, evidenciando que não houve transmissão transovariana. Uma fêmea resultante de iii uma ninfa alimentada artificialmente foi positiva, no entanto, a possibilidade de perpetuação transestadial de Bartonella spp. por essa espécie de carrapato não pode ser confirmada, haja vista a presença de sangue residual no referido espécime de carrapato. Conclui-se que o meio TSB se mostrou adequado para a realização da curva de crescimento sendo que conseguiu demonstrar todas as fases necessárias na curva. A alimentação artificial dos adultos demonstrou que não há a transmissão transestadial, porém, a alimentação artificial das ninfas não foi conclusiva devido a uma fêmea positiva na qPCR.

Bacteria of the genus Bartonella are zoonotic agents, being able cause self-damage or fatal to their hosts. These bactéria infec many animals, and are transmitted by vectors like fleas, lice, flies and ticks. In addition to host diversity being na epidemiological challenge, these bactéria are fastidious and their isolation in a culture medium is a constant difficulty. The goal of this study was standardize the growth curve of Bartonella spp. in medium TSB (Tryptic Soy Broth) supplemented and verify the occurrence of transovarian transmission and transstate perpetuation in ticks of the species Amblyomma sculptum with blood infected by Bartonella spp., through artificial feeding. To evaluate the growth of Bartonella spp. Culture medium (TSB) was used, supplemented with fetal bovine serum, sucrose and amphotericin. ScoreS CFU for the formation of the growth curve were performed on plates by the surface method. Once the optimal bacterial growth phase is established, arriving at concentration 107 it was used to infected rabbit blood previously tested negative for Bartonella spp. Females (49) of A. sculptum were artificially fed for two hours with infected blood, through microhematocrit tubes, then being naturally fed to rabbits until complete engorgement. Nymphs (98) were also artificially fed for four days, through a natural membrane made of mouse skin, for the assessment of the transstate perpetuation of Bartonella spp. After oviposition of the fed adult females and changed adults from artifically fed nymphs were tested molecularly the DNA of the pathogen. The results of the bacterial growth curve showed that in the TSB medium there was a slow growth, however well delimited, with the latency phase extending over 21 hours, exponential or log phase iv from 40 to 100 hours and stationary phase remaining from 100 to 160 hours, and starting its decline after that period. qPCR assay for Bartonella spp., based on the nuoG gene in the eggs of 30 surviving females afte artificial feeding, were negative, showing that there was no transovarian transmission. A female resulting from na artificially fed nymph was positive, however, the possibility of transstate perpetuation of Bartonella spp. by this species of tick cannot be confirmed, have a view the presence of residual blood in the above tick specimen. It is concluded that the TSB medium proved to be adequate for the realization of the growth curve being able to demonstrate all the necessary phases in the curve. The artificial feeding of adults demonstrated that there is no transstate transmission, however, the artificial feeding of the nymphs was not conclusive due to a qPCR positive female.

Dormancy models for Mycobacterium tuberculosis: A minireview

Dormancy models for Mycobacterium tuberculosis play important roles in understanding various aspects of tuberculosis pathogenesis and in the testing of novel therapeutic regimens. By simulating the latent tuberculosis infection, in which the bacteria exist in a non-replicative state, the models demonstrate reduced susceptibility to antimycobacterial agents. This minireview outlines the models available for simulating latent tuberculosis both in vitro and in several animal species. Additionally, this minireview discusses the advantages and disadvantages of these models for investigating the bacterial subpopulations and susceptibilities to sterilization by various antituberculosis drugs..(AU)

Efeito de diferentes condições de cultivo na produção de compostos orgânicos voláteis pelas microalgas Arthrospira platensis e Chlorella sp.

As microalgas sintetizam uma ampla gama de biomoléculas, dentre essas os compostos orgânicos voláteis (COVs). Os COVs são considerados metabólitos secundários e apresentam funções alelopáticas nos ecossistemas, e diversas aplicações nas indústrias alimentícia, farmacêutica e de cosméticos têm sido propostas. A síntese de COVs pode variar de acordo com a composição química das microalgas, logo, sua síntese pode ser afetada por diversos fatores, dentre eles, luz e fase de crescimento. Nesse sentido, o objetivo desse trabalho foi determinar os efeitos de diferentes irradiâncias e de fases da curva de crescimento no perfil de COVs nas biomassas de Arthrospira platensis e Chlorella sp. Para isso, foram desenvolvidas culturas experimentais destas microalgas sob as irradiâncias de 200 e 1.000 µmol fótons m-2 s-1, e as biomassas foram separadas quando as culturas se encontravam em fase exponencial e estacionária de cultivo. O perfil de COVs foi obtido por meio de análises realizadas por cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas (GC-MS) e a um headspace. Foram encontrados 12 exemplares de COVs nas biomassas de A. platensis e 34 nas biomassas de Chlorella sp., sendo que variações foram observadas em relação à síntese e à quantidade de COVs em cada condição de cultivo. Dos compostos encontrados, somente cinco foram comuns para as duas espécies. Em relação a A. platensis, a classe com maior representatividade no perfil de COVs foi a dos hidrocarbonetos, e o composto octadecano, que apresenta potencial aplicação na indústria alimentícia, apresentou maiores valores sob 1.000 µmol fótons m-2 s-1 na fase estacionária de crescimento. Por outro lado, nas biomassas de Chlorella sp., maiores valores foram encontrados de um constituinte da classe dos éteres sob irradiância de 200 µmol fótons m-2 s-1 e na fase exponencial de cultivo, bem como uma variedade de compostos nitrogenados. Em ambas as microalgas foi relatada a presença de uma variedade de terpenoides, sendo que Chlorella sp. apresentou como diferença a presença do composto safranal. Em conclusão, os resultados obtidos confirmam que tanto a luz, quanto a fase de crescimento, influenciaram o perfil de COVs das duas espécies de microalgas, já que diferenças quantitativas e qualitativas foram observadas nas condições de cultivo avaliadas.

Microalgae synthesize a wide range of biomolecules, among them, volatile organic compounds (VOCs). These are considered secondary metabolites and have allelopathic functions in ecosystems, also, many applications in the food, pharmaceutical and cosmetics industries have been proposed. The synthesis of VOCs can vary according to the chemical composition of the microalgae, therefore, their synthesis can be affected by several factors, such as, light and growth phase. In this sense, the objective of this work was to determine the influence of different irradiances and growth phases on the VOCs profile of Arthrospira platensis and Chlorella sp. For this, experimental cultures of these microalgae were developed in irradiances of 200 and 1,000 µmol photons m-2 s-1, and the biomasses were separated in the exponential and stationary growth phases. The VOCs profile of each biomass was obtained through analyzes performed by gas chromatography coupled to mass spectrometry (GC-MS) and a headspace. Twelve VOCs were found in the biomasses of A. platensis and 34 in the biomasses of Chlorella sp., with variations being observed in relation to the synthesis and quantity of VOCs in each cultivataion condition. Among the compounds found, only five were common for both species. Regarding A. platensis biomasses, hydrocarbons was the class with the greatest representation, and octadecane, which may present some applications in the food industry, was the predominant compound, with higher values under 1,000 µmol photons m-2 s-1 in the stationary growth phase. On the other hand, in Chlorella sp., a compound that belongs to the ethers class had the highest values under 200 µmol photons m-2 s-1 in the exponential phase of cultivation, as well as a variety of nitrogenous compounds. In both microalgae, the presence of a variety of terpenoids was reported, and Chlorella sp. presented one difference, the presence of safranal. In conclusion, the results obtained confirm that both the irradiance and growth phase influenced the VOCs profile of A. platensis and Chlorella sp, since quantitative and qualitative differences were observed in the cultivation conditions evaluated.

Microalgae population dynamics in photobioreactors with secondary sewage effluent as culture medium

Nitrogen and phosphorus present in sewage can be used for microalgae growth, possibiliting cost reduction in the production of microalgae at the same time that it decreases the eutrophication potential of the effluent. This research aimed at monitoring the native community of microalgae and coliform bacteria in a secondary effluent from anaerobic municipal sewage treatment. Two treatments (aerated and non-aerated) were performed to grow microalgae under semi-controlled conditions in semi-closed photobioreactors in a greenhouse. The results showed no significant pH and coliforms (total and Escherichia coli) variation between treatments. Nutrient concentrations were reduced supporting microalgae growth up to 107 cells.mL−1 independent of aeration. Exponential growth was obtained from the first day for the non-aerated, but a 5 day lag phase of growth was obtained for the aerated. Chlorella vulgaris was the dominant microalgae (99.9%) in both treatments. In the aerated, 5 algae classes were detected (Chlorophyceae, Cyanophyceae, Chrysophyceae, Bacillariophyceae and Euglenophyceae), with 12 taxa, whereas in the non-aerated, 2 classes were identified (Chlorophyceae and Cyanophyceae), with 5 taxa. We concluded that effluent is viable for microalgae growth, especially Chlorella vulgaris, at the same time that the eutrophication potential and coliforms are decreased, contributing for better quality of the final effluent.(AU)

Method for simultaneously determining the Rifampin, Isoniazid, Pyrazinamide and Ethambutol in the combined fixed-dose tablets / Determinação simultânea de Rifampicina, Isoniazida, Pirazinamida e Etambutol em comprimidos com doses fixas combinadas

Tablets containing isoniazid, pyrazinamide, ethambutol and rifampicin are used for tuberculosis treatment, and theyare freely distributed by the Brazilian National Health System. The official analytical methods for testing those substances in fixed-dose combined tablet are described in the United States Pharmacopeia and theInternational Pharmacopoeia. None of these official compendiums refers to the methodologies forconducting the simultaneous analysis of these four drugs. This study aimedatdeveloping an analytical methodology to determine simultaneously allof four drugs in tablets for tuberculosis treatment, bymeans ofhigh performance liquid chromatography with ultraviolet-visible detector. The developed method used a chromatographic column with octadecylsilane stationary phase (250 mm x 4.6 mm x 5 m particle size). The mobile phase was aqueous (85 % ammonium formate buffer pH 5, 15 % methanol and 250 mg CuSO4.5H2O), and organic phase (methanol, 0.1 % triethylamine and 0.2 % formic acid). The flow was 1.0 mL/min, at a wavelength of 265 nm or, when the equipment allowed, a wavelength of 265 nm for isoniazid, pyrazinamide and ethambutol and 335 nm for rifampicin. The developed methodology showed satisfactory results regarding the precision parameter, with relative standard deviation lower than 2.0 % for the studied drugs.(AU)

Os comprimidos utilizados no tratamento da tuberculose possuem quatro fármacos associados, isoniazida, pirazinamida, etambutol e rifampicina, e são distribuídos gratuitamente pelo Sistema Único de Saúde. Os métodos analíticos oficiais para analisar este medicamento estão especificados na Farmacopeia Americana 36a edição e na Farmacopeia Internacional 4a edição. Porém, estes compêndios oficiais não possuem monografias para análise simultânea dos quatro fármacos. O objetivo deste estudo foi desenvolver uma metodologia para determinar simultaneamente os princípios ativos em comprimidos dose fixa combinada, utilizando-se cromatografia a líquido de alta eficiência com detector de ultravioleta-visível, pois é de grande importância para o controle da qualidade do medicamento. O método desenvolvido utilizou coluna cromatográfica C18 (250 x 4,6) mm e 5 m, fase móvel constituída de fase aquosa (85 % tampão formiato de amônio 0,3 mol/L pH 5, 15 % metanol e 0,005 mol/L de Cu2+ ou 250 mg/L de CuSO4.5H2O) e fase orgânica (metanol, 0,1 % de trietilamina e 0,2 % de ácido fórmico). O fluxo foi de 1,0 mL/min e comprimento de ondade 265 nm para isoniazida, pirazinamida e o etambutol e de 335 nm para rifampicina. Este método apresentou desvio padrão relativo inferior a 2,0 % na precisão e linearidade para os quatro fármacos estudados.(AU)

Avaliação de minerais e elementos traço na leishmaniose cutânea e sua correlação com a patogênese da doença

A leishmaniose é uma doença ocasionada por parasitos do gênero Leishmania e pode se manifestar através de diversas formas clínicas com lesões cutâneas localizadas, disseminadas ou até a forma visceral. O resultado clínico de uma infecção por Leishmania spp. é variável e depende de diversos fatores, tanto relacionados ao parasito, quanto ao hospedeiro. A imunidade ou susceptibilidade às doenças infecto-parasitárias estão relacionadas com o estado nutricional do paciente. Nos últimos anos algumas pesquisas têm relacionado o estado nutricional e a presença ou ausência de minerais e elementos traço com a gravidade da doença, tanto para a leishmaniose tegumentar, quanto para a visceral. Sendo assim, este estudo teve como objetivo identificar e quantificar alterações de macro e microelementos durante o curso de infecção experimental por Leishmania (Leishmania) amazonensis e avaliar sua influência na patogenicidade da doença, correlacionando-os com a carga parasitária, análise histopatológica e parâmetros de estresse oxidativo. Para isto, camundongos BALB/c foram inoculados com as formas promastigotas de L. (L.) amazonensis em fase estacionária de crescimento. Os animais foram divididos em diferentes grupos, simulando quadros de infecções em hospedeiros imunocompetentes e imunocomprometidos. Amostras de sangue, baço, fígado e rim foram coletadas e submetidas a análise de espectrometria de Emissão Óptica por Plasma Acoplado Indutivamente, realizado testes histopatológicos, bem como da atividade da butirilcolinesterase, mieloperoxidase, substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico, superóxido dismutase, tióis totais e glutationa peroxidase. Foi possível observar a doença sistêmica com lesões histopatológicas em diferentes órgãos dos animais infectados, além de diminuição nos níveis de zinco e manganês no baço de animais infectados com L. (L.) amazonensis e imunossuprimidos pela depleção de células T CD4+ quando comparado ao grupo controle (P<0,05). No entanto não foi observado alteração nos parâmetros de estresse oxidativo evidenciando a resistência dos protozoários de L. (L.) amazonensis frente à resposta antioxidante de hospedeiros imunocompetentes e imunossuprimidos, possibilitando assim a persistência da infecção.

Leishmaniasis is a disease caused by parasites of the genus Leishmania and can manifest several clinical forms like localized, disseminated skin lesions or visceral form. The clinical result of a Leishmania spp. infection is variable and depends on several factors, both related to the parasite and to the host. Immunity or susceptibility to infectious-parasitic diseases is related to the nutritional status of the patient. In recent years, some research has correlated nutritional status and the presence or absence of minerals and trace elements with the severity of the disease, both for tegumentary and visceral leishmaniasis. This study aimed to identify and quantify changes in macro and microelements during the course of experimental infection by Leishmania (Leishmania) amazonensis and to evaluate its influence on the pathogenicity of the disease, correlating them with the parasite load, histopathological analysis and parameters oxidative stress. For this, BALB/c mice were inoculated with the promastigote forms of L. (L.) amazonensis in stationary phase of growth. The animals were divided into different groups and submitted to different clinical situations, simulating immunocompetent and immunocompromised hosts. Samples of blood, spleen, liver and kidney were collected and subjected to Inductively Coupled Plasma Optical Emission Spectroscopy analysis, histopathology, butyrylcholinesterase activity, myeloperoxidase, thiobarbituric acid reactive substances, superoxide dismutase, total thiols and glutathione peroxidase. It was possible to observe visceralization of the disease with histopathological lesions in several organs of the infected animals, as well as a decrease in the levels of zinc and manganese in the spleen of L. (L.) amazonensis infected animals and immunosuppressed by CD4+ T cell depletion when compared to the control group (P <0.05). However, no alteration in the oxidative stress parameters was observed evidencing the resistance of L. (L.) amazonensis protozoans to the antioxidant response of immunocompetent and immunosuppressed hosts.

AVALIAÇÃO DO POTENCIAL DE HIDROLISADO PROTEICO DE GELATINA DE PEIXE NA PRESERVAÇÃO DE FILÉS DE TRUTA ARCO-ÍRIS (Oncorhynchus mykiss) (SALMONIFORMES: SALMONIDAE) MANTIDOS SOB REFRIGERAÇÃO

Muitas fontes proteicas, sejam de origem vegetal ou animal, têm sido utilizadas para produção de hidrolisados ricos em peptídeos bioativos. Os benefícios oferecidos pela tecnologia se devem principalmente ao fato de alguns dos peptídeos exercerem atividade antioxidante e, mesmo que não muito comumente, atuando no controle do desenvolvimento microbiano. Podendo agir não só na conservação de alimentos, mas também auxiliar na proteção à saúde coletiva, aumento da validade comercial e, consequentemente, na redução das perdas. Além disso, é uma opção de maior valor agregado para o aproveitamento de resíduos do que a produção de farinhas e rações. Por este motivo, no que se refere ao pescado, a possível eficiência dos aditivos na manutenção dos atributos, se torna ainda mais valiosa, pois o processo de deterioração das matrizes alimentícias ocorre rapidamente devido, entre outros fatores, às suas características intrínsecas e também à contaminação oriunda do próprio meio onde vivem. A truta arco-íris (Oncorhynchus mykiss) é um salmonídeo predominantemente de cultivo com expressivo valor comercial, altamente consumido nacional e internacionalmente, entre outros fatores devido à sua composição rica em ácidos graxos do tipo ômega-3. O hidrolisado proteico de gelatina comercial de peixe foi testado na preservação de filé de truta arco-íris. As características do filé antes e após tratamento foram avaliadas. A manutenção da qualidade físico-química (pH, potencial redox, BNVT, TBARS, extração lipídica, EPA, DHA e composição centesimal) e microbiológica (BHAM, BHAP, pesquisa de Salmonella spp., Contagem de Staphylococcus aureus,coliformes totais e E. coli) foram os principais fatores analisados. No presente experimento objetivou-se avaliar o potencial de aplicação de protein hydrolysate (PH)de gelatina de peixe na preservação de filés de truta arco-íris embalados à vácuo e mantidos à ±4ºC. Pelas comparaçõesdos parâmetros físico-químicos foi possível concluir queavaliado isoladamente, o hidrolisado teve ação antioxidante, sendo constatado com a avaliação dos teores de de EPA e DHA. Quando aplicadodiretamente à matriz estudada, não foi possível observar o mesmo potencial antioxidante (p>0.05). Não houve interferência nas características físico-químicas, e as amostras estavam dentro dos padrões de identidade e qualidade até o final das análises. Também foi observado que quanto aos microrganismos pesquisados, o PH não estimulou o crescimento, no entanto, não foi eficiente (p>0.05) no controle do desenvolvimento. Contudo, graficamente verificou-se aumento da fase estacionária de alguns dos agentes pesquisados.

Many protein sources, whether of vegetable or animal origin, have been used for the production of hydrolysates rich in bioactive peptides. The benefits offered by the technology are mainly due to the fact that some of the peptides exert antioxidant activity and, although not very commonly, acting in the control of microbial development. In can act not only in food preservation, but also to help protect collective health, increase commercial validity and, consequently, reduce losses. In addition, it is a higher value-added option for the use of waste than the production of flour and feed. For this reason, with respect to fish, the possible efficiency of the additives in the maintenance of the attributes becomes even more valuable, since the deterioration process of the food matrices occurs rapidly due, among other factors, to their intrinsic characteristics and also to the contamination coming from their own environment. Rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) is a salmonid predominantly cultivated with significant commercial value, highly consumed nationally and internationally, among other factors due to its composition rich in omega-3 fatty acids. The commercial fish gelatine protein hydrolysate was tested for preservation of rainbow trout fillet. The characteristics of the fillet before and after treatment were evaluated.The maintenance of physical-chemical quality (pH, redox potential, TVB-N, TBARS, lipid extraction, EPA, DHA and centesimal composition) and microbiological (BHAM, BHAP, Salmonella spp., Staphylococcus aureus, total coliform and E. coli counts) were the main factors analyzed. In the present experiment the objectivewas to evaluate the potential of protein hydrolysate(PH) application of fish gelatine in the preservation of vacuum packed rainbow trout fillets and kept at ± 4ºC. From the physico-chemical parameters comparisons, it was possible to conclude that the hydrolysate had an antioxidant action and was evaluated by the EPA and DHA levels. When applied directly to the studied matrix, it was not possible to observe the same antioxidant potential (p>0.05). There was no interference in the physico-chemical characteristics, and the samples were within the identity and quality standards until the end of the analyzes. It was also observed that, for the microorganisms studied, PH did not stimulate growth, however, it was not efficient (p>0.05) in development control. However, graphically, there was an increase in the stationary phase of some of the investigated agents.

DESEMPENHO E COMPORTAMENTO DE FRANGOS DE CORTE ALIMENTADOS COM DIETAS COM NÍVEIS CRESCENTES DE VITAMINA E

Foram conduzidos dois experimentos com o objetivo de avaliar o desempenho, as características de carcaça e os parâmetros comportamentais de frangos de corte alimentados com diferentes níveis de vitamina E. No experimento I e II foram utilizados 288 pintos de corte, machos, da linhagem Cobb 500®, com um dia de idade, alimentados até o sétimo dia, com 50% das exigências de vitamina E. Aos oito dias de idade, as aves foram homogeneizadas e os tratamentos distribuídos em delineamento experimental inteiramente casualizado, com quatro tratamentos e seis repetições, com 12 aves cada. Os tratamentos foram constituídos por quatro níveis de vitamina E (50%; 100%; 150% e 200%), em que o nível de 100% correspondeu a recomendação para cada fase. As variáveis avaliadas no experimento I, foram ganho de peso, o consumo de ração, a conversão alimentar, peso final aos 21 e aos 42 dias de idade, a viabilidade, o Índice de Eficiência Produtiva (IEP), os rendimentos de carcaça e cortes nobres (coxa, sobrecoxa e peito). No experimento II avaliou-se os parâmetros comportamentais das aves (comendo, bebendo, investigando pena, movimento de conforto, ciscando, parada e sentada), temperaturas superficiais máxima, mínima, média e amplitude térmica, e consumo de ração no período de 24 horas no final de cada ciclo de vida, aos 21 e aos 42 dias de idade. Não foi observado efeito dos níveis de vitamina E, nas variáveis de desempenho aos 42 dias de idade. Os níveis influenciaram o rendimento de carcaça, demonstrando efeito linear crescente sobre esta característica. Observou-se que aos 21 dias de idade, os níveis de vitamina E influenciaram apenas na frequência que as aves permaneceram paradas, no tratamento experimental com 9,16 g vit/100 kg de ração apresentando menor frequência. Porém, os parâmetros comportamentais (bebendo, investigando penas, movimento de conforto, ciscando e sentada, parada), as temperaturas superficiais mínima, média e amplitude térmica foram influenciados pelos períodos da manhã, tarde, noite e madrugada. Do mesmo modo, aos 42 dias de idade, os níveis de vitamina E não influenciaram os parâmetros comportamentais, sendo influenciados pelos períodos da manhã, tarde, noite e madrugada. No entanto, houve interação entre os níveis de vitamina E no parâmetro comportamental bebendo. O consumo de ração no período de 24 horas, não foi influenciado pelos níveis de vitamina E aos 21e 42 dias de idade. Os níveis de 22,9 e 18,05 mg/kg de ração, nas fases de 8 a 21 e 21 a 42 dias de idade respectivamente, foram suficientes para atender as exigências de frangos de corte dos 8 aos 42 dias de idade. Os níveis influenciaram o parâmetro comportamental parada de frangos de corte aos 21 dias de idade, sendo recomendado o nível de 91,60 mg/kg de ração para esta fase.

Two experiments were carried out to evaluate the performance, carcass characteristics and behavioral parameters of broilers fed different vitamin E levels. In experiment I and II, a total of 288 one-day-old male Cobb 500® broiler chicks were fed up to seven days old with 50% of vitamin E requirements. At eight days of age, the birds were homogenized and the treatments were distributed in a completely randomized experimental design, with four treatments and six replications, with 12 birds each. The treatments consisted of four levels of vitamin E (50%; 100%; 150% and 200%), as the 100% level corresponded to the right recommendation for each phase. The variables evaluated in experiment I were weight gain, feed intake, feed conversion, final weight at 21 and 42 days of age, viability, Productive Efficiency Index (PEI), carcass yields and noble cuts (thigh, drumstick and chest), and abdominal fat content. In the experiment II, they were evaluated the behavioral parameters of the birds (eating, drinking, investigating feather, comfort movement, scratching, standing and sitting), maximum, minimum and mean surface temperatures, thermal amplitude and feed intake within 24 hours at the end of each life cycle, at 21 and 42 days of age. There was no effect of vitamin E levels on performance variables at 42 days of age. Vitamin levels influenced the carcass yield, showing an increasing linear effect on this characteristic. It was observed at 21 old, vitamin E levels only influenced the frequency that the birds remained stationary, presenting lower frequency in the experimental treatment with 9.16 g vit / 100 kg of feed. However, the behavioral parameters (drinking, investigating feathers, comfort movement, scratching, standing and sitting), minimum and mean surface temperatures, and thermal amplitude were influenced by the morning, afternoon, night and dawn periods. Likewise, at 42 days of age, vitamin E levels did not influence behavioral parameters, which were influenced by the morning, afternoon, night and dawn periods. However, there was interaction between vitamin E levels in the drinking behavioral parameter. Feed intake in the period of 24 hours was not influenced by vitamin E levels at 21 and 42 days of age. The levels of 22.9 and 18.05 g vit/ 100 kg of feed, in the phases from 8 to 21 and from 21 to 42 days old, respectively, were sufficient to meet the requirements of broilers from 8 to 42 days old. Levels influenced the behavioral parameter of broiler chickens at 21 days of age, and the level of 91.60 mg/kg of feed is recommended for this phase.

Regulation of gene expression: Cryptic beta-glucoside (bgl) operon of Escherichia coli as a paradigm

Bacteria have evolved various mechanisms to extract utilizable substrates from available resources and consequently acquire fitness advantage over competitors. One of the strategies is the exploitation of cryptic cellular functions encoded by genetic systems that are silent under laboratory conditions, such as the bgl (β-glucoside) operon of E. coli. The bgl operon of Escherichia coli, involved in the uptake and utilization of aromatic β-glucosides salicin and arbutin, is maintained in a silent state in the wild type organism by the presence of structural elements in the regulatory region. This operon can be activated by mutations that disrupt these negative elements. The fact that the silent bgl operon is retained without accumulating deleterious mutations seems paradoxical from an evolutionary view point. Although this operon appears to be silent, specific physiological conditions might be able to regulate its expression and/or the operon might be carrying out function(s) apart from the utilization of aromatic β-glucosides. This is consistent with the observations that the activated operon confers a Growth Advantage in Stationary Phase (GASP) phenotype to Bgl+ cells and exerts its regulation on at least twelve downstream target genes.

Bioconversion of R-(+)-limonene to perillic acid by the yeast Yarrowia lipolytica

Perillyl derivatives are increasingly important due to their flavouring and antimicrobial properties as well as their potential as anticancer agents. These terpenoid species, which are present in limited amounts in plants, may be obtained via bioconversion of selected monoterpene hydrocarbons. In this study, seventeen yeast strains were screened for their ability to oxidize the exocyclic methyl group in the p-menthene moiety of limonene into perillic acid. Of the yeast tested, the highest efficiency was observed for Yarrowia lipolytica ATCC 18942. The conversion of R (+)-limonene by Y. lipolytica was evaluated by varying the pH (3 to 8) and the temperature (25 to 30 ºC) in a reaction medium containing 0.5% v/v limonene and 10 gµL of stationary phase cells (dry weight). The best results, corresponding to 564 mgµL of perillic acid, were obtained in buffered medium at pH 7.1 that was incubated at 25 ºC for 48 h. The stepwise addition of limonene increased the perillic acid concentration by over 50%, reaching 855 mgµL, whereas the addition of glucose or surfactant to the reaction medium did not improve the bioconversion process. The use of Y. lipolytica showed promise for ease of further downstream processing, as perillic acid was the sole oxidised product of the bioconversion reaction. Moreover, bioprocesses using safe and easy to cultivate yeast cells have been favoured in industry.

Bioconversion of R-(+)-limonene to perillic acid by the yeast Yarrowia lipolytica

Perillyl derivatives are increasingly important due to their flavouring and antimicrobial properties as well as their potential as anticancer agents. These terpenoid species, which are present in limited amounts in plants, may be obtained via bioconversion of selected monoterpene hydrocarbons. In this study, seventeen yeast strains were screened for their ability to oxidize the exocyclic methyl group in the p-menthene moiety of limonene into perillic acid. Of the yeast tested, the highest efficiency was observed for Yarrowia lipolytica ATCC 18942. The conversion of R (+)-limonene by Y. lipolytica was evaluated by varying the pH (3 to 8) and the temperature (25 to 30 ºC) in a reaction medium containing 0.5% v/v limonene and 10 gµL of stationary phase cells (dry weight). The best results, corresponding to 564 mgµL of perillic acid, were obtained in buffered medium at pH 7.1 that was incubated at 25 ºC for 48 h. The stepwise addition of limonene increased the perillic acid concentration by over 50%, reaching 855 mgµL, whereas the addition of glucose or surfactant to the reaction medium did not improve the bioconversion process. The use of Y. lipolytica showed promise for ease of further downstream processing, as perillic acid was the sole oxidised product of the bioconversion reaction. Moreover, bioprocesses using safe and easy to cultivate yeast cells have been favoured in industry.

AVALIAÇÃO NUTRICIONAL DO GÉRMEN INTEGRAL DE MILHO PARA FRANGOS DE CORTE

Objetivou-se avaliar a composição bromatológica, os valores energéticos, o desempenho, as características de carcaça e a qualidade da carne de frangos de corte alimentados com níveis crescentes do gérmen integral de milho (GIM). Para isso, foram realizados dois experimentos, aprovados pela Comissão de Ética no Uso de Animais, no Laboratório de Pesquisa com aves do Departamento de Zootecnia da Universidade Federal Rural de Pernambuco. O primeiro experimento foi um ensaio de metabolismo utilizando 720 pintos de corte (Cobb 500) de um dia de idade, distribuídos em delineamento inteiramente casualizado, composto por seis tratamentos e seis repetições de 10 (fase pré-inicial 1 a 8 dias), 6 (fase inicial 15 a 22 dias) e 4 aves (fase de crescimento 28 a 35 dias) por parcela experimental. Os tratamentos experimentais consistiram de uma dieta referência, a qual foi substituída parcialmente pelo GIM, nas porções de 10, 15, 20, 25 e 30%. Foi realizada a coleta parcial de excretas com o uso da cinza ácida insolúvel como indicador, para a determinação da energia metabolizável aparente (EMA) e corrigida pelo balanço de nitrogênio (EMAn), coeficientes de metabolizabilidade aparente da energia bruta (CMAEB), matéria seca (CMAMS), proteína bruta (CMAPB) e extrato etéreo (CMAEE). O conteúdo ileal, também, foi coletado para a determinação dos coeficientes de digestibilidade ileal da matéria seca (CDIMS) e proteína bruta (CDIPB), matéria seca digestível (MSD) e proteína bruta digestível (PBD). O segundo experimento foi realizado com 648 pintos (Cobb 500) distribuídos em delineamento inteiramente casualizado com seis tratamentos e seis repetições, sendo 18 aves por parcela. Os tratamentos consistiram de uma dieta controle à base de milho e farelo de soja (0% GIM), e cinco dietas experimentais com a inclusão de 4, 8, 12, 16 e 20% de GIM. As aves e as sobras de rações foram pesadas semanalmente e foram calculados o consumo de ração (CR), ganho de peso (GP) e conversão alimentar (CA). Aos 42 dias de idade duas aves com o peso médio da parcela, foram eutanasiadas para avaliação do peso e rendimento de carcaça e cortes comerciais, vísceras, gordura abdominal e qualidade da carne (pH, perda de peso por cocção, força de cisalhamento, capacidade de retenção de água, cor e índice de peróxido). Os valores de EMA, EMAn, CMAEB, CMAMS, CMAPB e CMAEE foram determinados utilizando a metodologia de coleta parcial de excretas. Os dados do experimento 1 foram analisados através do modelo de superfície de resposta e àqueles do experimento 2 foram submetidos à análise de variância (ANOVA), e ajustados para a regressão do modelo broken line e aplicada a análise multivariada nos dados de qualidade de carne. O ponto estacionário para a EMA e EMAn foram 4173 kcal/kg (AME = 1781,167 + 52,446 idade + 203,455 nível - 1,570 nível x idade - 4,119 nível2) e 3591kcal / kg (AMEn = 1551,255 + 68,422 idade + 196,686 nível 1,819 nível x idade -3,849 nível2). Para o CMAEB, CMAPB, CMAMS e CMAEE os pontos estacionários foram 49,3; 40,4; 72,6 e 61,3%, respectivamente. Os pontos estacionários do CDIPB, CDIMS, PBD e MSD foram: 78,%, 57,96, 8,50 e 56,17%, respectivamente. Ocorreu diferença para o GP e a CA para o período total de criação (1 a 42 dias), onde o ganho de peso ótimo para esta fase foi estimado em 2921 g/ave com nível de inclusão de 11,8% do GIM. Não houve diferença para a EMA, EMAn e CMAPB das rações. Os níveis crescentes do GIM não influenciaram o peso e rendimento da carcaça e cortes, bem como a qualidade da carne, porém aumentaram o peso e o rendimento da moela e do proventrículo. Os níveis crescentes de GIM e a idade das aves influenciaram no aproveitamento energético das rações. Os resultados desta pesquisa indicam que a inclusão do GIM na dieta de frangos de corte reduziu o desempenho nos níveis mais elevados. O GIM em baixos níveis pode ser usado em rações para frangos de corte sem prejudicar os índices zootécnicos.

The objective of this study was to evaluate the chemical composition, energy values, performance, carcass characteristics and meat quality of broilers fed with increasing levels of corn germ meal (CGM). For this, two experiments were carried out by the Ethics Committee on the Use of Animals in the Research Laboratory with birds of the Department of Animal Science of the Federal Rural University of Pernambuco. The first experiment was a metabolism test using 720 broiler chickens (Cobb 500) of one day of age, distributed in a completely randomized design, consisting of six treatments and six replicates of 10 (pre-initial phase - 1 to 8 days), 6 (initial phase 15 to 22 days) and 4 birds (growth - 28 to 35 days) per plot. Experimental treatments consisted of a reference diet which was partially replaced by CGM in the 10, 15, 20, 25 and 30% portions. Partial excreta collection using the insoluble acidic indicator was used to determine the apparent metabolizable energy (AME) and corrected by the nitrogen balance (AMEn), apparent metabolizable coefficients of crude energy (AMCCE), dry matter (AMCDM), crude protein (AMCCP) and ethereal extract (AMCEE). The ileal content was also collected for the determination of ileal digestibility coefficients dry mater (IDCDM) and crude protein (IDCCP), digestible dry matter (DDM) and digestible crude protein (DCP). The second experiment was conducted with 648 chicks (Cobb 500) distributed in a completely randomized design with six treatments and six replicates, 18 birds per experimental unit. The treatments consisted of a control diet based on corn and soybean meal (0% CGM), and five diets tests with inclusion of CGM at 4, 8, 12, 16 and 20%. The birds and the feeds were weighed every seven days to define the feed intake (FI), weight gain (WG) and feed conversion ratio (FCR). At 42 days of age two birds per experimental plot were euthanized for evaluation of carcass weight and yield and commercial parts, viscera, abdominal fat and meat quality (pH, weight loss cooking, shear force, capacity water retention, color and peroxide index). The values of AME, AMEn, AMCCE, AMCDM, AMCCP and AMCEE were determined using the partial excreta collection methodology. The data from experiment 1 were analyzed using the response surface model and those from experiment 2 were submitted to analysis of variance (ANOVA) and adjusted for the regression of the broken line model and applied to the multivariate analysis in meat quality data. The stationary point for AME and AMEn was 4173 kcal/kg (AME = 1781.167 + 52.446 age + 203.455 level - 1.570 level x age - 4.119 level2), and 3591kcal/kg (AMEn= 1551.255 + 68.422 age + 196.686 level 1.819 level x age -3.849 level2). To AMCCE, AMCDM, AMCEE the stationary point was 49.3, 40.4, 72.6 and 61.3%, respectively. The stationary point for IDCCP, IDCCM, DCP and DDM 78.88, 57.96, 8.50 and 56.17%, respectively. There was a difference for weight gain and feed conversion ratio for the total period (1 to 42 days), where the optimal weight gain for this phase was estimated at 2921 g/bird with inclusion level of 11.8% of CGM. There was no difference for the AME, AMEn and AMCCP of the diets. That increasing levels of CGM did not influence carcass weight and yield and cuts, and meat quality, however, they increased the weight and yield of gizzard and proventriculus. Increasing levels of CGM and the age of the birds influenced the energy utilization of the rations. The results of this research indicate that the inclusion of CGM in the broiler diet reduced performance at the highest levels. Low level CGM can be used in feeds for broiler chickens without jeopardizing zootechnical indexes.

CINÉTICA DE CRESCIMENTO DE SALMONELLA HEIDELBERG PLANCTÔNICAS E SÉSSEIS

As doenças transmitidas por alimentos são causadas por bactérias, vírus, parasitas e toxinas. Dessas destaca-se a salmonelose uma doença alimentar grave causada pela bactéria Salmonella spp. sendo a Salmonella Heidelberg (SH) um dos sorovares de maior distribuição no mundo, associado a doenças humanas. A contaminação dos alimentos por salmonela ocorre principalmente por contaminação cruzada entre superfícies e alimento, uma vez que superfícies podem apresentar bactérias aderidas na forma de biofilmes. A capacidade de formação de biofilme é dependente da superfície utilizada nas plantas de processamento de alimentos sendo, o aço inoxidável o mais utilizado. Para evitar e remover os biofilmes das superfícies é essencial o estudo da cinética de crescimento do microrganismo, envolvendo a observação das fases de crescimento e o comportamento de células sésseis e planctônicas em função de diferentes temperaturas. O objetivo deste trabalho foi avaliar a cinética de crescimento de SH planctônica e sésseis mantidas a 9±1°C e 36±1°C, comparado-as com modelagens bacterianas no Pathogen Modeling Program (PMP) e no ComBase Predictor. Para o estudo da curva de crescimento de SH planctônica, obteve-se um inóculo de 103 UFC da cultura de SH, adicionados a tubos, em triplicata, contendo caldo triptona de soja sem glicose mantidos aerobicamente em incubadoras tipo B.O.D. sob temperatura de 9±1°C e 36±1°C, incubados durante 0 min., 01 h, 02 h, 03 h, 04 h, 06 h, 08 h, 10 h, 12 h, 18 h, 24 h, 36 h, 48 h, 72 h, 96 h e 120 h, 144 h, 168 h e 192 h. Após os tempos de incubação as células bacterianas foram quantificadas pelo método de contagem em gota (Drop plate) e os resultados foram expressos em UFC.mL-1. No estudo da curva de crescimento de SH em fase séssil os corpos de prova utilizados foram cupons de aço inoxidável, submetidos aos procedimentos de limpeza e esterilização. Para a formação dos biofilmes, os cupons foram cultivados em tubos submetidos ao mesmo protocolo do estudo de células planctônicas. Entretanto, após os períodos de incubação os cupons foram retirados dos meios de cultivo e imersos em Água Peptonada (AP) 0,1% por 1 minuto, introduzidos em tubos contendo AP 0,1%, submetidos ao banho de ultrassom (frequência de 40 kHz e potência de 81 W por 10 minutos) e quantificadas pelo método (Drop plate). Os resultados demostram que as células de SH planctônicas e sésseis apresentam os tempos de geração maiores e velocidades específicas menores na temperatura de 9±1°C. Nas temperaturas de 9±1°C e 36±1°C os tempos de gerações foram maiores e as velocidades específicas menores para células planctônicas do que as sésseis. Além disso, a curva de crescimento de células sésseis apresenta maior fase lag e exponencial quando mantidos a 9±1°C, enquanto que a maior fase estacionária é a 36±1°C. Para células planctônicas a maior fase lag é a 9±1°C e maior fase exponencial a 36°C. Assim, conclui-se que a cinética de crescimento de SH é influenciada pela temperatura e pelas fases planctônica e séssil, apresentando as fases da curva de crescimento e velocidades de crescimento especifica distintas. Na comparação entre a curva de crescimento de Salmonella Heidelberg planctônica e as modelagens bacterianas verificou-se diferentes parâmetros de crescimento a 10°C no PMP e ComBase, e a 36°C a modelagem no PMP demostrou os valores mais próximos aos encontrados na SH. Assim sendo, reitera-se a importância da manipulação e conservação de alimentos em baixas temperaturas, a fim de controlar o crescimento microbiano garatindo a segurança alimentar.

Foodborne diseases are caused by bacteria, viruses, parasites, toxins, and others. Of these, salmonellosis stands out a serious foodborne illness caused by the bacterium Salmonella spp. Salmonella Heidelberg (SH) is one of the most widely distributed serovars in the world, associated with human diseases. The contamination of food by Salmonella occurs mainly by crosscontamination between surfaces and food, once, surfaces may have bacteria adhered in the form of biofilms. The capacity of biofilm formation is dependent on the surface used in the processing plants and stainless steel is the most used. To avoid and remove biofilms from the surfaces, producing safe food, it is essential to study the growth kinetics of the microorganism involving the observation of growth phases and the behavior of sessile and planktonic cells as a function of different temperatures. The objective of this work was to evaluate the growth kinetics of planktonic and sessile SH maintained at 9 ± 1 ° C and 36 ± 1 ° C, compared them with bacterial modeling in the Pathogen Modeling Program (PMP) and ComBase Predictor. For the study of the growth curve of planktonic SH, an inoculum of 103 CFU of SH culture, added to tubes, in triplicate, containing tryptone broth of glucose-free soybeans kept aerobically in B.O.D. were incubated for 0 min, 01 h, 02 h, 03 h, 04 h, 06 h, 08 h, 10 h, 12 h, 18 h, 24 h at a temperature of 9 ± 1 ° C and 36 ± 1 ° C , 36 h, 48 h, 72 h, 96 h and 120 h, 144 h, 168 h and 192 h. After the incubation times the bacterial cells were quantified by the (Drop plate) and the results were expressed in CFU.mL-1. In the study of the SH curve in the sessile phase, the test pieces used were stainless steel coupons undergoing cleaning and sterilization procedures. For the formation of biofilms, the coupons were cultured in tubes submitted to the same protocol as the planktonic cell study. However, after the incubation periods the coupons were removed from the culture media and immersed in 0.1% Peptone Water (PW) for 1 minute, introduced into tubes containing 0.1% Pw, subjected to the ultrasonic bath (frequency of 40 kHz and power of 81 W for 10 minutes) and quantified by the method (Drop plate). The results show that planktonic and sessile SH cells have the highest generation times and lower specific rates at the temperature of 9 ± 1 ° C. At temperatures of 9 ± 1 ° C and 36 ± 1 ° C, generation times were longer and speeds smaller for planktonic cells than sessile. In addition, the growth curve of sessile cells presents a higher lag and exponential phase when maintained at 9 ± 1 ° C, while the largest stationary phase is at 36 ± 1 ° C. For planktonic cells the largest lag phase is at 9 ± 1 ° C and the highest exponential phase at 36 ° C. Thus, it is concluded that the kinetics of SH growth is influenced by the temperature and the planktonic and sessile phases, presenting the phases of the growth curve and specific speeds of growth. In the comparison between the planktonic Salmonella Heidelberg growth curve and the bacterial models, different growth parameters were observed at 10 ° C in PMP and ComBase, and at 36 ° C the PMP modeling showed values closer to those found in SH. Therefore, the importance of handling and preserving foods at low temperatures is reiterated in order to control microbial growth, guaranteeing food safety.

Caracterização e extração de compostos voláteis de resíduos do processamento de maracujá (Passiflora edulis Sims f. flavicarpa degener)

The aim of this study was to extract and identify volatile compounds from passion fruit residues generated during processing. Distillates of passion fruit residues were obtained from the techniques of simple hydrodistillation and hydrodistillation by passing nitrogen gas. The volatile compounds present in the distillates were captured by solid phase microextraction with Carboxen/DVB/DMS fiber. The volatile compounds were indentified by gas chromatography with mass spectrometry using a fused sillica capillary column with a CP WAX 52 stationary phase. Thirty one compounds were indentified by simple hydrodistillation technique. The main compounds were: neral (26.19%), methyl cinnamate (18.52%), linalool (16.82%), 1-undecanol (5.60%), cis-linalool oxide (4.41%), benzaldehyde (3.92%) and 1-hexanol (3.48%). For the hydrodistillation by passing nitrogen gas, thirty compounds were identified and the ones which presented higher area percentage were: methyl cinnamate (30.41%), neral (24.46%), -ionone (13.81%), linalool (4.0%) and butanoic acid (2.19%). The present study revealed that passion fruit waste contained volatile compounds that could be extracted as aromas products, presenting potential for the production of value-added natural essences.

Este estudo objetivou extrair e identificar compostos voláteis presentes nos resíduos de processo de maracujá. Obtiveram-se destilados a partir de resíduos de maracujá através das técnicas de hidrodestilação simples e hidrodestilação com arraste de gás nitrogênio. Os compostos voláteis presentes nos destilados foram capturados por microextração em fase sólida, empregando-se fibra Carboxen/DVB/DMS, e identificados por cromatografia gasosa acoplada com espectrômetro de massa, usando a coluna capilar de sílica fundida CP WAX 52. Foram identificados trinta e um compostos voláteis no extrato obtido pela técnica de hidrodestilação simples, sendo os principais compostos: neral (26,19%), cinamato de metila (18,52%), linalol (16,82%), 1-undecanol (5,60%), cis-óxido de linalol (4,41%), benzaldeído (3,92%) e 1-hexanol (3,48%). Para a hidrodestilação com arraste de gás nitrogênio, trinta compostos foram identificados, sendo que, em maior porcentagem de área, destacaram-se: cinamato de metila (30,41%), neral (24,46%), -ionona (13,81%), linalol (4,0%) e acido butanoico (2,19%). O presente estudo revelou que os resíduos de maracujá apresentam compostos voláteis que podem ser extraídos na forma de aromas, apresentando potencial para gerar essências naturais com valor agregado.

Caracterização e extração de compostos voláteis de resíduos do processamento de maracujá (Passiflora edulis Sims f. flavicarpa degener)

The aim of this study was to extract and identify volatile compounds from passion fruit residues generated during processing. Distillates of passion fruit residues were obtained from the techniques of simple hydrodistillation and hydrodistillation by passing nitrogen gas. The volatile compounds present in the distillates were captured by solid phase microextraction with Carboxen/DVB/DMS fiber. The volatile compounds were indentified by gas chromatography with mass spectrometry using a fused sillica capillary column with a CP WAX 52 stationary phase. Thirty one compounds were indentified by simple hydrodistillation technique. The main compounds were: neral (26.19%), methyl cinnamate (18.52%), linalool (16.82%), 1-undecanol (5.60%), cis-linalool oxide (4.41%), benzaldehyde (3.92%) and 1-hexanol (3.48%). For the hydrodistillation by passing nitrogen gas, thirty compounds were identified and the ones which presented higher area percentage were: methyl cinnamate (30.41%), neral (24.46%), -ionone (13.81%), linalool (4.0%) and butanoic acid (2.19%). The present study revealed that passion fruit waste contained volatile compounds that could be extracted as aromas products, presenting potential for the production of value-added natural essences.

Este estudo objetivou extrair e identificar compostos voláteis presentes nos resíduos de processo de maracujá. Obtiveram-se destilados a partir de resíduos de maracujá através das técnicas de hidrodestilação simples e hidrodestilação com arraste de gás nitrogênio. Os compostos voláteis presentes nos destilados foram capturados por microextração em fase sólida, empregando-se fibra Carboxen/DVB/DMS, e identificados por cromatografia gasosa acoplada com espectrômetro de massa, usando a coluna capilar de sílica fundida CP WAX 52. Foram identificados trinta e um compostos voláteis no extrato obtido pela técnica de hidrodestilação simples, sendo os principais compostos: neral (26,19%), cinamato de metila (18,52%), linalol (16,82%), 1-undecanol (5,60%), cis-óxido de linalol (4,41%), benzaldeído (3,92%) e 1-hexanol (3,48%). Para a hidrodestilação com arraste de gás nitrogênio, trinta compostos foram identificados, sendo que, em maior porcentagem de área, destacaram-se: cinamato de metila (30,41%), neral (24,46%), -ionona (13,81%), linalol (4,0%) e acido butanoico (2,19%). O presente estudo revelou que os resíduos de maracujá apresentam compostos voláteis que podem ser extraídos na forma de aromas, apresentando potencial para gerar essências naturais com valor agregado.

Caracterização e extração de compostos voláteis de resíduos do processamento de maracujá (Passiflora edulis Sims f. flavicarpa degener)

The aim of this study was to extract and identify volatile compounds from passion fruit residues generated during processing. Distillates of passion fruit residues were obtained from the techniques of simple hydrodistillation and hydrodistillation by passing nitrogen gas. The volatile compounds present in the distillates were captured by solid phase microextraction with Carboxen/DVB/DMS fiber. The volatile compounds were indentified by gas chromatography with mass spectrometry using a fused sillica capillary column with a CP WAX 52 stationary phase. Thirty one compounds were indentified by simple hydrodistillation technique. The main compounds were: neral (26.19%), methyl cinnamate (18.52%), linalool (16.82%), 1-undecanol (5.60%), cis-linalool oxide (4.41%), benzaldehyde (3.92%) and 1-hexanol (3.48%). For the hydrodistillation by passing nitrogen gas, thirty compounds were identified and the ones which presented higher area percentage were: methyl cinnamate (30.41%), neral (24.46%), -ionone (13.81%), linalool (4.0%) and butanoic acid (2.19%). The present study revealed that passion fruit waste contained volatile compounds that could be extracted as aromas products, presenting potential for the production of value-added natural essences.

Este estudo objetivou extrair e identificar compostos voláteis presentes nos resíduos de processo de maracujá. Obtiveram-se destilados a partir de resíduos de maracujá através das técnicas de hidrodestilação simples e hidrodestilação com arraste de gás nitrogênio. Os compostos voláteis presentes nos destilados foram capturados por microextração em fase sólida, empregando-se fibra Carboxen/DVB/DMS, e identificados por cromatografia gasosa acoplada com espectrômetro de massa, usando a coluna capilar de sílica fundida CP WAX 52. Foram identificados trinta e um compostos voláteis no extrato obtido pela técnica de hidrodestilação simples, sendo os principais compostos: neral (26,19%), cinamato de metila (18,52%), linalol (16,82%), 1-undecanol (5,60%), cis-óxido de linalol (4,41%), benzaldeído (3,92%) e 1-hexanol (3,48%). Para a hidrodestilação com arraste de gás nitrogênio, trinta compostos foram identificados, sendo que, em maior porcentagem de área, destacaram-se: cinamato de metila (30,41%), neral (24,46%), -ionona (13,81%), linalol (4,0%) e acido butanoico (2,19%). O presente estudo revelou que os resíduos de maracujá apresentam compostos voláteis que podem ser extraídos na forma de aromas, apresentando potencial para gerar essências naturais com valor agregado.

EFEITO DA MATÉRIA ORGÂNICA DISSOLVIDA NA FLOCULAÇÃO DA MICROALGA MARINHA Nannochloropsis oceanica

Microalgas marinhas do gênero Nannochloropsis são comumente utilizadas na aquicultura como alimento vivo e, atualmente, são reconhecidas como uma promissora fonte de biocombustível e bioprodutos com aplicações nas indústrias farmacêutica e alimentícia. No entanto, a produção em larga escala de microalgas encontra dificuldades principalmente na coleta e concentração destes microrganismos. O processo de floculação de células é mais eficiente e rentável do que outros. Entretanto, este método ainda apresenta muitos problemas técnicos que impedem sua a plena operacionalização. Dentre os maiores problemas, a matéria orgânica dissolvida (MOD) produzida pelas microalgas é reconhecida como um grande interferente no processo de concentração e sedimentação das células, acarretando no aumento da demanda de floculantes e até mesmo podendo inviabilizar o processo. Nesta Dissertação foi avaliado o efeito da matéria orgânica no processo de floculação através da quantificação e qualificação d mesma e também pela sua retirada do meio de cultura utilizando um skimmer. O crescimento das microalgas foi monitorado em dias alternados num sistema de cultivo de 250 L. Amostras de 100 mL de cultivo foram filtradas em filtros de membrana de 0,45 m de poro para obtenção da MOD e sua posterior quantificação e caracterização pelo carbono orgânico dissolvido (COD), absorbância a 254 nm (UV), além de concentração de proteínas e carboidratos. Todos estes fatores aumentaram ao longo do cultivo. A eficiência de floculação para a microalga N. oceanica foi testada nas frações particulada (MOP - > 0,7 m) e dissolvida (MOD - < 0,45 m) separadas por filtros 0,7 m e 0,45 m. Como floculante foi utilizado o polímero natural Tanfloc. As frações que continham apenas MOP resultaram em eficiência de floculação superior a 90%, enquanto que os tratamentos que continham MOD na sua composição não ultrapassaram 30% de eficiência, demonstrando que a MOD é a parte da matéria orgânica que mais interfere no processo. Num segundo experimento, ao atingir as fases de crescimento exponencial e estacionária, 2 litros de cultivo foram coletados. As amostras foram centrifugadas para remoção das microalgas e, em seguida, filtradas em filtro de membrana de 0,45 m para coleta da MOD, posteriormente fracionada por hidrofobicidade através de resinas XAD-7HP e XAD-4. A eficiência de floculação foi testada em 3 frações de matéria orgânica dissolvida: hidrofóbica (HPO), transfílica (TPH) e hidrofílica (HPI), onde foram ressuspendidas células de N. oceanica. Nas fases exponencial e estacionária a pior eficiência foi observada no Controle Positivo (cultivo), seguido pela fração HPI com o pior resultado dentre as frações testadas. A fase estacionária apresentou a pior eficiência de floculação, tanto no Controle Positivo quanto na fração HPI. Leituras de UV e concentrações de COD e proteínas aumentaram de uma fase para outra no Controle Positivo, enquanto que a concentração de carboidratos diminuiu. Desta forma se conclui que a maior concentração de proteínas na MOD interfere negativamente na floculação. A eficiência da floculação também foi testada em um terceiro experimento com a retirada de MOD pelo uso de skimmer. A floculação no tratamento skimmer apresentou excelentes resultados (93%), não havendo diferença estatística em comparação com o tratamento Controle Negativo (97% - sem matéria orgânica). O skimmer foi eficiente na retirada principalmente de proteínas do cultivo. Além disso verificou-se que o uso do skimmer não afetou a integridade das células de N. oceanica. Os experimentos foram realizados em triplicata. Como os dados nos 3 experimentos apresentaram distribuição normal e foram homocedásticos, foi usada ANOVA e post hoc de Tukey (p<0,05). Este projeto foi desenvolvido no Laboratório de Produção de Microalgas da Universidade Federal do Rio Grande FURG, no período outubro de 2015 a fevereiro de 2017.

Marine microalgae of the genus Nannochloropsis are commonly used in aquaculture as live food and are currently recognized as a promising source of biofuels and bioproducts for applications in the pharmaceutical and food industries. However, the large-scale production of microalgae finds difficulties mainly in the harvest of these microorganisms. The process of cell flocculation is more efficient and cost effective than others. However, this method still presents many technical problems that prevent its full operationalization. Among the major problems, the dissolved organic matter (DOM) produced by microalgae is recognized as a key interferent in the concentration and sedimentation process of the cells, causing an increase in the demand for flocculants and even rendering the process unfeasible. In this Dissertation the effect of organic matter in the flocculation process was evaluated by quantification and qualification of the same and also by its removal from the culture medium using a skimmer. The microalgae growth was monitored on alternate days in a 250 L culture system. Samples of 100 mL of culture were filtered through a 0.45 m pore membrane filer to obtain the DOM and its subsequent quantification and characterization as dissolved organic carbon (DOC), absorbance at 254 nm (UV), as well as proteins and carbohydrates contents. All of these factors increased throughout the culture. The flocculation efficiency for N. oceanica microalgae was tested in the particulate (POM -> 0.7 m) and dissolved (DOM - < 0.45 m) fractions separated by 0.7 m and 0.45 m filters. The Tanfloc natural polymer was used as flocculant. Fractions containing only POM resulted in flocculation efficiency greater than 90%, whereas treatments containing DOM in their composition did not exceed 30% efficiency, demonstrating that the DOM is the part of the organic matter that most interferes in the process. In a second experiment, 2 liters of were collected when the culture reached the exponential and stationary growth phases,. The samples were centrifuged to remove the cells and then filtered through a 0.45 m pore membrane filter to collect the DOM, which was subsequently fractionated by hydrophobicity through XAD-7HP and XAD-4 resins. The flocculation efficiency was tested in three fractions of dissolved organic matter: hydrophobic (HPO), transphilic (TPH) and hydrophilic (HPI), in which cells of N.oceanica were resuspended. In the exponential and stationary phases the worst efficiency was observed in the Positive Control (culture) followed by the HPI fraction with the poorest result among the fractions tested. The stationary phase had the worst flocculation efficiency, both in the Positive Control and in the HPI fraction. UV readings and concentrations of DOC and protein increased from one phase to another in the Positive Control, while the carbohydrate concentration decreased. In this way it is concluded that the higher concentration of proteins in the DOM interferes negatively in the flocculation. The flocculation efficiency was also tested in a third experiment with the removal of DOM by the use of skimmer. The flocculation in the skimmer treatment presented excellent results (93%), and there was no statistical difference in relation to the negative control treatment (97% - no organic matter). The skimmer was efficient in the removal of proteins from the culture. In addition, it was found that the use of the skimmer did not affect the integrity of the N. oceanica cells. The experiments were performed in triplicate. As the data in the 3 experiments had normal distribution and were homocedastic, ANOVA and post hoc Tukey (p <0.05) were used. This project was developed in the Microalgae Production Laboratory of the Federal University of Rio Grande - FURG, from October 2015 to February 2017.