Outbreak of bovine tick-borne disease on a riverside property in the Western Amazonia: Case report / Surto de tristeza parasitária bovina em propriedade ribeirinha na Amazônia Ocidental: Relato de caso

The objective was to report an outbreak of tick-borne disease (TBD) on riverside property in the Western Amazon. The death of 25 Nellore cattle was reported on a rural property on the banks of the Purus River, state of Acre. The producer observed animals with staggering walking, drop in productivity, weight loss and evolution to death in approximately 30 days. Fifteen animals from the same batch were selected for clinical evaluation and the ear tip was punctured for hemoparasite research, in addition to blood collection for hematological, biochemical and molecular evaluation. The main laboratory findings were leukocytosis, thrombocytopenia, hypoproteinemia, elevated creatine kinase and reduced urea, creatinine and albumin, as well as visualization of forms suggestive of Anaplasma spp. in 13.33% of the samples. Through PCR, 20% positivity was observed for Anaplasmamarginale and 53.33% for Babesia sp. Hematological and biochemical changes, although highly suggestive, may suffer changes from other factors not related to TBD. Therefore, the presumptive identification of the etiological agent in the blood or confirmatory by molecular methods is essential in the diagnosis. Depending on the stage of the disease, low parasitemia occurs, making it difficult to see hemoparasites in blood smears. The Babesia sp. was the main agent of the outbreak of TBD in the population evaluated, which, when associated with early clinical and laboratory diagnosis, results in adequate therapeutic direction and prophylactic measures, promoting a balance between host, agent and vector.

Objetivou-se relatar um surto de tristeza parasitária bovina (TPB) em propriedade ribeirinha na Amazônia Ocidental. Foi notificado o óbito de 25 bovinos da raça Nelore, em uma propriedade rural às margens do rio Purus, estado do Acre. O produtor observou animais com andar cambaleante, queda na produtividade, perda de peso e evolução ao óbito em aproximadamente 30 dias. Quinze animais do mesmo lote foram selecionados para avaliação clínica e foi procedida a punção a ponta de orelha para pesquisa de hemoparasitos, além da coleta de sangue para avaliação hematológica, bioquímica e molecular. Os principais achados laboratoriais foram anemia, leucocitose, trombocitopenia, hipoproteinemia, elevação da creatina quinase e redução de ureia, creatinina e albumina, além da visualização de formas sugestivas de Anaplasma spp. em 13,33% das amostras. Por meio da PCR, foi observado 20% de positividade para Anaplasma marginale e 53,33% para Babesia sp. As alterações hematológicas e bioquímicas, embora bastante sugestivas, podem sofrer alterações de outros fatores não relacionados à TPB. Por isso, a identificação presuntiva do agente etiológico no sangue ou confirmatória por métodos moleculares é essencial no diagnóstico. A depender da fase da doença, ocorre baixa parasitemia, dificultando a visualização de hemoparasitos em esfregaços sanguíneos. A Babesia sp. foi o principal agente do surto de TPB na população avaliada, que, quando associado ao diagnóstico clínico e laboratorial precoce, resulta no direcionamento terapêutico adequado e medidas profiláticas, promovendo uma relação de equilíbrio entre hospedeiro, agente e vetor.

Anaplasma phagocytophilum in horses - evaluation of proinflammatory biomarkers

Background: Anaplasma phagocytophilum is an obligate intracellular pathogen transmitted by the ticks that cause equinegranulocytic anaplasmosis (EGA). This pathogen is infects predominantly blood cells, principally granulocytes and especially neutrophils. A. phagocytophilum causes an acute febrile disease in horses accompanying with lethargy, loss ofappetite, lameness and hemorrhages. In horses, this disease should be considered in all acute symptoms accompaniedby thrombocytopenia and leukopenia identified by hematological test performed. Tick-borne pathogens have becomeincreasingly threatening for both animals and also public health since ticks mostly carry numerous well-documented andundocumented pathogens, and the geographical range of ticks has expanded in the recent years. This research has aimed toevaluate the impact of A. phagocytophilum infection on some oxidative/nitrosative stress parameters, antioxidant enzymeactivities, proinflammatory biomarkers and trace element levels in horses.Materials, Methods & Results: The present study has been carried out using blood samples collected from 93 horses aged1-year and older. The blood samples were centrifuged and sera were separated. Serum samples stored in the freezer (-20°C)until the day of analysis. The DNA was extracted from blood and analysed by nested-PCR technique targeting 16S rRNAgene of A. phagocytophilum and then positive PCR products were sequenced. A. phagocytophilum was 6 horses (6.4%)showed positive nested-PCR results. An infected group comprised of 6 positive horses according to PCR analysis results also6 healthy horses as control were selected. Serum SOD (Horse Superoxide Dismutase(Cu-Zn)) ELISA Kit, MPO (ELISAAssay Kit Horse Myeloperoxidase) and GPx (Horse glutathione peroxidase 1 ELISA Kit Assay), IL1 (Horse Interleukin 1Beta ELISA Kit), IL6 (Horse Interleukin 6 ELISA Kit), TNF α (Horse Tumor Necrosis...

Serological and molecular detection of Theileria equi in horses from Sinop, Mato Grosso state, Brazil / Detecção sorológica e molecular de Theileria equi em equinos oriundos de Sinop, Mato Grosso, Brasil

Equine piroplasmosis is the most important tick-borne disease to affect horses in Brazil. Theileria equi is one of the causative agents of equine piroplasmosis. Chronic cases are expected, in which the animals show no apparent signs of infection and remain asymptomatic but constitute a source of the infectious agent that ticks can spread. This study was conducted across 81 ranches located in the municipality of Sinop, State of Mato Grosso, Brazil. A sample calculation was performed to estimate the apparent prevalence of T. equi among horses. A total of 1,853 animals were included in the sampling analysis based on the information available from the Institute of Agricultural and Livestock Defense of Mato Grosso State. The serological analysis of 367 serum samples using an indirect enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) to detect anti-T. equi antibodies revealed that 337 animals were positive, representing a frequency of 90.70%. The molecular analysis to amplify the EMA-1 gene showed positivity in 20 of 89 tested samples. The fragments of four samples were sequenced and analyzed to determine their similarities to sequences from other species, based on sequences deposited at GenBank. All showed 100% similarity with T. equi. Our study represents the first report of T. equi antibodies among the equids in north-central region of Mato Grosso, revealing the widespread distribution of seropositive animals.

A piroplasmose equina é a doença transmitida por carrapatos mais importante em cavalos no Brasil. Theileria equi é um dos agentes causadores da piroplasmose equina. São esperados casos crônicos, nos quais os animais não apresentam sinais aparentes de infecção e permanecem assintomáticos, mas constituem uma fonte de infecção e disseminação por carrapatos. Este estudo foi realizado em 81 fazendas localizadas no município de Sinop, Estado de Mato Grosso, Brasil. Um cálculo amostral foi realizado para estimar a prevalência aparente de T. equi entre cavalos. No total, 1.853 animais foram incluídos na análise amostral com base nas informações disponíveis no Instituto de Defesa Agropecuária do Estado de Mato Grosso. A análise sorológica de 367 amostras de soro por meio de ensaio imunoenzimático indireto (ELISA) para detecção de anticorpos anti-T. equi revelou que 337 animais eram positivos, representando uma frequência de 90,70%. A análise molecular para o gene EMA-1 mostrou positividade em 20 das 89 amostras testadas. Os fragmentos de quatro amostras foram sequenciados e analisados para determinar suas semelhanças com sequências de outras espécies, a partir das sequências depositadas no GenBank. Todos mostraram 100% de similaridade com T. equi. Nosso estudo representa o primeiro relato de anticorpos contra T. equi entre os equídeos na região centro norte de Mato Grosso, revelando a ampla distribuição de animais soropositivos.

Serological and molecular detection of Theileria equi in horses from Sinop, Mato Grosso state, Brazil / Detecção sorológica e molecular de Theileria equi em equinos oriundos de Sinop, Mato Grosso, Brasil

Equine piroplasmosis is the most important tick-borne disease to affect horses in Brazil. Theileria equi is one of the causative agents of equine piroplasmosis. Chronic cases are expected, in which the animals show no apparent signs of infection and remain asymptomatic but constitute a source of the infectious agent that ticks can spread. This study was conducted across 81 ranches located in the municipality of Sinop, State of Mato Grosso, Brazil. A sample calculation was performed to estimate the apparent prevalence of T. equi among horses. A total of 1,853 animals were included in the sampling analysis based on the information available from the Institute of Agricultural and Livestock Defense of Mato Grosso State. The serological analysis of 367 serum samples using an indirect enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) to detect anti-T. equi antibodies revealed that 337 animals were positive, representing a frequency of 90.70%. The molecular analysis to amplify the EMA-1 gene showed positivity in 20 of 89 tested samples. The fragments of four samples were sequenced and analyzed to determine their similarities to sequences from other species, based on sequences deposited at GenBank. All showed 100% similarity with T. equi. Our study represents the first report of T. equi antibodies among the equids in north-central region of Mato Grosso, revealing the widespread distribution of seropositive animals.(AU)

A piroplasmose equina é a doença transmitida por carrapatos mais importante em cavalos no Brasil. Theileria equi é um dos agentes causadores da piroplasmose equina. São esperados casos crônicos, nos quais os animais não apresentam sinais aparentes de infecção e permanecem assintomáticos, mas constituem uma fonte de infecção e disseminação por carrapatos. Este estudo foi realizado em 81 fazendas localizadas no município de Sinop, Estado de Mato Grosso, Brasil. Um cálculo amostral foi realizado para estimar a prevalência aparente de T. equi entre cavalos. No total, 1.853 animais foram incluídos na análise amostral com base nas informações disponíveis no Instituto de Defesa Agropecuária do Estado de Mato Grosso. A análise sorológica de 367 amostras de soro por meio de ensaio imunoenzimático indireto (ELISA) para detecção de anticorpos anti-T. equi revelou que 337 animais eram positivos, representando uma frequência de 90,70%. A análise molecular para o gene EMA-1 mostrou positividade em 20 das 89 amostras testadas. Os fragmentos de quatro amostras foram sequenciados e analisados para determinar suas semelhanças com sequências de outras espécies, a partir das sequências depositadas no GenBank. Todos mostraram 100% de similaridade com T. equi. Nosso estudo representa o primeiro relato de anticorpos contra T. equi entre os equídeos na região centro norte de Mato Grosso, revelando a ampla distribuição de animais soropositivos.(AU)

Serological and molecular detection of Theileria equi in horses from Sinop, Mato Grosso state, Brazil / Detecção sorológica e molecular de Theileria equi em equinos oriundos de Sinop, Mato Grosso, Brasil

Equine piroplasmosis is the most important tick-borne disease to affect horses in Brazil. Theileria equi is one of the causative agents of equine piroplasmosis. Chronic cases are expected, in which the animals show no apparent signs of infection and remain asymptomatic but constitute a source of the infectious agent that ticks can spread. This study was conducted across 81 ranches located in the municipality of Sinop, State of Mato Grosso, Brazil. A sample calculation was performed to estimate the apparent prevalence of T. equi among horses. A total of 1,853 animals were included in the sampling analysis based on the information available from the Institute of Agricultural and Livestock Defense of Mato Grosso State. The serological analysis of 367 serum samples using an indirect enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) to detect anti-T. equi antibodies revealed that 337 animals were positive, representing a frequency of 90.70%. The molecular analysis to amplify the EMA-1 gene showed positivity in 20 of 89 tested samples. The fragments of four samples were sequenced and analyzed to determine their similarities to sequences from other species, based on sequences deposited at GenBank. All showed 100% similarity with T. equi. Our study represents the first report of T. equi antibodies among the equids in north-central region of Mato Grosso, revealing the widespread distribution of seropositive animals.

A piroplasmose equina é a doença transmitida por carrapatos mais importante em cavalos no Brasil. Theileria equi é um dos agentes causadores da piroplasmose equina. São esperados casos crônicos, nos quais os animais não apresentam sinais aparentes de infecção e permanecem assintomáticos, mas constituem uma fonte de infecção e disseminação por carrapatos. Este estudo foi realizado em 81 fazendas localizadas no município de Sinop, Estado de Mato Grosso, Brasil. Um cálculo amostral foi realizado para estimar a prevalência aparente de T. equi entre cavalos. No total, 1.853 animais foram incluídos na análise amostral com base nas informações disponíveis no Instituto de Defesa Agropecuária do Estado de Mato Grosso. A análise sorológica de 367 amostras de soro por meio de ensaio imunoenzimático indireto (ELISA) para detecção de anticorpos anti-T. equi revelou que 337 animais eram positivos, representando uma frequência de 90,70%. A análise molecular para o gene EMA-1 mostrou positividade em 20 das 89 amostras testadas. Os fragmentos de quatro amostras foram sequenciados e analisados para determinar suas semelhanças com sequências de outras espécies, a partir das sequências depositadas no GenBank. Todos mostraram 100% de similaridade com T. equi. Nosso estudo representa o primeiro relato de anticorpos contra T. equi entre os equídeos na região centro norte de Mato Grosso, revelando a ampla distribuição de animais soropositivos.

Hemoparasites in ticks of wild birds of Serra dos Órgãos National Park, state of Rio de Janeiro, Brazil / Hemoparasitos em carrapatos de aves silvestres do Parque Nacional da Serra dos Órgãos, estado do Rio de Janeiro, Brasil

The aim of this study is to detect the presence of tick-borne agents of genera Rickettsia, Borrelia, Babesia, Ehrlichia and Anaplasma in ticks collected from native wild birds in the state of Rio de Janeiro. Birds were captured and observed carefully to find the ectoparasites. DNA detection of hemoparasites was performed by means of the polymerase chain reaction (PCR). The sequences obtained were analyzed and their homologies were compared to the available isolates in the GenBank platform database. A total of 33 birds were captured from 20 different species, of which 14 were parasitized by Amblyomma longirostre (n = 22). There was absence of DNA from agents of the genera Babesia, Anaplasma and Ehrlichia in the evaluated samples. The phylogenetic analysis indicated that one sample had 100% identity with Rickettsia bellii (KJ534309), the other two samples showed 100% identity with Rickettsia sp. Aranha strain and strain AL (EU274654 and AY360216). The positive sample for R. bellii was also demonstrated to be positive for Borrelia sp., which presented a similarity of 91% with Borrelia turcica (KF422815). This is the first description of Borrelia sp. in ticks of the genus Amblyomma in South America.(AU)

Este trabalho teve como objetivo detectar evidências moleculares da presença de agentes dos gêneros Rickettsia, Borrelia, Babesia, Anaplasma e Ehrlichia transmitidos por carrapatos coletados de aves silvestres no estado do Rio de Janeiro. Aves foram capturadas e observadas cuidadosamente a procura de ectoparasitos. A detecção de DNA de hemoparasitos foi realizada por meio da reação em cadeia da polimerase (PCR). As sequências obtidas foram analisadas e sua homologia comparada aos isolados disponíveis na base de dados da plataforma GenBank. Foram capturadas 33 aves, de 20 espécies diferentes das quais 14 estavam parasitadas por Amblyomma longirostre (n = 22). Houve ausência de DNA de agentes dos gêneros Babesia, Anaplasma e Ehrlichia nas amostras avaliadas. A análise filogenética indicou que uma amostra apresentou 100% de identidade com Rickettsia bellii (KJ534309), as outras duas amostras apresentaram 100% de identidade com Rickettsia sp. cepa Aranha e Cepa AL (EU274654 e AY360216.). A amostra positiva para R. bellii também apresentou positividade para Borrelia sp. que apresentou similaridade de 91% com Borrelia turcica (KF422815). Esta é a primeira descrição de Borrelia sp. em carrapatos do gênero Amblyomma na América do Sul.(AU)

Monitoramento sanitário de bezerras leiteiras na fase de recria através de sistema de pesagem voluntária

O setor de criação de bezerras e novilhas é responsável pelo crescimento, reposição e melhoramento genético do rebanho, representando 20% dos custos totais de produção. Essa categoria representa alto investimento e obter sucesso na criação dos animais é fundamental para garantir eficiência no sistema de produção. Neste cenário, as doenças são a causa mais importante de mortalidade, causando grande impacto no setor de criação de bezerras e novilhas. No Brasil, a Tristeza Parasitária Bovina (TPB) e a Doença Respiratória Bovina (DRB) são responsáveis pela maior parte da mortalidade dos animais nessa categoria. Objetivou-se neste estudo avaliar métodos de monitoramento da saúde de bezerras leiteiras da raça Girolando entre 80 e 120 dias de vida para indicar a ocorrência de tristeza parasitária e doença respiratória. O experimento foi conduzido em uma fazenda localizada no município de Passos Minas Gerais, que possui histórico de morbidade e mortalidade de animais na fase de recria por TPB e DRB. Foram utilizadas 50 bezerras. O monitoramento diário foi realizado através da confecção de esfregaços sanguíneos, temperatura retal e avaliação do escore respiratório clínico de Wisconsin. Além disso, foram instaladas nos cochos de água, balanças automáticas de precisão para aferição do peso corporal dos animais. Os animais apresentaram queda no ganho de peso nos dois dias anteriores ao diagnóstico de TPB e no dia do diagnóstico de DRB. O monitoramento por peso corporal demonstrou valores de sensibilidade (S), especificidade (E), valor preditivo positivo (VPP) e valor preditivo negativo (VPN), respectivamente, 73%, 72,7%, 77,7% e 67,5% para TPB e 67,3%, 80,2%, 66% e 81,1% para DRB. Esses valores podem ser ajustados de acordo com a estratégia de monitoramento da doença e o custo da ocorrência de falsos positivos e falsos negativos. Os resultados mostraram que o monitoramento da saúde dos animais através de balanças automáticas pode ser utilizado e tem melhor eficiência comparado ao método de monitoramento por temperatura retal

The dairy calf and heifer sector is responsible for the growth, replacement, and genetic improvement of the herd, representing 20% of the total production costs. This category represents high investment and acquire success in the rearing dairy calfs and heifers is essential to ensure efficiency in the production system. In this scenario, diseases are the most important mortality cause, causing a high impact on the calf and heifer rearing sector. In Brazil, Tickborne disease (TBD) and Bovine Respiratory Disease (BRD) are responsible for most of the mortality of animals in the category. The aim of this study was to evaluate methods for monitoring the health of Girolando dairy calves between 80 and 120 days of age to indicate the occurrence of tick-borne disease and bovine respiratory disease. The experiment was conducted on a farm in the municipality of Passos - Minas Gerais, which has a history of morbidity and mortality of animals in the growing phase by TBD and BRD. 50 calves were used. Daily monitoring was carried out by means of blood smears, rectal temperature and evaluation of the Wisconsin clinical respiratory score. In addition, automatic precision scales were installed in the water bins to measure the animals' body weight. The animals showed a drop in reduction gain in the two days prior to the diagnosis of TBD and on the day of the diagnosis of BRD. The monitoring by body weight showed values of sensibility (Se), specificity (Sp), positive predictive value (PPV) and negative predictive value NPV, respectively, 73%, 72.7%, 77.7% and 67.5% for TBD and 67.3%, 80.2%, 66% and 81.1% for BRD. These values can be adjusted according to the disease monitoring strategy and the cost of occurring false positives and false negatives. The results showed that the monitoring of animal health through automatic scales can be used and has better efficiency compared to the method of monitoring by rectal temperature.

Assessing different chemoprophylactic protocols against bovine tick-borne diseases and their influence on the weight gain of calves / Avaliação de diferentes protocolos de quimioprofilaxia da tristeza parasitária bovina sobre o ganho de peso de novilhos

In the present study, 87 Aberdeen Angus calves were used to assess the effects of low dose, agent-specific drugs on weight gain after a babesiosis and anaplasmosis outbreak. All animals were weighed on weaning (day 34) and again on day zero, with a mean (on day zero) of 223.46 Kg and an average individual daily weight gain (ADG) of 0.258 Kg. The animals were then separated in three groups: G1 was composed of 37 calves with below average ADG; G2 was composed of 35 animals with below average ADG; and G3 was composed of 15 animals with above average ADG. On day zero animals in G1 were treated with 1.17 mg Kg-1 of diminazene diaceturate and 6.7 mg Kg-1 of oxytetracycline; those in G2 were treated with 1.2 mg Kg-1 of imidocarb dipropionate; and those in G3 were not treated. The animals were then monitored daily for the onset of disease, and on days 15 and 34 they were weighed and had their blood harvested. Animals in G1 had the better overall ADG (0.613 Kg day-1) (P 0.05), with no clinical cases during the experiment. The performance in G2 was moderate, not differing from either G1 or G3 (mean ADG = 0.528 Kg day-1), however, this group had two clinical cases of anaplasmosis during the experiment. Animals in G3 had the worst performance, considering ADG (0.343 Kg day-1). When total weight gain per animal is compared for the study period (35 days), those in G1 gained an average...(AU)

No presente estudo foram utilizados novilhos da raça Aberdeen Angus remanescentes de um de surto de babesiose e anaplasmose, expostos a infestações por carrapatos Rhipicephalus (Boophilus) microplus. No dia zero, o lote de 87 novilhos pesando em média 223,46 Kg, apresentava GMD de peso vivo de 0,258 Kg por dia nos últimos 34 dias. O lote foi dividido em 3 grupos: G1, 37 novilhos com GMD abaixo da média; G2, 35 novilhos com GMD abaixo da média; G3, 15 novilhos com GMD acima da média geral do lote. Os novilhos do G1 foram submetidos à quimioprofilaxia com uso de 1,17 mg Kg-1 de diaceturato de diminazeno e 6,7 mg Kg-1 de oxitetraciclina. Os novilhos do G2 foram submetidos à quimioprofilaxia com o uso de 1,2 mg Kg-1 de dipropionato de imidocarb. Os animais do G3 não foram medicados. O G1 obteve o melhor desempenho de ganho de peso no período (0,613 Kg dia-1) (P 0,05) e não apresentou nenhum caso clínico da doença durante o experimento. O protocolo quimioprofilático do G2 teve desempenho mediano, sem diferença dos demais grupos (0,528 Kg dia-1) e o G3 teve o pior desempenho (0,343 Kg dia-1), porém ocorreram 2 quadros clínicos de anaplasmose no final do experimento no G2. Na comparação do desempenho no ganho de peso total por animal no período, o G3 (Controle) obteve 11,667 Kg, O G2 obteve 17,957 Kg e o G1 obteve 20,851 Kg. O protocolo quimioprofilático a base de diaceturato de...(AU)

Experimental infection of Capybaras (Hydrochoerus hydrochaeris) with an Amblyomma sculptum-derived strain of Rickettsia rickettsii

A Febre Maculosa Brasileira (FMB) é reconhecida como a doença transmitida por carrapatos com maior letalidade no Brasil e outros países do hemisfério ocidental. Rickettsia rickettsii é seu agente etiológico e, na sua história natural, os carrapatos e mamíferos cumprem um papel essencial. No sudeste brasileiro, Amblyomma sculptum é o principal vetor incriminado e as capivaras têm sido reconhecidas como hospedeiros amplificadores. Estudos prévios têm comprovado que as capivaras são suscetíveis à infecção com R. rickettsii e apresentam uma rickettsemia prolongada que possibilita a infecção de populações de A. sculptum suscetíveis. Os estudos citados, usaram na infecção, uma cepa de R. rickettsii isolada de carrapatos Amblyomma aureolatum (cepa Taiaçu), sem executar novos desafios de infecção em animais imunes. No presente trabalho, apresentamos os resultados de uma infecção experimental de capivaras com uma cepa de R. rickettsii isolada de carrapatos A. sculptum (cepa Itu) identificando variáveis clínicas, hematológicas e patológicas, o período de rickettsemia e a subsequente transmissão de R. rickettsii a populações de carrapatos A. sculptum suscetíveis, com uma análise sequencial da sua competência vetorial. Adicionalmente, foram executados desafios posteriores para estudar os parâmetros citados em animais imunes ou convalescentes. Cinco capivaras, de duas áreas não endêmicas no estado de São Paulo, foram infectadas com R. rickettsii (cepa Itu) através de infestações com carrapatos A. sculptum infectados. A temperatura retal e os sinais clínicos foram avaliados por um período de acompanhamento de 30 dias e amostras de sangue foram coletadas a cada dois dias, para inoculação de cobaias, extração de DNA, hematologia e reação de imunofluorescência indireta (RIFI). Adicionalmente, as capivaras também foram infestadas com carrapatos A. sculptum não infectados (ninfas e adultos) em duas câmaras de alimentação (uma junto com os adultos infectados e a outra separados dos adultos infectados), os quais foram posteriormente coletados, incubados e usados para infestar coelhos suscetíveis e para extração de DNA. Estes procedimentos foram repetidos através de infecções subsequentes nas capivaras. Na primoinfecção, quatro de cinco capivaras apresentaram sinais clínicos e duas delas morreram, exibindo lesões macroscópicas vasculares durante a necropsia. Baseando-se na inoculação das cobaias, houve rickettsemia em todas as capivaras com uma duração média de 9,2 dias (intervalo: 6-20 dias). DNA de Rickettsia foi amplificado em amostras de sangue de três capivaras e algumas variáveis hematológicas (hematócrito e contagem de leucócitos) se alteraram durante a infecção. Todos os indivíduos apresentaram respostas sorológicas, mantiveram títulos de anticorpos durante o período de acompanhamento (307-555 dias) e, nos animais convalescentes, anticorpos foram detectados prévio a cada desafio ulterior. Em aquelas capivaras, não foram registrados nem sinais clínicos nem rickettsemia depois de cada um dos desafios. As amostras de carrapatos coletadas durante a primoinfecção, de todas as capivaras, amplificaram DNA de Rickettsia com taxas de infecção de 4,6-30% para ninfas e 5,0-100.0% para adultos. Adicionalmente, depois das infestações com estes carrapatos, os coelhos apresentaram sinais clínicos e reação sorológica. Pelo contrário, carrapatos coletados durante os desafios posteriores não amplificaram DNA de Rickettsia e os coelhos infestados com estes não exibiram sinais clínicos nem resposta de anticorpos. Salienta-se que um lote de carrapatos coletados da capivara 5, durante a segunda infeção, que se alimentaram junto com os adultos infectados, amplificaram DNA de Rickettsia, sugerindo uma provável transmissão horizontal não sistêmica. Em conclusão, no presente estudo foi corroborada a susceptibilidade das capivaras à infecção com R. rickettsii (cepa Itu) e a apresentação de variáveis de infecção similares quando comparada com a cepa Taiaçu. Não obstante, novas características clínicas e de infecção de carrapatos foram registradas em animais primo-infectados e imunes.

Brazilian Spotted Fever (BSF) is recognized as the most lethal tick-borne disease in Brazil and other countries in the western hemisphere. Rickettsia rickettsii is its etiological agent, and in its natural history, ticks and mammals perform an essential epidemiologic role. In Southeastern Brazil, Amblyomma sculptum is the main incriminated vector and capybaras have been recognized as amplifier hosts. Previous studies have comproved that capybaras are susceptible to infection with R. rickettsii and that develop a rickettsemia of sufficient length to infect naïve A. sculptum ticks. These studies used for infection a strain of R. rickettsii isolated from Amblyomma aureolatum ticks (strain Taiaçu) without performing subsequent infection challenges in immune animals. Herein, we present the results of an experimental study infecting capybaras with a R. rickettsii-strain isolated from A. sculptum (strain Itu) identifying clinical, haematological and pathological features, rickettsemic period and subsequent transmission of R. rickettsii to susceptible A. sculptum tick populations with a sequential analysis of their vectorial competence; also, we performed subsequent infections to evaluate the mentioned variables in immune or convalescent animals. Five capybaras, from two non-endemic regions in São Paulo state, were infected with R. rickettsii (strain Itu) through tick infestations with infected A. sculptum adults. Rectal temperature and clinical signs were registered during a 30-day following period and blood samples collected, each two days, for guinea pig inoculation, DNA extraction, haematology and immunofluorescence antibody test (IFA). Also, capybaras were infested with non-infected A. sculptum ticks (nymphs and adults) in two feeding chambers (one to feed with infected adults and another to feed separated from infected adults), which were further collected, incubated and posteriorly used for infestation of susceptible rabbits and DNA extraction. These procedures were repeated during subsequent capybara infections. During primoinfection, four out of five capybaras presented clinical signs and two died, showing vascular gross lesions at necropsy. Based on guinea pig inoculation, rickettsemia was present in all capybaras with a mean duration of 9.2 days (range: 6-12 days). Rickettsia DNA was amplified in blood samples of three capybaras and some hematologic variables (PCV, and leucocyte count) were altered during infection. All individuals presented serological responses and maintain antibody titres during the following period (307-555 days) and, in convalescent capybaras, antibodies were detected before each subsequent infection. In those animals, no clinical signs nor rickettsemia were detected after each infection challenge. Samples of ticks collected during primoinfection of all capybaras amplified Rickettsia DNA with infectious rates of 4.6-30.0% and 5.0-100.0% in molted nymphs and adults, respectively. Also, after infestations with these ticks, rabbits presented clinical signs and serologic reactivity. By contrast, ticks collected during subsequent capybara infections did not amplify Rickettsia DNA and rabbits infested with them did not exhibited clinical signs nor antibody response. Notably, a batch of ticks collected from capybara 5, during the second infection, that fed adjacent with infected adults, amplified Rickettsia DNA, suggesting a probable R. rickettsii non-systemic horizontal transmission. In conclusion, in the present study it was corroborated capybara susceptibility to infection with R. rickettsii (strain Itu) and similar infection variables when comparing with strain Taiaçu. However, new clinical and tick transmission patterns were registered in first-infected and immune animals.

Molecular detection of Ehrlichia canisin dogs from the Pantanal of Mato Grosso State, Brazil

The present study evaluated the presence of EhrlichiaDNA in the blood samples of 320 dogs from the urban and rural areas of the municipality of Poconé, Pantanal region, Mato Grosso state, by Polymerase Chain Reaction (PCR), targeting the ehrlichial dsbgene. Risk factors for infection in dogs were also evaluated. Forty-eight (15%, 95% CI: 11.4-19.5%) dogs were positive: 25 (15.6%, 95% CI: 10.4-22.2%) from the urban area and 23 (14.4%, 95% CI: 9.3-20.8%) from the rural area (P > 0.05). Partial DNA sequence obtained from PCR products of 18 samples from the urban area and 16 samples from the rural area were 100% identical to E. canis from Brazil and the USA. This study reports the first E. canis molecular detection in dogs from the northern Pantanal region.

O presente estudo avaliou a presença de DNA deEhrlichia spp. em 320 cães das áreas urbana e rural do município de Poconé, região do Pantanal de Mato Grosso, pela PCR visando o gene dsb. Os fatores de risco para a infecção em cães também foram avaliados. Quarenta e oito (15%, IC 95%: 11,4-19,5%) cães foram positivos, 25 (15,6%, IC 95%: 10,4-22,2%) da área urbana e 23 (14,37%, 95% CI: 9,3-20,8%) da área rural (P > 0,05). Sequências parciais de DNAs obtidos a partir de produtos da PCR de 18 amostras da área urbana e 16 da área rural foram 100% idênticas a E. canis do Brasil e EUA. Este estudo relata a primeira detecção molecular deE. canis em cães da região norte do Pantanal.

INFECÇÃO E DIVERSIDADE GENÉTICA DE Babesia caballi E Theileria equi EM EQUÍDEOS DO ESTADO DE MATO GROSSO.

A piroplasmose equina é uma doença transmitida por carrapatos, causada pelos hemoprotozoários Theileria equi e Babesia caballi. Tem importância econômica devido ao impacto no movimento internacional de cavalos para o comércio e para a participação em eventos. O objetivo deste estudo foi pesquisar a distribuição da T. equi e da B. caballi em equídeos do estado de Mato Grosso, por meio de métodos moleculares, e identificar fatores de risco associados à positividade, além de avaliar a diversidade genética dos agentes. Foram examinados 1624 equídeos, distribuídos em 973 propriedades, e os dados epidemiológicos de cada animal e propriedade. A identificação dos piroplasmídeos foi realizada pela reação em cadeia da polimerase (PCR), por meio da amplificação de um fragmento do gene EMA-1 (Erythrocyte merozoite antigen 1) de T. equi () e de um fragmento do gene RAP-1 (Rhoptry associated protein-1) de B. caballi. Para caracterização molecular e estudos filogenéticos, foram utilizadas 13 e 60 sequências dos genes RAP-1 e EMA-1, respectivamente, para construção de um dendograma utilizando máxima parcimônia. A prevalência molecular da infeção por B. caballi em animais foi de 2,74%, e de T. equi foi de 25,91%. Na análise das variáveis, equídeos criados no Pantanal tem menos chance de serem infectados por B. caballi e T. equi em 2,9% e 19,65% respectivamente. Animais com idade entre 6 meses a 2 anos e 11 meses apresentaram 1,20 vezes mais chance de serem infectados pela T. equi, enquanto animais com idade acima de 10 anos apresentaram 10,08% menos chance de estarem infectados por T. equi. A prevalência de propriedades positivas foi de 4,11%, para B. caballi e de 28,16% para T. equi. A localização da propriedade no bioma Pantanal, fez com que diminuísse a chance de ser positiva para T. equi em 56,23%, e as propriedades que utilizavam os equídeos para a realização do serviço da fazenda tinham menos chance de terem animais infectados por T. equi em 83,02%. Na análise filogenética, as sequências de B. caballi apresentaram variabilidade intraespecífica de 1,95%, contrastando com 2,99% em T. equi, contudo não nos permitiram distinguir os subgrupos relacionados aos diferentes biomas. A piroplasmose equina ocorre em todo o estado de Mato Grosso, com maior prevalência, de ambos os agentes, em animais e em propriedades no bioma Amazônico, seguida do Cerrado e do Pantanal.

Equine piroplasmosis is a tick-borne disease caused by the hemoprotozoa Theileria equi and Babesia caballi. It has economic importance due to the impact on the international movement of horses for trade and for participation in events. The aim of this study was to investigate the distribution of T. equi and B. caballi in equidae from the Mato Grosso state, by molecular methods to identify risk factors associated with positivity and to evaluate the genetic diversity of the agents. We examined 1624 equidae, distributed in 973 farms, and the epidemiological data of animal and property. Polymerase chain reaction (PCR) was identified by amplification of a fragment of the EMA-1 (Erythrocyte merozoite antigen 1) gene of T. equi gene and a fragment of the RAP-1 (Rhoptry associated protein-1) gene of B. caballi. For molecular characterization and phylogenetic studies, 13 and 60 sequences of the RAP-1 and EMA-1 genes, respectively, were used to construct a dendogram using maximum parsimony. The molecular prevalence of B. caballi infection in animals was 2.74%, and T. equi was 25.91%. In the analysis of the variables, equidae raised in the Pantanal are less likely to be infected by B. caballi and T. equi in 2.9% and 19.65% respectively. Animals aged 6 months to 2 years and 11 months presented a 1.20 times greater chance of being infected by T. equi, while animals older than 10 years presented 10.08% less chance of being infected by T. equi. The prevalence of positive properties was 4.11% for B. caballi and 28.16% for T. equi. The location of the property in the Pantanal biome decreased the chance of being positive for T. equi in 56.23%, and the properties that used equidae to perform the farm service were less likely to have T. equi infected animals .equi in 83.02%. In the phylogenetic analysis, B. caballi sequences presented intraspecific variability of 1.95%, contrasting with 2.99% in T. equi, but they did not allow us to distinguish the subgroups related to the different biomes. Equine piroplasmosis occurs in the state of Mato Grosso, with higher prevalence of both agents, in animals and in properties in the Amazon biome, followed by the Cerrado and the Pantanal.

Molecular detection of Ehrlichia canis in dogs from the Pantanal of Mato Grosso State, Brazil / Detecção molecular de Ehrlichia canis em cães do Pantanal do Mato Grosso, Brasil

The present study evaluated the presence of Ehrlichia DNA in the blood samples of 320 dogs from the urban and rural areas of the municipality of Poconé, Pantanal region, Mato Grosso state, by Polymerase Chain Reaction (PCR), targeting the ehrlichial dsbgene. Risk factors for infection in dogs were also evaluated. Forty-eight (15%, 95% CI: 11.4-19.5%) dogs were positive: 25 (15.6%, 95% CI: 10.4-22.2%) from the urban area and 23 (14.4%, 95% CI: 9.3-20.8%) from the rural area (P > 0.05). Partial DNA sequence obtained from PCR products of 18 samples from the urban area and 16 samples from the rural area were 100% identical to E. canis from Brazil and the USA. This study reports the first E. canis molecular detection in dogs from the northern Pantanal region.

O presente estudo avaliou a presença de DNA de Ehrlichia spp. em 320 cães das áreas urbana e rural do município de Poconé, região do Pantanal de Mato Grosso, pela PCR visando o gene dsb. Os fatores de risco para a infecção em cães também foram avaliados. Quarenta e oito (15%, IC 95%: 11,4-19,5%) cães foram positivos, 25 (15,6%, IC 95%: 10,4-22,2%) da área urbana e 23 (14,37%, 95% CI: 9,3-20,8%) da área rural (P > 0,05). Sequências parciais de DNAs obtidos a partir de produtos da PCR de 18 amostras da área urbana e 16 da área rural foram 100% idênticas a E. canis do Brasil e EUA. Este estudo relata a primeira detecção molecular de E. canis em cães da região norte do Pantanal.

Chemical identification of Tagetes minuta Linnaeus (Asteraceae) essential oil and its acaricidal effect on ticks / Caracterização química e efeito acaricida do óleo essencial de Tagetes minuta Linnaeus (Asteraceae) em carrapatos

The control of tick species that affect animal production is vital for the economic welfare of the cattle industry. This study focused on testing the acaricidal activity of the essential oil from the leaves and stems of Tagetes minuta against several Brazilian tick species, including Rhipicephalus (Boophilus) microplus, Rhipicephalus sanguineus, Amblyomma cajennense and Argas miniatus. The chemical composition of the essential oil was determined by chromatography and spectroscopy analyses, which revealed the presence of monoterpenes. The adult immersion test (AIT) and the larval packet test (LPT) were used to evaluate the efficacy of T. minuta essential oil in tick management at concentrations of 2.5, 5, 10, 20 and 40%. The results demonstrated that the T. minuta essential oil had over 95% efficacy against four species of ticks at a concentration of 20%. These results suggest that the essential oil of T. minuta could be used as an environmentally friendly acaricide.(AU)

O controle de carrapatos que causa impacto na produção de bovinos possui importância econômica para a cadeia produtiva. Neste trabalho objetivou-se testar a atividade acaricida do óleo essencial das folhas e caules de Tagetes minuta contra várias espécies de carrapatos brasileiros, incluindo Rhipicephalus (Boophilus) microplus, Rhipicephalus sanguineus, Amblyomma cajennense e Argas miniatus. A composição química do óleo foi determinada por GC-MS e análises de espectroscopia de RMN, que revelaram a presença de monoterpenos. Na avaliação destas substâncias no controle do carrapato foram empregados os testes de imersão de adulto (TIA) e o de pacote de larvas (TPL) para o extrato de óleo de T. minuta nas concentrações de 2,5%; 5%; 10%; 20% e 40%. Os resultados do TPL e TIA demonstraram que o óleo essencial na concentração de 20% de T. minuta apresenta eficácia superior a 95% nas quatro espécies de carrapato. Estes resultados sugerem que o óleo essencial de T. minuta pode ser usado como um acaricida eficaz e com baixo impacto ambiental.(AU)

Detecção molecular de Ehrlichia spp., Anaplasma spp., Rickettsia spp. e agentes da Ordem Piroplasmida em cães, e seus carrapatos, da região metropolitana da Província de Piura, Piura-Peru.

Erliquiose, Rickettsiose e Babesiose têm sido identificadas como causa crescente de morbidade e mortalidade de caninos e, em alguns países, do homem, em virtude da maior exposição a locais onde é comum a presença de carrapatos. O objetivo deste trabalho foi obter informações epidemiológicas sobre as infecções e presença dos agentes de membros Ordem Rickettsiales e agentes da Ordem Piroplasmida, que acometem cães, e seus carrapatos, da região Metropolitana da Província de Piura, por meio da Reação em Cadeia da Polimerase (PCR), Nested-PCR, polimorfismos de restrição de fragmentos amplificados (RFLP), Sequenciamento e Analise filogenética, assim como determinar as espécies envolvidas nas infecções, e conhecer a fauna de Ixodídeos presentes nessa região. Além das amostras de sangue (216) e carrapatos (984), foram coletadas informações sobre os cães e seus proprietários como: faixa etária, sexo, presença de carrapatos, estrato socioeconômico e convivência com outros animais. Dos 984 carrapatos, apenas três espécies de carrapatos foram identificadas, Riphicephalus sanguineus (977), Amblyomma triste (seis) e Amblyomma tigrinum (um). Estes foram classificados morfologicamente por estádio, espécie e sexo, ficando: 67,3% (348/517) fêmeas adultas (armazenadas individualmente), 22,8% (118/517) machos adultos (armazenados em pool de até sete exemplares) e 9,9% (51/517) ninfas (armazenadas em pool de até dez exemplares do mesmo animal e da mesma espécie). Utilizando-se os iniciadores ECC/ECB, ECAN/HE3 e PLATYS/HE3, verificou-se mediante PCR e Nested-PCR, frequências de 18,5% (40/216), 52,5%(21/40), 35,0%(14/40) e 20%(8/40) para agentes da Família Anaplasmataceae, E. canis, A. platys e coinfecção entre estas duas espécies, respectivamente, no DNA extraído dos cães, ficando 32,5%(13/40) das amostras negativas, para estas duas espécies pela Nested-PCR, mas diagnosticadas como E. canis e A. platys pelo sequenciamento. Ao se considerar as variáveis de sexo (p=0,034), presença de carrapatos (p=0,0001) e estrato socioeconômico (p=0,001), verificou-se que houve associação entre os diferentes grupos e a infecção para agentes da Família Anaplasmataceae em cães. A análise filogenética, confirmou a presença das espécies Ehrlichia canis, Anaplasma platys e Ehrlichia sp., no DNA extraído dos cães. A frequência de carrapatos positivos para agentes da Família Anaplasmataceae, mediante PCR, foi 15,0% (78/517). Entretanto, apenas duas sequências resultaram em boa qualidade para análise no GenBank, identificando o agente envolvido como E. canis. Além disso, dos 216 cães avaliados e 517 "pools" de carrapatos, 1,4% (3/216) e 0%(0/517) foram positivos para Babesia sp. na PCR utilizando os iniciadores PIRO A e PIRO B. Na RFLP demonstrou-se um padrão de clivagem, em todas as amostras, compatível com B. vogeli. As sequência evidenciaram um 99% de identidade para B. vogeli. Na avaliação de agentes rickettsiais, observou-se mediante PCR e sequenciamento, uma taxa de infecção em carrapatos de 0,2% (1/517). Essa amostra foi positiva para gltA, porém, negativa para ompA, ompB e htrA. A análise filogenética mostrou que a sequência avaliada se agrupou no clado de R. felis. Demonstrando pela primeira vez, mediante técnicas moleculares a presença de agentes de membros da Ordem Rickettsiales e agentes da Ordem Piroplasmida em cães, e seus carrapatos, na Província de Piura.

Rickettsiosis and babesiosis are important causes of morbidity and mortality in dogs and humans living in tick-infested areas. Ticks are important as vectors and reservoirs for these disease transmission agents. The aim of this work was to obtain epidemiological information regarding infections and the presence of members of the Anaplasmataceae family, and Rickettsial and piroplasmidas tick-borne agents in the metropolitan region of Piura, Peru. We performed polymerase chain reaction (PCR), nested-PCR, restriction fragment length polymorphism (RFLP), and sequencing and phylogenetic analyses in order to determine the species involved in infections and the fauna of ixodid ticks in that region. 216 blood samples and 984 ticks were collected from dogs from the region of Piura. We could identify three different tick species: 977 specimens of Riphicephalus sanguineus (180 nymphs, 410 females, and 387 males), six adult females of Amblyomma triste and one adult male of Amblyomma tigrinum. The total 984 ticks were further classified morphologically by stage, species, and sex. Our data shows that from the total of ticks collected, 67.3% (348/517) were adult female ticks (stored individually), 22.8% (118/517) were adult male ticks (stored in pools of up to seven specimens), and 9.90% (51/517) were nymphs (stored in pools of 10 specimens of the same specie). The information of the dogs including sex, age presence of ticks, coexistence with other animals and socio-economic status was registered and added by the owners. DNA from blood revealed that 18.5% (40/216), 52.5% (21/40), 35.0% (14/40) and 20% (8/40) were agents of the Family Anaplasmataceae, E. canis, A. Platys, and coinfection between these two species in dogs, respectively. 32.5% (13/40) of the negative samples by Nested-PCR for these two species, were diagnosed as E. canis and A. platys by sequencing. Positive sequences detected showed 100% similarity with the species E. canis and A. platys reported in GenBank. There was a significant association between Anaplasmataceae family infection in dogs and the following variables: sex (P=0,034), presence of ticks (P=0,0001), and socio-economic status (P=0,001).The frequency of positive ticks for agents of the family Anaplasmataceae, by PCR, was 15.0% (78/517). However, only two samples showed good quality sequences, and were positive for E. Canis by sequencing and phylogenetic analyses. Furthermore, from the 216 dogs evaluated, three (1.40%) were positive for Babesia sp. by PCR. All positive samples, analyzed by RFLP, revealed a cleavage compatible with B. vogeli. These sequences showed 99% identity with sequences of positive samples for B. vogeli. Not all tick samples were positively amplified by PCR with the primers PIRO A and PIRO B. During the evaluation of rickettsial agents by PCR and sequencing, the tick infection rate was 0.20% (1/517). Those samples were positive for gltA and negative for ompA, ompB and 17KD. The phylogenetic analysis showed that the sequence evaluated was grouped in the R. felis side.

Anaplasma marginale PURE ISOLATE OBTAINED IN COLOSTRUM-DEPRIVED NEWBORN CALVES / OBTENÇÃO DE ISOLADO PURO DE Anaplasma marginale EM BEZERROS NEONATOS PRIVADOS DE COLOSTRO

This study was conducted with the objective of obtaining pure autochthonous isolates of Anaplasma marginale from blood samples of bovines that have been raised in the tick-borne disease endemic area of the municipality of Goiânia. The inoculum of A. marginale was prepared from a donor animal, known to be natural carrier of hemoparasite mixed infections, after treatment with a babesicid sterilizing dose of imidocarb dipropionate. A 20 mL blood sample was collected from the donor animal 2 days post-infection and then transferred to a colostrum-deprived and hemoparasite free newborn calf. The receptor animal showed signs of fever and apathy with patent A. marginale parasitemia 30 days after inoculation. Blood sample was then collected and prepared as stabilates to be cryopreserved and to take part of an autochthonous blood parasites isolates library. The isolate purity was assured concomitantly by specific seroconversion tests, by PCR and by finally by the subinoculation of susceptible calves with the cryopreseved stabilates. It was confirmed that the use of colostrum-deprived free newborn calves as susceptible animals may be considered a practical and effective model to obtain pure hemoparasite isolates in endemic areas with additional advantages such as feasibility and low cost. Key words: Anaplasma marginale, isolates, calves, bovine anaplasmosis.

O trabalho foi realizado com o objetivo principal de obter isolados autóctones puros de Anaplasma marginale a partir de amostra de sangue de bovino criado em uma área endêmica para a tristeza parasitária bovina no município de Goiânia. Obteve-se o inóculo para o isolamento de A. marginale de animal doador, portador de infecções naturais mistas, após receber tratamento seletivo com dose babesicida esterelizante de dipropionato de imidocarb. Dois dias após esse tratamento, colheu-se dele uma amostra de sangue de 20 mL do animal doador para inoculação em bezerro neonato privado de colostro e livre de infecções por hemoparasitos. Após trinta dias da inoculação, o receptor apresentou febre, apatia e parasitemia patente por A. marginale. Amostras de sangue foram então colhidas e preparadas na forma de estabilizados para serem criopreservadas e, assim, comporem banco de isolados de hemoparasitos autóctones. Realizou-se a comprovação da pureza do isolado, concomitantemente, pela demonstração de soroconversão específica, pela reação de PCR e, ainda, pela subinoculação da amostra criopreservada em bezerro suscetível. Constatou-se ainda que o uso de bezerros neonatos privados de colostro, como animais suscetíveis, pode ser considerado como modelo prático, eficaz e relativamente barato para o isolamento de hemoparasitos em regiões endêmicas. PALAVRAS-CHAVES: Anaplasma marginale, anaplasmos

Outbreak of bovine tick-borne disease on a riverside property in the Western Amazonia: Case report

The objective was to report an outbreak of tick-borne disease (TBD) on riverside property in the Western Amazon. The death of 25 Nellore cattle was reported on a rural property on the banks of the Purus River, state of Acre. The producer observed animals with staggering walking, drop in productivity, weight loss and evolution to death in approximately 30 days. Fifteen animals from the same batch were selected for clinical evaluation and the ear tip was punctured for hemoparasite research, in addition to blood collection for hematological, biochemical and molecular evaluation. The main laboratory findings were leukocytosis, thrombocytopenia, hypoproteinemia, elevated creatine kinase and reduced urea, creatinine and albumin, as well as visualization of forms suggestive of Anaplasma spp. in 13.33% of the samples. Through PCR, 20% positivity was observed for Anaplasma marginale and 53.33% for Babesia sp. Hematological and biochemical changes, although highly suggestive, may suffer changes from other factors not related to TBD. Therefore, the presumptive identification of the etiological agent in the blood or confirmatory by molecular methods is essential in the diagnosis. Depending on the stage of the disease, low parasitemia occurs, making it difficult to see hemoparasites in blood smears. The Babesia sp. was the main agent of the outbreak of TBD in the population evaluated, which

Anaplasma marginale PURE ISOLATE OBTAINED IN COLOSTRUM-DEPRIVED NEWBORN CALVES / OBTENÇÃO DE ISOLADO PURO DE Anaplasma marginale EM BEZERROS NEONATOS PRIVADOS DE COLOSTRO

This study was conducted with the objective of obtaining pure autochthonous isolates of Anaplasma marginale from blood samples of bovines that have been raised in the tick-borne disease endemic area of the municipality of Goiânia. The inoculum of A. marginale was prepared from a donor animal, known to be natural carrier of hemoparasite mixed infections, after treatment with a babesicid sterilizing dose of imidocarb dipropionate. A 20 mL blood sample was collected from the donor animal 2 days post-infection and then transferred to a colostrum-deprived and hemoparasite free newborn calf. The receptor animal showed signs of fever and apathy with patent A. marginale parasitemia 30 days after inoculation. Blood sample was then collected and prepared as stabilates to be cryopreserved and to take part of an autochthonous blood parasites isolates library. The isolate purity was assured concomitantly by specific seroconversion tests, by PCR and by finally by the subinoculation of susceptible calves with the cryopreseved stabilates. It was confirmed that the use of colostrum-deprived free newborn calves as susceptible animals may be considered a practical and effective model to obtain pure hemoparasite isolates in endemic areas with additional advantages such as feasibility and low cost. Key words: Anaplasma marginale, isolates, calves, bovine anaplasmosis.

O trabalho foi realizado com o objetivo principal de obter isolados autóctones puros de Anaplasma marginale a partir de amostra de sangue de bovino criado em uma área endêmica para a tristeza parasitária bovina no município de Goiânia. Obteve-se o inóculo para o isolamento de A. marginale de animal doador, portador de infecções naturais mistas, após receber tratamento seletivo com dose babesicida esterelizante de dipropionato de imidocarb. Dois dias após esse tratamento, colheu-se dele uma amostra de sangue de 20 mL do animal doador para inoculação em bezerro neonato privado de colostro e livre de infecções por hemoparasitos. Após trinta dias da inoculação, o receptor apresentou febre, apatia e parasitemia patente por A. marginale. Amostras de sangue foram então colhidas e preparadas na forma de estabilizados para serem criopreservadas e, assim, comporem banco de isolados de hemoparasitos autóctones. Realizou-se a comprovação da pureza do isolado, concomitantemente, pela demonstração de soroconversão específica, pela reação de PCR e, ainda, pela subinoculação da amostra criopreservada em bezerro suscetível. Constatou-se ainda que o uso de bezerros neonatos privados de colostro, como animais suscetíveis, pode ser considerado como modelo prático, eficaz e relativamente barato para o isolamento de hemoparasitos em regiões endêmicas. PALAVRAS-CHAVES: Anaplasma marginale, anaplasmos

Assessing different chemoprophylactic protocols against bovine tick-borne diseases and their influence on the weight gain of calves / Avaliação de diferentes protocolos de quimioprofilaxia da tristeza parasitária bovina sobre o ganho de peso de novilhos

In the present study, 87 Aberdeen Angus calves were used to assess the effects of low dose, agent-specific drugs on weight gain after a babesiosis and anaplasmosis outbreak. All animals were weighed on weaning (day 34) and again on day zero, with a mean (on day zero) of 223.46 Kg and an average individual daily weight gain (ADG) of 0.258 Kg. The animals were then separated in three groups: G1 was composed of 37 calves with below average ADG; G2 was composed of 35 animals with below average ADG; and G3 was composed of 15 animals with above average ADG. On day zero animals in G1 were treated with 1.17 mg Kg-1 of diminazene diaceturate and 6.7 mg Kg-1 of oxytetracycline; those in G2 were treated with 1.2 mg Kg-1 of imidocarb dipropionate; and those in G3 were not treated. The animals were then monitored daily for the onset of disease, and on days 15 and 34 they were weighed and had their blood harvested. Animals in G1 had the better overall ADG (0.613 Kg day-1) (P 0.05), with no clinical cases during the experiment. The performance in G2 was moderate, not differing from either G1 or G3 (mean ADG = 0.528 Kg day-1), however, this group had two clinical cases of anaplasmosis during the experiment. Animals in G3 had the worst performance, considering ADG (0.343 Kg day-1). When total weight gain per animal is compared for the study period (35 days), those in G1 gained an average...

No presente estudo foram utilizados novilhos da raça Aberdeen Angus remanescentes de um de surto de babesiose e anaplasmose, expostos a infestações por carrapatos Rhipicephalus (Boophilus) microplus. No dia zero, o lote de 87 novilhos pesando em média 223,46 Kg, apresentava GMD de peso vivo de 0,258 Kg por dia nos últimos 34 dias. O lote foi dividido em 3 grupos: G1, 37 novilhos com GMD abaixo da média; G2, 35 novilhos com GMD abaixo da média; G3, 15 novilhos com GMD acima da média geral do lote. Os novilhos do G1 foram submetidos à quimioprofilaxia com uso de 1,17 mg Kg-1 de diaceturato de diminazeno e 6,7 mg Kg-1 de oxitetraciclina. Os novilhos do G2 foram submetidos à quimioprofilaxia com o uso de 1,2 mg Kg-1 de dipropionato de imidocarb. Os animais do G3 não foram medicados. O G1 obteve o melhor desempenho de ganho de peso no período (0,613 Kg dia-1) (P 0,05) e não apresentou nenhum caso clínico da doença durante o experimento. O protocolo quimioprofilático do G2 teve desempenho mediano, sem diferença dos demais grupos (0,528 Kg dia-1) e o G3 teve o pior desempenho (0,343 Kg dia-1), porém ocorreram 2 quadros clínicos de anaplasmose no final do experimento no G2. Na comparação do desempenho no ganho de peso total por animal no período, o G3 (Controle) obteve 11,667 Kg, O G2 obteve 17,957 Kg e o G1 obteve 20,851 Kg. O protocolo quimioprofilático a base de diaceturato de...