Conidiobolomicose em ovinos no Estado do Acre, Brasil / Conidiobolomycosis in sheep in the state of Acre, Brazil

A criação de ovinos tem expandido no mercado de carne e subprodutos no Brasil. A conidiobolomicose é uma zigomicose considerada uma doença emergente, que acomete humanos e animais. Por ser uma doença com letalidade alta e pela gravidade das lesões, ela causa perdas econômicas relevantes na ovinocultura. Este trabalho tem como objetivo descrever os aspectos epidemiológicos, clínicos, histopatológicos e microbiológicos da conidiobolomicose em um rebanho de ovinos no município de Porto Acre (AC). Descreve-se um surto de conidiobolomicose que ocorreu entre os meses de abril e julho de 2014. A propriedade possuía 60 ovinos da raça Santa Inês e cinco desses animais adoeceram. Clinicamente os animais doentes apresentavam dificuldade respiratória, corrimento nasal seroso a mucossanguinolento e, por vezes exoftalmia. Foram retirados fragmentos da lesão circunscrita do pulmão esquerdo dos ovinos necropsiados os quais foram submetidos à análise microbiológica e histopatológica. O fungo isolado apresentou caracterização macro e micromorfológica identificados como Conidiobolus lamprauges. Pelos sinais clínicos, achados epidemiológicos, análise histopatológica e, principalmente, pelo isolamento do agente, a enfermidade dos ovinos neste estudo foi identificada como conidiobolomicose causada por Conidiobolus lamprauges.(AU)

Sheep farming has expanded in the meat and by-products market in Brazil. Conidiobolomycosis is a zygomycosis considered an emerging disease, which affects humans and animals. Because it is a disease with high lethality and the severity of injuries, it causes significant economic losses in sheep farming. This work aims to describe the epidemiological, clinical, histopathological and microbiological aspects of conidiobolomycosis in a flock of sheep in Porto Acre city (Acre state of North Brazil). An outbreak of conidiobolomycosis occurred between April and July 2014. The property had 60 Santa Inês sheep and five of these animals became ill. Clinically, the sick animals had breathing difficulties, a serous to mucous-bloody runny nose and, at times, exophthalmos. Fragments of the circumscribed lesion of the left lung were removed from the necropsied sheep and submitted to microbiological and histopathological analysis. The isolated fungus showed macro and micromorphological characterization identified as Conidiobolus lamprauges. Due to clinical signs, epidemiological findings, histopathological analysis and, mainly, the isolation of the agent, the disease of the sheep in this study was identified as conidiobolomycosis caused by Conidiobolus lamprauges.(AU)

Conidiobolomycosis in ovine in Southeast Bahia - Brazil

Background: Conidiobolomycosis is a highly lethal, granulomatous disease that primarily affects the respiratory systemof sheep. The etiological agents are fungi of the genus Conidiobolus, including Conidiobolus coronatus, C. incongruus,and C. lamprageus. In Northeast Brazil, this disease is particularly important considering the significant impact sheepand goats have on the regional economy. The present report describes the occurrence of conidiobolomycosis in two sheepfrom the same property in the Itabuna-BA region that were referred to the Veterinary Hospital of the State University ofSanta Cruz, Bahia, Brazil.Case: The primary complaint in both animals was bilateral bloody nasal discharge over a period of approximately 15 daysand frequent coughing. On physical examination, the animals exhibited “goosebumps” and opaque hair, with a body scoreof 1 (scale, 1-5), mild dehydration (7%), apathy, frequent cough with putrid odor, bilateral serosanguinolent nasal discharge,craniofacial asymmetry, expiratory dyspnea, enlargement of the retropharyngeal lymph nodes, audible pulmonary rales,and pain on percussion of the pulmonary field. A therapeutic support protocol was established to stabilize the animals untilthe results of complete blood count, radiography, and microbiological evaluation of nasal content were available. Definitive diagnosis of disease was made by direct positive mycological examination, that revealed the presence of wide rarelyseptate hyphae, and isolation and cultivation of the fungus Conidiobolus sp., with microculture on slides and staining withlactophenol blue cotton. Due to disease diagnosis and the severity of injuries observed, the prognoses of both animals wereconsidered to be unfavorable and led to euthanasia and necropsy. At necropsy, the most...(AU)

Conidiobolomycosis in ovine in Southeast Bahia - Brazil

Background: Conidiobolomycosis is a highly lethal, granulomatous disease that primarily affects the respiratory systemof sheep. The etiological agents are fungi of the genus Conidiobolus, including Conidiobolus coronatus, C. incongruus,and C. lamprageus. In Northeast Brazil, this disease is particularly important considering the significant impact sheepand goats have on the regional economy. The present report describes the occurrence of conidiobolomycosis in two sheepfrom the same property in the Itabuna-BA region that were referred to the Veterinary Hospital of the State University ofSanta Cruz, Bahia, Brazil.Case: The primary complaint in both animals was bilateral bloody nasal discharge over a period of approximately 15 daysand frequent coughing. On physical examination, the animals exhibited “goosebumps” and opaque hair, with a body scoreof 1 (scale, 1-5), mild dehydration (7%), apathy, frequent cough with putrid odor, bilateral serosanguinolent nasal discharge,craniofacial asymmetry, expiratory dyspnea, enlargement of the retropharyngeal lymph nodes, audible pulmonary rales,and pain on percussion of the pulmonary field. A therapeutic support protocol was established to stabilize the animals untilthe results of complete blood count, radiography, and microbiological evaluation of nasal content were available. Definitive diagnosis of disease was made by direct positive mycological examination, that revealed the presence of wide rarelyseptate hyphae, and isolation and cultivation of the fungus Conidiobolus sp., with microculture on slides and staining withlactophenol blue cotton. Due to disease diagnosis and the severity of injuries observed, the prognoses of both animals wereconsidered to be unfavorable and led to euthanasia and necropsy. At necropsy, the most...

Epidemiological, clinical and diagnostic aspects of sheep conidiobolomycosis in Brazil / Aspectos epidemiológicos, clínicos e de diagnóstico da conidiobolomicose ovina no Brasil

Conidiobolomycosis is an emerging disease caused by fungi of the cosmopolitan genus Conidiobolus . Particular strains of Conidiobolus coronatus, Conidiobolus incongruus and Conidiobolus lamprauges , mainly from tropical or sub-tropical origin, cause the mycosis in humans and animals, domestic or wild. Lesions are usually granulomatous and necrotic in character, presenting two clinical forms: rhinofacial and nasopharyngeal. This review includes the main features of the disease in sheep, with an emphasis on the epidemiology, clinical aspects, and diagnosis of infections caused by Conidiobolus spp. in Brazil. In this country, the disease is endemic in the Northeast and Midwest, affecting predominantly woolless sheep breeds and occasioning death in the majority of the studied cases. The species responsible for infections of sheep are C. coronatus and C. lamprauges and the predominant clinical presentation is nasopharyngeal. These fungal infections are very important, since they compromise the health status of the sheep flock and cause serious economic losses to the sheep industry. Thus, research is needed to investigate faster tools for diagnosis and effective methods for the control and treatment of conidiobolomycosis.(AU)

Conidiobolomicose é uma enfermidade emergente causada por fungos cosmopolitas do gênero Conidiobolus . Isolados de Conidiobolus coronatus, Conidiobolus incongruus e Conidiobolus lamprauges, principalmente de origem tropical e subtropical, afetam humanos, animais domésticos e silvestres. As lesões da conidiobolomicose normalmente são de caráter granulomatoso e necrótico, apresentando-se sob duas formas clínicas: rinofacial e nasofaríngea. O presente artigo tem como objetivo revisar as principais características da doença em ovinos, particularizando a epidemiologia, assim como os aspectos clínicos e o diagnóstico das infecções causadas por Conidiobolus spp. no Brasil. Neste País, a enfermidade é endêmica nas regiões nordeste e centro-oeste, afetando ovinos predominantemente de raças deslanadas, ocasionando a morte na grande maioria dos casos estudados. As espécies do fungo responsáveis pelas infecções em ovinos são C. coronatus e C. lamprauges e a forma clínica predominante é a nasofaríngea. Tais infecções fúngicas são muito importantes, uma vez que comprometem o status sanitário do rebanho ovino e acarretam sérios prejuízos econômicos à ovinocultura. Dessa forma, pesquisas são necessárias para investigar ferramentas rápidas de diagnóstico e métodos eficazes de controle e tratamento da conidiobolomicose.(AU)

Proteínas imunorreativas de Conidiobolus lamprauges isoladas de ovinos infectados naturalmente / Immunoreactive proteins of Conidiobolus lamprauges isolated from naturally infected sheep

O estudo de conidiobolomicose ovina tem sido realizado nos seus aspectos clínicos, epidemiológicos, patológicos e moleculares. Informações, entretanto, sobre a resposta imune do hospedeiro na infecção por Conidiobolus lamprauges são inexistentes. Este estudo teve por objetivo a identificação de proteínas imunorreativas que possam desempenhar papel importante na resposta imune de ovinos naturalmente infectados por C. lamprauges. Para a caracterização protéica e imunológica foi utilizada a cepa de C. lamprauges (FIOCRUZ-INCQS 40316) isolada de ovino com sinais clínicos de conidiobolomicose no Estado do MT e cinco amostras de soro de ovinos infectados naturalmente pelo fungo. A presença de anticorpos IgG foi observada em todos os animais doentes com títulos reagentes em diluições de até 1:1.600. Na técnica do immunoblot, o perfil antigênico frente aos soros ovinos com a doença apresentou doze bandas reativas, com massas moleculares variando de 35 a 198 kDa. Dentre estas, a proteína de 198 kDa foi reativa em 3 soros de ovinos e a de 53 kDa apresentou a maior intensidade comparativamente com outras bandas, sendo provavelmente imunodominante. Amostras de soro de animais sadios não apresentaram reatividade demostrando a especificidade da técnica. A presença de proteínas antigênicas de C. lamprauges e IgG específicos em soros de ovinos observados no presente trabalho poderá auxiliar no desenvolvimento de métodos de diagnóstico precoces e na utilização de proteínas candidatas a vacinas para o controle e prevenção da infecção em animais e humanos.(AU)

The study of sheep conidiobolomycosis has been carried out in its clinical, epidemiological, pathological and molecular aspects. Information, however, about the host immune response in infection Conidiobolus lamprauges is absent. This study aimed to identify immunoreactive proteins that may play an important role in the immune response of sheep naturally infected by C. lamprauges. For protein and immunological characterization, C. lamprauges (strain FIOCRUZ-INCQS 40316) isolated from a sheep with clinical signs of conidiobolomycosis in the MT state and five sera samples of naturally infected sheep were used. The presence of IgG antibody was observed in all patients with reagent titers in dilutions up to 1:1600. In immunoblot technique, the antigenic profile against infected sheep sera showed twelve reactive bands with molecular weights ranging from 35 to 198 kDa. Among them, the 198 kDa protein was reactive against sera from three sheep and the 53 kDa showed increased intensity compared to other bands probably being immunodominant. Healthy animal serum samples showed no reactivity demonstrating the specificity of the technique. The presence of antigenic proteins of C. lamprauges and specific IgG in sheep sera observed in this study may assist in the development of early diagnostic methods and the use of protein as candidate vaccines for the control and prevention of infection in animals and human.(AU)

Aspectos epidemiológicos da conidiobolomicose em ovinos na região semiárida do Nordeste do Brasil / Epidemiological aspects of conidiobolomycosis in sheep in the Northeastern Brazilian semiarid region

Com o objetivo de determinar aspectos epidemiológicos da conidiobolomicose dos ovinos, foi realizado um estudo caso-controle em 27 propriedades (16 com casos e 11 controles) nos estados da Paraíba e do Rio Grande do Norte. Das 16 propriedades com casos, em nove (56,3%), ocorreu apenas um foco e em sete (43,8%) aconteceram dois, totalizando 23 focos no período do estudo. Em 20 focos, foi diagnosticada somente conidiobolomicose e, em três, além de casos de conidiobolomicose, ocorreram casos de pitiose rinofacial. Nos focos de conidiobolomicose, a morbidade variou de 0,7% a 73,3% e a letalidade foi de 100%. Treze focos (56,5%) aconteceram no período chuvoso (janeiro a maio), seis (26,1%) ocorreram no período seco (junho a dezembro) e, em quatro, não foi determinada a época de ocorrência. Em todas as propriedades com casos, os animais tinham acesso a açudes, durante todo o ano ou por períodos de 2-8 meses. Na análise univariada dos fatores de risco referentes aos focos de conidiobolomicose, as variáveis associadas foram: pastejo dos animais às margens dos açudes; período de pastejo às margens dos açudes; presença de matéria vegetal constituída por plantas aquáticas; pressão de pastejo; e raça, afetando predominantemente a raça Santa Inês. Conclui-se que a associação de fatores como pastejo constante em áreas úmidas com matéria vegetal decomposta e solo rico em matéria orgânica expõe os animais à infecção por Conidiobolus spp. e predispõe à ocorrência de focos. A implantação de pastagens para corte, nas margens dos açudes, pode ser uma medida eficaz de controle da conidiobolomicose.(AU)

With the objective to determine the epidemiological aspects of conidiobolomycosis and rhinofacial pythiosis in sheep, a case-control study was conducted in 27 farms (16 cases and 11 controls) in the states of Paraíba and Rio Grande do Norte. In nine (56.3%) farms only one outbreak was observed and in seven, two outbreaks occurred, totaling 23 outbreaks. In 20 farms only cases of conidiobolomycosis occurred and in three farms cases of conidiobolomicosis occurred together with cases of pythiosis. In conidiobolomycosis, morbidity ranged from 0.7% to 73.3% and lethality rate was 100%. Thirteen outbreaks (56.3%) occurred in the rainy season (January to May), six (26.1%) in the dry season (June to December) and in four it was not informed. In all farms with cases, sheep had access to ponds for the whole year or for periods of 2-8 months. In the univariate analysis of risk, the variables associated with the occurrence of conidiobolomycosis were: animal grazing on the borders of the ponds; presence of vegetable matter consisting mainly of aquatic plants in the pond borders; period of grazing on the pond borders; high grazing pressure; and predominant breed of sheep, being the Santa Inês breed the most affected. It was concluded that the combination of factors such as continuous grazing in wetlands with decomposed vegetable matter and soil rich in organic matter exposes the animals to Conidiobolus spp. and predisposes to the occurrence of conidiobolomycosis. The establishment of pastures for cutting at the borders of the ponds can be an effective measure to control conidiobolomycosis.(AU)

Utilização de três métodos imuno-histoquímicos na detecção de aspergilose e zigomicose em animais / Usage of three immunohistochemical methods in the detection of aspergillosis and zygomycosis in animals

Visando a otimização do uso da técnica de imuno-histoquímica (IHQ) na detecção de Aspergillus spp. e zigomicetos (membros da família Mucoraceae), utilizaram-se dois anticorpos monoclonais fungo-específicos em fragmentos de tecidos de animais (fixados em formol e embebidos em parafina) com diagnóstico histomorfológico prévio de aspergilose e zigomicose, os quais foram submetidos a três sistemas de detecção diferentes (dois biotinilados e um não biotinilado). Os dois anticorpos apresentaram alta especificidade e sensibilidade nos tecidos examinados. Não ocorreram reações cruzadas entre os anticorpos utilizados e os agentes etiológicos avaliados (incluindo casos de aspergilose, zigomicose, candidíase e pitiose). No entanto, reações inespecíficas foram observadas nas hifas em alguns casos, as quais puderam ser eliminadas através de um dos métodos de detecção utilizados. Para a aspergilose, o método da estreptavidina-biotina-fosfatase alcalina não apresentou reações inespecíficas nas hifas. Enquanto que nos casos de zigomicoses, as reações inespecíficas não ocorreram no método por polímero (não biotinilado). A técnica de IHQ mostrou-se uma ferramenta muito útil na detecção e confirmação dos casos de aspergilose e zigomicose neste estudo retrospectivo.(AU)

Aiming to optimize the usage of the immunohistochemical technique (IHC) in the detection of Aspergillus spp. and zygomycetes (members of the Mucoraceae family), two fungal-specific monoclonal antibodies were used in tissue fragments (formalin-fixed paraffin-embedded), previously diagnosed by histomorphology as aspergillosis and zygomycosis. Tissues were submitted to three different detection systems (two biotinilated and one non biotinilated). Both antibodies showed high specificity and sensitivity in the examined tissues. No cross-reactions were observed between the antibodies used and the agents evaluated (including cases of aspergillosis, zygomycosis, candidiasis and pythiosis). However, nonspecific reactions in hyphae were observed in some cases, but were eliminated by mean of one of the detection systems used. In the aspergillosis cases, with the streptavidin-biotin-alkaline phosphatase method, nonspecific reactions were not observed. In the zygomycosis cases, nonspecific reactions did not occur using a polymer (nonbiotinilated). The IHC technique showed to be a useful tool detecting and confirming aspergillosis and zygomycosis in this retrospective study.(AU)

Ocorrência de micoses e pitiose em animais domésticos: 230 casos / Occurrence of mycoses and pythiosis in domestic animals: 230 cases

A retrospective study was performed to determine the main mycoses and oomycosis that affected domestic animals diagnosed in the Laboratório de Patologia Veterinária (LPV) of the Universidade Federal de Santa Maria (UFSM). A total of 29,686 exams (9,487 necropsy reports and 20,199 biopsy reports) performed between January 1990 and December 2012 were analyzed. Two hundred and thirty cases (78% of mycoses and 22% of pythiosis) were found. Data about epidemiology, clinical signs, gross and histologic lesions were obtained from the reports. In two cases the fungi observed were not identified. The main diseases observed, in descending order of prevalence, were: pythiosis, candidiasis, aspergillosis, zygomycosis, dermatophytosis, mallasseziosis, cryptococcosis, megabacteriosis, and sporothrichosis. Others diseases with only one cases each were histoplasmosis and pneumocystosis. Pythiosis affected mainly horses and the mycosis affected mainly companion animals (dogs and cats).(AU)

Para determinar as principais micoses e oomicoses que acometeram animais domésticos na área de abrangência do Laboratório de Patologia Veterinária (LPV) da Universidade Federal de Santa Maria (UFSM), foi realizado um estudo retrospectivo em 9.487 protocolos de necropsias e 20.199 exames histopatológicos (totalizando 29.686 casos), realizados no LPV-UFSM, entre janeiro de 1990 e dezembro de 2012. Do total de protocolos analisados, 230 apresentaram micoses ou pitiose (oomicose), sendo 179 casos (78%) de micoses e 51 casos (22%) de pitiose. Os protocolos foram revisados para determinar os principais achados referentes à epidemiologia, sinais clínicos e às alterações macroscópicas e microscópicas. Em dois casos (0,8%) não foi possível determinar o gênero ou o grupo do fungo observado. As principais doenças diagnosticadas, em ordem decrescente de prevalência, foram: pitiose, candidíase, aspergilose, zigomicose, dermatofitose, malasseziose, criptococose, megabacteriose e esporotricose. Outras doenças diagnosticadas numa única ocorrência cada foram histoplasmose e pneumocistose. Os equinos foram os mais acometidos pela pitiose e os animais de companhia (cães e gatos) foram os mais acometidos pelas micoses.(AU)

MUCORMICOSE E CANDIDÍASE EM CÃES

Ultimamente, as doenças fúngicas tem sido responsáveis por elevada mortalidade na espécie canina. A zigomicose e a candidíase estão inseridas entre as principais micoses que eventualmente podem provocar infecções sistêmicas e fatais em indivíduos imunossuprmidos. Esta Dissertação, foi elaborada em dois capítulos, composta por dois artigos originais. O primeiro submetido à Journal of Comparative Pathology relata dois casos de infecções por fungos da ordem Mucorales com envolvimento sistêmico e hepatogástrico em cães, descrevendo os aspectos epidemiológicos, clínicos e patológicos. A doença ocorreu em cães Poodle, machos com idade de um e dez anos. As alterações clínicas incluíam sinais respiratórios, neurológicos e gastrointestinais que progrediram evoluindo para morte em três a dezenove dias. Macroscopicamente, no caso 1, havia áreas irregulares amareladas ou avermelhadas e elevadas que aprofundavam-se ao corte nos pulmões, coração e encéfalo. No caso 2, as alterações consistiam em ruptura de estômago com bordos e mucosa gástrica recobertos por espesso material brancacento e friável, além de múltiplas áreas extensas nodulares e cavitações profundas amarelo-brancacentas na superfície capsular do fígado. Histologicamente, foram observados piogranulomas em todos os órgãos afetados, associados a hifas fúngicas, vasculite e trombose. O diagnóstico de mucormicose foi realizado através das lesões microscópicas associadas às características morfotintoriais das hifas. As hifas foram fortemente imunomarcadas pelo anticorpo monoclonal anti-Rhizopus arrhizus. O segundo artigo, foi submetido à revista Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinária e Zootecnia, descreve os aspectos epidemiológicos, clínicos e patológicos de três casos de candidíase sistêmica associada a cinomose em cães. Os cães acometidos tinham idade de quatro meses a cinco anos. Desses, dois eram cães sem raça definida e um Poodle. As manifestações clínicas eram predominantemente neurológicas, seguidas de alterações inespecíficas com evolução de cinco a trinta dias. Na necropsia havia áreas branco-amareladas circundadas por bordas avermelhadas nos rins, coração, fígado, linfonodo submandibular e pulmão. Adicionalmente, no caso 2, havia material grumoso brancacento aderido à superfície epicárdica, artéria aorta, saco pericárdico e baço. Além de infarto no testículo direito, hidroureter, pielonefrite e hidronefrose. No caso 1, havia aumento da articulação carpo-metacárpica direita com conteúdo avermelhado e turvo. No encéfalo, as lesões caracterizavam-se por áreas enegrecidas e/ou avermelhadas e friáveis. Microscopicamente, as lesões consistiam em áreas de necrose e hemorragia, circundadas por neutrófilos associada a vasculite, congestão, trombose, infarto e fungos com vários padrões morfológicos que incluíam leveduras, pseudo-hifas e hifas. Os três cães estavam imunossuprimidos decorrente da infecção concomitante pelo vírus da cinomose canina. Os casos 2 e 3 foram diagnosticados ainda com dermatofitose generalizada e linfoma, respectivamente. O diagnóstico de candidíase sistêmica foi realizado através das características morfotintoriais do agente e imunomarcação pelo anticorpo policlonal anti-Candida albicans. Com a realização desses trabalhos foi possível constatar que a mucormicose e a candidíase são doenças esporadicamente diagnosticadas na rotina do Laboratório de Patologia Animal do Hospital Veterinário Universitário Prof. Dr. Ivon Macêdo Tabosa da UFCG. Embora pouco frequentes, essas micoses constituem importantes causas de morte em cães.

Lately, fungal diseases have been responsible for high mortality in the canine species. The zygomycosis, and candidiasis are inserted between the main mycoses which eventually may cause systemic and fatal infections in immunosuppressed individuals. This Dissertation, was elaborated in two chapters, composed by two original articles. The first one submitted to the Journal of Comparative Pathology, describe two cases of fungal infection of the order Mucorales with systemic and hepatogastric involvement in dogs. The disease occurred in Poodle dogs, males aged one and ten years. The clinical signs included respiratory, neurological and gastrointestinal symptoms that progressed to death in three and nineteen days. Macroscopically, in case 1, there were irregular yellowish or reddish raised areas that deepened the cut in the lungs, heart and brain. In case 2, the alterations consisted of rupture of the stomach with borders and gastric mucosa covered by a thick and whitish, but also friable material, in addition to multiple extensive nodular areas and deep white-yellowish cavitations on the capsular surface of the liver. Histologically, piogranulomas were observed in all affected organs, associated with fungal hyphae, vasculitis and thrombosis. The diagnosis of mucormycosis was based on the microscopic lesions associated with the morphotinctorial features of the hyphae. The hyphae were strongly immunomarked by the anti-Rhizopus arrhizus monoclonal antibody. The second article, was submitted to the journal Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinária e Zootecnia, describes the epidemiological, clinical and pathological aspects of three cases of systemic candidiasis associated with distemper in dogs. The affected dogs were between four months and five years. Of these, two were without defined breed dogs and one Poodle. The clinical manifestations were predominantly neurological, followed by nonspecific changes with evolution from five to thirty days. At necropsy there were yellowish-white areas surrounded by reddish edges in the kidneys, heart, liver, submandibular lymph node and lung. In addition, in case 2, there were lumpy materials whitish adhered to the epicardial surface, aortic artery, pericardial sac and spleen. In addition to infarction in the right testicle, hydroureter, pyelonephritis and hydronephrosis. In case 1, there was an increase in the right carpal-metacarpal joint, that when cutting reddish and cloudy content flowed. In the encephalon, the lesions were characterized by blackened and/or reddish and friable areas. Microscopically, the lesions consisted of areas of necrosis and hemorrhage, surrounded by neutrophils associated with vasculitis, congestion, thrombosis, infarction, and fungi with various morphological patterns including yeasts, pseudo-hyphae and hyphae. The three dogs were immunosuppressed due to the concomitant infection with the distemper virus. Cases 2 and 3 were diagnosed still with generalized dermatophytosis and lymphoma, respectively. The diagnosis of systemic candidiasis was made through the morphotinctorial characteristics of the agent and immunostaining by the polyclonal anti-Candida albicans antibody. With the accomplishment of these works it was possible to verify that mucormycosis and candidiasis are diseases sporadically diagnosed in the routine of the Laboratório de Patologia Animal of the Hospital Veterinário Universitário Prof. Dr. Ivon Macêdo Tabosa of the UFCG. Although uncommon, these mycoses are important causes of death in dogs.

Development and application of polymerase chain reaction test for detection of Conidiobolus lamprauges / Desenvolvimento e aplicação da reação em cadeia da polimerase para detecção de Conidiobolus lamprauges

Conidiobolomycosis is a granulomatous disease caused by the fungus Conidiobolus spp. in humans and animals. Traditional technique for diagnosis of the disease is isolation of the agent associated with the presence of typical clinical signs and pathological conditions. The aim of this study was to describe the development of a specific polymerase chain reaction (PCR) test for Conidiobolus lamprauges to detect the fungus in clinical samples. Samples from suspected animals were collected and submitted to isolation, histopathological analysis and amplification by PCR. DNA from tissues was subjected to PCR with fungi universal primers 18S rDNA gene, and specific primers were designed based on the same gene in C. lamprauges that generated products of about 540 bp and 222 bp respectively. The culture was positive in 26.6% of clinical samples. The PCR technique for C. lamprauges showed amplification of DNA from fresh tissues (80%) and paraffin sections (44.4%). In conclusion, the PCR technique described here demonstrated a high sensitivity and specificity for detection of fungal DNA in tissue samples, providing a tool for the rapid diagnosis of C. lamprauges. (AU)

A conidiobolomicose é uma doença granulomatosa causada pelo fungo Conidiobolus spp., observada em humanos e animais. As técnicas tradicionais de diagnóstico da doença são o isolamento do agente associado à presença de sinais clínicos típicos e condições patológicas. O objetivo deste trabalho é descrever o desenvolvimento de um teste da reação em cadeia da polimerase (PCR) específico para Conidiobolus lamprauges em amostras clínicas. As amostras de animais suspeitos foram coletadas e submetidas ao isolamento, análise histopatológica e amplificação pela PCR. O DNA de tecidos foi submetido a PCR com os iniciadores universais de fungos baseados no gene 18S rDNA e iniciadores específicos foram concebidos com base no mesmo gene em C. lamprauges que gerou produtos de aproximadamente 540 pb e 222 pb, respectivamente. A cultura foi positiva em 26,6% das amostras clínicas. A técnica de PCR para C. lamprauges mostrou a amplificação de DNA a partir de tecidos frescos (80%) e secções de parafina (44,4%). Em conclusão, a técnica de PCR aqui descrita demonstrou elevada sensibilidade e especificidade na detecção de DNA de fungos em amostras de tecido, proporcionando uma ferramenta rápida para o diagnóstico de C. lamprauges. (AU)

Conidiobolomicose causada por Conidiobolus lamprauges em ovinos no Estado de Santa Catarina / Conidiobolomycosis caused by Conidiobolus lamprauges in sheep in the state of Santa Catarina, Brazil

Descreve-se um surto de conidiobolomicose em ovinos no Estado de Santa Catarina. O surto ocorreu entre os meses de dezembro e março de 2006, no município de Santo Amaro da Imperatriz, região litorânea do Estado. A propriedade possuía 75 ovinos da raça Santa Inês e seis desses animais adoeceram. Clinicamente os animais doentes apresentavam dificuldade respiratória, corrimento nasal seroso a mucossanguinolento e, por vezes exolftalmia. Na necropsia verificou-se uma massa amarelada na região etmoidal e adjacências que, às vezes, atingia os linfonodos regionais, cérebro, globo ocular e pleura. Microscopicamente a massa caracterizava-se por infiltrado inflamatório granulomatoso com áreas necróticas associadas a hifas largas pouco ramificadas. Através de exame molecular detectou-se DNA de Conidiobolus lamprauges. Os aspectos clínicos, epidemiológicos, macroscópicos, microscópicos e moleculares caracterizam a conidiobolomicose causada por Conidiobolus lamprauges em ovinos.(AU)

An outbreak of conidiobolomycosis affecting sheep in the State of Santa Catarina, Southern Brazil is reported. The disease occurred in six Santa Inês breed sheep from a flock of 75 during the rainy season. Common clinical signs were noisy respiration and dyspnea, serous to mucosanguineous nasal discharge and exophthalmus. At necropsy there was a dense yellow mass in the nasopharyngeal area affecting the ethmoidal region, turbinate bones and occasionally limph nodes, central nervous system and pleura. Histopathologycally there was multifocal granulomas whith an eosinophilic necrotic reaction containing ribbon type hyphae similar to zygomycetous fungi. At molecular examination Conidiobolus lamprauges DNA was detected. The clinical, epidemiological, macroscopical, microscopical and molecular aspects characterize conidiobolomycosis caused by Conidiobolus lamprauges in sheep.(AU)

Proteínas imunorreativas de Conidiobolus lamprauges e variabilidade genética de isolados clínicos de ovinos naturalmente infectados.

O estudo de conidiobolomicose ovina tem sido realizado nos seus aspectos clínicos, epidemiológicos, patológicos e moleculares. Entretanto, informações sobre a resposta imune do hospedeiro na infecção por Conidiobolus lamprauges e da variabilidade genética da espécie são escassos. O presente trabalho descreve a identificação de proteínas imunorreativas de C. lamprauges pela técnica de western blot onde foram identificadas doze bandas reativas, com massas moleculares variando de 35 a 198 kDa. Dentre estas, a proteína de 198 kDa reativa em três soros de ovinos e a de 53 kDa que apresentou a maior intensidade comparativamente com outras bandas, sendo provavelmente imunodominante. Através da análise da variabilidade genética de sete isolados de C. lamprauges oriundos de casos clínicos de conidiobolomicose de diferentes regiões do Brasil pela técnica de Random Amplification of Polymorphic DNA (RAPD) houve padrões de amplificações variados sendo observadas de 4 a 17 amplicons. Ao analisar os perfis gerados foi observada variabilidade genética entre os isolados, sendo possível a separação em cinco grupos representativos em relação à forma clínica da doença e a origem geográfica. Os dados gerados podem contribuir para o entendimento dos mecanismos patogênicos e de resposta imune do hospedeiro e sobre os aspectos eco-epidemiológicos de C. lamprauges.

Conidiobolomycosis in sheep has been reported in tropical and subtropical climates with high humidity and is associated with high lethality and economic losses. In Brazil, outbreaks of this disease have been described in the Northeast, Midwest and South regions, mainly in ovine with two clinical forms: rhinopharyngeal and rhinofacial. In addition to occurring in regions of Brazil in different clinical forms, no data about the genetic diversity of Conidiobolus lamprauges is available. Thus, the aim of this study was to evaluate seven isolates of C. lamprauges from ovine clinical cases of conidiobolomycosis using five primers with the random amplified polymorphic DNA (RAPD) technique. Amplicons were observed in all isolates and ranged from 200 to 2,500 bp, with primer p50 leading to the most polymorphic amplicons. Phylongenetic analysis detected four groups (A, B, C and D) with 36% similarity between isolates. MatoGrosso isolates were in groups A and B, and the rhinofacial form was present only in group B. Genetic variability in Brazilian isolates of Conidiobolus lamprauges is likely related both to the clinical form of the disease and the geographic location.

Conidiobolomicose em ovinos no Estado de Mato Grosso / Conidiobolomycosis in sheep in the state of Mato Grosso, Brazil

Relatam-se os achados epidemiológicos, clínicos, patológicos e micológicos de conidiobolomicose em ovinos no Estado de Mato Grosso. A doença ocorreu em uma propriedade no município de Nobres, em um rebanho com 40 ovelhas adultas, entre os meses de janeiro a junho de 2007. Aproximadamente 30 por cento dos ovinos da propriedade adoeceram e todos os doentes morreram em curso clínico de 2-5 semanas. O quadro clínico foi caracterizado por apatia, emagrecimento, dificuldade respiratória com dispnéia, respiração ruidosa e oral, secreção nasal mucosa ou sero-sanguinolenta, exoftalmia unilateral, por vezes com cegueira, e morte. Havia desaparecimento de etmoturbinados com substituição por tecido bran-cacento, finamente granular, multilobulado e friável infil-trando-se na lâmina cribiforme, no septo nasal e nas coa-nas em todos os ovinos necropsiados. Lesões similares foram encontradas em linfonodos regionais (2 casos), pulmões (3), encéfalo (2) e em linfonodos do abomaso (1). Microscopicamente havia inflamação granulomatosa da região rinocerebral, caracterizada por necrose, proliferação de tecido conjuntivo, infiltrado de neutrófilos, eosinófilos, células epitelióides e células gigantes multinucleadas freqüentemente circundando material Splendori-Hoeppli, onde havia imagens negativas de hifas. Na impregnação pela Prata-Metenamina, as hifas tinham septos e ramificações escassas e irregulares, com dilatação balonosa terminal e com forte demarcação de contornos. Iso-lou-se de tecido nasal de quatro ovinos Conidiobolus sp.(AU)

The epidemiological, clinical, pathological and mycological findings of an outbreak of conidiobolomycosis in a flock of 40 Santa Ines sheep, in the state of Mato Grosso, Brazil, are reported. The illness occurred in the municipality of Nobres during January-June, 2007, resulting in death of about 30 percent of the affected sheep within 2-5 weeks. The clinical signs were characterized by apathy, weight loss, labored and noisy breathing with dyspnea, and mucous or serohemorrhagic nasal discharge. In three sheep there was unilateral exophthalmia, keratitis and corneal ulceration. A firm whitish, multi-lobulated, friable growth was evident in the ethmoturbinate region at the coronal sections of the head from six affected sheep. In all sheep the choana had similar nodular infiltration which resulted in local obstruction. In three of those there was exophthalmia. There was infiltration in the cribiform plate and brain (2 cases), regional lymph nodes (2), lungs (3), and abomasums (1). Microscopic findings were granulomatous inflammation of the rhinoetimoidal region, with necrosis, lymphocytic infiltration, epithelioid multinucleated giant cells and fibrovascular tissue, surrounding Splendore-Hoeppli material wich contained unstained ghost images of hyphae. The methenamine-silver stain uncover fungi hyphae, rarely ramified with bulbous dilatation in their extremities. Conidiobolus sp. was isolated from nasal tissue lesions of four sheep.(AU)

Outbreaks of rhinofacial and rhinopharyngeal zygomycosis in sheep in Paraíba, northeastern Brazil

Two outbreaks of zigomycosis with rhinofacial and two other with rhinopharyngeal lesions involving fungi with filamentous coaenocytic hyphae characteristic of entomoph-thoramycetous fungi are reported in the state of Paraíba, northeastern Brazil. One outbreak of rhinofacial zygomycosis occurred during the rainy season affecting 5 sheep. Another outbreak of the clinical form affected one out of 40 sheep during the dry season. Common clinical signs of the rhinofacial infection were bilateral serosanguineous nasal discharge with swelling of nostrils, upper lip, and the skin of the face. At necropsy the nasal mucosa showed dark brownish ulcerated areas which extended from the mucocutaneous region to 10cm inside the nasal vestibule. The mucosa of the hard palate was also ulcerated. The cutting surface of nostrils and palate showed a brownish or red spongeous tissue of friable consistency. One outbreak of rhinopharyngitis took place on an irrigated coconut farm; 7 out of 60 adult sheep were affected. Another outbreak affected a sheep in a flock of 80 during the dry season. Clinical signs as noisy respiration and dyspnoea due to mechanical blockage of the nasal cavities, swelling of the nostrils, and serosanguineous nasal discharge were observed. Six out of 8 sheep in this group showed exophthalmia, keratitis and unilateral corneal ulceration of the eye. The sheep either died of their infection or were euthanized after a clinical course of 7-30 days. At necropsy there was a dense yellow exudate in the nasopharyngeal area affecting the ethmoidal region, turbinate bones, paranasal sinuses, hard and soft palates, orbital cavity, pharynges, regional muscles and lymph nodes. Histopathologically both forms of the disease showed multifocal granulomas with an eosinophilic necrotic reaction (Splendore-Hoeppli phenomenon) containing ribbon-type coenocytic hyphae with 7-30mm in diameter similar to hyphae of zygomycetous fungi, possibly Conidiobolus spp. Outbrea...(AU)

Dois surtos de lesões rinofaciais e dois de lesões rinofaríngeas causadas por fungos com hifas filamentosas, raramente septadas, semelhantes às dos fungos entomophthorales, são descritos no Estado da Paraíba. Um surto da forma rinofacial afetou 5 ovinos durante a estação chuvosa. Outro surto desta forma clínica afetou um ovino de um grupo de 40, durante a época seca. Os sinais clínicos da forma rinofacial foram de corrimento serosanguinolento bilateral, com aumento de volume das narinas, lábio superior, e pele da face. Na necropsia, a mucosa nasal apresentava áreas ulceradas de cor marrom escuro, que se estendiam desde a região muco-cutánea até 10cm dentro do vestíbulo nasal. A mucosa do palato duro estava, também, ulcerada. A superfície de corte das narinas e palato apresentava-se marrom ou avermelhada de aspecto esponjoso e friável. Um surto de rinofaringite micótica ocorreu em uma plantação de coco irrigado, afetando 7 ovinos de um rebanho de 60 ovinos adultos. Outro surto desta forma da enfermidade afetou um único animal de um rebanho de 80, durante a época seca. Os animais apresentavam dispnéia, com respiração ruidosa devida ao bloqueio parcial das narinas, e corrimento nasal serosanguinolento. Seis dos oito animais afetados por esta forma da enfermidade apresentaram, em um olho, exoftalmia, ceratite e ulceração da córnea. Todos os ovinos morreram ou foram sacrificados após um curso clínico de 7-30 dias. Na necropsia exsudato amarelo consistente foi observado na região etmoidal, ossos turbinados, seios paranasais, palatos duro e mole, órbita, faringe, e músculos e linfonodos regionais. No estudo histológico, ambas as formas da doença mostraram granulomas multifocais com áreas necróticas eosinofílicas (material de Splendore-Hoeppli) contendo hifas com 7-30mm de diâmetro, raramente septadas, semelhantes às dos fungos entomophthorales, possivelmente Conidiobolus spp. Surtos de ambas as formas de rinite micótica são freqüentes na região ...(AU)

Epidemiologia e sinais clínicos da conidiobolomicose em ovinos no Estado do Piauí / Epidemiology and symptoms of conidiobolomycosis in sheep in the State of Piauí, Brazil

Foi realizado um estudo de ocorrência da conidiobolomicose ovina em 25 rebanhos no Estado do Piauí, de janeiro de 2002 a dezembro de 2004. A enfermidade acometeu apenas ovinos e ocorreu principalmente em abril-julho. A incidência média anual foi de 2,80 por cento e a incidência semestral foi significativamente mais alta (P <0,05) no primeiro semestre (2,10 por cento), durante a época chuvosa, do que no segundo semestre (0,69 por cento), durante a seca. A incidência entre rebanhos variou de 0,1-14,3 por cento e a letalidade foi de 100 por cento. Ao exame clínico, os animais apresentavam apatia, emagrecimento progressivo, secreção nasal serosa, mucosa e/ou hemorrágica, dificuldade respiratória, respiração ruidosa, febre e na maioria dos casos assimetria crânio-facial e exoftalmia. Alguns ovinos permaneciam com a cabeça baixa ou a pressionavam contra objetos. O curso clínico foi de 1-5 semanas. As lesões macroscópicas, microscópicas e ultrastructurais e a identificação do agente são descritas separadamente. Este é o primeiro registro de conidiobolomicose em ovinos no Brasil, enfermidade endêmica no Estado do Piauí, associada à alta pluviosidade (1000-1600mm anuais) e alta temperatura (19-36ºC).(AU)

Conidiobolomycosis is reported in 25 farms, from January 2002 to December 2004, in the state of Piauí. The disease affects only sheep, mainly in April-June. The mean morbidity rate was 2.80 percent, but was higher in the first semester (2.1 percent), during the raining period, than in the second one (0.69 percent), during the dry period. Morbidity rate among flocks varied from 0.1-14.3 percent. Case fatality rate was 100 percent, and the clinical manifestation period varied from 1-5 weeks. Clinical signs were serous, mucous and/or bloody nasal secretion, respiratory distress, snoring respiration, cranium-facial asymmetry, exophthalmia, fever and progressive emaciation. Marked depression, sometimes with the head down or head pressing was observed in some cases. Gross, microscopic and ultrastructural lesions and identification of the agent are reported elsewhere. This is the first report of conidiobolomycosis in Brazil, which is endemic and has a high frequency in sheep in the State of Piauí, associated with high rainfalls (1000-1600mm annually) and high temperature (19-36ºC).(AU)

Zygomycosis and skin pythiosis in horses: diagnosis and treatment / Zigomicose e pitiose cutânea em equinos: diagnóstico e tratamento

Also known as phycomycoses, pythiosis and zygomycosis are mycotic diseases with very similar morphological and histopathological features, and occur in skin, subcutaneous tissue, GI tract and lungs, mainly in horses. The etiological agents are soil and vegetation saprophytes present in swamps. Horses acquire the infection by remaining in these areas, in contact with the soil, favoring the occurrence of infected granulomatous lesions mainly in the distal portion of the limbs, ventral region of thea bdomen, chest and neck, with severe pruritus, ulceration, and viscous and abundant serosanguineous secretion. Several methods are used to treat these mycoses, surgical excision associated with amphotericin B being the most important. However, new adjuvant therapies have been successfully tested as this drug has many side effects and is very expensive.

A pitiose e a zigomicose, também conhecidas como ficomicose, constituem um grupo diverso de afecções micóticas de estreita semelhança anatomopatológica que acometem pele e tecido subcutâneo, trato digestivo e respiratório, especialmente em equinos. Os agentes etiológicos são saprófitos do solo e da vegetação e possuem também habitat aquático. Os equinos adquirem a infecção ao permanecerem em áreas alagadiças e ao entrarem em contato com o solo, favorecendo o aparecimento de lesões piogranulomatosas, preferencialmente localizadas na porção distal dos membros, região ventral do abdômen, tórax e pescoço. As lesões apresentam prurido intenso, ulceração, secreção serosanguinolenta de aspecto viscoso e abundante. Entre os diversos métodos utilizados no tratamento destas micoses, destaca-se a excisão cirúrgica associada à administração sistêmica de anfotericina B. Todavia, diante de seus sérios efeitos colaterais e seu custo elevado, novos tratamentos adjuvantes têm sido testados com sucesso.

Zygomycosis and skin pythiosis in horses: diagnosis and treatment / Zigomicose e pitiose cutânea em equinos: diagnóstico e tratamento

Also known as phycomycoses, pythiosis and zygomycosis are mycotic diseases with very similar morphological and histopathological features, and occur in skin, subcutaneous tissue, GI tract and lungs, mainly in horses. The etiological agents are soil and vegetation saprophytes present in swamps. Horses acquire the infection by remaining in these areas, in contact with the soil, favoring the occurrence of infected granulomatous lesions mainly in the distal portion of the limbs, ventral region of thea bdomen, chest and neck, with severe pruritus, ulceration, and viscous and abundant serosanguineous secretion. Several methods are used to treat these mycoses, surgical excision associated with amphotericin B being the most important. However, new adjuvant therapies have been successfully tested as this drug has many side effects and is very expensive.

A pitiose e a zigomicose, também conhecidas como ficomicose, constituem um grupo diverso de afecções micóticas de estreita semelhança anatomopatológica que acometem pele e tecido subcutâneo, trato digestivo e respiratório, especialmente em equinos. Os agentes etiológicos são saprófitos do solo e da vegetação e possuem também habitat aquático. Os equinos adquirem a infecção ao permanecerem em áreas alagadiças e ao entrarem em contato com o solo, favorecendo o aparecimento de lesões piogranulomatosas, preferencialmente localizadas na porção distal dos membros, região ventral do abdômen, tórax e pescoço. As lesões apresentam prurido intenso, ulceração, secreção serosanguinolenta de aspecto viscoso e abundante. Entre os diversos métodos utilizados no tratamento destas micoses, destaca-se a excisão cirúrgica associada à administração sistêmica de anfotericina B. Todavia, diante de seus sérios efeitos colaterais e seu custo elevado, novos tratamentos adjuvantes têm sido testados com sucesso.