Severe mammary fibroepithelial hyperplasia due to single injection of medroxyprogesterone acetate in two male cats / Hiperplasia fibroadenomatosa mamária felina secundária à aplicação única de acetato de medroxiprogesterona em dois felinos machos

Thirty and forty days after a 50 mg medroxyprogesterone acetate injection, respectively, two mixed-breed, 7 and 8-month-old entire male cats presented diffuse enlargement of thoracic and abdominal mammary glands, with ulceration, abscessation and necrosis. One patient was treated with 10 mg/kg aglepristone, antibiotic therapy, analgesic and non-steroidal anti-inflammatory compound; however a worse enlargement of mammary glands, necrosis and clinical condition was noted two days after antiprogestin injection. The second patient was submitted to surgical procedure without previous medical treatment. A partial bilateral mastectomy and conventional orchiectomy were performed, and both patients presented no clinical abnormalities 10 days after surgical treatment. In the male cat, the interruption of progesterone associated mammary fibroepithelial hyperplasia cannot be based in gonadectomy, being antiprogestin treatment the primary approach. Mastectomy can be a treatment option in selected cases, such as the two cases presented here, in case of antiprogestin treatment failure or in case of extensive ulceration, necrosis and risk of sepsis.(AU)

Trinta e quarenta dias após aplicação de acetato de medroxiprogesterona, dois gatos SRD machos não castrados, de sete e oito meses respectivamente, apresentaram aumento difuso de volume em glândulas mamárias torácicas e abdominais, com ulceração, abscedação e necrose. Um paciente foi tratado com 10 mg/kg de aglepristone, terapia antimicrobiana, analgésicos e anti-inflamatório não-esteroidal. Entretanto, apresentou piora dos sinais clínicos, da abscedação e necrose dois dias após a aplicação. O outro paciente foi submetido a procedimento cirúrgico sem tratamento clínico prévio. Mastectomia parcial bilateral e orquiectomia convencional foram realizadas e, ambos os pacientes se apresentaram sem alterações clínicas e receberam alta após 10 dias do procedimento cirúrgico. No felino macho, a interrupção da ação da progesterona associada à ocorrência de hiperplasia fibroadenomatosa mamária, não pode ser obtida por meio de gonadectomia, portanto, o tratamento de eleição deve ser realizado com utilização de antiprogestágeno. Em alguns casos, mastectomia parcial ou total é recomendada quando o tratamento clínico com antiprogestágeno falha ou, em casos de sepse, ulceração extensa e necrose, como nos pacientes deste relato.(AU)

Application of hormonal subdoses at the Bai Hui acupoint for estrus synchronization in sheep / Aplicação de subdoses hormonais no ponto de acupuntura Bai Hui para sincronização de estro em ovelhas

Here, the efficiency of applying subdoses of equine chorionic gonadotropin (eCG) and prostaglandin F2α (PGF2α) at the Bai Hui (BH) acupoint for estrus synchronization in sheep was evaluated. Thirty Santa Inês ewes received intravaginal sponges containing 60 mg medroxyprogesterone acetate for 7 days. The animals were divided into five treatments (T) (n=6): T1 (control), 132.5 µg PGF2α (100% of dose) and 300 IU eCG (100% of dose), both intramuscularly (IM); T2, 39.75 µg PGF2α (30% of dose) at the BH acupoint and 300 IU eCG (100% of dose) IM; T3, 132.5 µg PGF2α (100% of dose) IM and 90 IU eCG (30% of dose) at the BH acupoint; T4, 39.75 µg PGF2α (30% of dose) and 90 IU eCG (30% of dose), both at the BH acupoint; and T5, 39.75 µg PGF2α (30% of dose) and 90 IU eCG (30% of dose) both at a false acupoint (IM, at the same location as in T1). After 12 h of sponge removal and hormone application, the ewes were subjected to monitoring for estrus and mating and ultrasound assessments of follicular growth and ovulation time every 12 h. The data were evaluated for normality and subjected to analysis of variance, considering a 5% probability. There were no differences in the percentage of animals in estrus (93.3±9.1%), interval from sponge removal to estrus onset (48.1±6.0 h), interval from sponge removal to estrus end (69.6±5.4 h), duration of estrus (24.0±4.7 h), interval from sponge removal to ovulation (73.7±5.9 h), interval from estrus onset to ovulation (26.5±2.3 h), size of the largest follicle (6.7±0.4 mm), follicular growth rate (0.8±0.1 mm•day-1), number of ovulations (1.3±0.1), and plasma progesterone levels 7 days after ovulation (9.6±2.0 ng•mL-1). The cost of the synchronization protocol per animal was US$ 4.37, 4.12, 2.96, 2.71, and 2.71 for T1, T2, T3, T4, and T5, respectively, with 37.99% cost reduction using PGF2α and eCG at 30% of the conventional doses. Therefore, the application of reduced PGF2α (39.75 µg) and eCG (90 IU) doses at the BH or false acupoint effectively synchronized estrus and reduced protocol cost in sheep, indicating that the conventional doses are overestimated.(AU)

Aqui, foi avaliada a eficiência da aplicação de subdoses de gonadotrofina coriônica equina (eCG) e prostaglandina F2α (PGF2α) no ponto de acupuntura Bai Hui (BH) para sincronização de estro em ovelhas. Trinta ovelhas Santa Inês receberam esponjas intravaginais contendo 60 mg de acetato de medroxiprogesterona por 7 dias. Os animais foram divididos em cinco tratamentos (T) (n=6): T1 (controle), 132,5 µg PGF2α (100% da dose) e 300 UI de eCG (100% da dose), ambos por via intramuscular (IM); T2, 39,75 µg de PGF2α (30% da dose) no ponto de acupuntura BH e 300 UI eCG (100% da dose) IM; T3, 132,5 µg PGF2α (100% da dose) IM e 90 UI eCG (30% da dose) no ponto de acupuntura BH; T4, 39,75 µg PGF2α (30% da dose) e 90 UI eCG (30% da dose), ambos no ponto de acupuntura BH; e T5, 39,75 µg PGF2α (30% da dose) e 90 UI eCG (30% da dose) ambos em um falso acuponto (IM, no mesmo local que em T1). Após 12 horas da retirada da esponja e aplicação do hormônio, as ovelhas foram submetidas ao monitoramento do estro e acasalamento, e avaliação ultrassonográfica do crescimento folicular e tempo de ovulação a cada 12 horas. Os dados foram avaliados quanto à normalidade e submetidos à análise de variância, considerando 5% de probabilidade. Não houve diferenças na porcentagem de animais em estro (93,3 ± 9,1%), intervalo da remoção da esponja ao início do estro (48,1 ± 6,0 h), intervalo da remoção da esponja ao final do estro (69,6 ± 5,4 h), duração do estro (24,0 ± 4,7 h), intervalo da remoção da esponja à ovulação (73,7 ± 5,9 h), intervalo do início do estro à ovulação (26,5 ± 2,3 h), tamanho do maior folículo (6,7 ± 0,4 mm), taxa de crescimento folicular (0,8 ± 0,1 mm•dia-1), número de ovulações (1,3 ± 0,1) e níveis de progesterona plasmática 7 dias após a ovulação (9,6 ± 2,0 ng•mL-1). O custo do protocolo de sincronização por animal foi de US $ 4,37, 4,12, 2,96, 2,71 e 2,71 para T1, T2, T3, T4 e T5, respectivamente, com redução de custo de 37,99% usando PGF2α e eCG a 30% das doses convencionais. Portanto, a aplicação de PGF2α (39,75 µg) e doses reduzidas de eCG (90 UI) no BH ou falso acuponto sincronizaram efetivamente o estro e reduziram o custo do protocolo em ovelhas, indicando que as doses convencionais estão superestimadas.(AU)

Comparative analysis of the hormone production and gene expression profiles in ovine uterus tissue during oestrus cycle synchronized using medroxyprogesterone acetate plus eCG and prostaglandin analogue / Análise comparativa da produção de hormônios e perfis de expressão gênica em tecido uterino ovino durante o ciclo estral sincronizado usando acetato de medroxiprogesterona mais eCG e análogo de prostaglandina

The combination of medroxyprogesterone acetate (MPA) and gonadotropin chorionic (eCG) has been widely used to synchronize oestrus cycle in sheep, but their effects on the gene expression in uterine tissue are yet to be elucidated. To evaluate the effect of MPA + eCG or prostaglandin analogue (PA) treatments on the rate of oestrus cycle synchronization, as well as further hormone production and gene expression profiles in uterine tissue, 14 Santa Inês ewes were randomly selected. The MPA + eCG group (n=7) received intravaginal insertion of MPA-impregnated sponges for 14 days and was administered 350 IU eCG on the day of sponge withdrawal. The PA group (n=7) was administered two doses of 100 µg of PA separated by 12 days. The ewes were assessed for the rate of oestrus cycle synchronization and the serum concentrations of progesterone (P4) and estradiol (E2). Additionally, the expression of estrogen receptor (ERα), progesterone receptor (P4R), and immunolocalization of interferon receptor (IFNAR1) in the uterine tissue samples collected 15th day post-mating were examined. The rate of oestrus cycle synchronization was 100% (n=7/7) and 57.14% (n=4/7) in the MPA + eCG and PA groups, respectively. Moreover, the MPA + eCG group exhibited higher serum concentration of P4 than the PA group (p < 0.05). However, the E2 serum concentration did not differ between the two groups (p > 0.05). The relative expression of P4R and ERα mRNA analyzed using real-time PCR and immunodetection of IFNAR1 were similar between the two groups tested (p > 0.05). Conclusively, MPA + eCG treatment improved the rate of oestrus cycle synchronization and endogenous P4 production; however, it did not affect the expression of sex steroid receptors and IFNAR1 in uterine ovine tissue.(AU)

A combinação de acetato de medroxiprogesterona (MPA) com gonadotrofina coriônica (eCG) é amplamente utilizada para sincronizar o estro de ovelhas, mas seus possíveis efeitos sobre a expressão gênica em tecido uterino não foram elucidados. Para avaliar o efeito dos protocolos MPA + eCG ou análogo de prostaglandina (PA) sobre a taxa de sincronização do estro, bem como na futura produção hormonal e expressão gênica em tecido uterino, 14 ovelhas Santa Inês foram selecionadas. O grupo MPA + eCG (n=7) recebeu a inserção de esponjas impregnadas de MPA por via intravaginal por 14 dias e 350 UI de eCG no dia da retirada da esponja. O grupo PA recebeu duas doses de 100 µg de PA administradas com 12 dias de intervalo. As ovelhas foram avaliadas quanto à taxa de sincronização do estro, concentração sérica de progesterona (P4) e estradiol (E2). Além disso, foram examinadas a expressão do receptor de estradiol (ERα), receptor de progesterona (P4R) e localização do receptor de interferon (IFNAR1), a partir de amostras de tecido uterino coletadas 15 dias após o acasalamento. A taxa de sincronização do estro foi 100% (n = 7/7) e 57,14% (n = 4/7) nos grupos MPA + eCG e PA, respectivamente. Além disso, o grupo MPA + eCG apresentou maior concentração sérica de P4 em comparação com o grupo PA (P < 0,05). No entanto, a concentração sérica de E2 não diferiu entre os grupos testados (P > 0,05). A expressão relativa de RNAm para P4R e ERα analisado por PCR em tempo real e imunodetecção de IFNAR1 foi semelhante entre os grupos testados (P > 0,05). Em conclusão, o tratamento com MPA + eCG melhora a taxa de sincronização do estro e a produção de progesterona endógena; contudo, não afeta a regulação da expressão de receptores de esteroides sexuais e IFNAR1 no tecido uterino de ovinos.(AU)

Use of hormonal subdoses applied in Bai Hui acupuncture in estrus synchronization protocols for goats / Uso de subdoses hormonais aplicadas no acuponto Bai Hui em protocolos de sincronização de estro para cabras

The objective of this study was to evaluate the efficacy of delivering reduced doses of hormones via the Bai Hui acupoint in estrus synchronization in goats. A total of 40 goats received intravaginal sponges with medroxyprogesterone acetate for 7 days. The goats were then randomly distributed into 5 treatment: T1 - application of 132.5 μg of cloprostenol and 300 IU of equine chorionic gonadotropin (eCG), both by intramuscular injection (IM); T2 - application of 39.75 μg cloprostenol at the Bai Hui acupoint, and 300 IU of eCG by IM; T3 - application of 132.5 μg of cloprostenol by IM, and 90 IU of eCG at the Bai Hui acupoint; T4 - application of 39.75μg of cloprostenol and 90 UI of eCG, both in Bai Hui and T5 acupuncture: application of 39.75μg of cloprostenol and 90 UI of eCG, both applied in false acupoint. The goats were subjected to an estrus synchronization protocol and monitored for estrus detection, coverage and evaluation of reproductive parameters to detect entry into estrus. The data were subjected to normality tests, followed by appropriate statistical analyses of each variable. There was no significant difference (P > 0.05) in the percentage of animals in estrus (95.00 ± 11.18%), interval between sponge removal and beginning of estrus (49.72 ± 8.93 h), interval between sponge removal and end of estrus (76.84 ± 11.98 h), duration of estrus (27.08 ± 8.68 h), size of the largest follicle (6.82 ± 0.44 mm), interval between sponge removal and ovulation (78.28 ± 10.82 h), time from ovarian onset to estrus (28.52 ± 5.44 h), follicular growth rate (0.86 ± 0.29 mm/day), number of ovulations (1.32 ± 0.23), plasma progesterone concentration at 7 days after ovulation (10.28 ± 1.65 ng.mL-1), and gestation rate at 30 days after the beginning of estrus (75 ± 12.5%). However, the cost of the synchronization protocol per animal was 43.42% lower in treatments 4 and 5 (30% of the doses) than in treatment 1 (100% of the dose)...(AU)

O objetivo com o estudo foi avaliar a utilização de subdoses hormonais aplicadas no acuponto Bai Hui em protocolos de sincronização de estro em cabras. Foram utilizadas 40 cabras, as quais receberam esponjas intravaginais com acetato de medroxiprogesterona durante 7 dias, quando foram distribuídas aleatoriamente em 5 tratamentos: T1: aplicação de 132,5μg de cloprostenol e 300UI de eCG, ambos por via intramuscular (IM); T2: aplicação de 39,75μg de cloprostenol no acuponto Bai Hui e 300UI de eCG IM; T3: aplicação de 132,5μg de cloprostenol IM e 90UI de eCG no acuponto Bai Hui; T4: aplicação de 39,75μg de cloprostenol e 90UI de eCG, ambos no acuponto Bai Hui e T5: aplicação de 39,75μg de cloprostenol e 90UI de eCG, ambos aplicados em falso acuponto. As cabras foram submetidas à protocolo de sincronização de estro e monitoradas para detecção de estro, realização das coberturas e avaliação dos parâmetros reprodutivos. Os dados foram submetidos à análise de normalidade, seguido dos testes estatísticos adequados para cada variável. Não obteve-se diferença (p > 0,05) para porcentagem de animais em estro (95,00 ± 11,18%), intervalo da retirada da esponja ao início do estro (49,72 ± 8,93h), intervalo da retirada da esponja ao final do estro (76,84 ± 11,98h), duração do estro (27,08 ± 8,68h), tamanho do maior folículo (6,82 ± 0,44mm), intervalo da retirada da esponja à ovulação (78,28 ± 10,82h), intervalo do início do estro à ovulação (28,52 ± 5,44h), taxa de crescimento folicular (0,86 ± 0,29mm/dia), número de ovulações (1,32 ± 0,23), concentração de progesterona plasmática aos 7 dias após ovulação (10,28 ± 1,65ng.mL-1) e para taxa de gestação aos 30 dias (75 ± 12,5%). Porém, o custo do protocolo de sincronização por animal foi 43,42% menor para os tratamentos T4 e T5 (30% da dose) comparado com o T1 (100% da dose)...(AU)

Use of hormonal subdoses applied in Bai Hui acupuncture in estrus synchronization protocols for goats / Uso de subdoses hormonais aplicadas no acuponto Bai Hui em protocolos de sincronização de estro para cabras

The objective of this study was to evaluate the efficacy of delivering reduced doses of hormones via the Bai Hui acupoint in estrus synchronization in goats. A total of 40 goats received intravaginal sponges with medroxyprogesterone acetate for 7 days. The goats were then randomly distributed into 5 treatment: T1 - application of 132.5 μg of cloprostenol and 300 IU of equine chorionic gonadotropin (eCG), both by intramuscular injection (IM); T2 - application of 39.75 μg cloprostenol at the Bai Hui acupoint, and 300 IU of eCG by IM; T3 - application of 132.5 μg of cloprostenol by IM, and 90 IU of eCG at the Bai Hui acupoint; T4 - application of 39.75μg of cloprostenol and 90 UI of eCG, both in Bai Hui and T5 acupuncture: application of 39.75μg of cloprostenol and 90 UI of eCG, both applied in false acupoint. The goats were subjected to an estrus synchronization protocol and monitored for estrus detection, coverage and evaluation of reproductive parameters to detect entry into estrus. The data were subjected to normality tests, followed by appropriate statistical analyses of each variable. There was no significant difference (P > 0.05) in the percentage of animals in estrus (95.00 ± 11.18%), interval between sponge removal and beginning of estrus (49.72 ± 8.93 h), interval between sponge removal and end of estrus (76.84 ± 11.98 h), duration of estrus (27.08 ± 8.68 h), size of the largest follicle (6.82 ± 0.44 mm), interval between sponge removal and ovulation (78.28 ± 10.82 h), time from ovarian onset to estrus (28.52 ± 5.44 h), follicular growth rate (0.86 ± 0.29 mm/day), number of ovulations (1.32 ± 0.23), plasma progesterone concentration at 7 days after ovulation (10.28 ± 1.65 ng.mL-1), and gestation rate at 30 days after the beginning of estrus (75 ± 12.5%). However, the cost of the synchronization protocol per animal was 43.42% lower in treatments 4 and 5 (30% of the doses) than in treatment 1 (100% of the dose)...

O objetivo com o estudo foi avaliar a utilização de subdoses hormonais aplicadas no acuponto Bai Hui em protocolos de sincronização de estro em cabras. Foram utilizadas 40 cabras, as quais receberam esponjas intravaginais com acetato de medroxiprogesterona durante 7 dias, quando foram distribuídas aleatoriamente em 5 tratamentos: T1: aplicação de 132,5μg de cloprostenol e 300UI de eCG, ambos por via intramuscular (IM); T2: aplicação de 39,75μg de cloprostenol no acuponto Bai Hui e 300UI de eCG IM; T3: aplicação de 132,5μg de cloprostenol IM e 90UI de eCG no acuponto Bai Hui; T4: aplicação de 39,75μg de cloprostenol e 90UI de eCG, ambos no acuponto Bai Hui e T5: aplicação de 39,75μg de cloprostenol e 90UI de eCG, ambos aplicados em falso acuponto. As cabras foram submetidas à protocolo de sincronização de estro e monitoradas para detecção de estro, realização das coberturas e avaliação dos parâmetros reprodutivos. Os dados foram submetidos à análise de normalidade, seguido dos testes estatísticos adequados para cada variável. Não obteve-se diferença (p > 0,05) para porcentagem de animais em estro (95,00 ± 11,18%), intervalo da retirada da esponja ao início do estro (49,72 ± 8,93h), intervalo da retirada da esponja ao final do estro (76,84 ± 11,98h), duração do estro (27,08 ± 8,68h), tamanho do maior folículo (6,82 ± 0,44mm), intervalo da retirada da esponja à ovulação (78,28 ± 10,82h), intervalo do início do estro à ovulação (28,52 ± 5,44h), taxa de crescimento folicular (0,86 ± 0,29mm/dia), número de ovulações (1,32 ± 0,23), concentração de progesterona plasmática aos 7 dias após ovulação (10,28 ± 1,65ng.mL-1) e para taxa de gestação aos 30 dias (75 ± 12,5%). Porém, o custo do protocolo de sincronização por animal foi 43,42% menor para os tratamentos T4 e T5 (30% da dose) comparado com o T1 (100% da dose)...

Pattern of follicular development in sheep subjected to ovarian superstimulation after follicular ablation by laparoscopic ovum pick-up / Padrão de desenvolvimento folicular em ovelhas submetidas à superestimulação ovariana após ablação folicular por laparoscopia

The aim of this study was to determine the pattern of follicular development in ewes following ablation of all follicles associated with ovarian superstimulatory treatment. After confirmation of reproductive cyclicity using ultrasonography and progesterone levels, five adult ewes of undetermined breed received a vaginal pessary containing 60mg of medroxyprogesterone, maintained for 10 days, with the application of 100ug cloprostenol on the fourth day. On the tenth day, 300UI equine chorionic gonadotropin (eCG) was applied together with 80mg FSH, and all visible follicles were aspirated by laparoscopic ovum pick-up (LOPU). Following LOPU, ovarian structures were assessed using sonography every 8 hours for a period of 64 hours, and the number and diameter of small (4.5mm) follicles were recorded. The average diameter of small follicles reduced from 5.6±1.5mm initially to 0.8±1.3mm by 56 hours. Population size of the medium-sized follicles during the observation period followed a parabolic distribution wherein the theoretical maximum size emerged at 34.6 hours with no difference at (P>0.05) 24 (4.6±1.5) and 48 hours (4.8±2.3). It was concluded that in ewes subjected to ovarian superstimulation immediately following LOPU, follicular development is characterized by a new wave of follicle growth with a predominance of medium-sized follicles (2.5-4.5mm) between 24 and 48 hours, and a theoretical population maximum occured at 34.6 hours.

O objetivo deste estudo foi determinar o padrão do desenvolvimento folicular em ovelhas após a ablação de todos os folículos, associado a tratamento superestimulatório ovariano. Após confirmação da ciclicidade reprodutiva por avaliação ultrassonográfica e dosagem de progesterona, cinco ovelhas adultas, sem raça definida, ao início do tratamento, receberam pessário vaginal contendo 60mg de acetato de medroxiprogesterona. Após quatro dias, foi administrado 100µg cloprostenol sódico e, no décimo dia, realizou-se a remoção do pessário e aspiração de todos os folículos ovarianos visíveis, guiada por laparoscopia, além da administração de 300UI eCG associada a 80mg FSH. Ao final do tratamento, a cada 8 horas, foi realizada avaliação ultrassonográfica das estruturas ovarianas por um período de 64 horas, onde o número e o diâmetro de folículos pequenos ( 4,5mm) foram contabilizados. O número de folículos pequenos, que inicialmente apresentava média 5,6±1,5, foi reduzido para 0,8±1,3 a partir de 56 horas, folículos grandes somente foram vistos a partir de 32 horas (0,2±0,4); a população de folículos médios, durante o período de observação, apresentou uma distribuição parabólica cujo vértice, considerado o ponto teórico de maior concentração, foi às 34,6 horas, não havendo diferença (P>0,05) nessa população de folículos, entre 24 e 48 horas (4,6±1,5 vs 4,8±2,3). Conclui-se que, em ovelhas submetidas à superestimulação ovariana iniciada imediatamente após remoção de todos os folículos visíveis à laparoscopia, o desenvolvimento folicular é caracterizado pela emergência de nova onda de crescimento, com predomínio de folículos médios (2,5 a 4,5mm) entre 24 e 48 horas, sendo o ponto teórico de maior ocorrência às 34,6 horas.

Pattern of follicular development in sheep subjected to ovarian superstimulation after follicular ablation by laparoscopic ovum pick-up / Padrão de desenvolvimento folicular em ovelhas submetidas à superestimulação ovariana após ablação folicular por laparoscopia

The aim of this study was to determine the pattern of follicular development in ewes following ablation of all follicles associated with ovarian superstimulatory treatment. After confirmation of reproductive cyclicity using ultrasonography and progesterone levels, five adult ewes of undetermined breed received a vaginal pessary containing 60mg of medroxyprogesterone, maintained for 10 days, with the application of 100ug cloprostenol on the fourth day. On the tenth day, 300UI equine chorionic gonadotropin (eCG) was applied together with 80mg FSH, and all visible follicles were aspirated by laparoscopic ovum pick-up (LOPU). Following LOPU, ovarian structures were assessed using sonography every 8 hours for a period of 64 hours, and the number and diameter of small (< 2.5mm), medium-sized (2.5-4.5mm), and large (>4.5mm) follicles were recorded. The average diameter of small follicles reduced from 5.6±1.5mm initially to 0.8±1.3mm by 56 hours. Population size of the medium-sized follicles during the observation period followed a parabolic distribution wherein the theoretical maximum size emerged at 34.6 hours with no difference at (P>0.05) 24 (4.6±1.5) and 48 hours (4.8±2.3). It was concluded that in ewes subjected to ovarian superstimulation immediately following LOPU, follicular development is characterized by a new wave of follicle growth with a predominance of medium-sized follicles (2.5-4.5mm) between 24 and 48 hours, and a theoretical population maximum occured at 34.6 hours.(AU)

O objetivo deste estudo foi determinar o padrão do desenvolvimento folicular em ovelhas após a ablação de todos os folículos, associado a tratamento superestimulatório ovariano. Após confirmação da ciclicidade reprodutiva por avaliação ultrassonográfica e dosagem de progesterona, cinco ovelhas adultas, sem raça definida, ao início do tratamento, receberam pessário vaginal contendo 60mg de acetato de medroxiprogesterona. Após quatro dias, foi administrado 100µg cloprostenol sódico e, no décimo dia, realizou-se a remoção do pessário e aspiração de todos os folículos ovarianos visíveis, guiada por laparoscopia, além da administração de 300UI eCG associada a 80mg FSH. Ao final do tratamento, a cada 8 horas, foi realizada avaliação ultrassonográfica das estruturas ovarianas por um período de 64 horas, onde o número e o diâmetro de folículos pequenos ( < 2,5mm), médios (2,5 a 4,5mm) e grandes (>4,5mm) foram contabilizados. O número de folículos pequenos, que inicialmente apresentava média 5,6±1,5, foi reduzido para 0,8±1,3 a partir de 56 horas, folículos grandes somente foram vistos a partir de 32 horas (0,2±0,4); a população de folículos médios, durante o período de observação, apresentou uma distribuição parabólica cujo vértice, considerado o ponto teórico de maior concentração, foi às 34,6 horas, não havendo diferença (P>0,05) nessa população de folículos, entre 24 e 48 horas (4,6±1,5 vs 4,8±2,3). Conclui-se que, em ovelhas submetidas à superestimulação ovariana iniciada imediatamente após remoção de todos os folículos visíveis à laparoscopia, o desenvolvimento folicular é caracterizado pela emergência de nova onda de crescimento, com predomínio de folículos médios (2,5 a 4,5mm) entre 24 e 48 horas, sendo o ponto teórico de maior ocorrência às 34,6 horas.(AU)

Avaliação do reconhecimento materno da gestação em ovelhas Santa Inês submetidas a diferentes protocolos hormonais para sincronização do estro

Na literatura, ainda é inexistente se os protocolos de sincronização de estro e da ovulação a base de acetato de medroxiprogesterona (MPA) por 14 dias, associado à gonadotrofina coriônica equina (eCG) afetam o ambiente uterino de ovelhas da raça Santa Inês durante o período de reconhecimento materno da gestação. Portanto, objetivou-se avaliar os efeitos de diferentes protocolos hormonais sobre a taxa de sincronização do estro, níveis séricos de progesterona e expressão de IFNAR1 durante o período de reconhecimento materno da gestação em ovelhas Santa Inês. As ovelhas foram sincronizadas com acetato de medroxiprogesterona (MPA) mais gonadotrofina coriônica equina (eCG) (grupo MPA + eCG, n = 7) ou com prostaglandina F2 (grupo PGF2, n = 7). O protocolo de sincronização do grupo MPA + eCG consistiu na utilização de esponjas intravaginais impregnadas com MAP por 14 dias e aplicação de prostaglandina (PGF2) no dia 07. No dia 14, foi retirada a esponja intravaginal e realizada a aplicação de eCG. O grupo PGF2 consitiu de duas aplicações de PGF2 nos dias 0 e 12 do protocolo. Após 24 horas do final do protocolo, os animais receberam monta natural. No 15º dia após o acasalamento, todos os animais foram submetidos à coleta de sangue para dosagem de progesterona e coleta de biópsia uterina para imunolocalização do IFNAR1. Houve diferença significativa nos efeitos dos tratamentos hormonais sobre a taxa de sincronização do estro (P<0,05). O grupo MPA+eCG apresentou 100% de taxa de sicronização de estro, enquanto o grupo PGF2 apresentou 57,17%. Além disso, os níveis séricos de progesterona foram significativamente superiores em ovelhas sincronizadas com MPA + eCG quando comparadas com ovelhas sincronizadas com PGF2 (p <0,05). Porém, a intensidade da imunomarcação para IFNAR1 no endométrio uterino de ovelhas não diferiu entre os tratamentos hormonais testados (p> 0,05). Nas condições do presente estudo, o tratamento hormonal com MPA + eCG promoveu maior taxa de sincronização do estro e estimulou a síntese de progesterona ovariana durante o período de reconhecimento materno da gestação em ovelhas. No entanto, não houve efeito dos tratamentos hormonais testados sobre o padrão de expressão de IFNAR1 no endométrio de ovelhas Santa Inês durante este período.

Na literatura, ainda é inexistente se os protocolos de sincronização de estro e da ovulação a base de acetato de medroxiprogesterona (MPA) por 14 dias, associado à gonadotrofina coriônica equina (eCG) afetam o ambiente uterino de ovelhas da raça Santa Inês durante o período de reconhecimento materno da gestação. Portanto, objetivou-se avaliar os efeitos de diferentes protocolos hormonais sobre a taxa de sincronização do estro, níveis séricos de progesterona e expressão de IFNAR1 durante o período de reconhecimento materno da gestação em ovelhas Santa Inês. As ovelhas foram sincronizadas com acetato de medroxiprogesterona (MPA) mais gonadotrofina coriônica equina (eCG) (grupo MPA + eCG, n = 7) ou com prostaglandina F2 (grupo PGF2, n = 7). O protocolo de sincronização do grupo MPA + eCG consistiu na utilização de esponjas intravaginais impregnadas com MAP por 14 dias e aplicação de prostaglandina (PGF2) no dia 07. No dia 14, foi retirada a esponja intravaginal e realizada a aplicação de eCG. O grupo PGF2 consitiu de duas aplicações de PGF2 nos dias 0 e 12 do protocolo. Após 24 horas do final do protocolo, os animais receberam monta natural. No 15º dia após o acasalamento, todos os animais foram submetidos à coleta de sangue para dosagem de progesterona e coleta de biópsia uterina para imunolocalização do IFNAR1. Houve diferença significativa nos efeitos dos tratamentos hormonais sobre a taxa de sincronização do estro (P<0,05). O grupo MPA+eCG apresentou 100% de taxa de sicronização de estro, enquanto o grupo PGF2 apresentou 57,17%. Além disso, os níveis séricos de progesterona foram significativamente superiores em ovelhas sincronizadas com MPA + eCG quando comparadas com ovelhas sincronizadas com PGF2 (p <0,05). Porém, a intensidade da imunomarcação para IFNAR1 no endométrio uterino de ovelhas não diferiu entre os tratamentos hormonais testados (p> 0,05). Nas condições do presente estudo, o tratamento hormonal com MPA + eCG promoveu maior taxa de sincronização do estro e estimulou a síntese de progesterona ovariana durante o período de reconhecimento materno da gestação em ovelhas. No entanto, não houve efeito dos tratamentos hormonais testados sobre o padrão de expressão de IFNAR1 no endométrio de ovelhas Santa Inês durante este período.

PRODUÇÃO E COLETA DE EMBRIÕES PELO MÉTODO NÃO CIRÚRGICO EM OVELHAS MORADA NOVA

O objetivo do presente estudo foi viabilizar a produção e coleta de embriões pelo método não cirúrgico (NSER) em ovelhas Morada Nova, uma vez que o uso desta técnica pode contribuir para o Programa de Conservação de Recursos Genéticos desta importante raça brasileira, aumentando o número de embriões nos bancos de germoplasma. Este estudo foi realizado em duas etapas sendo que na primeira, foi comparada a produção de embriões in vivo de doadoras submetidas a diferentes protocolos de sincronização de estro e/ou superovulação. As ovelhas receberam esponjas intravaginais embebidas em 60 mg de acetato de medroxiprogesterona (MAP), as quais foram mantidas por seis (G6; n = 12), nove (G9; n = 12) ou 12 (G12; n = 12) dias. Metade das ovelhas em cada grupo permaneceu sincronizada (SYNCH) enquanto a outra metade foi superovulada (SOV) com hormônio folículo estimulante suíno (pFSH). Das variáveis analisadas, houve diferença no início do estro que ocorreu 10-12 h depois (P <0,01) em ovelhas G9SYNCH quando comparadas a G6SYNCH e G12SYNCH, e a duração do estro foi 19 h maior (P <0,01) em G9SOV do que em G6SOV. A duração média do procedimento de coleta foi de 32,6 ± 1,3 min. Pelo menos uma estrutura foi recuperada em 85,7% das ovelhas sincronizadas e em 87,5% das superovuladas. As taxas de recuperação de embriões viáveis também foram semelhantes (P> 0,05) para os grupos sincronizados e superovulados: G6 (1,0 ± 0,3 e 2,5 ± 1,5), G9 (1,3 ± 0,5 e 4,8 ± 2,0) e G12 (1,0 ± 0,3 e 4,8 ± 2,3). Conclui-se que o pré-tratamento com diferentes durações de progesterona pode ser empregado em ovelhas Morada Nova, resultando em taxas de recuperação embrionária viáveis em animais sincronizados e/ou superovulados. Na segunda etapa, procurou-se correlacionar quantidade de folículos acima de 2 mm de diâmetro no momento da última dose de pFSH com a resposta superovultória (número de corpos lúteos) e a produção de embriões (quantidade de blastocisto e qualidade embrionária) em ovelhas sincronizadas com os dois tratamentos mais promissores do experimento anterior (G9 e G12). A contagem total de folículos com diâmetro 2 mm dobrou entre a 1ª e a 6ª dose de pFSH em ambos os grupos de ovelhas (P <0,05). As respostas ao estro não variaram entre os dois subconjuntos de ovelhas Morada Nova e foram em média 95,2%. Corpos lúteos (CL) foram detectados em 85,0% e 60,0% das ovelhas que apresentaram cio, respectivamente, nos grupos G9 e G12. A NSER foi concluída com sucesso em 86,2% de todas as ovelhas estudadas. O número médio de CLs por doadora e por doadora lavada com sucesso foi maior (P <0,05) no G12 (12,3 ± 1,7 / 12,1 ± 1,9) do que no G9 (7,9 ± 1,4 / 8,2 ± 1,6). O número médio de blastocistos recuperados e de embriões viáveis foi maior (P <0,05) para G12 (5,8 ± 1,9 e 3,7 ± 1,7) do que para G9 (3,5 ± 1,1 e 0,8 ± 0,3, respectivamente). A contagem total de folículos no momento da aplicação da 6ª dose de pFSH no grupo G12 foi positivamente correlacionada (P <0,05) com o número de CLs (r = 0,95) e com o de embriões viáveis (r = 0,91). Conclui-se que o protocolo de sincronização de estro baseado na utilização de P4 por 12 dias resultou em melhores resultados superovulatórios quando comparado ao protocolo de 9 dias e que a contagem total de folículos na última dose de pFSH foi um bom preditor de resposta superovulatória apenas nas ovelhas tratadas com P4 por 12 dias.

The objective of the present study was to enable the production and collection of embryos by the non-surgical method (NSER) in Morada Nova ewes, since the use of this procedure can contribute to the Program for the Conservation of Genetic Resources of this important Brazilian breed, increasing the number of embryos in germplasm banks. This study was carried out in two experiments; the first one compared the production of embryos in vivo from donors submitted to different estrous and / or superovulation synchronization protocols. The ewes received intravaginal sponges soaked in 60 mg of medroxyprogesterone acetate (MAP), which were maintained for six (G6; n = 12), nine (G9; n = 12) or 12 (G12; n = 12) days. Half of the ewes in each group remained synchronized (SYNCH) while the other half were superovulated (SOV) with porcine follicle stimulating hormone (pFSH). Of the analyzed variables, there was a difference in the beginning of estrus that occurred 10-12 h later (P <0.01) in G9SYNCH ewes when compared to G6SYNCH and G12SYNCH, and the duration of estrus was 19 h longer (P <0.01) in G9SOV than in G6SOV. The average duration of the collection procedure was 32.6 ± 1.3 min. At least one structure was recovered in 85.7 and 87.5% of the synchronized and superovulated ewes, respectively. The recovery rates of viable embryos were also similar (P> 0.05) for the synchronized and superovulated groups: G6 (1.0 ± 0.3 and 2.5 ± 1.5), G9 (1.3 ± 0, 5 and 4.8 ± 2.0) and G12 (1.0 ± 0.3 and 4.8 ± 2.3). It is concluded that pretreatment with different progesterone durations can be used in Morada Nova ewes, resulting in viable embryo recovery rates in synchronized and / or superovulated animals. In the second experiment, the number of follicles 2 mm at the time of the last dose of pFSH was correlate with the superovultory response (number of corpus luteum) and the production of embryos (number of blastocyst and embryonic quality) in synchronized ewes with the two most promising treatments from the previous experiment (G9 and G12). The total count of follicles 2 mm doubled from the 1st to the 6th pFSH dose in both groups of ewes (P < 0.05). Estrus responses did not vary between the two subsets of Morada Nova sheep and they averaged 95.2%. Corpora lutea (CL) were detected in 85.0% and 60.0% of ewes going estrus in G9 Days and G12 Days groups, respectively. NSER was successfully completed in 86.2% of all ewes studied (P > 0.05). The mean number of CL per ewe/successfully flushed donor ewe was greater (P < 0.05) in G12 (12.3 ± 1.7/12.1 ± 1.9) than in G9 (7.9 ± 1.4/8.2 ± 1.6). Mean numbers of retrieved blastocysts and viable embryos were greater (P > 0.05) for G12 (5.8 ± 1.9 and 3.7 ± 1.7) than for G9 ewes (3.5 ± 1.1 and 0.8 ± 0.3, respectively). The total follicle count when applying the 6th dose of pFSH in the G12 group was positively correlated (P <0.05) with the number of CLs (r = 0.95) and with the number of viable embryos (r = 0.91). It was concluded that estrus synchronization protocol based on the use of P4 for 12 days resulted in better superovulatory results when compared to the 9 days protocol and that the total follicle count in the last dose of pFSH was a good predictor of superovulatory response only in Morada Nova ewes treated with P4 for 12 days.

Qualitative and quantitative analysis of bacteria from vaginitis associated with intravaginal implants in ewes following estrus synchronization / Análise qualitativa e quantitativa de bactérias da vaginite associadas com implante intravaginal em ovelhas após sincronização de estro

This study evaluated the presence of vaginitis and the bacterial load associated with different intravaginal implants in ewes. Twenty-four Dorper and crossbred ewes were allocated into three groups and received intravaginal implant containing 0.3g progesterone (CIDR(r)), 60mg MAP or sponges without progesterone (CONTROL) for six days. Then, CIDR and MAP treated-ewes received 12.5mg dinoprost and 300IU eCG. Vaginal mucus samples were collected at four times: before device insertion, at the day of its removal, 24 and 48 hours after. The samples were cultured and the colonies were counted (CFU/mL) and identified. The results obtained from the counting of CFU mL-1 were submitted to Kruskal-Wallis H test, with P 0.05 being considered significant. Before device insertion, 68.2% of the samples yielded Staphylococcus spp. and 60.0% of them were Staphylococcus aureus. After implant removal, 100% of ewes had clinical signs of vaginitis. However, the level of local infection in the CONTROL-ewes was lower (P>0.05) in comparison with MAP and CIDR-treated ewes. During the occurrence of vaginitis, the predominant isolates belonged to the coliform group, mainly Escherichia coli (72.7%). Such infection was not determined by the members of the vaginal microbiota that were present before implant insertion and normal microbiota was restored between 24 to 48 hours after insert removal.(AU)

Este estudo avaliou a presença de vaginite e contagem bacteriana associada ao uso de diferentes dipositivos intravaginais em ovelhas. Vinte e quatro fêmeas Dorper e mestiças foram alocadas em três grupos e receberam implante intravaginal contendo 0,3g de progesterona (CIDR(r)), 60mg de acetato de medroxiprogesterona (MAP) ou esponjas sem progesterona (CONTROLE) por seis dias. Posteriormente, as ovelhas tratadas com CIDR e MAP receberam 12,5mg de dinoprost e 300 UI de eCG. Amostras do muco vaginal foram coletadas em quatro momentos: antes da inserção do dispositivo, no dia de sua retirada, 24 e 48 horas após. As amostras foram cultivadas e as colônias foram contadas (UFC mL-1) e identificadas. Os resultados obtidos da contagem das UFC mL-1 foram submetidos ao teste do qui-quadrado, com P 0,05 sendo considerado significativo. Antes da inserção do dispositivo, 68,2% das amostras continham Staphylococcus spp., sendo 60,0% delas Staphylococcus aureus. Após a remoção do implante, 100% das ovelhas apresentaram sinais clínicos de vaginite. Entretanto, o grau de infecção local nas ovelhas do grupo CONTROLE foi menor (P>0.05), em comparação com as ovelhas recebendo CIDR e MAP. Durante a ocorrência da vaginite, os isolados predominantes pertenciam ao grupo dos coliformes, principalmente Escherichia coli (72,7%). Tal infecção não foi determinada pelos membros da microbiota vaginal, que estavam presentes antes da inserção dos dispositivos, e a microbiota normal foi reestabelecida entre 24 e 48 horas após sua remoção.(AU)

EFEITO DA GONADOTROPINA CORIÔNICA HUMANA SETE DIAS APÓS O ESTRO NA FORMAÇÃO DE CORPO LÚTEO ACESSÓRIO E GESTAÇÃO EM CABRAS LEITEIRAS

Em caprinos, o folículo dominante atinge seu diâmetro máximo no sexto dia após ovulação ou sete dias após início do estro. Sendo assim, o objetivo deste estudo foi avaliar o papel da gonadotropina coriônica humana (hCG) no Dia 7 após o estro no corpo lúteo (CL) original, na formação do CL acessório (CLA), concentrações de progesterona sérica e taxa de gestação em cabras leiteiras. Um total de 96 cabras da raça Toggenburg receberam esponja intravaginal contendo 60 mg de acetato medroxiprogesterona por seis dias. Às 24 h antes da retirada da esponja, 200 UI de gonadotropina coriônica equina e 30 µg de d-cloprostenol i.m. foram administrados. Após a retirada da esponja, a detecção de estro e acasalamento natural foram realizados. Sete dias (D7) após o estro, as fêmeas receberam 1 mL de salina (grupo CONTROLE) ou 300 UI de hCG (grupo hCG) i.m. Exames ultrassonográficos foram efetuados nos dias sete, 13, 17 e 21 após o estro e a taxa de gestação foi verificada no D30. A taxa de resposta ao estro foi de 89,6% (86/96). A área de tecido luteal, vascularização luteal e diâmetro de tecido luteal não revelaram diferenças significativas entre os grupos. A taxa de formação do CLA foi de 46,5% (20/43) para as cabras do grupo hCG e 0% para o CONTROLE e todas as fêmeas que desenvolveram CLA tornaram-se gestantes. A taxa de gestação foi maior (P<0,05) nas cabras tratadas com hCG (90,7%; 39/43) do que nas do CONTROLE (74,4%; 32/43). Em conclusão, a administração de hCG no D7 após o estro afetou positivamente a taxa de gestação em caprinos leiteiros.

In goats, the dominant follicle reaches its maximum diameter in the sixth day after ovulation or seventh day after estrus onset. This study aimed to assess the role of exogeneous hCG on Day 7 after estrus on the ovulatory corpus luteum (CL), accessory CL (ACL) formation, serum progesterone concentrations and pregnancy rate in dairy goats. A total of 96 Toggenburg female goats received an intravaginal sponge containing 60 mg of medroxyprogesterone acetate for six days. Both 200 IU equine chorionic gonadotropin and 30 µg of d-cloprostenol i.m. were administered 24 h before sponge removal. After sponge removal, estrus detection and breeding were performed. Seven days (D7) after estrus, females received either 1 mL of saline (CONTROL group) or 300 IU human chorionic gonadotropin (hCG group) i.m. Ultrasound exams were performed on Day 7, 13, 17 and 21 after estrus and pregnancy rate was verified on D30. Estrus response rate was overall 89.6% (86/96). The area of luteal tissue, luteal vascularization and the luteal tissue diameter did not reveal important differences between both groups. The ACL formation rate was 46.5% (20/43) for hCG and 0% for CONTROL goats and all females that developed ACL became pregnant. Pregnancy rate was higher (P<0.05) in hCG-goats (90.7%; 39/43) than in CONTROL-goats (74.4%; 32/43). In conclusion, hCG administration on D7 after estrus positively affected the pregnancy rate in dairy goats. Keywords

PROTOCOLOS HORMONAIS DE SINCRONIZAÇÃO E INDUÇÃO DE ESTRO EM OVELHAS LEITEIRAS NOS TRÓPICOS

O presente estudo objetivou testar a eficiência dos protocolos de indução e sincronização de estro em ovelhas leiteiras, considerando: (i) intervalo de aplicação da prostaglandina sintética na estação reprodutiva, (ii) tempo de exposição à progesterona sintética e (iii) dose de eCG temporada de superação. No estudo 1, 52 ovelhas foram submetidas à sincronização do cio por duas doses de d-cloprostenol em intervalos de sete a nove dias. No estudo 2, 47 ovelhas pluríparas foram submetidas à indução do estro utilizando um dispositivo intravaginal contendo 60 mg de acetato de medroxiprogesterona, mantido por seis, nove ou 12 dias. Um dia antes de sua retirada, 37,5 µg de d-cloprostenol e 300 UI de eCG foram aplicados. No estudo 3, 46 ovelhas foram submetidas à indução do estro sincronizado com o uso de dispositivo progestagênico intravaginal por seis dias. No quinto dia, d-cloprostenol e 300 UI ou 400 UI de eCG foram administrados. Para todos os estudos, após a segunda dose de d-cloprostenol ou retirada da esponja, os sinais de início e término do estro foram registrados e o acasalamento natural foi realizado. Após 30 dias, a ultrassonografia transretal foi realizada para o diagnóstico da gestação. No estudo 1, os grupos apresentaram taxa de estro (80,0 e 77,8 %) e taxa de prenhez (85,0 e 66,7 %) similares. Já, o intervalo entre a segunda aplicação de d-cloprostenol e o início do estro foi menor no G7dias (31,5 ± 7,8 h) quando comparado ao G9dias (37,8 ± 7,2 h). No estudo 2 não houve diferença entre os grupos experimentais. Foram obtidas uma taxa de estro de 95,7 %, duração média do estro de 29,6 ± 11 h, intervalo médio da retirada da esponja ao início e final do estro de 34,7 ± 11,7 e 64,3 ± 9,1 h, respectivamente, e taxa de gestação de 71,1 %. Também não houve diferenças entre os grupos experimentais no estudo 3. Foram obtidas uma taxa de estro de 80,4 %, taxa de gestação de 65,0 % e número de embriões de 1,5 ± 0,6. Em conclusão, é possível diminuir (i) o intervalo entre as aplicações de dcloprostenol durante sete dias na época de reprodução, (ii) a duração da exposição à progesterona sintética para seis dias e (iii) a dose de eCG (300 UI) durante a contra-estação reprodutiva em ovelhas da raça Lacaune em condições tropicais.

The present study aimed to test the efficiency of estrus induction and synchronization protocols in dairy ewes, considering: (i) synthetic prostaglandin application interval in the breeding season, (ii) synthetic progesterone exposure time and (iii) eCG dose in outbreeding season. In study 1, 52 ewes were subjected to estrus synchronization using two doses of d-cloprostenol at intervals of seven or nine days. In study 2, 47 pluriparous sheep underwent estrus induction using an intravaginal device containing 60 mg medroxyprogesterone acetate, maintained for six, nine or 12 days. One day before withdrawal, 37.5 µg d-cloprostenol and 300 IU eCG were applied. In study 3, 46 sheep underwent synchronized estrus induction with the use of an intravaginal progestagen device for six days. On the fifth day, d-cloprostenol and 300 IU or 400 IU eCG were administered. For all studies, after the second dose of d-cloprostenol or sponge removal, signs of estrus onset and termination were recorded and natural mating was performed. After 30 days, transrectal ultrasound was performed to diagnose pregnancy. In study 1, the groups presented similar estrus rate (80.0 and 77.8%) and pregnancy rate (85.0 and 66.7%). However, the interval between the second application of d-cloprostenol and the beginning of estrus was smaller in G7days (31.5 ± 7.8h) when compared to G9days (37.8 ± 7.2h). In study 2 there was no difference between the experimental groups. An estrus rate of 95.7% was obtained, mean estrus duration of 29.6 ± 11 h, mean interval from sponge removal at the beginning and end of estrus of 34.7 ± 11.7 and 64.3 ± 9. , 1 h, respectively, and pregnancy rate of 71.1%. There were also no differences between the experimental groups in study 3. An estrus rate of 80.4%, pregnancy rate of 65.0% and number of embryos of 1.5 ± 0.6 were obtained. In conclusion, it is possible to decrease (i) the interval between d-cloprostenol applications by seven days at the breeding season, (ii) the duration of synthetic progesterone exposure to six days and (iii) the eCG dose (300 IU) during the outbreeding season in Lacaune ewes under tropical conditions.

ESTIMULAÇÃO OVARIANA VISANDO A PRODUÇÃO DE OÓCITOS EM OVELHAS DA RAÇA SANTA INÊS

A manipulação hormonal das funções ovarianas usando associação de gonadotrofinas e 2 progestágenos é amplamente aplicada nas tecnologias de reprodução assistida (ARTs) para 3 aumentar a obtenção de oócitos em ovelhas vivas. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito 4 de protocolos estimulatórios, considerando a resposta ovariana, a modulação gênica e seu 5 impacto sobre a qualidade dos complexos cumulus oócitos (CCOs) imaturos em ovelhas da raça 6 Santa Inês. No experimento 1, avaliou-se o uso de duas doses (80 e 120 mg) e dois regimes de 7 administração (única ou múltipla) do FSH. População folicular, taxa de recuperação, 8 quantidade de CCOs viáveis e BCB+ não diferiram, mas houve efeito do regime em múltipla 9 aplicação sobre a proporção de CCOs GI/II. A expressão de genes marcadores de qualidade e 10 da via esteroidogênica foi afetada (P<0.05) pelo FSH. A abundância na via esteroidogênica foi 11 reduzida com o aumento da dose de FSH nos protocolos de única aplicação, mas em múltipla 12 somente o LHr foi afetado. Comparando-se a mesma dose de FSH em diferentes regimes; 80 mg 13 em única aplicação reduziu a expressão de FSHr e ER, porém em 120 mg apenas o LHr foi 14 reduzido. No experimento 2, foi avaliado o uso da progesterona (P4) e acetato de 15 medroxiprogesterona (MAP) durante a estimulação com 80 mg de FSH em múltipla 16 administração previamente estabelecida no experimento 1. A resposta ovariana e os parâmetros 17 oocitários não diferiram entre os grupos. Contudo, a expressão gênica foi alterada pelos 18 progestágenos, onde receptores da via esteroidogênica (FSHr, LHr, Er) e marcadores de 19 qualidade (ZAR1, GDF9 e Bcl-2) foram abundantes em P4 (P <0,05). RELN foi subexpresso e 20 Bcl-2 superexpresso em MAP (P <0,05). FSHr, LHr e RELN foram superexpressos (P <0,05) 21 em P4 (vs MAP). Em conclusão, 80 mg de FSH em múltipla aplicação foi eficiente no 22 incremento da população folicular, obtenção de CCOs desenvolvidos (BCB+) e na modulação 23 de genes de impacto na qualidade. P4 e MAP não alteraram a dinâmica folicular, número de 24 folículos, número de CCOs e nem a qualidade morfológica dos mesmos. A P4 exógena modulou 25 positivamente a abundância dos genes com importância na aquisição da competência. O uso de 26 80 mg de FSH associado a um dispositivo intravaginal contendo P4 melhora a obtenção de 27 CCOs imaturos mais competentes para uso em ARTs em ovelhas. 28

progestogens are widely applied in the assisted reproductive technologies (ARTs) to enhance 3 oocyte obtaining in live female of small ruminants. The aim of this study was to evaluate the 4 effect of stimulatory protocols, considering ovarian response, gene modulation and its impact 5 on the quality of immature cumulus oocytes complex (COCs) in Santa Inês sheep. At 6 experiment 1, doses (80 and 120 mg) and application regimen (single or multiple) of FSH were 7 evaluated. Follicular population, recovery rate, number of viable COCs and BCB+ COCs did 8 not differ among groups, but there was effect on the proportion of GI / II COCs in the multiple 9 application regime. FSH affected expression of quality markers and steroidogenic pathway 10 (P<0.05). Abundance in the steroidogenic pathway was reduced with increasing of the FSH 11 dose in single application, but in multiple only LHr was affected. When comparing the same 12 FSH dose in different regimen, 80 mg in single application reduced the expression of FSHr and 13 ER, but in 120 mg only the LHr was reduced. At experiment 2, the effect of progesterone (P4) 14 and medroxyprogesterone acetate (MAP) used during FSH stimulation were evaluated. Ovarian 15 response and oocyte parameters did not differ among groups. However, gene expression was 16 altered by progestogens: steroidogenic pathway receptors (FSHr, LHr, Er) and quality markers 17 (ZAR1, GDF9 and Bcl-2) were up-regulated in P4. RELN was down-regulated and Bcl-2 up-18 regulated in MAP (P <0.05). FSHr, LHr and RELN were up-regulated (P <0.05) in P4 (vs 19 MAP). In conclusion, 80 mg of FSH in multiple applications was efficient to increase the 20 follicular population, fully grown (BCB +) COCs obtaining and modulated positively the genes 21 expression. P4 and MAP did not alter the follicular dynamics, number of follicles, number of 22 CCOs or their morphological quality. Exogenous P4 positively modulated the abundance of 23 genes with importance in competence acquisition. The use of 80 mg of FSH associated with an 24 intravaginal device containing P4 improves the obtaining of competent immature COCs for use 25 in ARTs in sheep. 26

EFEITOS DO TRATAMENTO COM PROGESTÁGENOS SOBRE O ÚTERO DE GATAS DOMÉSTICAS

O Brasil possui a segunda maior população pet do mundo, e os gatos domésticos têm crescido com maior proporção. Pararelamente a esse crescimento, também tem crescimento o número de animais abandonados, além de baixos índices de adoção. A criação desses animais sem acompanhamento do médico veterinário, mobilidade irrestrita e ausência de controle reprodutivo determina prejuízos ao seu bem-estar e podem resultar em agravos aos seres humanos, como transmissão de doenças, contaminação ambiental, formando um quadro problemático para saúde pública. Toda essa problemática da procriação excessiva e as suas decorrências, aumentou também o uso de contraceptivos, que acometem inúmeros efeitos indesejáveis, logo, faz-se necessário o conhecimento da anatomofisiologia reprodutiva da gata doméstica (Felis catus), bem como conhecer os protocolos de contracepção mais específicos e eficientes, tendo em vista os mecanismos de ação e indicação, que tragam menos danos colaterais, e métodos mais seguros ao controle reprodutivo. A revisão de literatura teve como objetivo abordar a anatomofisiologia reprodutiva da gata doméstica (Felis catus) e os métodos contraceptivos mais utilizados, mecanismo de ação, dosagens utilizadas, vantagens e desvantagens de cada protocolo considerado. Nesse sentido a avaliação e a busca por métodos contraceptivos menos onerosos configura-se como uma alternativa ao controle da natalidade, levando em consideração as relações que os fármacos têm e seus efeitos colaterais. Assim, o experimento teve como objetivo foi avaliar os efeitos de contraceptivos à base de progesterona em gatas domesticas, na macroscopia uterina, o efeito imunossupressor na citologia endometrial e a histopatologia. Foram utilizadas 17 gatas, sem raça definida, com até dois anos de idade, sem histórico de patologias reprodutivas ou aplicação prévia de anticoncepcionais. Esses animais foram divididos em três grupos experimentais, grupo controle (n=7) sem administração de progestágenos, grupo oral (n=4) aplicação de progestágeno oral e grupo injetável (n=6) aplicação de progestágeno injetável. Os animais foram submetidos, após 12 semanas, à ovariohisterectomia para análises. As alterações macroscópicas uterinas foram semelhantes nos grupos oral e injetável, onde grande parte apresentou parede uterina espessada, endométrio hipertrofiado com dobras. Os efeitos citológicos demonstraram diminuição da resposta leucocitária nos grupos oral e injetável. Nas análises morfológicas e histológicas, os resultados mostraram glândulas endometriais mais dilatadas no grupo oral, seguido do grupo injetável, acompanhado da diminuição da lâmina própria. As demais estruturas analisadas, miométrio total, circular interna, estrato vascular e longitudinal externa tiveram maiores médias que o grupo controle, o que demonstrou os efeitos da P4 nessas estruturas uterinas, o que confirma a influência da estrutura do órgão. Os efeitos dos progestágenos sobre o útero de gatas tratadas com acetato de megestrol e medroxiprogesterona, onde as principais alterações encontradas foram em altura do epitélio superficial, miométrio total, muscular circular interna, estrato vascular e muscular longitudinal externa.

Brazil has the second largest pet population in the world, and domestic cats have grown to a greater extent. In addition to this growth, the number of abandoned animals has also increased, as well as low rates of adoption. The creation of these animals without accompaniment by the veterinarian, unrestricted mobility and lack of reproductive control will damage their well-being and may result in human suffering, such as disease transmission and environmental contamination, forming a problematic framework for public health. All this problem of excessive procreation and its consequences has also increased the use of contraceptives, which have numerous undesirable effects, so it is necessary to know the reproductive anatomy of the domestic cat (Felis catus), as well as to know the protocols of contraception more specific and efficient, in view of the mechanisms of action and indication, which bring less collateral damage, and safer methods to reproductive control. The literature review aimed to address the reproductive anatomy of domestic cat (Felis catus) and the most used contraceptive methods, mechanism of action, dosages used, advantages and disadvantages of each protocol considered. In this sense, the evaluation and the search for less costly contraceptive methods is an alternative to birth control, taking into account the relationships that the drugs have and their side effects. The objective of the experiment was to evaluate the effects of progesterone-based contraceptives in domestic cats, uterine macroscopy, immunosuppressive effect in endometrial cytology and histopathology. Seventeen unprotected cats were used up to two years of age, with no history of reproductive pathologies or prior application of contraceptives. These animals were divided in three experimental groups, control group (n = 7) without administration of progestins, oral group (n = 4) application of oral progestogen and injectable group (n = 6) application of injectable progestogen. After 12 weeks, the animals were submitted to ovariohysterectomy for analysis. Uterine macroscopic alterations were similar in the oral and injectable groups, where a large part had a thickened uterine wall, a hypertrophied endometrium with folds. The cytological effects demonstrated a decrease in the leukocyte response in the oral and injectable groups. In the morphological and histological analyzes, the results showed more dilated endometrial glands in the oral group, followed by the injectable group, accompanied by the decrease of the lamina propria. The other structures analyzed, total myometrium, internal circular, vascular and external longitudinal strata had higher mean values than the control group, which demonstrated the effects of P4 in these uterine structures, which confirms the influence of the organ structure. The effects of progestins on the uterus of cats treated with megestrol acetate and medroxyprogesterone, where the main alterations were in height of superficial epithelium, total myometrium, internal circular muscle, vascular stratus and external longitudinal muscle.

Influencia do transplante autólogo de células da granulosa no desenvolvimento do corpo lúteo e fertilidade, desenvolvimento gestacional e neonatal após transferência intrafalopiana de oócitos maturados in vitro em ovelhas

O objetivo do presente trabalho foi avaliar os corpos lúteos (CL) formados em decorrência da aspiração folicular guiada por laparoscopia (LOPU) na espécie ovina, quanto ao desenvolvimento morfológico, funcionalidade e potencial de desenvolvimento gestacional. Foram realizados dois experimentos, em ambos o estro das ovelhas foi sincronizado utilizando dispositivo intravaginal de acetato de medroxiprogesterona por 14 dias, aplicação de 140 g cloprostenol no quarto dia e retirada do dispositivo no décimo quarto dia com concomitante administração de gonadotrofina coriônica equina (eCG). No Experimento I, 48 horas após a remoção do dispositivo realizou-se a LOPU dos folículos ovarinos em seis ovelhas (Grupo LOPU LG), ou a LOPU associada com reposição de células em sete animais (Grupo reposição RG) em cinco animais a ovulação foi espontânea (Grupo controle CG). Foi realizada avaliação ultrassonográfica ovariana dos animais diariamente até o momento de uma nova ovulação e coleta de sangue para dosagem de progesterona (P4) plasmática a cada 48 horas até o decimo quinto dia. Os animais do LG (1,7±0,5) e RG (1,4±0,5) formaram mais CLs do que os animais do CG (1,0±0,0). A área lútea individual dos CLs foi menor no LG (0,69±0,30 cm2), em comparação ao RG (0,79±0,25 cm2) e CG (0,85±0,32 cm2). A área lútea total foi semelhante entre o LG (1,2±0,4 cm2) e RG (1,1±0,5 cm2), sendo ambas maiores que a do CG (0,9±0,3 cm2). A concentração de P4 plasmática não diferiu entre os grupos, ficando acima de dois ng/mL na fase estática de desenvolvimento dos CLs. No Experimento II, após 48 horas da retirada do dispositivo intravaginal realizou-se a LOPU de todos os folículos ovarianos visíveis. Os complexos cúmulus oócito (COCs) obtidos foram avaliados por estereomicroscopia, um COC autólogo com expansão das células do cúmulus foi transferido para o interior do oviduto de cada ovelha, ipsilateral ao ovário do maior folículo aspirado e inseminação artificial (IA) guiada por laroscopia no corno uterino do mesmo lado. Após as transferências dos oócitos e IA as fêmeas foram acompanhadas diariamente por ultrassonografia trasnretal e dosagem de P4 plasmática por 18 dias. Ocorreu a formação de 2 CLs em cada animal, estes apresentaram produção de P4 crescente em fase inicial, que se estabilizou em concentrações superiores a 2 ng/mL. Uma das ovelhas apresentou diminuição nas concentrações de P4 e redução da área lútea no final do período das observações. Duas ovelhas se apresentavam gestantes à ultrassonografia realizada 35 dias após a transferência dos oócitos, e os partos normais ocorreram aos 151 e 153 dias, respectivamente. A partir das informações dos dois experimentos conclui-se que a LOPU em momento pré-ovulatório leva a formação de CLs funcionais em ovelhas, que o procedimento leva a formação de CLs acessórios, a transferência autóloga de células foliculares leva ao incremento da área lútea, e os animais apresentam concentrações plasmáticas similares à ovelha com CL decorrente de ovulação espontânea, sendo possível o desenvolvimento de gestação normal.

The aim of the present study was to evaluate the corpus luteum (CL) formed as a result of laparoscopic ovum pick-up (LOPU) in the ovine, regarding the morphological development, functionality and potential of gestational development. Two experiments were carried out, in both of them, the oestrous of the ewes was synchronized using a 14-day intravaginal device of medroxyprogesterone acetate, 140 g cloprostenol on the fourth day and withdrawal of the device on the fourteenth day with concomitant administration of equine chorionic gonadotrophin (eCG). In Experiment I, 48 hours after the removal of the device, was realized a LOPU of the ovarian follicles in six sheep (LOPU Group - LG), or LOPU associated with cell replacement in seven animals (Replacement Group - RG) was performed in five animals a ovulation was spontaneous (Control Group - CG). Ultrasonographic evaluation of the animals was performed daily until the time of ovulation and blood collection for progesterone plasma concentration (P4) every 48 hours until the 15th day. LG animals (1.7 ± 0.5) and RG (1.4 ± 0.5) formed more CLs than CG animals (1.0 ± 0.0). The individual luteal area of CLs was lower in LG (0.69 ± 0.30 cm2), compared to RG (0.79 ± 0.25 cm2) and CG (0.85 ± 0.32 cm2). The total luteal area was similar between LG (1.2 ± 0.4 cm2) and RG (1.1 ± 0.5 cm2), both larger than CG (0.9 ± 0.3 cm2). Plasma P4 concentration did not differ between groups, being above 2 ng / mL in the static phase of CLs development. In Experiment II, after 48 hours of withdrawal of the intravaginal device, LOPU of all visible ovarian follicles was performed. The oocyte cumulus complexes (COCs) obtained were evaluated by stereomicroscopy, an autologous COC with cumulus cell expansion was transferred into the ovary of each sheep, ipsilateral to the ovary of the largest follicle aspirated and artificial insemination (AI) guided by laparoscopy in the uterine horn on the same side. After oocyte and IA transfer the females were monitored daily by transrectal ultrasonography and plasma P4 dosage for 18 days. The formation of 2 CLs occurred in each animal, which presented increased P4 production in the initial phase, which stabilized at concentrations higher than 2 ng/mL. One of the sheep presented a decrease in P4 concentrations and a reduction of the luteal area at the end of the observation period. Two sheep were pregnant on ultrasonography performed 35 days after oocyte transfer, and normal deliveries occurred at 151 and 153 days, respectively. From the information of the two experiments it was concluded that LOPU in the pre-ovulatory period leads to the formation of functional CLs in sheep, which leads to the formation of accessory CLs, the autologous transfer of follicular cells leads to the increase of the luteal area, and the animals present similar plasma concentrations to the sheep with CL due to spontaneous ovulation, being possible the development of normal gestation.

Delaying farrowing using intravaginal devices impregnated with progestagen does not affect the proportion of piglets born alive

The objective of this study was to evaluate the efficiency of progestagen intravaginal devices (IVDs) in preventing parturition in sows by determining the effect of delaying parturition on the alive/total born piglets ratio. Evaluations of IVDs containing 0.5, 1.0 or 1.5g progesterone (P4) showed they were not effective in delaying parturition at any dosage tested. In a second experiment, seventy-five sows at day 112 of pregnancy were equally distributed (n=15 per group) in the following treatments: prostaglandin (PGF2; 250µg sodium cloprostenol; control group) or PGF2 and simultaneous insertion of an IVD containing medroxyprogesterone acetate (MPA) for 48h. Control sows initiated labor 27.7±1.6h after PGF2 injection. The mean time (±SEM) between PGF2 administration and parturition was 72.1±8.8h, 72.7±3.8h, 82.7±7.1h and 81.8±3.5h for MPA 100, 200, 400 and 800mg, respectively, differing from control group (P 0.05). To evaluate the effect of delaying parturition on the alive/total born piglets ratio at birth, sows between days 109 and 112 of gestation received IVDs containing 800mg MPA (on Thursdays) for 72h to prevent parturition in weekends and then were treated with PGF2 at the time of device withdrawal (on Sundays). The alive/total born piglets ratio was 89.0±1.6, 90.1±1.2 and 89.0±1.5% for control (Normal group; n=57 sows), PGF2-induced (Induced group; n=57 sows), and IVD+PGF2-induced (MPA800 group, n=56 sows) groups, respectively (P>0.05). These findings confirm that IVDs impregnated with MPA can effectively prevent parturition in sows without affecting the alive/total born piglets ratio and therefore represent an alternative to avoid weekend farrowing in swine herds.

O objetivo do presente estudo foi avaliar a eficiência de dispositivos intravaginais (DIVs) contendo progestágeno na prevenção do parto e determinar o efeito do atraso do parto sobre a proporção de leitões vivos/nascidos totais. DIVs contendo 0,5, 1,0 ou 1,5g de progesterona (P4) não foram eficientes na prevenção do parto em nenhuma das doses. No experimento 2, setenta e cinco porcas aos 112 dias de gestação foram equilibradamente distribuídas (n=15 por grupo) nos seguintes tratamentos: prostaglandina (PGF2; 250µg cloprostenol sódico; grupo controle) ou PGF2 e simultânea inserção de DIV contendo acetato de medroxiprogesterona (MAP) por 48h. Fêmeas do grupo controle iniciaram o parto 27,7±1,6h após injeção de PGF2. O tempo médio entre a administração de PGF2 e início do parto foi 72,1±8,8h, 72,7±3,8h, 82,7±7,1h e 81,8±3,5h para os grupos MAP 100, 200, 400 e 800mg, respectivamente, diferindo do grupo controle (P 0,05). Para avaliar o efeito da inibição do parto sobre a proporção de leitões nascidos vivos, porcas entre 109 e 112 dias de gestação receberam DIVs contendo 800mg MAP (quintas-feiras) por 72h para prevenir o parto aos finais de semana e foram tratadas com PGF2 no momento da retirada dos DIV (aos domingos). A razão leitões vivos/nascidos totais foi 89,0±1,6, 90,1±1,2 e 89,0±1,5% nos grupos controle (Normal; n=57 porcas), induzido com PGF2 (Induzido; n=57 porcas) e PGF2+DIV (MPA800; n=56 porcas), respectivamente (P>0,05). Esses resultados confirmam que DIVs contendo MAP podem efetivamente inibir o início do parto em porcas sem afetar a proporção de leitões nascidos vivos e, portanto, representam uma alternativa para evitar partos aos finais de semana.

Delaying farrowing using intravaginal devices impregnated with progestagen does not affect the proportion of piglets born alive

The objective of this study was to evaluate the efficiency of progestagen intravaginal devices (IVDs) in preventing parturition in sows by determining the effect of delaying parturition on the alive/total born piglets ratio. Evaluations of IVDs containing 0.5, 1.0 or 1.5g progesterone (P4) showed they were not effective in delaying parturition at any dosage tested. In a second experiment, seventy-five sows at day 112 of pregnancy were equally distributed (n=15 per group) in the following treatments: prostaglandin (PGF2; 250µg sodium cloprostenol; control group) or PGF2 and simultaneous insertion of an IVD containing medroxyprogesterone acetate (MPA) for 48h. Control sows initiated labor 27.7±1.6h after PGF2 injection. The mean time (±SEM) between PGF2 administration and parturition was 72.1±8.8h, 72.7±3.8h, 82.7±7.1h and 81.8±3.5h for MPA 100, 200, 400 and 800mg, respectively, differing from control group (P 0.05). To evaluate the effect of delaying parturition on the alive/total born piglets ratio at birth, sows between days 109 and 112 of gestation received IVDs containing 800mg MPA (on Thursdays) for 72h to prevent parturition in weekends and then were treated with PGF2 at the time of device withdrawal (on Sundays). The alive/total born piglets ratio was 89.0±1.6, 90.1±1.2 and 89.0±1.5% for control (Normal group; n=57 sows), PGF2-induced (Induced group; n=57 sows), and IVD+PGF2-induced (MPA800 group, n=56 sows) groups, respectively (P>0.05). These findings confirm that IVDs impregnated with MPA can effectively prevent parturition in sows without affecting the alive/total born piglets ratio and therefore represent an alternative to avoid weekend farrowing in swine herds.

O objetivo do presente estudo foi avaliar a eficiência de dispositivos intravaginais (DIVs) contendo progestágeno na prevenção do parto e determinar o efeito do atraso do parto sobre a proporção de leitões vivos/nascidos totais. DIVs contendo 0,5, 1,0 ou 1,5g de progesterona (P4) não foram eficientes na prevenção do parto em nenhuma das doses. No experimento 2, setenta e cinco porcas aos 112 dias de gestação foram equilibradamente distribuídas (n=15 por grupo) nos seguintes tratamentos: prostaglandina (PGF2; 250µg cloprostenol sódico; grupo controle) ou PGF2 e simultânea inserção de DIV contendo acetato de medroxiprogesterona (MAP) por 48h. Fêmeas do grupo controle iniciaram o parto 27,7±1,6h após injeção de PGF2. O tempo médio entre a administração de PGF2 e início do parto foi 72,1±8,8h, 72,7±3,8h, 82,7±7,1h e 81,8±3,5h para os grupos MAP 100, 200, 400 e 800mg, respectivamente, diferindo do grupo controle (P 0,05). Para avaliar o efeito da inibição do parto sobre a proporção de leitões nascidos vivos, porcas entre 109 e 112 dias de gestação receberam DIVs contendo 800mg MAP (quintas-feiras) por 72h para prevenir o parto aos finais de semana e foram tratadas com PGF2 no momento da retirada dos DIV (aos domingos). A razão leitões vivos/nascidos totais foi 89,0±1,6, 90,1±1,2 e 89,0±1,5% nos grupos controle (Normal; n=57 porcas), induzido com PGF2 (Induzido; n=57 porcas) e PGF2+DIV (MPA800; n=56 porcas), respectivamente (P>0,05). Esses resultados confirmam que DIVs contendo MAP podem efetivamente inibir o início do parto em porcas sem afetar a proporção de leitões nascidos vivos e, portanto, representam uma alternativa para evitar partos aos finais de semana.

Delaying farrowing using intravaginal devices impregnated with progestagen does not affect the proportion of piglets born alive

The objective of this study was to evaluate the efficiency of progestagen intravaginal devices (IVDs) in preventing parturition in sows by determining the effect of delaying parturition on the alive/total born piglets ratio. Evaluations of IVDs containing 0.5, 1.0 or 1.5g progesterone (P4) showed they were not effective in delaying parturition at any dosage tested. In a second experiment, seventy-five sows at day 112 of pregnancy were equally distributed (n=15 per group) in the following treatments: prostaglandin (PGF2; 250µg sodium cloprostenol; control group) or PGF2 and simultaneous insertion of an IVD containing medroxyprogesterone acetate (MPA) for 48h. Control sows initiated labor 27.7±1.6h after PGF2 injection. The mean time (±SEM) between PGF2 administration and parturition was 72.1±8.8h, 72.7±3.8h, 82.7±7.1h and 81.8±3.5h for MPA 100, 200, 400 and 800mg, respectively, differing from control group (P 0.05). To evaluate the effect of delaying parturition on the alive/total born piglets ratio at birth, sows between days 109 and 112 of gestation received IVDs containing 800mg MPA (on Thursdays) for 72h to prevent parturition in weekends and then were treated with PGF2 at the time of device withdrawal (on Sundays). The alive/total born piglets ratio was 89.0±1.6, 90.1±1.2 and 89.0±1.5% for control (Normal group; n=57 sows), PGF2-induced (Induced group; n=57 sows), and IVD+PGF2-induced (MPA800 group, n=56 sows) groups, respectively (P>0.05). These findings confirm that IVDs impregnated with MPA can effectively prevent parturition in sows without affecting the alive/total born piglets ratio and therefore represent an alternative to avoid weekend farrowing in swine herds.

O objetivo do presente estudo foi avaliar a eficiência de dispositivos intravaginais (DIVs) contendo progestágeno na prevenção do parto e determinar o efeito do atraso do parto sobre a proporção de leitões vivos/nascidos totais. DIVs contendo 0,5, 1,0 ou 1,5g de progesterona (P4) não foram eficientes na prevenção do parto em nenhuma das doses. No experimento 2, setenta e cinco porcas aos 112 dias de gestação foram equilibradamente distribuídas (n=15 por grupo) nos seguintes tratamentos: prostaglandina (PGF2; 250µg cloprostenol sódico; grupo controle) ou PGF2 e simultânea inserção de DIV contendo acetato de medroxiprogesterona (MAP) por 48h. Fêmeas do grupo controle iniciaram o parto 27,7±1,6h após injeção de PGF2. O tempo médio entre a administração de PGF2 e início do parto foi 72,1±8,8h, 72,7±3,8h, 82,7±7,1h e 81,8±3,5h para os grupos MAP 100, 200, 400 e 800mg, respectivamente, diferindo do grupo controle (P 0,05). Para avaliar o efeito da inibição do parto sobre a proporção de leitões nascidos vivos, porcas entre 109 e 112 dias de gestação receberam DIVs contendo 800mg MAP (quintas-feiras) por 72h para prevenir o parto aos finais de semana e foram tratadas com PGF2 no momento da retirada dos DIV (aos domingos). A razão leitões vivos/nascidos totais foi 89,0±1,6, 90,1±1,2 e 89,0±1,5% nos grupos controle (Normal; n=57 porcas), induzido com PGF2 (Induzido; n=57 porcas) e PGF2+DIV (MPA800; n=56 porcas), respectivamente (P>0,05). Esses resultados confirmam que DIVs contendo MAP podem efetivamente inibir o início do parto em porcas sem afetar a proporção de leitões nascidos vivos e, portanto, representam uma alternativa para evitar partos aos finais de semana.

Viabilidade do uso de associação gonadotrópica para indução de ciclicidade em ovelhas fora da estação reprodutiva

A associação de progestágeno e gonadotrofina coriônica equina (P4-eCG) é o protocolo melhor estabelecido na espécie ovina para sincronização de estro. Este protocolo tem as melhores taxas de prenhez obtidas tanto com cruzamento por monta natural como por inseminação artificial, e ainda pelos benefícios agregados ao ciclo reprodutivo, principalmente quando há utilização do eCG. No entanto, o eCG não se encontra disponível isoladamente para venda em todos os países, sendo então necessário a utilização de um produto comercial de associação gonadotrófica (eCG+hCG). Em ovinos, há poucos estudos envolvendo os efeitos da adição de hCG em protocolo de indução à ovulação, principalmente comparando ao uso de eCG isolado. Desta forma, o objetivo deste estudo foi avaliar a eficácia de um protocolo P4-eCG+hCG, frente ao protocolo convencional P4-eCG e P4 isolado, para indução de estro e ovulação em cordeiras pré-púberes e ovelhas durante o anestro estacional, com base na hipótese de que o hCG associado ao eCG promoveria melhora nos parâmetros reprodutivos. No experimento 1, verificou-se as taxas de manifestação de estro e prenhez. Foram utilizadas 66 cordeiras pré-púberes na contra-estação reprodutiva, submetidas aleatoriamente aos seguintes protocolos: dispositivo vaginal (DIV) contendo acetato de medroxiprogesterona (MAP) por 12 dias (MAP; n=13), DIV por 12 dias associado à 400UI de eCG na retirada do dispositivo (eCG; n=26) ou DIV por 12 dias associado à 400UI eCG e 200UI hCG (eCG+hCG; n=27) na retirada do dispositivo. Após exposição à monta natural com carneiros, a taxa de manifestação de estro foi superior em eCG (88,5%; 23/26) e eCG+hCG (85,2%; 23/27), em comparação ao MAP (33,3%; 4/12; P<0,05). A taxa de prenhez foi superior no eCG (34,6%; 9/26) em relação ao MAP (0%; 0/13; P<0,05) e intermediária no grupo eCG+hCG (18,6%; 5/27). Os níveis de progesterona sérica não diferiram entre os grupos eCG e eCG+hCG, sendo observado apenas um efeito do momento. No experimento 2, 18 ovelhas foram submetidas aos mesmos protocolos do experimento 1 (n=6/grupo), sendo observado um maior crescimento folicular nos grupos tratados com gonadotrofinas em comparação ao MAP (P<0,05). Os níveis de progesterona nove dias após os tratamentos foram superiores no eCG+hCG em comparação aos demais grupos. Coletivamente, os resultados sugerem que a associação de eCG+hCG não traz benefícios em relação ao uso de eCG isoladamente.

The association of progestogen and equine chorionic gonadotrophin (P4-eCG) is the best established protocol in the ovine species for estrus synchronization. This protocol has the best pregnancy rates obtained with both natural mating and artificial insemination, as well as the added benefits to the reproductive cycle, especially when using eCG. However, the eCG is not available alone for sale in all countries, so a commercial gonadotrophic association product (eCG + hCG) is required. In sheep, there are few studies involving the effects of adding hCG on ovulation induction protocol, specially comparing to the use of eCG alone. The objective of this study was to evaluate the efficacy of a P4-eCG+hCG protocol, compared to the conventional protocol P4 and P4-eCG alone, for induction of estrus and ovulation in prepubertal sheep and ewes during seasonal anestrous, based on the hypothesis that hCG associated with eCG would promote improvement in reproductive parameters. In experiment 1, the rates of estrus and pregnancy were observed. Sixty-six pre-pubescent ewes were used outside the reproductive season, randomly assigned to the following protocols: intravaginal device (DIV) containing medroxyprogesterone acetate (MAP) for 12 days (MAP; n = 13); 12-day DIV associated with 400IU eCG at DIV withdrawal; n = 26) or DIV for 12 days associated with 400IU eCG and 200IU hCG (eCG + hCG; n = 27) at DIV withdrawal. After exposure to natural mating, the rate of estrus manifestation was higher in eCG (88.5%, 23/26) and eCG + hCG (85.2%, 23/27) compared to MAP (33.3%, 4/12, P <0.05). The pregnancy rate was higher in eCG (34.6%, 9/26) than in MAP (0%, 0/13, P <0.05) and intermediate in the eCG + hCG group (18.6%; 5/27). Serum progesterone levels did not differ between the eCG and eCG + hCG groups, and only an effect of moment was observed. In the experiment 2, 18 ewes were submitted to the same protocols from experiment 1 (n = 6 / group), and a greater follicular growth was observed in the groups treated with gonadotrophins compared to MAP alone (P <0.05). Progesterone levels nine days after treatments were higher in eCG + hCG compared to the other groups. Collectively, the results suggest that the association of eCG + hCG does not bring benefits in relation to the use of eCG alone.

ENSAIO CLÍNICO COM CÉLULAS-TRONCO MESENQUIMAIS (CTM) NA RECUPERAÇÃO DE OVÁRIOS DE CABRAS SUBMETIDAS A MÚLTIPLAS ASPIRAÇÕES FOLICULARES POR LAPAROSCOPIA (LOPU)

Os problemas ligados à diminuição do potencial produtivo dos ovários estão entre os principais fatores limitantes à reprodução com isso, objetivou-se com este trabalho avaliar o efeito da infusão de células-tronco mesenquimais (CTM) em ovários de cabras submetidas a múltiplas aspirações foliculares por laparoscopia (LOPU). Foram utilizadas cabras sem padrão racial definido (SPRD), não lactantes, com idade média de três anos e escore da condição corporal (ECC) variando de 3,0 a 4,0 e distribuídas em dois experimentos, no primeiro com doze cabras (n=12) e no segundo com sete (n=7). No experimento um as cabras foram sincronizadas com o uso de esponjas intravaginais com acetato de medroxiprogesterona e aplicações de d-cloprostenol e a estimulação ovariana constituiu-se na administração de FSHp e eCG, em aplicações únicas, feita 36 horas anterior às LOPUs, e posteriormente as fêmeas foram submetidas a 5 sessões/animal de LOPU com intervalos de 12 dias. No experimento dois as cabras sincronizadas da mesma forma do experimento um e posteriormente divididas em dois tratamentos: T1-CTR (Controle 3 animais); T2 - CTM (ovários tratados com células tronco mesenquimais 4 animais), incluindo a terapia celular através de infusão ovariana com células tronco CTM, na concentração de 1 x 106 cel/mL, nanomarcadas com Qtracker® e diluídas em 0,2 mL de solução fisiológica (NacL a 0,9%) em duas aplicações: na última LOPU e 70 dias após. As avaliações quanto à funcionalidade ovariana/oocitária foi realizada 45 dias posterior à ultima infusão de CTM. Coletas de sangue para dosagens hormonais de estradiol e progesterona foram realizadas, antes da primeira, e após a quinta LOPU juntamente com biopsias do córtex ovariano. A avaliação histológica foi realizada após 115 dias da primeira infusão de CTM, a partir do abate dos animais e coleta dos ovários. Todas as análises foram executadas através do programa Statistical Analysis System (SAS Institute Inc., 2002). No experimento um, houve diferença significativa (P<0,05) na média de folículos aspirados com menor média na 3ª LOPU. Em relação à média de oócitos recuperados, não observou-se diferença significativa entre a 1ª e a 5ª LOPU (P>0,05), porem as médias dos folículos aspirados na 2ª, 3ª e 4ª LOPU reduziram significativamente em relação a 1ª LOPU (P<0,05). Quanto a taxa de recuperação oocitária, houve uma redução na 3ª e 4ª LOPU em relação à 1ª e 2ª LOPU (P<0,05) e na 5ª LOPU observou-se um aumento da recuperação oocitaria em relação à 3ª e 4ª LOPU (P<0,05). Quanto a qualidade, os CCOs de grau 2 reduziram entre a 1ª e a 4ª LOPU e os oócitos de grau 4 aumentaram na 2ª, 4ª e 5ª LOPU em relação a 1ª e 3ª LOPU(P<0,05). Houve uma redução (P<0,05) de estruturas viáveis na 2ª e 4ª LOPU (46,4% e 53,8% respectivamente), com retomada da viabilidade na 3ª e 5ª LOPU (80,76% e 61,2% respectivamente). As biópsias que antecederam as coletas e pós sucessivas aspirações evidenciaram tecidos ovarianos morfologicamente normais, com alterações discretas no parênquima ovariano. Não houve diferença (P>0,05) na dosagem de progesterona entre as sucessivas LOPUs porem houve um aumento (P<0,05) na dosagem de estradiol da 2º LOPU em relação às demais. No experimento 2, não houve diferença significativa (P>0,05) entre os folículos aspirados, oócitos recuperados e taxa de recuperação em relação aos grupos controle e grupos tratados com CTMs. Em relação a qualidade dos CCOs não ocorreu diferença significativa (P<0,05) entre as classificações das estruturas oocitárias. Nas avaliações histológicas foram observadas discretas alterações no parênquima ovariano, sem comprometimento do mesmo. Conclui-se que, cinco sessões de aspirações foliculares por laparoscopia com intervalos de doses dias não interfere morfofuncionalmente nos ovários de cabras e que a utilização de CTM não influenciou nos parâmetros qualitativos e quantitativos de oócitos recuperados por LOPU de cabras SPRD.

The problems related to the reduction of ovaries productive potential are among the main limiting factors for reproduction, therefore, the objective of this work was to evaluate the effect of the infusion of mesenchymal stem cells (CTM) on ovary of goats submitted to multiple follicular aspirations by laparoscopy (LOPU). Goats with undefined racial pattern (SPRD), non-lactating, with mean age of three years and body condition scoring (ECC) ranging from 3.0 to 4.0 were used and distributed in two experiments, in the first with twelve goats (n= 12) and in the second with seven (n = 7). In the first experiment, the goats were synchronized using intravaginal sponges with medroxyprogesterone acetate and d-cloprostenol applications, ovarian stimulation consisted of administration of FSHp and eCG in single applications 36 hours prior to LOPUs, and later females were submitted to 5 sessions/animal of LOPU at 12-day intervals. In the second experiment, the goats were synchronized in the same way of the first experiment and later divided into two treatments: T1-CTR (Control - 3 animals); T2-CTM (ovaries treated with mesenchymal stem cells - 4 animals), including cell therapy through ovarian infusion in two applications with 1 x 106 cel/mL of stem cells - CTM, nanoparticulated with Qtracker ® and diluted in 0.2 mL of physiological solution (0.9% NaCl), these two applications were performed at the last LOPU and 70 days after. Evaluations for ovarian / oocyte functionality were performed 45 days after the last CTM infusion. Blood collections for hormonal dosages of estradiol and progesterone were performed, before the first LOPU, and after the fifth LOPU simultaneously to biopsies of the ovarian cortex. The histological evaluation was performed after the animals slaughter and collection of the ovaries, 115 days after the first CTM infusion. All analyzes were performed through the Statistical Analysis System (SAS Institute Inc., 2002). In the first experiment, there was a significant difference (P <0.05) in the mean of the aspirated follicles with lower mean in the 3rd LOPU. Regarding the mean of oocytes recovered, no significant difference was observed between the 1st and 5th LOPU (P> 0.05), however the mean of follicles aspirated in 2nd, 3rd and 4th LOPU significantly reduced compared to 1st LOPU (P <0.05). Regarding the oocyte recovery rate, there was a reduction in the 3rd and 4th LOPU in relation to the 1st and 2nd LOPU (P <0.05) and in the 5th LOPU there was an increase in oocyte recovery in relation to the 3rd and 4th LOPU (P <0.05). As regards the quality, the grade 2 levels of the CCO system increased between 1st and 4th LOPU and grade 4 levels increased in 2nd, 4th and 5th LOPU in relation to 1st and 3rd LOPU (P <0.05). There was a reduction (P <0.05) of viable structures in the 2nd and 4th LOPU (46.4% and 53.8%, respectively), with recovery of viability in the 3rd and 5th LOPU (80.76% and 61.2% respectively). The biopsies that preceded the collections and subsequent successive aspirations revealed morphologically normal ovarian tissues, with discrete alterations in the ovarian parenchyma. There was no difference (P> 0.05) in the progesterone dosage between successive LOPU's, but there was an increase (P <0.05) in the estradiol dosage of the 2nd LOPU in relation to the others. In the second experiment, there was no significant difference (P> 0.05) between aspirated follicles, recovered oocytes and recovery rate in relation to the control groups and groups treated with CTM's. Regarding the quality of CCOs, there was no significant difference (P <0.05) between the classifications of oocyte structures. In the histological evaluations, discrete alterations in the ovarian parenchyma were observed, without any impairment. It was concluded that five sessions of follicular aspiration by laparoscopy with dose and day intervals did not interfere morphofunctionally in the ovaries of goats and that the use of CTM did not influence the qualitative and quantitative parameters of oocytes recovered by LOPU from SPRD goats.