Comparison of serological and molecular tests to investigate Leishmania spp. infections in stray dogs from an area of intense visceral leishmaniasis transmission in Brazil / Comparação de testes sorológicos e moleculares para investigar infecções por Leishmania spp. em cães errantes de uma área de intensa transmissão de leishmaniose visceral no Brasil

Abstract The aim of this study was to investigate the level of exposure to Leishmania infection in stray dogs in an area of intense visceral leishmaniasis transmission in the state of Pernambuco, Brazil. Blood samples from 178 dogs were analyzed using serological and molecular assays: rapid immunochromatographic test (ICT), enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), immunofluorescence antibody test (IFAT), and conventional and quantitative polymerase chain reaction (cPCR and qPCR). Positivity values obtained with serological tests were 71.4% (127/178), 70.2% (125/178), and 50.6% (90/178) using ICT, ELISA, and IFAT, respectively, with 38.8% (69/178) of the dogs were simultaneously positive for all three tests. The positivity values obtained with cPCR and qPCR were 20.2% (36/178) and 38.8% (69/178), respectively, with 11.8% (21/178) testing positive in both molecular assays. Overall, 87.1% (155/178) were positive for anti-Leishmania spp. antibodies and/or Leishmania spp. DNA. Positivity to one or more tests was statistically associated with lymphadenomegaly, skin lesions, lymphocytosis, anemia and hyperproteinemia. The results of this study revealed a high level of exposure to Leishmania in stray dogs in an area of intense human visceral leishmaniasis transmission, suggesting that dogs play a role as reservoirs in the transmission cycle of this zoonosis.

Resumo O objetivo deste estudo foi investigar o nível de exposição à infecção por Leishmania em cães errantes de uma área de transmissão intensa de leishmaniose visceral no estado de Pernambuco. Amostras de sangue de 178 cães foram avaliadas por testes sorológicos e moleculares: teste imunocromatográfico (IC), ensaio imunoenzimático (ELISA), teste de imunofluorescência de anticorpos (RIFI), reação em cadeia da polimerase convencional e quantitativa (cPCR e qPCR). Os valores de positividade obtidos com os testes sorológicos foram 71,4% (127/178), 70,2% (125/178) e 50,6% (90/178) com IC, ELISA e RIFI, respectivamente. E com 38,8% (69/178) dos cães mostraram-se simultaneamente positivos aos três testes. Os valores de positividade obtidos por cPCR e qPCR foram 20,2% (36/178) e 38,8% (69/178), respectivamente. E com 11,8% (21/178) dos cães foram positivos em ambos os testes moleculares. No geral, 87,1% (155/178) foram positivos para anticorpos anti-Leishmania spp. e/ou material genético de Leishmania spp. A positividade a um ou mais testes foi estatisticamente associada à linfonodomegalia, lesões cutâneas, linfocitose, anemia e hiperproteinemia. Os resultados do estudo revelam um alto nível de exposição à Leishmania spp. em cães errantes em uma área de transmissão intensa de leishmaniose visceral humana, sugerindo que eles podem desempenhar um papel como reservatórios no ciclo de transmissão dessa zoonose.

Differentials in the epidemiological profile of canine visceral leishmaniasis in the semi-arid region of Paraíba, Brazil / Diferenciais no perfil epidemiológico da leishmaniose visceral canina no semiárido da Paraíba, Brasil

The objective of this study was to estimate the prevalence of canine visceral leishmaniasis (CVL) and to identify the differences in associated factors to its occurrence in urban area and countrysides in the municipality of Santa Luzia located in the semi-arid region of Paraíba. In the years 2015 and 2016, 779 blood samples from dogs were collected. The prevalence was determined by three serological techniques, ELISA-S7® Kit, DPP® Rapid Test and EIE-LVC® Kit, considering positive the samples that reacted in at least two assays. Associated factors were determined by univariate and multivariate analyzes of the guardians' responses to the epidemiological questionnaire. The prevalence of anti-Leishmania infantum antibodies in the studied municipality was 15.00% (117/779), being higher in the urban area (15.20%) than in the countryside (13.60%). The neighborhood with the highest prevalence was Frei Damião with 26.40% (33/125), being considered a hotspot (OR 1.245, p=0.007). Other associated factors were the semi-domiciliary breeding (OR 1.798, p=0.025), in the urban area, and hunting dog (OR 18.505, p=0.016), contact with cattle (OR 17.298, p=0.022) and environment where the dog is raised (OR 4.802, p=0.024) in the countryside. In the municipality of Santa Luzia, the prevalence of canine visceral leishmaniasis is high and the disease is widely distributed. Epidemiological differences between urban area and the countryside could be observed demonstrating the need for more adequate control measures for each locality and proving the urbanization process.(AU)

O objetivo desta pesquisa foi estimar a prevalência da leishmaniose visceral canina (LVC) e identificar as diferenças nos fatores relacionados à sua ocorrência nas zonas urbana e rural do município de Santa Luzia, localizado no semiárido paraibano. Nos anos de 2015 e 2016, coletaram-se 779 amostras de sangue de cães. A prevalência foi determinada através de três técnicas sorológicas, Kit ELISA-S7®, teste rápido DPP® e Kit EIE-LVC®, considerando positivas as amostras que reagiram em, pelo menos, dois ensaios. Os fatores relacionados foram determinados por meio das análises estatísticas uni e multivariada das respostas dos tutores ao questionário epidemiológico. A prevalência de anticorpos anti-Leishmania infantum encontrada no município estudado foi de 15,00% (117/779), sendo maior na zona urbana (15,20%) do que na rural (13,60%). O bairro que apresentou maior prevalência foi o Frei Damião com 26,40% (33/125), sendo considerado um hotspot (OR 1,245; p=0,007). Outros fatores relacionados encontrados foram a criação semidomiciliar (OR 1,798; p=0,025), na zorna urbana, e cão de caça (OR 18,505; p=0,016), contato com bovinos (OR 17,298; p=0,022) e ambiente onde o cão é criado (OR 4,802; p=0,024), na zona rural. Verifica-se a elevada prevalência da leishmaniose visceral canina e a sua ampla distribuição no município de Santa Luzia. Diferenças epidemiológicas entre as zonas urbana e rural puderam ser observadas, demonstrando a necessidade de medidas de controle mais adequadas para cada localidade e comprovando o processo de urbanização.(AU)

Differentials in the epidemiological profile of canine visceral leishmaniasis in the semi-arid region of Paraíba, Brazil / Diferenciais no perfil epidemiológico da leishmaniose visceral canina no semiárido da Paraíba, Brasil

The objective of this study was to estimate the prevalence of canine visceral leishmaniasis (CVL) and to identify the differences in associated factors to its occurrence in urban area and countrysides in the municipality of Santa Luzia located in the semi-arid region of Paraíba. In the years 2015 and 2016, 779 blood samples from dogs were collected. The prevalence was determined by three serological techniques, ELISA-S7® Kit, DPP® Rapid Test and EIE-LVC® Kit, considering positive the samples that reacted in at least two assays. Associated factors were determined by univariate and multivariate analyzes of the guardians' responses to the epidemiological questionnaire. The prevalence of anti-Leishmania infantum antibodies in the studied municipality was 15.00% (117/779), being higher in the urban area (15.20%) than in the countryside (13.60%). The neighborhood with the highest prevalence was Frei Damião with 26.40% (33/125), being considered a hotspot (OR 1.245, p=0.007). Other associated factors were the semi-domiciliary breeding (OR 1.798, p=0.025), in the urban area, and hunting dog (OR 18.505, p=0.016), contact with cattle (OR 17.298, p=0.022) and environment where the dog is raised (OR 4.802, p=0.024) in the countryside. In the municipality of Santa Luzia, the prevalence of canine visceral leishmaniasis is high and the disease is widely distributed. Epidemiological differences between urban area and the countryside could be observed demonstrating the need for more adequate control measures for each locality and proving the urbanization process.(AU)

O objetivo desta pesquisa foi estimar a prevalência da leishmaniose visceral canina (LVC) e identificar as diferenças nos fatores relacionados à sua ocorrência nas zonas urbana e rural do município de Santa Luzia, localizado no semiárido paraibano. Nos anos de 2015 e 2016, coletaram-se 779 amostras de sangue de cães. A prevalência foi determinada através de três técnicas sorológicas, Kit ELISA-S7®, teste rápido DPP® e Kit EIE-LVC®, considerando positivas as amostras que reagiram em, pelo menos, dois ensaios. Os fatores relacionados foram determinados por meio das análises estatísticas uni e multivariada das respostas dos tutores ao questionário epidemiológico. A prevalência de anticorpos anti-Leishmania infantum encontrada no município estudado foi de 15,00% (117/779), sendo maior na zona urbana (15,20%) do que na rural (13,60%). O bairro que apresentou maior prevalência foi o Frei Damião com 26,40% (33/125), sendo considerado um hotspot (OR 1,245; p=0,007). Outros fatores relacionados encontrados foram a criação semidomiciliar (OR 1,798; p=0,025), na zorna urbana, e cão de caça (OR 18,505; p=0,016), contato com bovinos (OR 17,298; p=0,022) e ambiente onde o cão é criado (OR 4,802; p=0,024), na zona rural. Verifica-se a elevada prevalência da leishmaniose visceral canina e a sua ampla distribuição no município de Santa Luzia. Diferenças epidemiológicas entre as zonas urbana e rural puderam ser observadas, demonstrando a necessidade de medidas de controle mais adequadas para cada localidade e comprovando o processo de urbanização.(AU)

Differentials in the epidemiological profile of canine visceral leishmaniasis in the semi-arid region of Paraíba, Brazil

ABSTRACT: The objective of this study was to estimate the prevalence of canine visceral leishmaniasis (CVL) and to identify the differences in associated factors to its occurrence in urban area and countrysides in the municipality of Santa Luzia located in the semi-arid region of Paraíba. In the years 2015 and 2016, 779 blood samples from dogs were collected. The prevalence was determined by three serological techniques, ELISA-S7® Kit, DPP® Rapid Test and EIE-LVC® Kit, considering positive the samples that reacted in at least two assays. Associated factors were determined by univariate and multivariate analyzes of the guardians responses to the epidemiological questionnaire. The prevalence of anti-Leishmania infantum antibodies in the studied municipality was 15.00% (117/779), being higher in the urban area (15.20%) than in the countryside (13.60%). The neighborhood with the highest prevalence was Frei Damião with 26.40% (33/125), being considered a hotspot (OR 1.245, p=0.007). Other associated factors were the semi-domiciliary breeding (OR 1.798, p=0.025), in the urban area, and hunting dog (OR 18.505, p=0.016), contact with cattle (OR 17.298, p=0.022) and environment where the dog is raised (OR 4.802, p=0.024) in the countryside. In the municipality of Santa Luzia, the prevalence of canine visceral leishmaniasis is high and the disease is widely distributed. Epidemiological differences between urban area and the countryside could be observed demonstrating the need for more adequate control measures for each locality and proving the urbanization process.

RESUMO: O objetivo desta pesquisa foi estimar a prevalência da leishmaniose visceral canina (LVC) e identificar as diferenças nos fatores relacionados à sua ocorrência nas zonas urbana e rural do município de Santa Luzia, localizado no semiárido paraibano. Nos anos de 2015 e 2016, coletaram-se 779 amostras de sangue de cães. A prevalência foi determinada através de três técnicas sorológicas, Kit ELISA-S7®, teste rápido DPP® e Kit EIE-LVC®, considerando positivas as amostras que reagiram em, pelo menos, dois ensaios. Os fatores relacionados foram determinados por meio das análises estatísticas uni e multivariada das respostas dos tutores ao questionário epidemiológico. A prevalência de anticorpos anti-Leishmania infantum encontrada no município estudado foi de 15,00% (117/779), sendo maior na zona urbana (15,20%) do que na rural (13,60%). O bairro que apresentou maior prevalência foi o Frei Damião com 26,40% (33/125), sendo considerado um hotspot (OR 1,245; p=0,007). Outros fatores relacionados encontrados foram a criação semidomiciliar (OR 1,798; p=0,025), na zorna urbana, e cão de caça (OR 18,505; p=0,016), contato com bovinos (OR 17,298; p=0,022) e ambiente onde o cão é criado (OR 4,802; p=0,024), na zona rural. Verifica-se a elevada prevalência da leishmaniose visceral canina e a sua ampla distribuição no município de Santa Luzia. Diferenças epidemiológicas entre as zonas urbana e rural puderam ser observadas, demonstrando a necessidade de medidas de controle mais adequadas para cada localidade e comprovando o processo de urbanização.

Polymerase chain reaction using conjunctival swab samples for detecting Leishmania DNA in dogs / Reação em cadeia da polimerase usando amostras de Swab de conjuntiva para detecção de DNA de Leishmania em cães

Abstract The dog is the main domestic reservoir of Leishmania and font of infection for the vector, constituting an important host for the transmission of the parasite to humans. Non-invasive collection of swab samples for leishmaniasis diagnosis has been a promising alternative. This study analyzed the positivity of polymerase chain reaction (PCR) for the diagnosis of canine leishmaniasis in conjunctiva samples. DNA extraction was performed using SDS 20% and PCR was performed using 13A/13B primers that amplify 120-bp of Leishmania kDNA. Of the 77 dogs analyzed, 50 (64.93%) had ocular changes: 25 (32.47%) dogs had periocular lesion, 41 (53.25%) dogs had purulent eye discharge, and 17 (22.08%) dogs had both signals. PCR was positive in 35 dogs (45.45%), and there was no significant difference between dogs with and without ocular signals (p=0.4074). PCR positivity was significant higher in dogs without periocular injury (p=0.0018). Conjunctive PCR, a less invasive, fast, and painless collection technique, is indicated to complement the diagnosis, especially in dogs without periocular injury, independent of the presence of purulent eye discharge.

Resumo O cão é o principal reservatório doméstico de Leishmania e também fonte de infecção para o vetor, constituindo um importante hospedeiro para a transmissão do parasita ao homem. A coleta não invasiva de amostras em swab para diagnóstico das leishmanioses tem sido uma alternativa promissora. Este estudo analisou a positividade da reação em cadeia da polimerase (PCR) para o diagnóstico de leishmaniose canina em amostras de conjuntiva. A extração do DNA foi realizada com SDS 20%. A PCR foi realizada com primers 13A/13B que amplificam 120-pb do kDNA de Leishmania. Dos 77 cães analisados, 50 (64,93%) tiveram alterações oculares; 25 (32,47%) cães tiveram uma lesão periocular; 41 (53,25%) tiveram secreção ocular purulenta e 17 (22,08%) cães tiveram ambos os sinais. A PCR foi positiva em 35 cães (45,45%) e não houve diferença significativa em cães com e sem sinais oculares (p = 0,4074). A positividade da PCR foi significativamente maior em cães sem lesão periocular (p = 0,0018). PCR em conjuntiva, uma técnica de coleta menos invasiva, rápida e indolor, é indicada para complementar o diagnóstico, principalmente em cães sem lesão periocular, independentemente da presença de secreção ocular purulenta.

Comparison of serological and molecular tests to investigate Leishmania spp. infections in stray dogs from an area of intense visceral leishmaniasis transmission in Brazil / Comparação de testes sorológicos e moleculares para investigar infecções por Leishmania spp. em cães errantes de uma área de intensa transmissão de leishmaniose visceral no Brasil

The aim of this study was to investigate the level of exposure to Leishmania infection in stray dogs in an area of intense visceral leishmaniasis transmission in the state of Pernambuco, Brazil. Blood samples from 178 dogs were analyzed using serological and molecular assays: rapid immunochromatographic test (ICT), enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), immunofluorescence antibody test (IFAT), and conventional and quantitative polymerase chain reaction (cPCR and qPCR). Positivity values obtained with serological tests were 71.4% (127/178), 70.2% (125/178), and 50.6% (90/178) using ICT, ELISA, and IFAT, respectively, with 38.8% (69/178) of the dogs were simultaneously positive for all three tests. The positivity values obtained with cPCR and qPCR were 20.2% (36/178) and 38.8% (69/178), respectively, with 11.8% (21/178) testing positive in both molecular assays. Overall, 87.1% (155/178) were positive for anti-Leishmania spp. antibodies and/or Leishmania spp. DNA. Positivity to one or more tests was statistically associated with lymphadenomegaly, skin lesions, lymphocytosis, anemia and hyperproteinemia. The results of this study revealed a high level of exposure to Leishmania in stray dogs in an area of intense human visceral leishmaniasis transmission, suggesting that dogs play a role as reservoirs in the transmission cycle of this zoonosis.(AU)

O objetivo deste estudo foi investigar o nível de exposição à infecção por Leishmania em cães errantes de uma área de transmissão intensa de leishmaniose visceral no estado de Pernambuco. Amostras de sangue de 178 cães foram avaliadas por testes sorológicos e moleculares: teste imunocromatográfico (IC), ensaio imunoenzimático (ELISA), teste de imunofluorescência de anticorpos (RIFI), reação em cadeia da polimerase convencional e quantitativa (cPCR e qPCR). Os valores de positividade obtidos com os testes sorológicos foram 71,4% (127/178), 70,2% (125/178) e 50,6% (90/178) com IC, ELISA e RIFI, respectivamente. E com 38,8% (69/178) dos cães mostraram-se simultaneamente positivos aos três testes. Os valores de positividade obtidos por cPCR e qPCR foram 20,2% (36/178) e 38,8% (69/178), respectivamente. E com 11,8% (21/178) dos cães foram positivos em ambos os testes moleculares. No geral, 87,1% (155/178) foram positivos para anticorpos anti-Leishmania spp. e/ou material genético de Leishmania spp. A positividade a um ou mais testes foi estatisticamente associada à linfonodomegalia, lesões cutâneas, linfocitose, anemia e hiperproteinemia. Os resultados do estudo revelam um alto nível de exposição à Leishmania spp. em cães errantes em uma área de transmissão intensa de leishmaniose visceral humana, sugerindo que eles podem desempenhar um papel como reservatórios no ciclo de transmissão dessa zoonose.(AU)

Autochthonous canine visceral leishmaniasis cases occur in Paraná state since 2012: isolation and identification of Leishmania infantum / Leishmaniose visceral canina autóctone ocorre no estado do Paraná desde 2012: isolamento e identificação de Leishmania infantum

The aim of this study was to confirm the emergence of canine visceral leishmaniasis among dogs in Foz do Iguaçu. The disease was diagnosed through the isolation and molecular identification of Leishmania infantum. In the first sample collection stage (2012), three lymph node aspirates and 46 buffy coat samples were obtained mostly from the dogs that were seroreagents for leishmaniasis. In the second sample collection stage (2013), the buffy coat samples were collected from 376 dogs located close to Paraguay, Paraná river, center and peripheral parts of the city. The DNA from the six isolates, four from the first sampling stage (4/49) and two from the second sampling stage (2/376), was subjected to polymerase chain reaction using the K26F/R primers. The isolate was confirmed as L. infantum by sequencing. As none of the dogs had ever left the city, the isolates were confirmed as autochthonous. Further, the study confirmed the emergence of canine visceral leishmaniasis in Paraná through the identification of L. infantum among dogs in Foz do Iguaçu city. Hence, collaborative control measures should be designed and implemented by the public agencies and research institutions of Brazil, Argentina, and Paraguay to control the spread of visceral leishmaniasis.(AU)

O objetivo deste estudo foi confirmar a emergência da leishmaniose visceral canina em Foz do Iguaçu próximo à fronteira com a Argentina e ao Paraguai, por meio do isolamento e identificação molecular de Leishmania infantum. Em um primeiro estágio de coleta de animais (2012), três amostras de aspirados de linfonodos e 46 camadas leucocitárias foram obtidas de cães soropositivos para leishmaniose. Em um segundo estágio de coleta (2013), foram coletadas amostras de camada leucocitária de 376 cães de 20 localidades próximas à fronteira com o Paraguai, rio Paraná, centro e periferia da cidade. Seis isolados foram obtidos, quatro da primeira etapa (4/49) e dois da segunda etapa (2/376); estes isolados foram submetidos à amplificação com iniciadores K26F/R, e a análise de sua sequência confirmou a espécie como L. infantum. A autoctonia dos casos foi confirmada, pois 100% dos cães nunca haviam saído da cidade. O estudo confirma a emergência de leishmaniose visceral canina no Paraná com identificação de L. infantum em cães da cidade de Foz do Iguaçu. Assim, medidas de controle devem ser elaboradas e implementadas por órgãos públicos e instituições de pesquisa do Brasil, Argentina e Paraguai em parceria com o objetivo de controlar a disseminação de zoonoses e os casos humanos de LV.(AU)

Levantamento dos casos confirmados de leishmaniose visceral no estado do Pará em 2018

A Leishmaniose Visceral (LV) é uma das principais zoonoses de ocorrência mundial, que pode levar a índices de letalidade elevados quando não instituído tratamento adequado. A doença apresenta alta prevalência em diferentes regiões brasileiras, inclusive na região norte. O objetivo deste trabalho foi realizar um levantamento dos casos de LV notificados no estado do Pará em2018. Este trabalho compreende um estudo epidemiológico descritivo realizado com base em dados secundários disponíveis no Sistema de Informação de Agravos de Notificação (SINAN) sobre os casos confirmados de LV no estado do Pará no ano de 2018. Um total de 562 casos de LV foi notificado no estado do Pará em 2018, ocorrendo em 54 municípios paraenses e sendo mais prevalente em Parauapebas, Marabá e Canaã dos Carajás, no sudeste do Pará. Os meses com maiores números de casos foram fevereiro, março, maio, junho, julho, agosto e setembro, todos apresentando mais de 50 casos. A ocorrência da LV variou de acordo com a faixa etária, apresentando maiores números de notificação em crianças de um a quatro anos, seguido de adultos de 20 a 39 anos. Quando avaliado o sexo, homens foram mais acometidos por LV que as mulheres. Em 2018, o estado do Pará notificou elevados números de casos de LV, especialmente em crianças de um a quatro anos, em homens e habitantes da região Sudeste do estado. Observou-se ainda que a ocorrência foi maior entre os meses de maio a julho.

Visceral Leishmaniasis (VL) is one of the main zoonoses worldwide, which can lead to high lethality rates when adequate treatment is not instituted. The disease has a high prevalence in different Brazilian regions, including the northern region. The objective of this work was to carry out a survey of the cases of VL notified in the state of Pará in 2018. This work comprises a descriptive epidemiological study carried out based on secondary data available in the Sistema de Informação de Agravos de Notificação (SINAN) on the confirmed cases of VL in the state of Pará in the year 2018. A total of 562 cases of VL were reported in the state of Pará in 2018, occurring in 54 municipalities in Pará and being more prevalent in Parauapebas, Marabá and Canaã dos Carajás, in the southeast of Pará. The months with the highest number of cases were February, March, May, June, July, August and September, all presenting more than 50 cases. The occurrence of VL varied according to the age group, with higher numbers of notification in children aged one to four years, followed by adults aged 20 to 39 years. When gender was assessed, men were more affected by VL than women. In 2018, the state of Pará reported high numbers of cases of VL, especially in children aged one to four years, in men, and inhabitants of the southeastern region of the state. It was also observed that the occurrence was greater between the months of May to July.

Levantamento dos casos confirmados de leishmaniose visceral no estado do Pará em 2018

A Leishmaniose Visceral (LV) é uma das principais zoonoses de ocorrência mundial, que pode levar a índices de letalidade elevados quando não instituído tratamento adequado. A doença apresenta alta prevalência em diferentes regiões brasileiras, inclusive na região norte. O objetivo deste trabalho foi realizar um levantamento dos casos de LV notificados no estado do Pará em2018. Este trabalho compreende um estudo epidemiológico descritivo realizado com base em dados secundários disponíveis no Sistema de Informação de Agravos de Notificação (SINAN) sobre os casos confirmados de LV no estado do Pará no ano de 2018. Um total de 562 casos de LV foi notificado no estado do Pará em 2018, ocorrendo em 54 municípios paraenses e sendo mais prevalente em Parauapebas, Marabá e Canaã dos Carajás, no sudeste do Pará. Os meses com maiores números de casos foram fevereiro, março, maio, junho, julho, agosto e setembro, todos apresentando mais de 50 casos. A ocorrência da LV variou de acordo com a faixa etária, apresentando maiores números de notificação em crianças de um a quatro anos, seguido de adultos de 20 a 39 anos. Quando avaliado o sexo, homens foram mais acometidos por LV que as mulheres. Em 2018, o estado do Pará notificou elevados números de casos de LV, especialmente em crianças de um a quatro anos, em homens e habitantes da região Sudeste do estado. Observou-se ainda que a ocorrência foi maior entre os meses de maio a julho.(AU)

Visceral Leishmaniasis (VL) is one of the main zoonoses worldwide, which can lead to high lethality rates when adequate treatment is not instituted. The disease has a high prevalence in different Brazilian regions, including the northern region. The objective of this work was to carry out a survey of the cases of VL notified in the state of Pará in 2018. This work comprises a descriptive epidemiological study carried out based on secondary data available in the Sistema de Informação de Agravos de Notificação (SINAN) on the confirmed cases of VL in the state of Pará in the year 2018. A total of 562 cases of VL were reported in the state of Pará in 2018, occurring in 54 municipalities in Pará and being more prevalent in Parauapebas, Marabá and Canaã dos Carajás, in the southeast of Pará. The months with the highest number of cases were February, March, May, June, July, August and September, all presenting more than 50 cases. The occurrence of VL varied according to the age group, with higher numbers of notification in children aged one to four years, followed by adults aged 20 to 39 years. When gender was assessed, men were more affected by VL than women. In 2018, the state of Pará reported high numbers of cases of VL, especially in children aged one to four years, in men, and inhabitants of the southeastern region of the state. It was also observed that the occurrence was greater between the months of May to July.(AU)

Edema de córnea severo em cão naturalmente infectado por Leishmania spp / Severe corneal edema in a dog naturally infected by Leishmania spp

Background: Visceral leishmaniasis (VL) is an infectious disease caused by the protozoan Leishmania infantum that istransmitted to dogs and humans by sandflies. The incidence of eye injuries in VL is high. They occur in 20 to 81% ofinfected dogs and include blepharitis, granulomatous conjunctivitis, scleritis, keratitis, anterior uveitis, keratoconjunctivitissicca, and secondary glaucoma. However, some dogs present only the clinical signs of eye damage. The main objective ofthis manuscript is to report a case of anterior uveitis with severe corneal edema in a dog with VL that underwent clinicaland surgical ophthalmic treatments after miltefosine therapy.Case: An 8-month-old, intact male Labrador Retriever with brown fur presented with pruritus, diffuse desquamation,and conjunctival hyperemia on physical evaluation. On the basis of an ophthalmic examination, nodular conjunctivitisand uveitis were diagnosed in both eyes. Moreover, laboratory examination results showed hyperproteinemia, increasedserum alkaline phosphatase activity, and positive reactions to immunochromatographic tests for VL. Clinical treatmentwas instituted from the moment of diagnosis, when miltefosine and allopurinol were prescribed. at the end of treatment,based on laboratory examination results, only clinical support treatment based on remaining clinical-pathological changeswas prescribed. Topical medications (prednisolone eye drops and sodium hyaluronate) were recommended for the ophthalmic changes. One week after the start of topical treatment, the dog showed...

Edema de córnea severo em cão naturalmente infectado por Leishmania spp / Severe corneal edema in a dog naturally infected by Leishmania spp

Background: Visceral leishmaniasis (VL) is an infectious disease caused by the protozoan Leishmania infantum that istransmitted to dogs and humans by sandflies. The incidence of eye injuries in VL is high. They occur in 20 to 81% ofinfected dogs and include blepharitis, granulomatous conjunctivitis, scleritis, keratitis, anterior uveitis, keratoconjunctivitissicca, and secondary glaucoma. However, some dogs present only the clinical signs of eye damage. The main objective ofthis manuscript is to report a case of anterior uveitis with severe corneal edema in a dog with VL that underwent clinicaland surgical ophthalmic treatments after miltefosine therapy.Case: An 8-month-old, intact male Labrador Retriever with brown fur presented with pruritus, diffuse desquamation,and conjunctival hyperemia on physical evaluation. On the basis of an ophthalmic examination, nodular conjunctivitisand uveitis were diagnosed in both eyes. Moreover, laboratory examination results showed hyperproteinemia, increasedserum alkaline phosphatase activity, and positive reactions to immunochromatographic tests for VL. Clinical treatmentwas instituted from the moment of diagnosis, when miltefosine and allopurinol were prescribed. at the end of treatment,based on laboratory examination results, only clinical support treatment based on remaining clinical-pathological changeswas prescribed. Topical medications (prednisolone eye drops and sodium hyaluronate) were recommended for the ophthalmic changes. One week after the start of topical treatment, the dog showed...(AU)

Prevalência da leishmaniose visceral canina e coinfecções em região periurbana no Distrito Federal - Brasil / Prevalence of visceral canine leishmaniosis and co-infections in periurban region in the Federal District - Brazil

Objetivou-se verificar a prevalência da leishmaniose visceral canina (LVC) em área periurbana com foco de transmissão no Distrito Federal (DF) e também avaliar a prevalência de coinfecções como dirofilariose, anaplasmose, erliquiose e doença de Lyme em cães sororreagentes para LVC. Inicialmente, amostras de soros dos cães da área de estudo foram testadas à reação imunocromatográfica que contém dois antígenos recombinantes ̶ rK39 e rK26 − (DPP) para Leishmania sp. O soro dos animais reagentes ao teste de DPP foi confirmado para LVC com ELISA. As amostras reagentes a ambos os testes foram analisadas para possíveis coinfecções através do teste de SNAP (IDEXX 4Dx Plus). Foram avaliados 240 cães, dos quais 132 (55%) obtiveram resultados reagentes para DPP e para ELISA concomitantemente, sendo diagnosticados com LVC. Destes, 26 (20%) foram reagentes para Ehrlichia canis ou E. ewangii, 9 (7%) apresentaram positividade para Anaplasma phagocytophilum ou A. platys e, nessas amostras que se apresentaram reagentes, observou-se a ocorrência de coinfecção de anaplasmose, erliquiose e leishmaniose em 3 (2,3%) animais. Verificou-se alta prevalência da LVC na região periurbana do DF, destacando-se a necessidade de diagnóstico mais preciso quanto a coinfecções que possivelmente podem influenciar no prognóstico e manifestação do quadro clínico desses pacientes.

The aim of this study was to verify the prevalence of Canine Visceral Leishmaniasis (CVL) in periurban area focusing on transmissions that occurred on Distrito Federal (DF), and also, evaluate the prevalence of co-infections like dirofilariosis, anaplasmosis, ehrlichiosis and Lyme disease in dogs seroreagents to CLV. Initially the serum of the dogs inhabitants of the study area was tested according to the immunochromatographic reaction that contained two recombinant antigens - rK39 e rK26 - (DPP) to Leishmania sp. The animal plasma that reacted to the DPP test was confirmed for CVL with ELI-SA. Through confirmation of diagnose of VL by both tests, the samples were analyzed for possible co-infections through SNAP test (IDEXX 4Dx Plus). 240 dogs were tested, 132 (55%) of which obtained reacting results for DPP and for ELISA concomitantly, being diagnosed with CVL. Amongst those, 26 (20%) were positive for Ehrlichia canis or E. ewangii, meanwhile 9 (7%) presented positive results for Anaplasma phagocytophilum or A. platys, from those samples that showed to be positive, co-infection of anaplasmosis, ehrlichiosis and leishmaniasis was observed in 3 (2.3%) dogs. The high prevalence of CVL was observed in the periurban region of DF, highlighting the need for more precise diagnosis regarding co-infections that may possibly influence on the prognosis and clinical manifestation of these patients.

Prevalência da leishmaniose visceral canina e coinfecções em região periurbana no Distrito Federal - Brasil / Prevalence of visceral canine leishmaniosis and co-infections in periurban region in the Federal District - Brazil

Objetivou-se verificar a prevalência da leishmaniose visceral canina (LVC) em área periurbana com foco de transmissão no Distrito Federal (DF) e também avaliar a prevalência de coinfecções como dirofilariose, anaplasmose, erliquiose e doença de Lyme em cães sororreagentes para LVC. Inicialmente, amostras de soros dos cães da área de estudo foram testadas à reação imunocromatográfica que contém dois antígenos recombinantes ̶ rK39 e rK26 − (DPP) para Leishmania sp. O soro dos animais reagentes ao teste de DPP foi confirmado para LVC com ELISA. As amostras reagentes a ambos os testes foram analisadas para possíveis coinfecções através do teste de SNAP (IDEXX 4Dx Plus). Foram avaliados 240 cães, dos quais 132 (55%) obtiveram resultados reagentes para DPP e para ELISA concomitantemente, sendo diagnosticados com LVC. Destes, 26 (20%) foram reagentes para Ehrlichia canis ou E. ewangii, 9 (7%) apresentaram positividade para Anaplasma phagocytophilum ou A. platys e, nessas amostras que se apresentaram reagentes, observou-se a ocorrência de coinfecção de anaplasmose, erliquiose e leishmaniose em 3 (2,3%) animais. Verificou-se alta prevalência da LVC na região periurbana do DF, destacando-se a necessidade de diagnóstico mais preciso quanto a coinfecções que possivelmente podem influenciar no prognóstico e manifestação do quadro clínico desses pacientes.(AU)

The aim of this study was to verify the prevalence of Canine Visceral Leishmaniasis (CVL) in periurban area focusing on transmissions that occurred on Distrito Federal (DF), and also, evaluate the prevalence of co-infections like dirofilariosis, anaplasmosis, ehrlichiosis and Lyme disease in dogs seroreagents to CLV. Initially the serum of the dogs inhabitants of the study area was tested according to the immunochromatographic reaction that contained two recombinant antigens - rK39 e rK26 - (DPP) to Leishmania sp. The animal plasma that reacted to the DPP test was confirmed for CVL with ELI-SA. Through confirmation of diagnose of VL by both tests, the samples were analyzed for possible co-infections through SNAP test (IDEXX 4Dx Plus). 240 dogs were tested, 132 (55%) of which obtained reacting results for DPP and for ELISA concomitantly, being diagnosed with CVL. Amongst those, 26 (20%) were positive for Ehrlichia canis or E. ewangii, meanwhile 9 (7%) presented positive results for Anaplasma phagocytophilum or A. platys, from those samples that showed to be positive, co-infection of anaplasmosis, ehrlichiosis and leishmaniasis was observed in 3 (2.3%) dogs. The high prevalence of CVL was observed in the periurban region of DF, highlighting the need for more precise diagnosis regarding co-infections that may possibly influence on the prognosis and clinical manifestation of these patients.(AU)

Reflexões sobre cenários, vigilância epidemiológica e controle da transmissão de leishmaniose visceral no estado de São Paulo / Analysis of epidemiological scenarios and the relationship with surveillance and control of visceral leishmaniasis transmission in the state of São Paulo

Diferenças regionais nos padrões de transmissão da leishmaniose visceral tem se constituído ao longo do tempo em diferentes cenários para enfrentamento da doença no estado de São Paulo. Entre 1999 a 2016, Lutzomyia longipalpis foi detectado em 95,8% (137/143) dos municípios com transmissão humana, canina ou ambas. Todavia, a ocorrência de casos humanos em município do litoral e aumento de casos caninos na região metropolitana de São Paulo sem detecção do vetor, sugere novos desafios à vigilância e ao controle da doença. No oeste do estado, prevalece à forma clássica de transmissão com 19,70% (13/66) dos municípios prioritários, acumulando 63,8% (245/384) dos casos no triênio 2015-2016-2017. Esse padrão epidemiológico é compatível com a regra empírica 80/20. Alguns destes municípios houve remissão da transmissão, porem com posterior aumento no decorrer dos anos. Desse modo conclui-se que a vigilância e o controle da leishmaniose visceral terá como desafio a busca por novas ferramentas para o enfrentamento da transmissão nos diversos cenários e para o efetivo controle da doença.

Regional characteristics influence the patterns of transmission of visceral leishmaniasis revealing over time different scenarios for the control of the disease in the state of São Paulo. Between 1999 and 2016, Lutzomyia longipalpis was detected in 95.8% (137/143) of the municipalities with human, canine or both transmissions. However, the occurrence of human cases in a new municipality and an increase in canine cases in the metropolitan region of São Paulo without detection of the vector suggest new challenges to surveillance and control of the disease. In the western part of the state, the classic form of transmission prevails with 19.70% (13/66) of the priority municipalities, accumulating 63.8% (245/384) of cases in the triennium 2015-2016-2017. This epidemiological pattern is compatible with the 80/20 empirical rule. Some of these municipalities had remission of the transmission with a subsequent increase in the number of cases over the years. Thus, it is concluded that the surveillance and control system of visceral leishmaniasis should seek new tools for coping with transmission in the various scenarios and for effective control of the disease.

Reflexões sobre cenários, vigilância epidemiológica e controle da transmissão de leishmaniose visceral no estado de São Paulo / Analysis of epidemiological scenarios and the relationship with surveillance and control of visceral leishmaniasis transmission in the state of São Paulo

Diferenças regionais nos padrões de transmissão da leishmaniose visceral tem se constituído ao longo do tempo em diferentes cenários para enfrentamento da doença no estado de São Paulo. Entre 1999 a 2016, Lutzomyia longipalpis foi detectado em 95,8% (137/143) dos municípios com transmissão humana, canina ou ambas. Todavia, a ocorrência de casos humanos em município do litoral e aumento de casos caninos na região metropolitana de São Paulo sem detecção do vetor, sugere novos desafios à vigilância e ao controle da doença. No oeste do estado, prevalece à forma clássica de transmissão com 19,70% (13/66) dos municípios prioritários, acumulando 63,8% (245/384) dos casos no triênio 2015-2016-2017. Esse padrão epidemiológico é compatível com a regra empírica 80/20. Alguns destes municípios houve remissão da transmissão, porem com posterior aumento no decorrer dos anos. Desse modo conclui-se que a vigilância e o controle da leishmaniose visceral terá como desafio a busca por novas ferramentas para o enfrentamento da transmissão nos diversos cenários e para o efetivo controle da doença.(AU)

Regional characteristics influence the patterns of transmission of visceral leishmaniasis revealing over time different scenarios for the control of the disease in the state of São Paulo. Between 1999 and 2016, Lutzomyia longipalpis was detected in 95.8% (137/143) of the municipalities with human, canine or both transmissions. However, the occurrence of human cases in a new municipality and an increase in canine cases in the metropolitan region of São Paulo without detection of the vector suggest new challenges to surveillance and control of the disease. In the western part of the state, the classic form of transmission prevails with 19.70% (13/66) of the priority municipalities, accumulating 63.8% (245/384) of cases in the triennium 2015-2016-2017. This epidemiological pattern is compatible with the 80/20 empirical rule. Some of these municipalities had remission of the transmission with a subsequent increase in the number of cases over the years. Thus, it is concluded that the surveillance and control system of visceral leishmaniasis should seek new tools for coping with transmission in the various scenarios and for effective control of the disease.(AU)

Variables associated with the prevalence of anti-Leishmania spp. antibodies in dogs on the tri-border of Foz do Iguaçu, Paraná, Brazil / Variáveis associadas à prevalência de anticorpos anti- Leishmania spp. em cães na tríplice fronteira de Foz do Iguaçu, Paraná, Brasil

The aim of this study was to investigate the occurrence of anti-Leishmania spp. antibodies in dogs from localities in the city of Foz do Iguaçu, Paraná state, Brazil, on the border with Argentina and Paraguay. Blood samples dogs were collected to perform the following serologic tests: immunochromatographic DPP® rapid test, indirect immunoenzymatic assay (ELISA) and indirect immunofluorescence assay (IFA). In 2012, 285 dogs were analyzed on Argentina border, and in 2013, serum samples from 396 dogs on the border of Paraguay were collected. Using ELISA for screening and IFA for the confirmatory test, the results showed that the antibody prevalence was 1.8% (5/285) on the border of Argentina and 3.0% (12/396) on Paraguay border. When using the DPP® for screening and ELISA as a confirmatory analysis, we observed a seroreagent prevalence in dogs of 2.5% (7/285) on Argentina border and 5.1% (20/396) on Paraguay border. The non-public collection of domestic waste (p= 0.0004) was shown to be associated with leishmaniasis. This study shows the presence of leishmaniasis and suggest the emergence of canine visceral leishmaniasis in state of Paraná due to the confirmed occurrence of seroreactive dogs on Argentina and Paraguay border, which has environmental and geographical characteristics that favor the spread of the parasite.(AU)

O objetivo deste estudo foi investigar a ocorrência de anticorpos anti- Leishmania spp. em cães da cidade de Foz do Iguaçu, estado do Paraná, Brasil, fronteira com a Argentina e o Paraguai. Amostras de sangue de cães foram coletadas para realização dos seguintes testes sorológicos: teste rápido imunocromatográfico DPP®, ensaio imunoenzimático indireto (ELISA) e ensaio de imunofluorescência indireta (IFI). Em 2012, 285 cães foram analisados na fronteira com Argentina e, em 2013, amostras de soro de 396 cães na fronteira com o Paraguai. Utilizando ELISA para triagem e IFA para o teste confirmatório, os resultados mostraram uma prevalência de anticorpos de 1,8% (5/285) na fronteira da Argentina e 3,0% (12/396) na fronteira com o Paraguai. Ao usar o DPP® para triagem e ELISA como uma análise confirmatória, observou-se uma prevalência de cães sororreagentes de 2,5% (7/285) na fronteira com a Argentina e 5,1% (20/396) na fronteira com o Paraguai. A não coleta pública de lixo doméstico (p = 0,0004) mostrou-se associada à leishmaniose. Este estudo demonstra a presença de leishmaniose e sugere a emergência da leishmaniose visceral canina no estado do Paraná devido à ocorrência de cães sororreagentes na fronteira Argentina e Paraguai, que possuem características ambientais e geográficas que favorecem a disseminação do parasito.(AU)

Análise comparativa entre os diferentes protocolos utilizados para o diagnóstico da leishmaniose visceral canina / Comparative analysis among the different protocols used for the diagnosis of canine visceral leishmaniasis

Foi realizada análise comparativa entre os diferentes protocolos utilizados no diagnóstico da leishmaniose visceral canina, em inquéritos soroepidemiológicos, na região de São José do Rio Preto, no período de 2008 a 2012. Para cada protocolo avaliou-se o total de exames processados, o tempo médio para examinar as amostras coletadas nos diferentes períodos e a análise de concordância bruta. Foram utilizados quatro protocolos: diagnóstico apenas pela reação de imunofluorescência indireta (RIFI) em 12.871 (28,4%) cães, por ensaio imunoenzimático (EIE) e RIFI em 632 (1,4%); 22.387 (49,4%) por EIE/RIFI, e 9.453 (20,8%) pelo teste rápido (TR) Dual Path Platform (DPP®)/EIE. Nos dois primeiros grupos, as análises foram no eluato de sangue coletado em papel de filtro, e nos dois últimos no soro sanguíneo. O protocolo TR-DPP®/EIE demandou menor tempo (dias) desde a execução até a liberação dos resultados, em comparação aos demais. Na avaliação das taxas de concordância bruta, o TR-DPP®/EIE apresentou melhor desempenho (58,5%). Apesar de, o atual protocolo TR-DPP®/EIE tenha contribuído para diminuir a discordância entre os resultados obtidos nos EIE/RIFI, o EIE confirma menos de 60% dos TR-DPP® reagentes, o que indica a necessidade de buscar novas alternativas para efetuar o diagnóstico em cães.

The comparative analysis was performed among the different protocols proposed for diagnosing the canine visceral leishmaniasis in the seroepidemiological surveys performed in the region of São José do Rio Preto, from 2008 to 2012. Each protocol evaluated the total number of processed tests, the mean time for examining the collected samples, in different periods, and the gross agreement analysis. Four protocols were used: diagnosis only by indirect immunofluorescence test (IFT), in 12,871 (28.4%) dogs samples; by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and IFT in 632 (1.4%); (ELISA/IFT) in 22,387 (49.4%) and the rapid test (RT) Dual Path Platform (DPP®)/ ELISA in 9,453 (20.8%). In the first two groups, the tests were performed using eluates from blood collected in the filter paper, and in the two last employed serum samples. RT-DPP®/ELISA demanded less time (days), from the test starting until the results release. In the of gross agreement rates, RT-DPP®/ELISA showed the best performance (58.5%). Although the new protocol RT-DPP®/ELISA has contributed to decrease in the mismatch between ELISA and IFT results, ELISA confirms less than 60% of RT-DPP® reagent samples, indicating the need for searching the new alternatives for the canine diagnosis.

Análise comparativa entre os diferentes protocolos utilizados para o diagnóstico da leishmaniose visceral canina / Comparative analysis among the different protocols used for the diagnosis of canine visceral leishmaniasis

Foi realizada análise comparativa entre os diferentes protocolos utilizados no diagnóstico da leishmaniose visceral canina, em inquéritos soroepidemiológicos, na região de São José do Rio Preto, no período de 2008 a 2012. Para cada protocolo avaliou-se o total de exames processados, o tempo médio para examinar as amostras coletadas nos diferentes períodos e a análise de concordância bruta. Foram utilizados quatro protocolos: diagnóstico apenas pela reação de imunofluorescência indireta (RIFI) em 12.871 (28,4%) cães, por ensaio imunoenzimático (EIE) e RIFI em 632 (1,4%); 22.387 (49,4%) por EIE/RIFI, e 9.453 (20,8%) pelo teste rápido (TR) Dual Path Platform (DPP®)/EIE. Nos dois primeiros grupos, as análises foram no eluato de sangue coletado em papel de filtro, e nos dois últimos no soro sanguíneo. O protocolo TR-DPP®/EIE demandou menor tempo (dias) desde a execução até a liberação dos resultados, em comparação aos demais. Na avaliação das taxas de concordância bruta, o TR-DPP®/EIE apresentou melhor desempenho (58,5%). Apesar de, o atual protocolo TR-DPP®/EIE tenha contribuído para diminuir a discordância entre os resultados obtidos nos EIE/RIFI, o EIE confirma menos de 60% dos TR-DPP® reagentes, o que indica a necessidade de buscar novas alternativas para efetuar o diagnóstico em cães.(AU)

The comparative analysis was performed among the different protocols proposed for diagnosing the canine visceral leishmaniasis in the seroepidemiological surveys performed in the region of São José do Rio Preto, from 2008 to 2012. Each protocol evaluated the total number of processed tests, the mean time for examining the collected samples, in different periods, and the gross agreement analysis. Four protocols were used: diagnosis only by indirect immunofluorescence test (IFT), in 12,871 (28.4%) dogs samples; by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and IFT in 632 (1.4%); (ELISA/IFT) in 22,387 (49.4%) and the rapid test (RT) Dual Path Platform (DPP®)/ ELISA in 9,453 (20.8%). In the first two groups, the tests were performed using eluates from blood collected in the filter paper, and in the two last employed serum samples. RT-DPP®/ELISA demanded less time (days), from the test starting until the results release. In the of gross agreement rates, RT-DPP®/ELISA showed the best performance (58.5%). Although the new protocol RT-DPP®/ELISA has contributed to decrease in the mismatch between ELISA and IFT results, ELISA confirms less than 60% of RT-DPP® reagent samples, indicating the need for searching the new alternatives for the canine diagnosis.(AU)

Activity of the antiarrhythmic drug amiodarone against Leishmania (L) infantum: an in vitro and in vivo approach

Background:Considering the high toxicity and limited therapies available for treating visceral leishmaniasis (VL), the drug repositioning approach represents a faster way to deliver new therapies to the market.Methods:In this study, we described for the first time the activity of a potent antiarrhythmic, amiodarone (AMD), against L. (L.)infantum and its in vitro and in vivo activity.Results:The evaluation against promastigotes has shown that amiodarone presents leishmanicidal effect against the extracellular form, with an IC50 value of 10 μM. The activity was even greater against amastigotes in comparison with promastigotes with an IC50 value of 0.5 μM. The selectivity index in relation to the intracellular form demonstrated that the antiparasitic activity was approximately 56 times higher than its toxicity to mammalian cells. Investigation of the in vivo AMD activity in the L. infantum-infected hamster model showed that 51 days after the initial infection, amiodarone was unable to reduce the parasite burden in the spleen and liver when treated for 10 consecutive days, intraperitoneally, at 50 mg/kg/day, as determined by qPCR. Although not statistically significant, AMD was able to reduce the parasite burden by 20% in the liver when treated for 10 consecutive days, orally, at 100 mg/kg/day; no reduction in the spleen was found by qPCR.Conclusions:Our findings may help further drug design studies seeking new AMD derivatives that may provide new candidates with an in vitro selectivity close to or even greater than that observed in the prototype delivering effectiveness in the experimental model of VL.(AU)

Activity of the antiarrhythmic drug amiodarone against Leishmania (L) infantum: an in vitro and in vivo approach

Considering the high toxicity and limited therapies available for treating visceral leishmaniasis (VL), the drug repositioning approach represents a faster way to deliver new therapies to the market. Methods: In this study, we described for the first time the activity of a potent antiarrhythmic, amiodarone (AMD), against L. (L.)infantum and its in vitro and in vivo activity. Results: The evaluation against promastigotes has shown that amiodarone presents leishmanicidal effect against the extracellular form, with an IC50 value of 10 μM. The activity was even greater against amastigotes in comparison with promastigotes with an IC50 value of 0.5 μM. The selectivity index in relation to the intracellular form demonstrated that the antiparasitic activity was approximately 56 times higher than its toxicity to mammalian cells. Investigation of the in vivo AMD activity in the L. infantum-infected hamster model showed that 51 days after the initial infection, amiodarone was unable to reduce the parasite burden in the spleen and liver when treated for 10 consecutive days, intraperitoneally, at 50 mg/kg/day, as determined by qPCR. Although not statistically significant, AMD was able to reduce the parasite burden by 20% in the liver when treated for 10 consecutive days, orally, at 100 mg/kg/day; no reduction in the spleen was found by qPCR. Conclusions: Our findings may help further drug design studies seeking new AMD derivatives that may provide new candidates with an in vitro selectivity close to or even greater than that observed in the prototype delivering effectiveness in the experimental model of VL.(AU)