Feral dogs in Chitral gol national park, Pakistan: a potential threat to the future of threatened Kashmir Markhor (Capra falconeri cashmiriensis) / Cães ferozes no parque nacional Chitral gol, Paquistão: uma ameaça potencial para o futuro do Markhor da Caxemira ameaçado (Capra falconeri cashmiriensis)

Abstract Feral dogs are well-organized hunters of ungulates in many parts of the world, causing great damage to wildlife populations and ultimately to the ecosystem. In Pakistan, the impacts of feral dogs on the wildlife have not been documented yet. In a period of fifteen years (2006-2020), feral dogs have killed hundreds of threatened markhor in Chitral gol national park (CGNP), Pakistan. Despite direct predation other impacts including disturbance and competition with other natural predators, could compromise conservation and management efforts. The population of feral dogs seems to have been increased with the increase of dumping sites by communities. Our findings suggest that there are pressing needs of controlling the feral dogs population and eradicating them from the core zone of CGNP and surrounding buffer communities. Conventional culling of dogs should be coupled with modern techniques like castration and sterilization. Communities should be educated regarding the clean environment, proper disposal of home wastes and, biodiversity conservation.

Resumo Os cães ferozes são caçadores bem organizados de ungulados em muitas partes do mundo, causando grandes danos à população de animais selvagens e, em última instância, ao ecossistema. No Paquistão, os impactos dos cães selvagens na vida selvagem ainda não foram documentados. Em um período de 15 anos (2006-2020), cães selvagens mataram centenas de markhor ameaçados no parque nacional Chitral gol (CGNP), Paquistão. Apesar da predação direta, outros impactos, incluindo distúrbios e competições com outros predadores naturais podem comprometer os esforços de conservação e manejo. A população de cães selvagens parece ter aumentado com o aumento dos locais de despejo pelas comunidades. Nossas descobertas sugerem que há necessidades urgentes para controlar a população de cães selvagens e erradicá-los da zona central do CGNP e das comunidades-tampão vizinhas. O abate convencional de cães deve ser combinado com técnicas modernas como castração e esterilização. As comunidades devem ser educadas sobre o meio ambiente limpo, o descarte adequado de resíduos domésticos e a conservação da biodiversidade.

Metastatic oral squamous cell carcinoma in a captive common hippopotamus (Hippopotamus amphibius)

Reported cases of neoplasia affecting hippopotamus are very scarce. This report describes a metastatic oral squamous cell carcinoma in a captive 44-year-old male common hippopotamus (Hippopotamus amphibius) that developed progressive loss of appetite, fibrinohemorrhagic oral discharge, and progressive weight loss. Gross, cytological, and histopathological findings were compatible with a conclusive diagnosis of an invasive oral squamous cell carcinoma with metastasis in the lung, adrenal, and spleen. To the best of our knowledge this is the first report of squamous cell carcinoma in a common hippopotamus.

Metastatic oral squamous cell carcinoma in a captive common hippopotamus (Hippopotamus amphibius)

Reported cases of neoplasia affecting hippopotamus are very scarce. This report describes a metastatic oral squamous cell carcinoma in a captive 44-year-old male common hippopotamus (Hippopotamus amphibius) that developed progressive loss of appetite, fibrinohemorrhagic oral discharge, and progressive weight loss. Gross, cytological, and histopathological findings were compatible with a conclusive diagnosis of an invasive oral squamous cell carcinoma with metastasis in the lung, adrenal, and spleen. To the best of our knowledge this is the first report of squamous cell carcinoma in a common hippopotamus.(AU)

Gyrostigma rhinocerontis (Diptera: Oestridae, Gasterophilinae) in white rhinoceroses (Ceratotherium simum) imported from South Africa: occurrence in Itatiba, São Paulo, Brazil / Gyrostigma rhinocerontis (Diptera: Oestridae, Gasterophilinae) em rinocerontes-brancos (Ceratotherium simum) importados da África do Sul: ocorrência em Itatiba, São Paulo

Fly larvae from the Gasterophilinae subfamily of the Oestridae family are parasites of domestic (equine) and wild (rhinos and equine) odd-hoofed ungulates (Perissodactyla). The gastric parasite of African Rhinos is Gyrostigma rhinocerontis (formerly Gyrostigma pavesii), which in its larva phase can be found in the feces of their hosts and can reach 40mm length. The adult is the largest fly in Africa, reaching 41mm long, with 71-mm wingspan. The Gyrostigma genus does not occur naturally in Brazil. There is one previous report of the occurrence of its larvae in the feces of a white rhino brought from South Africa in the 1990's, which was housed in a zoo located in Rio Grande do Sul. The present paper furnishes data from a zoo of the city of Itatiba, São Paulo state, Brazil, where Gyrostigma rhinocerontis larvae were found in 2005 in the feces of a group of white rhinos (Ceratotherium simum) legally imported from South Africa. The rhinos were kept in a breeding and preservation farm. This paper also reports the measures taken to control the case and avoid the dissemination of the parasite, calling attention to the fact of globalization, which allows international and intercontinental transit of wild animals with potential risks of adaptation of exotic parasites to new ecosystems.(AU)

As larvas dos dípteros da subfamília Gasterophilinae da família Oestridae parasitam ungulados perissodáctilos, tanto domésticos (equídeos) quanto selvagens (rinocerontes e equídeos). O parasito gástrico dos rinocerontes africanos é Gyrostigma rhinocerontis (anteriormente Gyrostigma pavesii), que na fase larval pode ser encontrada nas fezes dos hospedeiros, e chega a medir 40mm de comprimento. O adulto é a maior mosca daquele continente, atingindo até 41mm de comprimento, e envergadura de 71 mm. O gênero Gyrostigma não ocorre naturalmente no Brasil, onde anteriormente existia somente um relato do achado de larvas, nas fezes de um rinoceronte-branco oriundo da África do Sul nos anos 90 do século XX, e albergado num zoológico localizado no Rio Grande do Sul. Este artigo apresenta dados sobre o achado, em um zoológico no município de Itatiba, Estado de São Paulo, Brasil, de larvas de Gyrostigma rhinocerontis nas fezes de um grupo de rinocerontes-brancos (Ceratotherium simum) importados legalmente da África do Sul, onde eram mantidos em uma fazenda de preservação com criação manejada, em 2005. São relatadas também as medidas tomadas para controle do caso e prevenção da disseminação do parasito, e se discutem os riscos da globalização, que viabiliza o trânsito internacional e intercontinental de animais selvagens, com riscos potenciais de adaptação de parasitos exóticos a novos ecossistemas.(AU)

Subsistence hunting of Cuniculus paca in the middle of the Solimões River, Amazonas, Brazil / Caça de subsistência de Cuniculus paca no Médio Solimões, Amazonas, Brasil

Ungulates, large primates and caviomorfs are cited by Amazonian hunters as preferred species. In this research, paca (Cuniculus paca) hunting was investigated in relation to water levels and the lunar cycle. In eight years of monitoring in the Amanã Sustainable Development Reserve, the killing of 625 pacas was registered in five monitored communities. Paca hunting took place mainly at night and the most commonly used method is “spotlighting”. A positive correlation between the number of pacas killed and water level (rs=0.890; p<0.0001) was found. At least 37% of the pacas were hunted when moon illumination level was less than 10%, before moonrise or after moonset. In the Boa Esperança community, capture of paca tended to decrease on nights with high moon illumination (rs= −0.663; p=0.067). At the same time, an expressive catch-per-unity-effort decrease was also observed in this community (r2= −0.881; p<0.001), allowing us to predict unsustainable hunting levels for the next decade. The stock of animals in these areas could be continuously replaced if surrounding areas consisted of continuous forests. However, continuous hunting and deforestation force local hunters to travel longer distances to kill prey such as pacas. The confirmation of the relation between paca habits and lunar illumination and water level, a pattern described by local hunters, demonstrates the potential value of participatory research and the possibility of integrating traditional knowledge into scientific knowledge.(AU)

Ungulados, primatas de grande porte e caviomorfos são citados por caçadores amazônicos como espécies preferenciais. Neste trabalho, a caça de paca (Cuniculus paca) foi investigada em relação ao nível d'água e ao ciclo lunar. O abate de 625 pacas foi registrado em oito anos de monitoramento em cinco comunidades da Reserva de Desenvolvimento Sustentável Amanã. A caça de paca ocorre principalmente à noite e o método mais utilizado é a “focagem”. Encontrou-se uma correlação positiva entre o número de pacas abatidas e o nível d'água (rs=0.890; p<0.0001). Pelo menos 37% dos indivíduos foram abatidos quando o nível de iluminação lunar era menor do que 10%, antes do nascer da lua ou após seu ocaso. Na comunidade da Boa Esperança, a captura de paca tendeu ao decrescimento em noites com altos níveis de iluminação lunar (rs=−0.663; p=0.067). Ao mesmo tempo, uma expressiva redução da captura por unidade de esforço foi observada nessa comunidade (r2=−0.881; p<0.001), permitindo-nos prever níveis de caça insustentáveis para a próxima década. Frente a extensas áreas contínuas de floresta, o estoque de animais nas áreas de caça poderia ser continuamente substituído, mas os efeitos combinados de caça constante e desmatamento forçam caçadores locais a se locomoverem por longas distâncias para abater presas como as pacas. A confirmação dos padrões descritos por moradores locais sobre a relação entre pacas e os níveis de iluminação lunar e de água demonstra o potencial de pesquisa participativa e a possibilidade de integração entre os conhecimentos tradicionais e científicos.(AU)

Detecção de patógenos de suínos em javalis (Sus scrofa) de vida livre no Rio Grande do Sul

A presença de suídeos asselvajados, bem como seu rápido crescimento populacional e dispersão no Brasil é motivo de preocupação devido a seu impacto negativo na natureza. Esses animais têm sido considerados potenciais reservatórios de patógenos e podem estar relacionados à disseminação e manutenção desses agentes para outras espécies animais, incluindo seres humanos. O objetivo deste estudo foi testar a hipótese de que javalis de vida livre são portadores de patógenos de importância para a suinocultura e investigar os fatores de risco associados à ocorrência dos mesmos. Para isso, foram analisadas amostras de tecidos de javalis para identificarpatógenos bacterianos: Actinobacillus pleuropneumoniae, Haemophilus parasuis e Mycoplasma hyopneumoniae; patógenos virais: Circovírus Suíno Tipo 2(PCV2),Circovírus Suíno Tipo 3 (PCV3), Protoparvovírus de ungulados 1 (antigo Parvovírus suíno UPV), Torque teno Susvirus suíno 1a e 1b (TTSuV1a e TTSuV1b); e um patógeno parasitário: Metastrongylus spp. Foi realizada reação em cadeia de polimerase (PCR) em tempo real de 79 amostras de tecido pulmonar para os patógenos bacterianos, pools de linfonodos de 80 animais para os patógenos virais, e a avaliação histológica de 45 lâminas de tecido pulmonar para o patógeno parasitário. Dessas avaliações, 1,27% das amostras foram positivas para A. pleuropneumoniae, 3,80% para H. parasuis, 0,0% para M. hyopneumoniae, 2,50% para PCV2, 36,25% para PCV3, 8,75% para UPV1, 53,75% para TTSuV1a, 5% para TTSuV1b e 60% para Metastrongylusspp.Para avaliação dos fatores de risco foi utilizada uma análise logística univariada entre as variáveis: sexo, peso, idade, local de caça, estação do ano e positividade para patógenos descritos. As variáveis com P<0,2 nesta análise foram selecionadas pararegressão logística multivariada, na qual variáveis com P<0,05 foram consideradas fatores de risco. O fator de risco para ocorrência deH. parasuis foi o local de caça; para PCV3, o fator de riscofoi idade (adultos) e o sexo (fêmeas) foi fator de proteção; paraUPV1, foram fatores de risco a idade (jovem), o local de caça e maior peso; para TTSuV1aa estação do ano (primavera) foi fator de proteção; para TTSuV1b o menor peso foi fator de risco e paraMetastrongylusspp.a idade adulta fator de proteção. Os dados deste estudo evidenciam a presença dos patógenos circulando nos javalis de vida livre no Rio Grande do Sul e indicam a possibilidade desses animais servirem de reservatório tendo o risco de infectar outros animais.

The presence of wild boars as well as their rapid population growth and dispersion in Brazil is cause for concern due to their negative impact on nature. These animals have been considered potential reservoirs of pathogens and may be related to the dissemination and maintenance of these agents to other animal species, including humans. The objective of this study was to test the hypothesis that free-living wild boars are carriersof pathogens important for pig production and to investigate the risk factors associated to their occurrence. For this, wild boar tissue samples were analyzed to identify bacterial pathogens: Actinobacillus pleuropneumoniae, Haemophilus parasuis and Mycoplasma hyopneumoniae; viral pathogens: Swine Circovirus Type 2 (PCV2), Swine Circovirus Type 3 (PCV3), Protoparvovírus of ungulates 1 (formerly Porcine Parvovirus - UPV), Torque tenoSusvirus 1a and 1b (TTSuV1a and TTSuV1b); and a parasitic pathogen: Metastrongylus spp.. Real-time polymerase chain reaction (PCR) was performed in 79 lung tissue samples for bacterial pathogens detection; lymph nodes pools of 80 animals for viral pathogens; and histological evaluation of 45 lung tissue for the parasite detection. From these evaluations, 1.27% of the samples were positive for A. pleuropneumoniae, 3.80% for H. parasuis, 0.0% for M. hyopneumoniae, 2.50% for PCV2, 36.25% for PCV3, 8.75% for UPV1, 53.75% for TTSuV1a, 5% for TTSuV1b and 60% for Metastrongylus spp.. To evaluate the risk factors, univariate logistic analysis was used between the variables: sex, weight, age, hunting location, season and positivity for described pathogens. The variables with P <0.2 in this analysis were selected for multivariate logistic regression, in which variables with P <0.05 were considered risk factors. The risk factor for H. parasuis occurrence was the hunting site; for PCV3, the risk factor was age (adults) and sex (females) was a protection factor; for UPV1, age (young), the place of hunting and greater weight were risk factors; for TTSuV1a the season (spring) was protective factor; for TTSuV1b the lowest weight was a risk factor and for Metastrongylus spp. the adult age was a protection factor.The data of this study evidence the presence of pathogens important for swine industry circulating in wild boars in Rio Grande do Sul and indicate the possibility of these animals to serve as reservoirs with the risk of infecting other animals.

Detecção de anticorpos IgG anti-Trypanosoma vivax em bovinos através do teste de Imunofluorescência indireta / Detection of IgG antibodies against Trypanosoma vivax in cattle by indirect immunofluorescence test

Trypanosoma vivax infecta uma grande variedade de animais ungulados selvagens e domésticos, podendo causar grande impacto na produção de ruminantes. Este trabalho teve como objetivo avaliar a detecção de anticorpos IgG anti-Trypanosoma vivax em bovinos provenientes do estado de Pernambuco, Brasil. Para tanto, foram analisadas 2,053 amostras de soro sanguíneo de bovinos provenientes de rebanhos de municípios do estado de Pernambuco, os quais foram analisados através da Reação de Imunofluorescência Indireta. Das amostras testadas 13,93% (286/2.053) foram reagentes para anticorpos IgG anti-Trypanosoma vivax. As freqüências, por mesorregião, variaram de 11,90% a 15,99%. Assim, os dados obtidos permitiram a caracterização do estado de Pernambuco como uma área de instabilidade enzoótica e sugere que o estado Pernambuco é área endêmica para Trypanosoma vivax e este parasito está distribuído por todo o estado. (AU)

Trypanosoma vivax infects a wide range of wild and domestic ungulates, causing important losses for the livestock industry. The aim of the present study was to assess the detection of IgG antibodies against T. vivax in cattle from the state of Pernambuco, Brazil. Therefore, we analyzed 2.053 blood serum samples from cattle herds of municipalities in Pernambuco, what was made by Immunofluorescence Assay. The overall seroprevalence of IgG antibodies against T. vivax in cattle was 13.93% (286/2053). The frequencies, by region, varied from 11.90% to 15.99%. Thus, the data obtained allowed to characterize the state of Pernambuco as an area of enzootic instability for T. vivax. The frequency herein reported (i.e., 13.93%) indicates that Pernambuco is an endemic area for T. vivax, this parasite being spread throughout the state. (AU)

Malária em mamíferos silvestres / Malaria in wild mammals / Malaria en mamíferos silvestres

Muito do conhecimento sobre a biologia do parasita da malária foi obtido de estudos de campo e de laboratório em modelos experimentais primatas e murinos. Essa revisão faz uma síntese das espécies de Plasmodium spp. descritas no mundo que infectam mamíferos não humanos e discute a importância e aplicações em estudos experimentais de algumas espécies. Em primatas, existem 29 espécies conhecidas de Plasmodium spp. que parasitam grandes símios, macacos e lêmures. Além da importância da utilização dos primatas em estudos experimentais, foi demonstrado que existe transmissão natural de malárias de seres humanos para outros primatas e vice-versa, merecendo destaque um grande de foco de infecção por malária de macacos em seres humanos na Ásia. Em roedores murinos, são descritas cinco espécies que infectam ratos silvestres na África central e Egito. Em outros mamíferos, são conhecidos como hospedeiros o porco espinho africano, morcegos, esquilos e ungulados. A malária é uma doença de impacto mundial histórico e recente e os modelos animais, tanto roedores quanto primatas, tiveram e terão um crucial papel na realização de estudos experimentais. Porém, a malária em mamíferos é ainda carente de esclarecimentos, sendo ainda necessários estudos para se definir as espécies de Plamodium existentes, seus respectivos hospedeiros silvestres e distribuição geográfica, assim como a importância e as consequências do parasitismo nesses animais.(AU)

Most of the knowledge of malaria parasite biology was obtained from field and laboratory studies on murine and primate experimental models. This review summarizes Plasmodium spp. species that are described infecting non-human mammals and discusses the importance and applications in experimental studies of some species. In primates, there are 29 known described Plasmodium spp. species infecting simian, macaques and lemurs. Besides the importance of the utilization of primates in experimental studies, it was demonstrated that there are natural transmissions of human malaria to other primates and vice versa, and a great focus of macaque malaria infection in human beings in Asia is of great concern. In murine rodents, there are five species which infect wild rats in Central Africa and Egypt. In other mammals, the African porcupine, bats, squirrels and ungulates are known as hosts. Malaria is a disease with worldwide recent impact history, and animal models, rodents and primates had and will have a crucial role on experimental studies. However, mammalian malaria still needs clarification, and studies are necessary to define the existing Plasmodium species, their wild hosts and geographical distribution, as well as the parasitism importance and consequence in these animals.(AU)

Gran parte del conocimiento sobre la biología del parásito de la malaria se ha obtenido a partir de estudios de campo y de laboratorio en modelos experimentales murinos y primates. Esa revisión hace una síntesis de las especies de Plasmodium spp. descriptas en el mundo que infectan mamíferos no humanos, también se analiza la importancia y las aplicaciones en estudios experimentales de algunas especies. En primates, hay 29 especies conocidas de Plasmodium spp. que parasitan grandes simios, monos y lémures. Además de la importancia del uso de primates en estudios experimentales, se ha demostrado que existe transmisión natural de malarias de seres humanos para otros primates y viceversa, mereciendo destaque un gran foco de infección por malaria de monos en humanos en Asia. En roedores murinos, se describen cinco especies que infectan ratas silvestres en África Central y Egipto. En otros mamíferos, son conocidos como hospederos el puercoespín africano, murciélagos, ardillas y ungulados. La malaria es una enfermedad de impacto mundial histórico y reciente y los modelos animales, tanto roedores como primates, tuvieron y tendrán un papel crucial en la realización de estudios experimentales. Sin embargo, la malaria en mamíferos es aún carente de aclaraciones, siendo necesarios estudios para definir las especies de Plasmodium existentes, sus respectivos hospederos silvestres y distribución geográfica, así como la importancia y las consecuencias de parasitismo en esos animales.(AU)

Isolamento de células derivadas da pele de macacos Sapajus apella (Linnaeus, 1758) e de bovinos para fins de aplicação em biotécnicas da reprodução

Células-tronco presentes nos compartimentos da pele são indispensáveis para a manutenção da homeostase, regeneração, reparação tecidual e reconstrução da integridade e funcionalidade após lesões. Em 2001 um protocolo de isolamento de precursores neurais foi adaptado para o isolamento de células-tronco da pele, referidas como precursores derivados da pele (SKPs), as quais foram diferenciadas, posteriormente, em células da linhagem germinativa, abrindo, assim, uma via de exploração para aplicações em biotecnologias da reprodução. Outro relevante aspecto sobre a pele, são as metodologias desenvolvidas para sua conservação e manutenção por longos períodos, o que permite a estocagem de suprimento biológico para inúmeras pesquisas, inclusive em biologia da conservação e criobiologia. Nesse contexto, considerando-se a necessidade de novas técnicas que contribuam para a preservação de espécies de primatas neotropicais e ungulados silvestres, este trabalho teve como objetivo o isolamento de células derivadas da pele de macacos Sapajus apella e de bovinos, buscando-se, em acréscimo, o estabelecimento de um protocolo de criopreservação das amostras, para posterior utilização em biotécnicas da reprodução. Inicialmente, implementou-se um protocolo otimizado de isolamento enzimático de precursores derivados da pele, com o qual foi possível obter SKPs de fetos bovinos, as quais foram positivas para a atividade da enzima fosfatase alcalina, marcadora de pluripotência. Em Sapajus apella foi possível isolar e cultivar células por essa metodologia até a formação de aglomerados. Em seguida, células resistentes a estresse conhecidas como células Muse, foram isoladas de fibroblastos de macaco Sapajus apella e de bovino adulto e em idade fetal. As células resistentes a estresse formaram aglomerados semelhantes a SKPs em amostras dos três animais, indicando a técnica como um método com potencial para a obtenção de esferas multipotentes. Por fim, estabeleceu-se um protocolo para vitrificação de biópsias de pele de macacos Sapajus apella, o qual foi efetivo para manter a integridade de até 88% das células epidermais, preservar boa densidade de fibroblastos e viabilizar a obtenção de células através do cultivo primário por explante. O protocolo de vitrificação proposto nesse estudo, associado às técnicas de isolamento de células derivadas da pele executadas, constituem em valiosa metodologia para a formação de bancos de germoplasma que viabilizem a realização de biotécnicas da reprodução como a clonagem e a geração de gametas in vitro e contribuam para a preservação de espécies silvestres em risco de extinção.

Stem cells present in the skin compartments are indispensable for the maintenance of homeostasis, regeneration, tissue integrity repair and functionality recovering after injury. In 2001 a protocol for the isolation of neural precursors was adapted for the isolation of skin stem cells, referred as "skin derived precursors" (SKPs), which were able to differentiate into germline cells, thus opening up a line of research in the field of reproduction biotechnology.Another relevant aspect about the skin are the methodologies developed for its conservation and maintenance for long periods, which allows the storage of biological supplies for numerous researches, including conservation biology and cryobiology. In this context, considering the need for new techniques that contribute to the preservation of neotropical primates and wild ungulates species, this work aimed to isolate skin derived cells of Sapajus apella monkeys and bovines. In addition, it was stablished a cryopreservation protocol for the skin samples. Initially, an optimized protocol of enzymatic isolation of skin derived precursors was implemented. It was possible to obtain alkaline phosphatase positive SKPs from bovine fetuses and to isolate and cultures cells from Sapajus apella until cluster formation. Next, stress-tolerant cells also known as Muse cells, were isolated from fibroblastsof Sapajus apella, adult bovine and bovine fetus. The stress-tolerant cells isolated from all three animals generated SKP-like spheres, indicating the technique as a potential method for multipotent spheres obtention. Finally, a protocol for Sapajus apella skin biopsies vitrification was established, which was effective to maintain the integrity of up to 88% of epidermal cells, preserve good fibroblast density and to be established a primary culture of skin explants.The vitrification protocol proposed in this study, associated with the techniques of skin derived cells isolation, constitute a valuable methodology for the formation of germplasm banks that enable the performance of reproductive biotechniques such as cloning and in vitro gametes generation and contribute to the preservation of endangered or threatened wild species.

Antibodies against toxoplasmosis in semicaptive pampas deer (Ozotoceros bezoarticus) in Uruguay

The health status of wild animals is of particular interest in veterinary epidemiology to have certainty on the diseases that affect each species, and which ones may be shared with domestic species and humans. Epidemiological surveillance should be done as frequently as possible to predict the appearance of emerging diseases in susceptible animal populations. The pampas deer (Ozotoceros bezoarticus) is an artiodactyl mammal belonging to the suborder of ruminants, considered on Appendix 1 of CITES and is designated an endangered species by the IUCN. Small isolated populations have been reported in Argentina, Brazil and Uruguay. In Uruguay there are two wild populations, and there is a third semi-captive population with approximately 80 individuals at the Estación de Cría de Fauna Autóctona Cerro Pan de Azúcar (ECFA, Maldonado, Uruguay). Until now, there is scarce information reported on infectious and parasitic diseases in this specie. The aim of this work was to determine the presence of antibodies against Leptospirosis (Leptospira interrogans, 21 serovars), Toxoplasmosis (Toxoplasma gondii), Brucellosis (Brucella abortus), Chlamydiosis (Chlamydophila abortus), Enzootic bovine leukosis, Bovine herpesvirus and Bovine viral diarrhea in the ECFA pampas deer population.[...]

Antibodies against toxoplasmosis in semicaptive pampas deer (Ozotoceros bezoarticus) in Uruguay

The health status of wild animals is of particular interest in veterinary epidemiology to have certainty on the diseases that affect each species, and which ones may be shared with domestic species and humans. Epidemiological surveillance should be done as frequently as possible to predict the appearance of emerging diseases in susceptible animal populations. The pampas deer (Ozotoceros bezoarticus) is an artiodactyl mammal belonging to the suborder of ruminants, considered on Appendix 1 of CITES and is designated an endangered species by the IUCN. Small isolated populations have been reported in Argentina, Brazil and Uruguay. In Uruguay there are two wild populations, and there is a third semi-captive population with approximately 80 individuals at the Estación de Cría de Fauna Autóctona Cerro Pan de Azúcar (ECFA, Maldonado, Uruguay). Until now, there is scarce information reported on infectious and parasitic diseases in this specie. The aim of this work was to determine the presence of antibodies against Leptospirosis (Leptospira interrogans, 21 serovars), Toxoplasmosis (Toxoplasma gondii), Brucellosis (Brucella abortus), Chlamydiosis (Chlamydophila abortus), Enzootic bovine leukosis, Bovine herpesvirus and Bovine viral diarrhea in the ECFA pampas deer population.[...](AU)

DESENVOLVIMENTO DE TESTE IMUNOENZIMÁTICO ELISA PARA DIAGNÓSTICO DA TRIPANOSOMÍASE BOVINA UTILIZANDO PROTEÍNA RECOMBINANTE DE Trypanosoma vivax UBERABA, MG 2016

A tripanosomíase é causada pelo protozoário hemoflagelado Trypanosoma vivax e acomete ungulados domésticos e selvagens. Estima-se que animais infectados contribuam com uma perda anual de 160 milhões de dólares, devido a redução na produção de leite e carne, perda de escore corporal, dificuldades na reprodução, abortos e em muitos casos, morte. O patógeno causa sintomatologia clínica que pode ser similar a outras patologias que acometem bovinos, portanto o diagnóstico deve ser preciso e não erroneamente diagnosticado como uma doença com sintomatologia similar. O objetivo do presente trabalho foi obter proteína recombinante do Trypanosoma vivax e padronizar um teste ELISA (Enzime linked immunosorbent assay), para diagnóstico da tripanosomíase bovina com maior sensibilidade e especificidade. Uma proteína foi selecionada por meio de análise por bioinformática, produzida de forma recombinante, expressa, purificada e utilizada na padronização do ELISA. Inicialmente, diferentes concentrações de proteína recombinante (1, 10, 100 e 1000 nanogramas) foram testadas, bem como diferentes diluições de pool de soros positivos de animais experimentalmente infectados e negativos (1:100, 1:250 e 1:500) e diferentes diluições de conjugado anti-IgG marcado com peroxidase (1:5000, 1:10000 e 1:20000). Após a padronização, foi realizado o teste utilizando-se amostras de bovinos infectados experimentalmente por T. vivax nos dias 0, 21, 24, 27 e 30 pós-infecção experimental. A maior diferença de densidade ótica entre animais positivos e negativos foi observada utilizando-se 1000 nanogramas de proteína recombinante, soro na diluição de 1:100 e conjugado na diluição de 1:5000. Após analisar as densidades óticas, foi realizada a curva ROC (Receiver Operating Characteristic) e estabelecido um ponto de corte de 0,04. O teste apresentou acurácia de 98,6%, sensibilidade de 94,4% e especificidade de 100%. Valor preditivo positivo e valor preditivo negativo foram 100% e 93,3%, respectivamente. A razão de verossimilhança negativa e positiva foram de 0,06 e +, respectivamente. A padronização se mostrou adequada com a quantidade utilizada de proteína recombinante de 1000 nanogramas, diluição de soros de 1:100 e diluição de conjugado de 1:5000. Sensibilidade e especificidade obtidos com soro de animais infectados experimentalmente são promissores e destacam o potencial da proteína recombinante para diagnóstico preciso da tripanosomíase bovina.

Tripanosomiasis is caused by the hemoflagellate protozoan Trypanosoma vivax and affects domestic and wild ungulates. It is estimated that infected animals can contribute to an estimated annual loss of 160 million dollars, due to decrease in milk and meat production, loss of body condition, difficulties in reproduction, abortion, and in many cases death. The pathogen causes clinical symptoms that can be similar to other pathologies that affect bovines, therefore, the diagnosis must be precise and not misdiagnosed to a disease with similar symptoms. The objective of this present study was to obtain recombinant protein from Trypanosoma vivax and standardize an ELISA (Enzime linked immunosorbent assay), for the diagnosis of bovine tripanosomiasis with higher sensitivity and specificity. A protein was selected via bioinformatics analysis, recombinantly produced, expressed, purified and used in ELISA padronization. Initially, different concentrations of recombinant protein (1, 10, 100 and 1000 nanograms) were tested, as well as different dilutions of sera pool of positive animals experimentally infected and negative (1:100, 1:250 e 1:500), and different dilutions of conjugate anti-IgG marked with peroxidase (1:5000, 1:10000 and 1:20000). After padronization, the test was performed using samples from bovines experimentally infected with T. vivax on days 0, 21, 24, 27 and 30 after experimental infection. The highest difference of optical density among positive and negative animals was observed using 1000 nanograms of recombinant protein, sera dilution of 1:100 and conjugate dilution of 1:5000. After optical density analysis, a Receiver Operating Carachteristic (ROC) curve was done and a cut- off of 0,04 was stablished. The test showed accuracy of 98,6%, sensibility of 94,4% and specificity of 100%. Predicted positive and negative values were respectively 100% e 93,3%. Negative and positive likelihood ratio were respectively 0,06 e +. Standardization showed adequate with the used amount of recombinant protein of 1000 nanograms, sera dilution of 1:100 and conjugate dilution of 1:5000. Sensitivity and specificity results obtained using sera of experimentally infected animals were promising and show the potential of the recombinant protein for the precise diagnose of bovine tripanosomiasis.

INVESTIGAÇÕES OFTÁLMICAS EM ESPÉCIES SELECIONADAS DE UNGULADOS ARTIODÁTILOS.

A presente dissertação engloba três artigos distintos que contribuem para o conhecimento científico atual da oftalmologia de ungulados artiodátilos selvagens e domésticos. Cada artigo científico tornou-se um capítulo da dissertação. Todos os estudos foram conduzidos pela autora e por colaboradores do Laboratório de Oftalmologia Comparada (LABOCO), da Universidade Federal do Paraná (UFPR). O primeiro capítulo relata uma estrutura anatômica jamais descrita em camelídeos do Velho Mundo, uma espinha óptica localizada no osso esfenóide. No que se refere à importância deste novo achado, a observação da estrutura óssea na órbita de camelos e dromedários (Artiodactyla), quando combinada com a constatação anterior de uma estrutura anatômica semelhante em morcegos (Chiroptera), pode fornecer apoio adicional quanto à proximidade dessas duas ordens animais, aparentemente muito distintas na árvore filogenética. A função exata da espinha óssea descrita deverá ser mais investigada no futuro, porém aparenta servir como suporte para músculos extraoculares. O segundo capítulo descreve as características anatômicas normais do olho, biometria ocular e parâmetros de testes oftálmicos para o aoudad (Ammotragus lervia). Seus olhos localizam-se lateralmente na cabeça, são proeminentes e possuem diversas características anatômicas especializadas provenientes de adaptações evolutivas para o pastejo, as quais já foram previamente observadas em outras espécies de ungulados como cavalos, bois e ovelhas. Foram estabelecidos os valores normais para testes oftálmicos comumente realizados: Teste Lacrimal de Schirmer (TLS), microbiota bacteriana normal da superfície ocular, estesiometria corneal, tonometria, espessura da córnea, ultrassonografia em modo B do bulbo ocular, análise de fotografia do fundo de olho e, por fim, mensuração da fissura corneana e palpebral. O conhecimento das variações anatômicas normais, resultados biométricos e parâmetros normais para testes diagnósticos oftálmicos nunca antes explorados nesta espécie podem auxiliar médicos veterinários e particularmente oftalmologistas veterinários no diagnóstico de várias doenças oculares que eventualmente ocorrem. O aoudad é um capríneo selvagem considerado ameaçado de extinção em seu habitat natural, entretanto está presente em diversos parques zoológicos ao redor do mundo e também em parques de caças legalizados. O terceiro e último capítulo consiste em um estudo histopatológico do carcinoma espinocelular ocular bovino (CEOB), uma importante doença neoplásica de ocorrência mundial, que impacta no bem-estar animal e que também traz sérios efeitos deletérios na produção de gado bovino. Trata-se da primeira investigação realizada exclusivamente com casos de CEOB diagnosticados no Estado do Paraná e em Santa Catarina. Foi realizada a classificação histológica de 10 casos diagnosticados de CEOB no LABOCO, sendo que esta foi uma tentativa pioneira de produzir um esquema de graduação histológica plausível em estudo brasileiro de CEOB. Curiosamente os nossos resultados de análise fenotípica estão em desacordo com dados de investigações anteriores, visto que seis de dez casos de CEOB foram observados em animais com olhos bem pigmentados. O parâmetro de anaplasia não se correlacionou bem com invasão tumoral mais profunda e índice mitótico, isso ocorreu com a maior parte das amostras analisadas. Uma associação entre a classificação histológica e técnicas moleculares pode ser alternativa viável para investigar e prever o comportamento do CEOB no futuro.

The present dissertation encompasses three different texts contributing to the current scientific ophthalmology knowledge of ungulate artiodactyls. Each of these papers became a chapter in the present dissertation. All studies were conducted by the author and collaborators from Laboratory of Comparative Ophthalmology (LABOCO), Federal University of Paraná (FUPR). The first chapter reports a previously undescribed anatomic structure, an optic spine on the sphenoid bone in Old World camelids. Concerning the importance of this novel finding, the observation of this osseous structure on the bony orbit of camels and dromedaries (Artiodactyla) when combined with the previous finding of a similar anatomic structure in a bat (Chiroptera) may provide further support to the close proximity of these two apparently very distinct animal orders in the phylogenetic tree. The exact function of this osseous spine remains to be further investigated but seems to serve as an attachment for extraocular muscles. The second chapter describes normal anatomic eye features, biometry and ophthalmic test parameters for the aoudad (Ammotragus lervia). Its eyes are large and laterally placed in the head with several specialized anatomic features attributed to be evolutionary adaptations for grazing, which were also previously observed in other prey species of ungulates, such as horses, sheep and cattle. Normal values for commonly used ophthalmic tests were established, namely: Schirmer tear test (STT), normal ocular surface bacterial microbiota, corneal esthesiometry, tonometry, corneal thickness, B-mode ultrasonography of the globe, fundus photography analysis and lastly corneal and palpebral fissure measurements. Knowledge of the normal anatomic variations, biometric findings and normal parameters for ocular diagnostic tests may assist veterinarians and particularly veterinary ophthalmologists in the diagnosis of several ocular diseases that eventually occur in this previously unexplored wild caprid species, which is considered under threat of extinction in its natural habitat but rather widespread in zoological parks throughout the world and also used as game in legalized hunting parks. The third and last chapter consists of a histopathological study of the bovine ocular squamous cell carcinoma (OSSC), a worldwide prevalent and serious neoplastic disease, while having negative effects on animal welfare also have profoundly deleterious effects on cattle production. This was the first investigation performed exclusively in OSCC cases diagnosed in the State of Paraná and Santa Catarina. A histologic classification of 10 OSCC cases referred to LABOCO was performed. This is a first attempt to produce an acceptable histological grading scheme in a Brazilian OSCC study. Curiously our findings are in disagreement with previous investigations since six out of ten OSCC cases were observed in animals with heavily pigmented eyes. Awkwardly, anaplasia parameters did not correlate well with tumor invasion of deeper tissues and mitotic indexes in most samples analyzed. Possibly, an association between histological grading and molecular techniques such as in situ hybridization and immunohistochemistry would be a feasible route to investigate and predict OSCC behavior in the future.