Association of Kappa casein gene polymorphism with milk production traits in crossbred dairy cows / Associação do polimorfismo do gene Kappa-caseína com características de produção de leite em vacas leiteiras mestiças

Milk's qualitative and technological properties are greatly affected by genetic polymorphisms in the kappa-casein gene, and their polymorphisms may serve as informative markers of yield and composition. Thus, the objective of this study was to detect kappa-casein (kappa-CN) gene polymorphisms and their association with milk production traits in crossbred dairy cows. One hundred healthy crossbred (Friesian x Jenoubi) dairy animals between three and five years old were sampled for blood and milk during their first lactation. The genomic DNA was extracted from whole blood, and restriction fragment length polymorphism (RFLP-PCR) was used to determine the genotype of the kappa-CN gene. As a consequence of the restriction digestion of this fragment with Hind III, it showed three different restriction patterns: BB (453 base pairs uncut), AB (453, 206, and 225 base pairs), and AA (206 and 225 base pairs). Based on genetic diversity, the AB genotype was the most predominant (n = 67), with a frequency of 0.67. A variant genotype of the kappa-CN gene was associated with milk production traits in crossbred dairy cows. Animals with the AA variant produced a higher milk yield and a higher percentage of fat, casein, protein, and solids not fat (SNF) (P≤0.05) (1.397kg, 0.75%, 0.31%, 0.27%, and 0.68%, respectively) than those with the BB variant. A logistic regression analysis confirmed that the kappa-CN genotypes increase milk yield and casein content. Therefore, genetic variants of the kappa-CN gene could be used as genetic markers for improving milk production traits in dairy cattle.(AU)

As propriedades qualitativas e tecnológicas do leite são muito afetadas por polimorfismos genéticos no gene kappa-caseína e esses polimorfismos podem servir como marcadores informativos de rendimento e composição. Assim, o objetivo deste estudo foi detectar polimorfismos do gene kappa-caseína (kappa-CN) e sua associação com características de produção de leite em vacas leiteiras mestiças. Cem animais mestiços (Freisian x Jenoubi) saudáveis, entre três e cinco anos de idade, foram amostrados durante a primeira lactação para sangue e leite. O DNA genômico foi extraído do sangue total e o polimorfismo dos fragmentos de restrição do DNA genômico (RFLP-PCR) foi usado para determinar o genótipo do gene kappa-CN. Em consequência da digestão de restrição deste fragmento com Hind III, ele apresentou três padrões de restrição diferentes: BB (453 pares de bases não cortadas), AB (453,206 e 225 pares de bases) eAA (206 e 225 pares de bases). Com base na diversidade genética, o genótipo AB foi o mais predominante (n = 67), com frequência de 0,67. Genótipo variante do gene kappa-CN foi associado com características de produção de leite em vacas leiteiras mestiças. Animais com a variante AA tiveram maior produção de leite e maior percentual de gordura, caseína, proteína e sólidos não gordurosos (SNG) (P≤0,05) (l,397kg, 0,75%, 0,31%, 0,27% e 0,68%, respectivamente) do que aqueles com variante BB. Uma análise de regressão logística confirmou que os genótipos kappa-CN aumentam a produção de leite e o teor de caseína. Portanto, variantes genéticas do gene kappa-CN podem ser usadas como marcadores genéticos para melhorar as características de produção de leite em bovinos leiteiros.(AU)

Effects of a hepatoprotectant and different feed energy sources on milk composition and nutrient partitioning in lactating cows / Efeitos de um hepatoprotetor e diferentes fontes de energia na dieta sobre a composição do leite e a partição dos nutrientes em vacas lactantes

The present study aimed at assessing the effects of hepatoprotective agents in diets that contain sources of energy on milk production, milk composition, and nutrient partition in lactating cows. Sixteen Holstein x Gir crossbred mid-lactation cows with an average body weight of 553 ± 85 kg were used in this study. These animals were allocated in a 4x4 Latin square design. A 2x2 factorial arrangement was employed in this feeding experiment. In each treatment, cows received diets with or without a hepatoprotective agent and variable in ground corn grain or citrus pulp as energy sources. Evaluated parameters included nutrient intake and digestibility, milk production, milk composition, energy balance, and nitrogen balance. Performance and nutrient balance variables were assessed and no interaction was observed between the hepatoprotective compounds and the dietary sources of energy. Dry matter intake, milk production and net energy for lactation were higher in corn as an energy source whereas milk fat content was higher in citrus pulp diets. There was a reduction in protein and casein contents in the milk of cows that was supplemented with an hepatoprotective agent. In this study, the hepatoprotective agent improved nitrogen balance in dairy cows. The use of the hepatoprotective compounds in the diet of these lactating cows in confinement reduced the milk protein fraction and favored a higher nitrogen balance in these animals. Retention of nitrogen compounds in the metabolism of lactating cows under confinement is influenced by hepatoprotective agents.(AU)

Objetivou-se com este estudo avaliar os efeitos de fontes de energia associadas a um hepatoprotetor sobre a produção, composição do leite e a partição dos nutrientes em vacas lactantes confinadas. Foram utilizadas 16 vacas mestiças Holandês x Gir no terço médio da lactação, com peso corporal médio de 553 ± 85 kg, distribuídas em delineamento experimental quadrado latino 4x4 quádruplo em arranjo fatorial 2x2. Os tratamentos consistiram de dieta com ou sem a inclusão do hepatoprotetor, e variação de milho moído ou polpa cítrica como fontes de energia. Não houve interação (P>0.05) entre as fontes de energia e o hepatoprotetor para as variáveis de desempenho e balanço de nutrientes. O consumo de matéria seca, a produção de leite, o leite corrigido para 4% de gordura foram maiores (P<0.05) nas dietas com milho moído como fonte de energia. O teor de gordura do leite foi maior (P<0.05) nas dietas com a polpa cítrica. Houve redução (P<0.05) no teor de proteína bruta e caseína no leite das vacas que receberam o hepatoprotetor na dieta. O hepatoprotetor favoreceu maior (P<0.05) retenção e balanço de nitrogênio nas vacas. Portanto, o milho moído pode ser utilizado na dieta como fonte de energia para impulsionar a produção de leite. Enquanto, a fonte de energia proveniente da polpa cítrica afeta a composição do leite, através do incremento no teor de gordura. O uso de hepatoprotetores na dieta favoreceu maior retenção de nitrogênio em vacas lactantes confinadas.(AU)

Milk allergy in jersey cows: first report in Brazil / Auto alergia ao leite em vaca jersey: primeiro relato no Brasil / Alergia a la leche de auto en vaca jersey: primer reporte en Brasil

Allergy to milk is the only auto-allergic disease in cattle. It is characterized by the retention and absorption of milk itself, making milk proteins, especially alpha casein, have access to the bloodstream, resulting in a type I hypersensitivity. The purpose of this report is to describe a case of auto-allergic disease in cattle. Here we report the case of a four-year-old Jersey female bovine, which was pregnant and weighing 400Kg. The animal was being treated at (hidden for revision)and had a history of an acute allergic reaction. Its owner reported sudden onset of skin lesions, salivation, and difficulty breathing. As the animal was participating in an agricultural exhibition, it was not being milked to generate mammary gland engorgement (milk retention). Inphysical examination findings wherein there is presence of multifocal urticarial papules and plaques, mainly on the sides and right and left flanks, besides the absence of pruritus, edema in mucocutaneous regions of the upper and lower eyelids of the right and left eyes, submandibular edema, excessive salivation, inspiratory dyspnea with half-open mouth breathing, respiratory distress, apathy, cough, tachycardia tachypnea, ruminal hypomotility and increased volume of the mammary gland, characterizing milk retention. Clinical suspicion was milk allergy with anaphylactic reaction (type I hypersensitivity). Treatment was based on promethazine administration (1mg/kg; IV) and immediate full milking of the mammary gland. After 12 h of treatment, clinical respiratory signs resolved, and after 24 h, skin changes resolved completely. Based on clinical signs and treatment success, the clinical suspicion of milk allergy causing anaphylactic reaction (type I hypersensitivity) was confirmed.(AU)

A alergia ao leite é a única doença auto-alérgica em bovinos. Caracteriza-se pela retenção e absorção do próprio leite, fazendo com que as proteínas do leite, principalmente a alfa caseína, tenham acesso à corrente sanguínea, resultando em uma hipersensibilidade do tipo I. O objetivo deste relato é descrever um caso de doença autoalérgica em bovinos. Relatamos o caso de uma fêmea bovina da raça Jersey, com quatro anos de idade, prenhe e pesando 400Kg. O animal estava em tratamento (oculto para revisão)e tinha histórico de reação alérgica aguda. Proprietário relatou aparecimento súbito de lesões na pele, salivação e dificuldade respiratória. Oanimal estava participando de uma exposição agrícola, e não estava sendo ordenhado para gerar ingurgitamento da glândula mamária (retenção de leite). No exame físico identificou-sepápulas e placas urticariformes multifocais, principalmente nas laterais e flancos direito e esquerdo, ausência de prurido, edema em regiões mucocutâneas das pálpebras superior e inferior dos olhos direito e esquerdo, edema submandibular, salivação excessiva, dispneia inspiratória com respiração de boca entreaberta, desconforto respiratório, apatia, tosse, taquicardia, taquipneia, hipomotilidade ruminal e aumento do volume da glândula mamária, caracterizando retenção de leite. A suspeita clínica foi alergia ao leite com reação anafilática (hipersensibilidade tipo I). O tratamento baseou-se na administração de prometazina (1mg/kg; IV) e ordenha completa imediata da glândula mamária. Após 12 h de tratamento, os sinais clínicos respiratórios foram resolvidos e, após 24 h, as alterações cutâneas desapareceram completamente. Com base nos sinais clínicos e no sucesso do tratamento, confirmou-sea suspeita de alergia ao leite causando reação anafilática (hipersensibilidade tipo I).(AU)

La alergia a la leche es la única enfermedad autoalérgica en el ganado bovino. Se caracteriza por la retención y absorción de la propia leche, provocando que las proteínas de la leche, especialmente la alfa caseína, tengan acceso al torrente sanguíneo, dando lugar a una hipersensibilidad tipo I. El objetivo de este reporte es describir un caso de enfermedad autoalérgica en bovinos. Presentamos el caso de una vaca Jersey hembra de cuatro años, gestante y de 400 kg de peso. El animal estaba siendo atendido en el (oculto para revision)y tenía antecedentes de reacción alérgica aguda. Propietario refirió aparición repentina de lesiones en la piel, salivación y dificultad respiratoria. Como el animal participaba en una exhibición agrícola, no estaba siendo ordeñado para generar congestión de la glándula mamaria (retención de leche). En examen físico en los que se observan pápulas y placas urticariales multifocales, principalmente en costados y flancos derecho e izquierdo, además de ausencia de prurito, edema en las regiones mucocutáneas de los párpados superior e inferior del lado derecho e ojos izquierdos, edema submandibular, salivación excesiva, disnea inspiratoria con respiración con la boca abierta, dificultad respiratoria, apatía, tos, taquicardia (frecuencia cardíaca 88 latidos/minuto), taquipnea (100 movimientos/minuto), normotermia (39,0°C), hipomotilidad ruminal (2 movimientos ruminales/5 minutos) y aumento de volumen de la glándula mamaria, caracterizando la retención de leche. La sospecha clínica fue alergia a la leche con reacción anafiláctica (hipersensibilidad tipo I). El tratamiento se basó en la administración de prometazina (1 mg/kg; IV) y ordeño completo inmediato de la glándula mamaria. Después de 12 h de tratamiento, los signos clínicos respiratorios se resolvieron y, después de 24 h, los cambios en la piel desaparecieron por completo. Sobre la base de los signos clínicos y el éxito del tratamiento, se confirmó la sospecha clínica de alergia a la leche que causaba una reacción anafiláctica (hipersensibilidad tipo I).(AU)

Molecular characterization of Kappa-casein and beta-lactoglobulin genes in Anatolian Black cattle and Holstein breeds / [Caracterização molecular dos genes Kappa-casein e beta-lactoglobulina em gado negro anatoliano e raças Holstein]

κ-Cn and ß-lactoglobulin are important candidate genes associated with milk yield and milk protein content. The present investigation is carried out to determine the polymorphisms status of κ-Cn and ß-lactoglobulin genes in Anatolian Black cattle and Holstein breeds. PCR-RFLP technique was used to determine Kappa-Casein and ß-lactoglobulin polymorphisms in both cattle breeds. The allele frequency of Anatolian Black cattle in terms of κ-Cn and ß-lactoglobulin genes were 0.50 (A) 0.50 (B) and 0.20 (A) 0.80 (B) respectively, whereas in Holstein were 0.29 (A) 0.71 (B) and 0.44 (A) 0.56 (B) respectively. The chi-square test showed that each cattle breed was in Hardy-Weinberg equilibrium (P>0.05).

κ-Cn e ß-lactoglobulina são importantes genes candidatos associados à produção de leite e ao teor de proteína do leite. A presente investigação é realizada para determinar o status de polimorfismos dos genes κ-Cn e ß-lactoglobulina nas raças Anatolian Black cattle e Holstein. A técnica PCR-RFLP foi utilizada para determinar os polimorfismos Kappa-Casein e ß-lactoglobulina em ambas as raças de gado. A freqüência dos alelos do gado negro anatólio em termos de κ-Cn e ß-lactoglobulina foi de 0,50 (A) 0,50 (B) e 0,20 (A) 0,80 (B) respectivamente, enquanto que em Holstein foi de 0,29 (A) 0,71 (B) e 0,44 (A) 0,56 (B) respectivamente. O teste do qui-quadrado mostrou que cada raça bovina estava em equilíbrio de Hardy-Weinberg (P>0,05).

Supplementation strategies for lactating F1 Holstein x Zebu cows on deferred pastures / Estratégias de suplementação para vacas F1 Holandês x Zebu em lactação em pasto diferido

The objective of this study was to evaluate the effects of different concentrate supplementation strategies to lactating F1 Holstein x Zebu cows managed on deferred signal grass pasture on milk yield, composition and body weight gain. Thirty-six F1 Holstein x Zebu cows with average days in milk of 102 ± 10 and body weight of 501 ± 19 kg were allotted to a 4 x 5 completely randomized factorial design, with four feeding strategies and five weeks of evaluation. The treatments consisted of four nutritional strategies: deferred pasture as a source of roughage + 700 grams of protein supplement (PDPI); deferred pasture as a source of roughage + 1,200 grams of protein supplement (PDPII); deferred pasture + 15 kilograms of corn silage (natural basis) + 1,200 grams of protein supplement (PDSP) and corn silage (ad libitum) + 700 grams of protein supplement (CSS). There was no interaction (P = 0.99) between supplementation strategies and test days on milk yield and chemical composition. The mean milk yield of cows managed on PDPI, PDPII and PDSP was 11.50 kg/day (P > 0.05), which was 14.30% lower than that of cows managed on CSS. Fat content (P < 0.01), protein (P < 0.01), lactose (P < 0.01), defatted dry extract (DDE) (P< 0 .01), total solids (P < 0.01) and milk casein (P < 0.01) were affected by different supplementation strategies. F1 Holstein x Zebu cows on deferred Urochloa decumbens cv. Basilisk pasture and supplemented with concentrate maintains milk production at 11.50 kg with normal composition, maintaining satisfactory body weight and condition score.(AU)

O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos de diferentes estratégias de suplementação com concentrado para vacas F1 Holandês x Zebu em lactação manejadas em pastagem de capim-braquiária diferida sobre a produção, composição e ganho de peso corporal do leite. Trinta e seis vacas F1 Holandês x Zebu com média de dias em leite de 102 ± 10 e peso corporal de 501 ± 19 kg foram distribuídas em um planejamento fatorial 4 x 5 inteiramente casualizado, com quatro estratégias de alimentação e cinco semanas de avaliação. Os tratamentos consistiram em quatro estratégias nutricionais: pasto diferido como fonte de volumoso + 700 gramas de suplemento protéico (PDPI); pastagem diferida como fonte de volumoso + 1.200 gramas de suplemento protéico (PDPII); pastagem diferida + 15 quilos de silagem de milho (base natural) + 1.200 gramas de suplemento protéico (PDSP) e silagem de milho (ad libitum) + 700 gramas de suplemento protéico (CSS). Não houve interação (P = 0,99) entre as estratégias de suplementação e os dias de teste na produção e composição química do leite. A produção média de leite das vacas manejadas com PDPI, PDPII e PDSP foi de 11,50 kg / dia (P > 0,05), que foi 14,30% menor que a das vacas manejadas com CSS. O teor de gordura (P < 0,01), proteína (P < 0,01), lactose (P < 0,01), extrato seco desengordurado (DDE) (P < 0,01), sólidos totais (P < 0,01) e caseína do leite (P < 0,01) foram afetados por diferentes estratégias de suplementação. Vacas F1 Holandês x Zebu em Urochloa decumbens diferida cv. O pasto de Basilisk e suplementada com concentrado mantém a produção de leite em 11,50 kg com composição normal, mantendo peso corporal e escore de condição satisfatórios.(AU)

Artificial neural networks in the prediction of fraud in integral milk powder by adding whey powder / Redes neurais artificiais na predição de fraude em leite em pó integral pela adição de soro lácteo em pó

This research was performed to ascertain the most suitable Artificial Neural Network (ANN) model to quantify the degree of fraud in powdered milk through the addition of powdered whey via regular standard physicochemical analyses. In this study, an evaluation was done on 103 samples with different quantities of added whey powder to whole milk powder. Using Fourier Transform Infrared Spectroscopy the fat, cryoscopy, total solids, defatted dry extract, lactose, protein and casein were analyzed. The hyperbolic tangent transformation function was used with 45 topologies, and the Holdback and K-fold validation methods were tested. In the Holdback method, 75% of the database was employed for training, while 25% was used for validation. In the K-fold method, the database was categorized into five equal sized subsets, which alternated between training and validation. Of the two methods, the K-fold method was proven to have superior efficiency. Next, analysis was done on three models of multilayer perceptron networks with feedforward architecture. In Model 1, the input layer contained all the physicochemical analyses conducted, in model 2 the casein analysis was excluded, and in model 3 the routine analyses performed for dairy products was done (fat, defatted dry extract, cryoscopy and total solids). From Model 3 an ANN was derived which could satisfactorily predict fraud calculated from using the routine and standard analyses for dairy products, containing 64 nodes in the hidden layer, with R² of 0.9935 and RMSE of 0.5779 for training, and R² of 0.9964 and RMSE of 0.4358 for validation.

O objetivo do trabalho foi determinar o melhor modelo de rede neural artificial (RNA) para quantificar fraude em leite em pó, pela adição de soro em pó, por meio de analises físico-químicas de rotina. Foram avaliados 103 níveis de adição de soro lácteo em pó em leite em pó integral. As análises de gordura, crioscopia, sólidos totais, extrato seco desengordurado, lactose, proteína e caseína foram realizadas por espectroscopia no infravermelho com transformada de Fourier. A função de transformação utilizada foi a tangente hiperbólica, em que testou-se 45 topologias e dois métodos de validação: holdback e k-fold. Para o método holdback, 75% do banco de dados foi utilizado para o treinamento e 25% para a validação. Para o método k-fold, o banco de dados foi dividido em cinco subconjuntos de mesmo tamanho que se alternavam entre treinamento e validação. O método k-fold se mostrou mais eficiente. Três modelos de redes perceptron de múltiplas camadas com arquitetura feedforward foram analisados. No modelo 1 a camada de entrada constituía todas as análises físico-químicas realizadas, no modelo 2 excluiu-se a análise de caseína e no modelo 3 utilizou-se as análises de rotina em laticínios (gordura, extrato seco desengordurado, crioscopia e sólidos totais). O modelo 3 obteve uma RNA capaz de predizer satisfatoriamente a fraude avaliada a partir de análises consideradas de rotina em laticínios com uma RNA contendo 64 nodos na camada oculta, R² de 0,9935 e RMSE de 0,5779 para treinamento, R² de 0,9964 e RMSE de 0,4358 para validação.

Production of proline and protease with different organic wastes in bacteria (Production proline and protease with organic wastes)

Abstract In this study, we investigated the proline and protease production of different bacteria in several organic waste materials. Our aim was to produce proline and protease economically in waste that is abundantly available while reducing its environmental impact. 5 ml of different organic waste materials (OWW: Olive waste water; N.B: Nutrient Broth; EW: Eggshell; PBS: PBS buffer; PLW: Peach leaf wastes; TCW: Turkish coffee wastes; TWW: Tea waste water; WCW: Waste cheese whey; WFO: Waste frying oil) were placed in 10 ml grow tubes, inoculated and incubated for 24 h. Phosphate-buffered saline and 10% solutions of different organic wastes were added. These cultures were subsequently incubated at 37°C for 24 h. Cells were harvested at 24 h for L-proline assay. 1 ml of culture was transferred by pipette into an Eppendorf tube and centrifuged at 14,000 rpm for 20 min at room temperature. Cellular debris was removed by centrifuge and the supernatant was used for proline activity assays. Protease activity was determined using a modified method with casein as the substrate. We found that proline and protease can easily be produced economically using Turkish coffee wastes (TCW), Waste cheese whey (WCW) and Olive waste water (OWW) organic waste. We believe that this study will result in similar research leading to the economical use of these waste materials thus reducing their impact on the environment.

Resumo Neste estudo, investigamos a produção de prolina e protease de diferentes bactérias em diversos resíduos orgânicos. Nosso objetivo era produzir prolina e protease economicamente em resíduos que estão disponíveis em abundância, reduzindo seu impacto ambiental. Cinco ml de diferentes materiais de resíduos orgânicos (OWW: resíduos de azeitona; NB: caldo nutriente; EW: casca de ovo; PBS: tampão PBS; PLW: resíduos de folhas de pêssego; TCW: resíduos de café turco; TWW: resíduos de chá; WCW: resíduos de queijo soro de leite; WFO: óleo de fritura residual) foram colocados em tubos de cultivo de 10 ml, inoculados e incubados por 24 horas. Adicionaram-se solução salina tamponada com fosfato e soluções a 10% de diferentes resíduos orgânicos. Essas culturas foram subsequentemente incubadas a 37° C durante 24 h. As células foram colhidas às 24 h para o ensaio de L-prolina. Um ml de cultura foi transferido por pipeta para um tubo Eppendorf e centrifugado a 14.000 rpm, por 20 min, em temperatura ambiente. Os detritos celulares foram removidos por centrifugação e o sobrenadante foi usado para ensaios de atividade de prolina. A atividade da protease foi determinada usando um método modificado com caseína como substrato. Descobrimos que a prolina e a protease podem ser facilmente produzidas economicamente, usando resíduos de café turco (TCW), resíduos de soro de queijo (WCW) e resíduos orgânicos de água de oliva (OWW). Acreditamos que este estudo resultará em pesquisas semelhantes, levando ao uso econômico desses materiais residuais, reduzindo, assim, seu impacto no meio ambiente.

Production of proline and protease with different organic wastes in bacteria (Production proline and protease with organic wastes) / Produção de prolina e protease com diferentes resíduos orgânicos em bactérias (produção de prolina e protease com resíduos orgânicos)

In this study, we investigated the proline and protease production of different bacteria in several organic waste materials. Our aim was to produce proline and protease economically in waste that is abundantly available while reducing its environmental impact. 5 ml of different organic waste materials (OWW: Olive waste water; N.B: Nutrient Broth; EW: Eggshell; PBS: PBS buffer; PLW: Peach leaf wastes; TCW: Turkish coffee wastes; TWW: Tea waste water; WCW: Waste cheese whey; WFO: Waste frying oil) were placed in 10 ml grow tubes, inoculated and incubated for 24 h. Phosphate-buffered saline and 10% solutions of different organic wastes were added. These cultures were subsequently incubated at 37°C for 24 h. Cells were harvested at 24 h for L-proline assay. 1 ml of culture was transferred by pipette into an Eppendorf tube and centrifuged at 14,000 rpm for 20 min at room temperature. Cellular debris was removed by centrifuge and the supernatant was used for proline activity assays. Protease activity was determined using a modified method with casein as the substrate. We found that proline and protease can easily be produced economically using Turkish coffee wastes (TCW), Waste cheese whey (WCW) and Olive waste water (OWW) organic waste. We believe that this study will result in similar research leading to the economical use of these waste materials thus reducing their impact on the environment.

Neste estudo, investigamos a produção de prolina e protease de diferentes bactérias em diversos resíduos orgânicos. Nosso objetivo era produzir prolina e protease economicamente em resíduos que estão disponíveis em abundância, reduzindo seu impacto ambiental. Cinco ml de diferentes materiais de resíduos orgânicos (OWW: resíduos de azeitona; NB: caldo nutriente; EW: casca de ovo; PBS: tampão PBS; PLW: resíduos de folhas de pêssego; TCW: resíduos de café turco; TWW: resíduos de chá; WCW: resíduos de queijo soro de leite; WFO: óleo de fritura residual) foram colocados em tubos de cultivo de 10 ml, inoculados e incubados por 24 horas. Adicionaram-se solução salina tamponada com fosfato e soluções a 10% de diferentes resíduos orgânicos. Essas culturas foram subsequentemente incubadas a 37° C durante 24 h. As células foram colhidas às 24 h para o ensaio de L-prolina. Um ml de cultura foi transferido por pipeta para um tubo Eppendorf e centrifugado a 14.000 rpm, por 20 min, em temperatura ambiente. Os detritos celulares foram removidos por centrifugação e o sobrenadante foi usado para ensaios de atividade de prolina. A atividade da protease foi determinada usando um método modificado com caseína como substrato. Descobrimos que a prolina e a protease podem ser facilmente produzidas economicamente, usando resíduos de café turco (TCW), resíduos de soro de queijo (WCW) e resíduos orgânicos de água de oliva (OWW). Acreditamos que este estudo resultará em pesquisas semelhantes, levando ao uso econômico desses materiais residuais, reduzindo, assim, seu impacto no meio ambiente.

Chemical profile colostrum, quality refrigerated and frozen milk of santa inês sheep / Perfil químico do colostro, qualidade do leite refrigerado e congelado de ovelhas santa inês

The chemical composition of Santa Inês sheep colostrum was evaluated, as well as chilled milk (zero to 240 hours) and frozen milk for up to 70 days. Results of chemical composition (fat, protein, casein, lactose, total and degreased dry extract) and colostrum somatic cell count (SCC) were presented descriptively. The results of chemical composition and SCC and total bacterial count (TBC) of chilled and frozen milk were evaluated in a completely randomized design, the repetition of milk collection days and the treatments of the times when the milk was chilled and frozen. The comparison of the quality averages of chilled and frozen milk was performed by Tukey test, with a probability of 5.0 %. Santa Inês sheep colostrum showed high protein and fat content, demonstrating a high source of nutrients for lamb nutrition. Santa Inês sheep's milk can be stored for up to 240 hours without changes in chemical quality. Frozen milk from Santa Inês ewes for up to 70 days minus fat content; however, this form of milk preservation is viable. Refrigeration and freezing are alternatives that add value to the milk of Santa Inês ewes, but studies with previous preservation methods are necessary for greater quality assurance.

Avaliou-se a composição química do colostro de ovinos Santa Inês, leite refrigerado (zero a 240 horas) e leite congelado por até 70 dias. Os resultados de composição química (gordura, proteína, caseína, lactose, extrato seco total e desengordurado) e contagem de células somáticas do colostro (CCS) foram apresentados de forma descritiva. Os resultados da composição química, CCS e da contagem bacteriana total (CBT) do leite refrigerado e congelado foram avaliados em delineamento inteiramente casualizado. As repetições foram os dias de coleta do leite e os tratamentos os tempos em que o leite foi refrigerado e congelado. A comparação das médias de qualidade do leite resfriado e congelado foi realizada pelo teste de Tukey, com probabilidade de 5,0 %. O colostro de ovinos Santa Inês apresentou alto teor de proteína e gordura, demonstrando ser uma grande fonte de nutrientes para a nutrição de cordeiros. O leite de ovelha Santa Inês pode ser armazenado sob refrigeração por até 240 horas sem alterações da composição química. O leite congelado de ovelhas Santa Inês pode ser armazenado por até 70 dias, contudo ocorre alteração da composição química, principalmente nos teores de gordura. A refrigeração e o congelamento são alternativas que agregam valor ao leite de ovelhas Santa Inês, porém, mais estudos com estes métodos de preservação, são necessários para maior garantia de qualidade.

Production of proline and protease with different organic wastes in bacteria (Production proline and protease with organic wastes) / Produção de prolina e protease com diferentes resíduos orgânicos em bactérias (produção de prolina e protease com resíduos orgânicos)

In this study, we investigated the proline and protease production of different bacteria in several organic waste materials. Our aim was to produce proline and protease economically in waste that is abundantly available while reducing its environmental impact. 5 ml of different organic waste materials (OWW: Olive waste water; N.B: Nutrient Broth; EW: Eggshell; PBS: PBS buffer; PLW: Peach leaf wastes; TCW: Turkish coffee wastes; TWW: Tea waste water; WCW: Waste cheese whey; WFO: Waste frying oil) were placed in 10 ml grow tubes, inoculated and incubated for 24 h. Phosphate-buffered saline and 10% solutions of different organic wastes were added. These cultures were subsequently incubated at 37°C for 24 h. Cells were harvested at 24 h for L-proline assay. 1 ml of culture was transferred by pipette into an Eppendorf tube and centrifuged at 14,000 rpm for 20 min at room temperature. Cellular debris was removed by centrifuge and the supernatant was used for proline activity assays. Protease activity was determined using a modified method with casein as the substrate. We found that proline and protease can easily be produced economically using Turkish coffee wastes (TCW), Waste cheese whey (WCW) and Olive waste water (OWW) organic waste. We believe that this study will result in similar research leading to the economical use of these waste materials thus reducing their impact on the environment.

Neste estudo, investigamos a produção de prolina e protease de diferentes bactérias em diversos resíduos orgânicos. Nosso objetivo era produzir prolina e protease economicamente em resíduos que estão disponíveis em abundância, reduzindo seu impacto ambiental. Cinco ml de diferentes materiais de resíduos orgânicos (OWW: resíduos de azeitona; NB: caldo nutriente; EW: casca de ovo; PBS: tampão PBS; PLW: resíduos de folhas de pêssego; TCW: resíduos de café turco; TWW: resíduos de chá; WCW: resíduos de queijo soro de leite; WFO: óleo de fritura residual) foram colocados em tubos de cultivo de 10 ml, inoculados e incubados por 24 horas. Adicionaram-se solução salina tamponada com fosfato e soluções a 10% de diferentes resíduos orgânicos. Essas culturas foram subsequentemente incubadas a 37° C durante 24 h. As células foram colhidas às 24 h para o ensaio de L-prolina. Um ml de cultura foi transferido por pipeta para um tubo Eppendorf e centrifugado a 14.000 rpm, por 20 min, em temperatura ambiente. Os detritos celulares foram removidos por centrifugação e o sobrenadante foi usado para ensaios de atividade de prolina. A atividade da protease foi determinada usando um método modificado com caseína como substrato. Descobrimos que a prolina e a protease podem ser facilmente produzidas economicamente, usando resíduos de café turco (TCW), resíduos de soro de queijo (WCW) e resíduos orgânicos de água de oliva (OWW). Acreditamos que este estudo resultará em pesquisas semelhantes, levando ao uso econômico desses materiais residuais, reduzindo, assim, seu impacto no meio ambiente.

Influence of the seasons on the quality and composition of milk from dairy farms in the northern region of Rio Grande do Sul, Brazil / Influência das estações do ano sobre a qualidade microbiológica do leite de fazendas leiteiras da região norte do Rio Grande do Sul, Brasil

This study aimed to verify the relationship between parameters of physicochemical composition, microbiological quality, and volume of milk delivered to a dairy in the northern region of Rio Grande do Sul, Brazil, at four different times in 2020. For this purpose, the parameters volume, protein, fat, lactose, total solids, somatic cell count (SCC), and standard plate count (SPC) were evaluated. The data were collected in January, April, July, and October from 1634 dairy farms located in the northern region of Rio Grande do Sul. The data were evaluated using Pearson's correlation, while the means were compared using Tukey's test, both at a 5% significance. Milk fat and protein contents were higher during fall (4.02 and 3.35%) and winter (3.90 and 3.36%, respectively), contributing to a higher concentration of solids. The microbiological quality of milk, especially SCC, is compromised during the warmer months due to the thermal stress suffered by the animals, challenging their immune system and increasing their susceptibility to diseases. The highest milk SPC in the winter (247.12 CFU/mL) refers to the transfer of contamination from the teat to the tank due to the inefficiency of pre-milking procedures. Therefore, the microbiological quality of milk was variable between the studied periods, and fat and protein contents suffered reductions during the summer, reflecting lower remuneration for quality given the high SCC in the same season.

O objetivo desse estudo foi verificar a relação entre parâmetros da composição físico-química, qualidade microbiológica e volume de leite entregue a um laticínio na região Norte do Rio Grande do Sul, no ano de 2020, em quatro diferentes épocas do ano. Para isso, foram avaliados os parâmetros volume, proteína, gordura, lactose, sólidos totais, contagem de células somáticas (CCS) e contagem padrão em placas (CPP). Os dados foram coletados nos meses de janeiro, abril, julho e outubro, em 1634 propriedades leiteiras localizadas na região Norte do Rio Grande do Sul. Os dados foram avaliados por meio da correlação de Pearson e as médias foram comparadas pelo teste de Tukey, ambos a 5% de significância. Os teores de gordura e proteína do leite foram maiores durante o outono (4,02 e 3,35%) e o inverno (3,90 e 3,36%, respectivamente), contribuindo para a maior concentração de sólidos no mesmo período. A qualidade microbiológica do leite, principalmente a CCS, é comprometida durante os meses mais quentes, em virtude do estresse térmico sofrido pelos animais, desafiando o sistema imune e aumentando a susceptibilidade a enfermidades. A maior CPP do leite no período de inverno (247,12 UFC/mL) remete à transferência de sujidades do teto para o tanque, em virtude da ineficiência dos procedimentos pré-ordenha. Portanto, a qualidade microbiológica do leite foi variável entre os períodos estudados, sendo que os teores de gordura e proteína sofreram reduções durante o verão, refletindo em menores remunerações por qualidade, visto a alta CCS na mesma estação.

Production of proline and protease with different organic wastes in bacteria (Production proline and protease with organic wastes) / Produção de prolina e protease com diferentes resíduos orgânicos em bactérias (produção de prolina e protease com resíduos orgânicos)

In this study, we investigated the proline and protease production of different bacteria in several organic waste materials. Our aim was to produce proline and protease economically in waste that is abundantly available while reducing its environmental impact. 5 ml of different organic waste materials (OWW: Olive waste water; N.B: Nutrient Broth; EW: Eggshell; PBS: PBS buffer; PLW: Peach leaf wastes; TCW: Turkish coffee wastes; TWW: Tea waste water; WCW: Waste cheese whey; WFO: Waste frying oil) were placed in 10 ml grow tubes, inoculated and incubated for 24 h. Phosphate-buffered saline and 10% solutions of different organic wastes were added. These cultures were subsequently incubated at 37°C for 24 h. Cells were harvested at 24 h for L-proline assay. 1 ml of culture was transferred by pipette into an Eppendorf tube and centrifuged at 14,000 rpm for 20 min at room temperature. Cellular debris was removed by centrifuge and the supernatant was used for proline activity assays. Protease activity was determined using a modified method with casein as the substrate. We found that proline and protease can easily be produced economically using Turkish coffee wastes (TCW), Waste cheese whey (WCW) and Olive waste water (OWW) organic waste. We believe that this study will result in similar research leading to the economical use of these waste materials thus reducing their impact on the environment.(AU)

Neste estudo, investigamos a produção de prolina e protease de diferentes bactérias em diversos resíduos orgânicos. Nosso objetivo era produzir prolina e protease economicamente em resíduos que estão disponíveis em abundância, reduzindo seu impacto ambiental. Cinco ml de diferentes materiais de resíduos orgânicos (OWW: resíduos de azeitona; NB: caldo nutriente; EW: casca de ovo; PBS: tampão PBS; PLW: resíduos de folhas de pêssego; TCW: resíduos de café turco; TWW: resíduos de chá; WCW: resíduos de queijo soro de leite; WFO: óleo de fritura residual) foram colocados em tubos de cultivo de 10 ml, inoculados e incubados por 24 horas. Adicionaram-se solução salina tamponada com fosfato e soluções a 10% de diferentes resíduos orgânicos. Essas culturas foram subsequentemente incubadas a 37° C durante 24 h. As células foram colhidas às 24 h para o ensaio de L-prolina. Um ml de cultura foi transferido por pipeta para um tubo Eppendorf e centrifugado a 14.000 rpm, por 20 min, em temperatura ambiente. Os detritos celulares foram removidos por centrifugação e o sobrenadante foi usado para ensaios de atividade de prolina. A atividade da protease foi determinada usando um método modificado com caseína como substrato. Descobrimos que a prolina e a protease podem ser facilmente produzidas economicamente, usando resíduos de café turco (TCW), resíduos de soro de queijo (WCW) e resíduos orgânicos de água de oliva (OWW). Acreditamos que este estudo resultará em pesquisas semelhantes, levando ao uso econômico desses materiais residuais, reduzindo, assim, seu impacto no meio ambiente.(AU)

Allele and genotype frequency for milk beta-casein in dairy cattle in the northern region of Tocantins State, Brazil / Frequências alélicas e genotípicas para beta-caseína do leite em bovinos leiteiros da microrregião de Araguaína, Tocantins

At present, there is a concern about the quality of milk and diseases related to its consumption, as it can generate discomfort and allergic reactions in some individuals due to its protein components. Thus, the present study was developed to identify the allele and genotype frequencies of genes for ß-casein, A1 and A2, in dairy herds in the region of Araguaína-TO, Brazil. Genetic material from 421 animals (crossbred dairy cattle in lactation) was used. All animals were numbered for identification, and DNA samples were extracted from hair bulbs. Samples for two markers from the polymorphic regions were characterized and confirmed by real-time PCR using the ABI Prism® 7500 Sequence Detection System (Applied Biosystems). Allele and genotype frequencies were determined using the TaqMan™ detection system, where the primer and probe release different fluorescence signals for each allele of the polymorphism. The sampled herd showed frequencies of 28.27% for the A1 allele and 71.73% for the A2 allele. Genotype frequencies were 52.96% (223/421) for A2A2; 37.53% (158/421) for the A1A2 genotype; and 9.50% (40/421) for the A1A1 genotype. The frequency of the A1 allele for ß-casein in dairy herds from the northern region of Tocantins was low and is per the results of previous studies. Although the A2A2 genotype of ß-casein had a high relative frequency, the A1A2 genotype is still rather frequent, warranting greater selection pressure.(AU)

Atualmente existe uma preocupação em relação à qualidade e doenças que estão relacionadas ao consumo de leite, pois o mesmo pode gerar desconfortos e reações alergicas em alguns indivíduos devido aos seus constituintes protéicos. Assim, o presente estudo teve como objetivo identificar a frequência alélica e genotípica de genes para beta caseína, A1 e A2, em rebanhos leiteiros da região de Araguaína-TO. Foram utilizados material genético de 421 animais (bovinos leiteiros mestiços em lactação), e todos os animais foram numerados para identificação e amostras de DNA foram extraídas de bulbo de folículos pilosos. As amostras para dois marcadores das regiões polimórficas foram caracterizadas e confirmadas por PCR em tempo real, usando um sistema de detecção de sequências ABI Prism® 7500 (Applied Biosystems). As frequências alélicas e genotípicas foram determinadas utilizando o sistema de detecção TaqMan ™, no qual o primer e a sonda emitem diferentes sinais de fluorescência para cada alelo do polimorfismo. Observou-se frequência do alelo A1 de 28,27%, e do alelo A2 de 71,73% no rebanho amostral. A frequência genotípica de A2A2 foi de 52,96% (223/421), com genótipo A1A2 de 37,53% (158/421), e de 9,50% (40/421) animais com genótipo A1A1. A frequência do alelo A1 para beta-caseína em rebanhos leiteiros da região norte do Tocantins foi baixa e seguiu a mesma tendência já observada em estudos anteriores. Os genótipos A2A2 da beta-caseína apresentaram frequência relativa alta, entretanto o genótipo A1A2 ainda é bastante frequente, necessitando de maior pressão de seleção.(AU)

Comparison of biological activities of Tityus pachyurus venom from two Colombian regions

Abstract Background: In the present study, we have tested whether specimens of the medically relevant scorpion Tityus pachyurus, collected from two climatically and ecologically different regions, differ in the biological activities of the venom. Methods: Scorpions were collected in Tolima and Huila, Colombia. Chemical profiles of the crude venom were obtained from 80 scorpions for each region, using SDS-PAGE and RP-HPLC. Assays for phospholipase A2, direct and indirect hemolytic, proteolytic, neuromuscular, antibacterial, and insecticidal activities were carried out. Results: The electrophoretic profiles of venom from the two regions showed similar bands of 6-14 kDa, 36-45 kDa, 65 kDa and 97 kDa. However, bands between 36 kDa and 65 kDa were observed with more intensity in venoms from Tolima, and a 95 kDa band occurred only in venoms from Huila. The chromatographic profile of the venoms showed differences in the intensity of some peaks, which could be associated with changes in the abundance of some components between both populations. Phospholipase A2 and hemolytic activities were not observable, whereas both venoms showed proteolytic activity towards casein. Insecticidal activity of the venoms from both regions showed significant variation in potency, the bactericidal activity was variable and low for both venoms. Moreover, no differences were observed in the neuromuscular activity assay. Conclusion: Our results reveal some variation in the activity of the venom between both populations, which could be explained by the ecological adaptations like differences in feeding, altitude and/or diverse predator exposure. However more in-depth studies are necessary to determine the drivers behind the differences in venom composition and activities.

Comparison of biological activities of Tityus pachyurus venom from two Colombian regions

Background: In the present study, we have tested whether specimens of the medically relevant scorpion Tityus pachyurus, collected from two climatically and ecologically different regions, differ in the biological activities of the venom. Methods: Scorpions were collected in Tolima and Huila, Colombia. Chemical profiles of the crude venom were obtained from 80 scorpions for each region, using SDS-PAGE and RP-HPLC. Assays for phospholipase A2, direct and indirect hemolytic, proteolytic, neuromuscular, antibacterial, and insecticidal activities were carried out. Results: The electrophoretic profiles of venom from the two regions showed similar bands of 6-14 kDa, 36-45 kDa, 65 kDa and 97 kDa. However, bands between 36 kDa and 65 kDa were observed with more intensity in venoms from Tolima, and a 95 kDa band occurred only in venoms from Huila. The chromatographic profile of the venoms showed differences in the intensity of some peaks, which could be associated with changes in the abundance of some components between both populations. Phospholipase A2 and hemolytic activities were not observable, whereas both venoms showed proteolytic activity towards casein. Insecticidal activity of the venoms from both regions showed significant variation in potency, the bactericidal activity was variable and low for both venoms. Moreover, no differences were observed in the neuromuscular activity assay. Conclusion: Our results reveal some variation in the activity of the venom between both populations, which could be explained by the ecological adaptations like differences in feeding, altitude and/or diverse predator exposure. However more in-depth studies are necessary to determine the drivers behind the differences in venom composition and activities.(AU)

Índice de CMP em leite pasteurizado comercializado em Minas Gerais, Brasil, durante os anos de 2011 a 2017 / Caseinomacropeptide index in pasteurized milk retailed in Minas Gerais, Brazil from 2011 to 2017

Cheese whey is a nutritious byproduct in the dairy industry, however, due to low commercial value, its use as a milk adulterant is a common practice not easily detected by routine analysis. In Brazil, quantification of caseinomacropeptide (CMP) index, using High Performance Liquid Chromatography (HPLC), is officially used to investigate illegal cheese whey addition to milk. Milk with CMP index above 30mg/L is considered not suitable for human consumption. The objective of this research was to report the CMP index in 185 samples of pasteurized milk, representing 73 commercial brands produced in 51 counties and ten mesoregions of the state of Minas Gerais, from 2011 to 2013 (58 samples) and 2015 to 2017 (127 samples). CMP index was considered normal (up to 30mg/L) in 75.1% of the samples. However, 21.1% presented CMP index above 75mg/L and 3.8% from 31 to 75mg/L. CMP index above 75mg/L was found in 17.4% of the samples produced during the dry season (April to September) and in 24.7% during the rainy season (October to March). These data point to the need of more efficient monitoring and inspection processes to hinder adulteration with cheese whey addition to milk.(AU)

Índice de CMP em leite pasteurizado comercializado em Minas Gerais, Brasil, durante os anos de 2011 a 2017 / Caseinomacropeptide index in pasteurized milk retailed in Minas Gerais, Brazil from 2011 to 2017

Cheese whey is a nutritious byproduct in the dairy industry, however, due to low commercial value, its use as a milk adulterant is a common practice not easily detected by routine analysis. In Brazil, quantification of caseinomacropeptide (CMP) index, using High Performance Liquid Chromatography (HPLC), is officially used to investigate illegal cheese whey addition to milk. Milk with CMP index above 30mg/L is considered not suitable for human consumption. The objective of this research was to report the CMP index in 185 samples of pasteurized milk, representing 73 commercial brands produced in 51 counties and ten mesoregions of the state of Minas Gerais, from 2011 to 2013 (58 samples) and 2015 to 2017 (127 samples). CMP index was considered normal (up to 30mg/L) in 75.1% of the samples. However, 21.1% presented CMP index above 75mg/L and 3.8% from 31 to 75mg/L. CMP index above 75mg/L was found in 17.4% of the samples produced during the dry season (April to September) and in 24.7% during the rainy season (October to March). These data point to the need of more efficient monitoring and inspection processes to hinder adulteration with cheese whey addition to milk.(AU)

Effect of the addition of sodium caseinate on the viability of cryopreserved buffalo semen / Efeito da adição de caseinato de sódio sobre a viabilidade do sêmen bubalino criopreservado

The use of cooled semen in artificial insemination operations results in higher pregnancy rates than the use of frozen semen. This result seems to be related to the more severe damage triggered by the freezing process than that observed during refrigeration. Due to its ability to bind to sperm-binding proteins and calcium ions, sodium caseinate has been studied as a substance capable of preventing early sperm capacitation, a significant cause of the decreased pregnancy rate resulting from the use of frozen semen. The first objective of this study was to evaluate whether a commercial egg yolk diluent developed for frozen bovine semen could be used for buffalo semen cryopreservation; the second objective was to investigate the effect of this diluent in combination with sodium caseinate during the procedures of buffalo sperm cryopreservation using flow cytometry and computer-assisted sperm analysis. In the first part of the study, comparing the results of spermatic kinetics and plasma and acrosomal membrane integrity, it was observed that the freezing process resulted in more cell damage than the cooling process. In the second part of the study, no effects of the addition of sodium caseinate to the egg yolk diluent were observed. From the results of the present study, it was possible to conclude that the egg yolk-based diluent was suitable for buffalo semen cryopreservation and that the addition of sodium caseinate did not decrease the harmful effects related to seminal cryopreservation.

O uso de sêmen resfriado em operações de inseminação artificial resulta em taxas de prenhez mais altas do que o uso de sêmen congelado. Esse resultado parece estar relacionado aos danos mais severos desencadeados pelo processo de congelação, quando comparado com o de refrigeração. Devido à sua capacidade de se ligar às proteínas ligadoras de espermatozoides e íons cálcio, o caseinato de sódio foi estudado quanto a sua capacidade de prevenir a capacitação espermática precoce, uma causa significativa de diminuição da taxa de prenhez com o uso de sêmen congelado. O primeiro objetivo deste estudo foi avaliar se um diluidor comercial a base de gema de ovo, destinado à congelação de sêmen bovino, poderia ser usado para a criopreservação de sêmen bubalino; o segundo objetivo foi investigar o efeito da adição do caseinato de sódio ao diluidor estudado durante os procedimentos de criopreservação de espermatozoides bubalinos. Foram empregadas a citometria de fluxo e a análise computadorizada do movimento espermático como métodos de avaliação seminal. Na primeira fase do estudo, comparando-se os resultados da cinética espermática e da integridade das membranas plasmática e acrossomal, observou-se que o processo de congelação promoveu mais danos celulares que o processo de resfriamento. Na segunda fase do estudo, não foram observados efeitos benéficos da adição de caseinato de sódio ao diluente empregado. A partir dos resultados do presente estudo, foi possível concluir que o diluente à base de gema de ovo foi adequado para a criopreservação do sêmen de bubalino e que a adição do caseinato de sódio não diminuiu os efeitos deletérios desencadeados pelo processo de criopreservação seminal.

Effect of the addition of sodium caseinate on the viability of cryopreserved buffalo semen / Efeito da adição de caseinato de sódio sobre a viabilidade do sêmen bubalino criopreservado

The use of cooled semen in artificial insemination operations results in higher pregnancy rates than the use of frozen semen. This result seems to be related to the more severe damage triggered by the freezing process than that observed during refrigeration. Due to its ability to bind to sperm-binding proteins and calcium ions, sodium caseinate has been studied as a substance capable of preventing early sperm capacitation, a significant cause of the decreased pregnancy rate resulting from the use of frozen semen. The first objective of this study was to evaluate whether a commercial egg yolk diluent developed for frozen bovine semen could be used for buffalo semen cryopreservation; the second objective was to investigate the effect of this diluent in combination with sodium caseinate during the procedures of buffalo sperm cryopreservation using flow cytometry and computer-assisted sperm analysis. In the first part of the study, comparing the results of spermatic kinetics and plasma and acrosomal membrane integrity, it was observed that the freezing process resulted in more cell damage than the cooling process. In the second part of the study, no effects of the addition of sodium caseinate to the egg yolk diluent were observed. From the results of the present study, it was possible to conclude that the egg yolk-based diluent was suitable for buffalo semen cryopreservation and that the addition of sodium caseinate did not decrease the harmful effects related to seminal cryopreservation.(AU)

O uso de sêmen resfriado em operações de inseminação artificial resulta em taxas de prenhez mais altas do que o uso de sêmen congelado. Esse resultado parece estar relacionado aos danos mais severos desencadeados pelo processo de congelação, quando comparado com o de refrigeração. Devido à sua capacidade de se ligar às proteínas ligadoras de espermatozoides e íons cálcio, o caseinato de sódio foi estudado quanto a sua capacidade de prevenir a capacitação espermática precoce, uma causa significativa de diminuição da taxa de prenhez com o uso de sêmen congelado. O primeiro objetivo deste estudo foi avaliar se um diluidor comercial a base de gema de ovo, destinado à congelação de sêmen bovino, poderia ser usado para a criopreservação de sêmen bubalino; o segundo objetivo foi investigar o efeito da adição do caseinato de sódio ao diluidor estudado durante os procedimentos de criopreservação de espermatozoides bubalinos. Foram empregadas a citometria de fluxo e a análise computadorizada do movimento espermático como métodos de avaliação seminal. Na primeira fase do estudo, comparando-se os resultados da cinética espermática e da integridade das membranas plasmática e acrossomal, observou-se que o processo de congelação promoveu mais danos celulares que o processo de resfriamento. Na segunda fase do estudo, não foram observados efeitos benéficos da adição de caseinato de sódio ao diluente empregado. A partir dos resultados do presente estudo, foi possível concluir que o diluente à base de gema de ovo foi adequado para a criopreservação do sêmen de bubalino e que a adição do caseinato de sódio não diminuiu os efeitos deletérios desencadeados pelo processo de criopreservação seminal.(AU)

Diluente quimicamente definido e antioxidantes polifenois na criopreservação de sêmen ovino / Chemically defined diluter and polyphenolic antioxidants in the cryopreservation of sheep semen

The objective of this study was to elaborate chemically defined extender based on casein, added with polyphenolic antioxidants, for the freezing of semen from ram breeders. To evaluate Tris-casein (5% glycerol), plus polyphenols, four semen pools from three rams sires were frozen (0µM; 10µM resveratrol; 5µM quercetin; 25µM catechin; 25µM catechin + 10µM resveratrol; 25µM catechin + 5µM quercetin; 10 µM resveratrol + 5µM quercetin; 25µM catechin + 10µM resveratrol + 5µM quercetin). After thawing, the samples were evaluated for sperm kinetics, plasma and acrosomal membrane integrity and mitochondrial membrane potential. There was no significant difference (p≥0.05) between the control group and the treatments for any of the evaluated parameters. However, it can be seen that the Tris-casein extender was efficient in cryopreserving ram semen. It is concluded that the Tris-casein extender can be used for freezing ram semen.