Isolation and identification of Mycobacterium bovis in cattle slaughtered from an abattoir in Garanhuns, Pernambuco / Isolamento e identificação de Mycobacterium bovis em bovinos abatidos em matadouro público de Garanhuns, Pernambunco

Tuberculosis is a chronic infectious disease caused by the Mycobacterium tuberculosis complex (CMT), members including M. bovis. The sanitary inspection in slaughterhouses has a great importance on public health for the removal of contaminated meat with pathological lesions. Cattle slaughtered in the abattoir of Garanhuns were subjected to macroscopic, histological, bacteriological, and molecular analyses. Lung inspection revealed gross lesions suggestive of tuberculosis. The characterization of tuberculous granulomas was performed by histopathology and hematoxylin and eosin (HE) staining. The identification of acid-fast bacilli (AFB) was performed on smears with fresh material and histological staining using Ziehl-Neelsen stain. Bacteriological diagnosis was carried out using Stonebrink and Lowenstein-Jensen media, and polymerase chain reaction (PCR) was performed from the DNA extracted from colonies for the identification of Mycobacterium spp. We found that 1% (32/3,.180) of the collected lungs showed lesions suggestive of tuberculosis. Histopathological analysis revealed that 65.62% (21/32) samples had granulomatous pneumonia. AFB was detected in 46.88% (15/32) smears and 4.16% (1/24) histological sections, as analyzed by Ziehl-Neelsen staining. Moreover, 68.75% (22/32) samples showed bacterial growth and molecular identification 90% (18/20) of the samples were positive...

A tuberculose é uma doença infecciosa crônica causada por membros do complexo Mycobacterium tuberculosis (CMT), incluindo M. bovis. A inspeção sanitária em matadouros frigoríficos possui grande importância para a saúde pública pela remoção de carne contaminada com lesões patológicas. Os bovinos abatidos no matadouro de Garanhuns-PE foram submetidos a análises macroscópicas, histológicas, bacteriológicas e moleculares. A inspeção pulmonar revelou lesões sugestivas de tuberculose.A caracterização de granulomas tuberculoides foi realizada através da histopatologia e coloração de hematoxilina e eosina (HE). A identificação de bacilo álcool - ácido resistente (BAAR) foi realizado em esfregaços com material fresco e em cortes histológicos sob a coloração de Zihel-Neelsen. O diagnóstico bacteriológico foi realizado em meio de cultivo Stonebrink e Lowenstein-Jensen e a reação em cadeia da polimerase (PCR) sucedeu a partir de DNA extraído de colônias para identificação do Mycobacterium sp... Verificou-se que1% (32/3.180) dos pulmões coletados apresentaram lesões sugestivas de tuberculose. Na análise histopatológica 65.62% (21/32) amostras tinham pneumonia granulomatosa. BAAR foram detectados em 46,88% (15/32) esfregaços e 4,16% (1/24) em corte histológico conforme analisado pela coloração de Ziehl-Neelsen. Além disso, em 68,75% (22/32) das amostras houve crescimento bacteriano e na...

Isolation and identification of Mycobacterium bovis in cattle slaughtered from an abattoir in Garanhuns, Pernambuco / Isolamento e identificação de Mycobacterium bovis em bovinos abatidos em matadouro público de Garanhuns, Pernambunco

Tuberculosis is a chronic infectious disease caused by the Mycobacterium tuberculosis complex (CMT), members including M. bovis. The sanitary inspection in slaughterhouses has a great importance on public health for the removal of contaminated meat with pathological lesions. Cattle slaughtered in the abattoir of Garanhuns were subjected to macroscopic, histological, bacteriological, and molecular analyses. Lung inspection revealed gross lesions suggestive of tuberculosis. The characterization of tuberculous granulomas was performed by histopathology and hematoxylin and eosin (HE) staining. The identification of acid-fast bacilli (AFB) was performed on smears with fresh material and histological staining using Ziehl-Neelsen stain. Bacteriological diagnosis was carried out using Stonebrink and Lowenstein-Jensen media, and polymerase chain reaction (PCR) was performed from the DNA extracted from colonies for the identification of Mycobacterium spp. We found that 1% (32/3,.180) of the collected lungs showed lesions suggestive of tuberculosis. Histopathological analysis revealed that 65.62% (21/32) samples had granulomatous pneumonia. AFB was detected in 46.88% (15/32) smears and 4.16% (1/24) histological sections, as analyzed by Ziehl-Neelsen staining. Moreover, 68.75% (22/32) samples showed bacterial growth and molecular identification 90% (18/20) of the samples were positive...(AU)

A tuberculose é uma doença infecciosa crônica causada por membros do complexo Mycobacterium tuberculosis (CMT), incluindo M. bovis. A inspeção sanitária em matadouros frigoríficos possui grande importância para a saúde pública pela remoção de carne contaminada com lesões patológicas. Os bovinos abatidos no matadouro de Garanhuns-PE foram submetidos a análises macroscópicas, histológicas, bacteriológicas e moleculares. A inspeção pulmonar revelou lesões sugestivas de tuberculose.A caracterização de granulomas tuberculoides foi realizada através da histopatologia e coloração de hematoxilina e eosina (HE). A identificação de bacilo álcool - ácido resistente (BAAR) foi realizado em esfregaços com material fresco e em cortes histológicos sob a coloração de Zihel-Neelsen. O diagnóstico bacteriológico foi realizado em meio de cultivo Stonebrink e Lowenstein-Jensen e a reação em cadeia da polimerase (PCR) sucedeu a partir de DNA extraído de colônias para identificação do Mycobacterium sp... Verificou-se que1% (32/3.180) dos pulmões coletados apresentaram lesões sugestivas de tuberculose. Na análise histopatológica 65.62% (21/32) amostras tinham pneumonia granulomatosa. BAAR foram detectados em 46,88% (15/32) esfregaços e 4,16% (1/24) em corte histológico conforme analisado pela coloração de Ziehl-Neelsen. Além disso, em 68,75% (22/32) das amostras houve crescimento bacteriano e na...(AU)

Diagnóstico histopatológico e molecular de lesões sugestivas de tuberculose em búfalos abatidos nos municípios de Macapá e Santana, estado do Amapá / Histopathological and molecular diagnosis of lesions suggestive of tuberculosis in buffaloes slaughtered in the municipalities of Macapá and Santana, Amapá state, Brazil

Este estudo teve como objetivo avaliar lesões sugestivas de tuberculose em búfalos abatidos em matadouros oficiais no Estado do Amapá, Brasil, a fim de confirmar o diagnóstico de tuberculose por avaliação histopatológica e molecular. As amostras de tecido de 20 búfalos que apresentavam lesões sugestivas de tuberculose, dos municípios de Macapá e Santana, foram coletadas. As amostras foram divididas em duas partes: uma delas foi fixada em formalina a 10% tamponada e rotineiramente processadas para avaliação histopatológica, coradas pela hematoxilina-eosina e Ziehl-Neelsen; e o outra parte foi usado para Nested-PCR para o complexo de Mycobacterium tuberculosis (CMT) e para Mycobacterium bovis. As lesões macroscópicas sugestivas de tuberculose foram observadas nos pulmões, linfonodos brônquicos, mediastínicos, retrofaríngeos e submandibulares, fígado e pleura. Histopatologicamente, todas as amostras apresentaram lesões sugestivas de tuberculose, caracterizadas por granulomas compostos por grande quantidade de infiltração de células epitelióides, células de Langerhans e linfócitos, margeando um centro necrótico, calcificado ou não, rodeado por cápsula de tecido conjuntivo fibroso. Bacilos álcool-ácido resistentes foram observados nos tecidos de 3/20 (15%) búfalos. Com relação à detecção molecular, 13/20 (65%) bubalinos apresentaram amostras de tecidos positivos: 6 foram positivos nas Nested-PCRs para CMT e M. bovis, um foi positivo apenas na Nested-PCR para CMT, e 6 foram positivos apenas na Nested-PCR para M. bovis. Os resultados deste estudo demonstram a importância de diagnosticar a tuberculose em búfalos na região e apontam para a necessidade de implementar medidas eficazes para controlar e erradicar a enfermidade.(AU)

This study aimed to evaluate suggestive lesions of tuberculosis in buffaloes slaughtered in official slaughterhouses in the State of Amapá, Brazil, in order to confirm the diagnosis of tuberculosis by histopathological and molecular evaluation. Tissue samples of 20 buffaloes showing lesions suggestive of tuberculosis, from the municipalities of Macapá and Santana, were collected. The samples were divided into two parts: one was fixed in 10% buffered formalin and routinely processed for histopathological evaluation, stained by hematoxylin-eosin and Ziehl-Neelsen; and the other was used for Nested-PCRs for Mycobacterium tuberculosis complex (MTC) and for Mycobacterium bovis. Gross lesions suggestive of tuberculosis were observed in the lungs, bronchial, mediastinic, retropharyngeal and submandibular lymph nodes, liver and pleura. Histopathologically, all samples showed lesions suggestive of tuberculosis, characterized by granulomas composed of large amount of infiltration of epithelioid cells, Langhans cells and lymphocytes, bordering a necrotic core, calcified or not, surrounded by a fibrous connective tissue capsule. Acid-fast bacilli were observed in the tissues of 3/20 (15%) buffaloes. With regards to the molecular detection, 13/20 (65%) buffaloes showed positive tissue samples: 6 were positive both in the MTC and M. bovis Nested-PCRs, one was positive only in the MTC Nested-PCR, and 6 were positive only in the M. bovis Nested-PCR. The results of this study demonstrate the importance of diagnosing TB in buffaloes in the region and point to the requirement to implement effective measures to control and eradicate the disease.(AU)

Diagnóstico histopatológico e molecular de lesões sugestivas de tuberculose em búfalos abatidos nos municípios de Macapá e Santana, estado do Amapá / Histopathological and molecular diagnosis of lesions suggestive of tuberculosis in buffaloes slaughtered in the municipalities of Macapá and Santana, Amapá state, Brazil

Este estudo teve como objetivo avaliar lesões sugestivas de tuberculose em búfalos abatidos em matadouros oficiais no Estado do Amapá, Brasil, a fim de confirmar o diagnóstico de tuberculose por avaliação histopatológica e molecular. As amostras de tecido de 20 búfalos que apresentavam lesões sugestivas de tuberculose, dos municípios de Macapá e Santana, foram coletadas. As amostras foram divididas em duas partes: uma delas foi fixada em formalina a 10% tamponada e rotineiramente processadas para avaliação histopatológica, coradas pela hematoxilina-eosina e Ziehl-Neelsen; e o outra parte foi usado para Nested-PCR para o complexo de Mycobacterium tuberculosis (CMT) e para Mycobacterium bovis. As lesões macroscópicas sugestivas de tuberculose foram observadas nos pulmões, linfonodos brônquicos, mediastínicos, retrofaríngeos e submandibulares, fígado e pleura. Histopatologicamente, todas as amostras apresentaram lesões sugestivas de tuberculose, caracterizadas por granulomas compostos por grande quantidade de infiltração de células epitelióides, células de Langerhans e linfócitos, margeando um centro necrótico, calcificado ou não, rodeado por cápsula de tecido conjuntivo fibroso. Bacilos álcool-ácido resistentes foram observados nos tecidos de 3/20 (15%) búfalos. Com relação à detecção molecular, 13/20 (65%) bubalinos apresentaram amostras de tecidos positivos: 6 foram positivos nas Nested-PCRs para CMT e M. bovis, um foi positivo apenas na Nested-PCR para CMT, e 6 foram positivos apenas na Nested-PCR para M. bovis. Os resultados deste estudo demonstram a importância de diagnosticar a tuberculose em búfalos na região e apontam para a necessidade de implementar medidas eficazes para controlar e erradicar a enfermidade.(AU)

This study aimed to evaluate suggestive lesions of tuberculosis in buffaloes slaughtered in official slaughterhouses in the State of Amapá, Brazil, in order to confirm the diagnosis of tuberculosis by histopathological and molecular evaluation. Tissue samples of 20 buffaloes showing lesions suggestive of tuberculosis, from the municipalities of Macapá and Santana, were collected. The samples were divided into two parts: one was fixed in 10% buffered formalin and routinely processed for histopathological evaluation, stained by hematoxylin-eosin and Ziehl-Neelsen; and the other was used for Nested-PCRs for Mycobacterium tuberculosis complex (MTC) and for Mycobacterium bovis. Gross lesions suggestive of tuberculosis were observed in the lungs, bronchial, mediastinic, retropharyngeal and submandibular lymph nodes, liver and pleura. Histopathologically, all samples showed lesions suggestive of tuberculosis, characterized by granulomas composed of large amount of infiltration of epithelioid cells, Langhans cells and lymphocytes, bordering a necrotic core, calcified or not, surrounded by a fibrous connective tissue capsule. Acid-fast bacilli were observed in the tissues of 3/20 (15%) buffaloes. With regards to the molecular detection, 13/20 (65%) buffaloes showed positive tissue samples: 6 were positive both in the MTC and M. bovis Nested-PCRs, one was positive only in the MTC Nested-PCR, and 6 were positive only in the M. bovis Nested-PCR. The results of this study demonstrate the importance of diagnosing TB in buffaloes in the region and point to the requirement to implement effective measures to control and eradicate the disease.(AU)

Tuberculosis in goats and sheep slaughtered in the semiarid of the Paraíba state, Northeast region of Brazil / Tuberculose em caprinos e ovinos abatidos no semiárido da Paraíba, Brasil

The aim of this work was to isolate and characterize microorganisms in hypertrophied lymph nodes or gross lesions suggestive of tuberculosis collected from 12 goats and 28 sheep slaughtered at the public slaughterhouse of Patos municipality, Paraíba State, in the Northeast region of Brazil. The identification of mycobacteria was performed by the PRA method (PCR-Restriction Enzyme Analysis). Histopathological examination of lesions was also performed. Organs affected were liver, lung, mammary gland, bladder and mediastinal, mesenteric, submandibular, parotid, popliteal, precrural, prescapular and superficial inguinal lymph nodes. Histopathological examination showed the presence of granulomas in 8 (20.00%) animals. Of the 12 goats, 1 (8.33%) was positive in the culture of mycobacteria, and by PRA method the isolate was classified as belonging to the M. tuberculosis complex. Two (7.14%) sheep were positive for the presence of environmental mycobacteria. There was isolation of Corynebacterium pseudotuberculosis in 8 (66.66%) goats and 17 (60.71%) sheep, and simultaneous isolation of mycobacteria and C. pseudotuberculosis in 1 (8.33%) goat and 1 (3.57%) sheep. The isolation of mycobacteria of the M. tuberculosis complex in goats in this study raises concerns of public health, as professionals involved in handling these animals and the meat and milk consumers are exposed to the risk [...]

O objetivo do presente trabalho foi isolar e tipificar micro-organismos presentes em linfonodos hipertrofiados ou lesões macroscópicas sugestivas de tuberculose colhidos de 12 caprinos e 28 ovinos abatidos no matadouro público do município de Patos, Paraíba. A identificação de micobactérias foi feita com o método PRA (PCR-Restriction Enzyme Analysis). Também foi realizado o exame histopatológico das lesões. Os órgãos afetados foram fígado, pulmão, glândula mamária, bexiga e linfonodos mediastínicos, mesentéricos, submandibulares, parotídeos, poplíteos, pré-crural, pré-escapular e inguinal superficial. O exame histopatológico apontou a presença de granulomas em 8 (20,00%) animais. Dos 12 caprinos, 1 (8,33%) foi positivo no cultivo de micobactérias, e pelo método PRA o isolado foi classificado como pertencente ao complexo M. tuberculosis. Dois (7,14%) ovinos foram positivos para a presença de micobactérias ambientais. Houve isolamento de Corynebacterium pseudotuberculosis em 8 (66,66%) caprinos e em 17 (60,71%) ovinos, e isolamento simultâneo de micobactérias e C. pseudotuberculosis em 1 (8,33%) caprino e 1 (3,57%) ovino. O isolamento de micobactéria do complexo M. tuberculosis em caprinos no presente trabalho levanta preocupações do ponto de vista de saúde pública, uma vez que profissionais envolvidos na manipulação destes animais, bem como a população consumidora de carne [...]

Tuberculosis in goats and sheep slaughtered in the semiarid of the Paraíba state, Northeast region of Brazil / Tuberculose em caprinos e ovinos abatidos no semiárido da Paraíba, Brasil

The aim of this work was to isolate and characterize microorganisms in hypertrophied lymph nodes or gross lesions suggestive of tuberculosis collected from 12 goats and 28 sheep slaughtered at the public slaughterhouse of Patos municipality, Paraíba State, in the Northeast region of Brazil. The identification of mycobacteria was performed by the PRA method (PCR-Restriction Enzyme Analysis). Histopathological examination of lesions was also performed. Organs affected were liver, lung, mammary gland, bladder and mediastinal, mesenteric, submandibular, parotid, popliteal, precrural, prescapular and superficial inguinal lymph nodes. Histopathological examination showed the presence of granulomas in 8 (20.00%) animals. Of the 12 goats, 1 (8.33%) was positive in the culture of mycobacteria, and by PRA method the isolate was classified as belonging to the M. tuberculosis complex. Two (7.14%) sheep were positive for the presence of environmental mycobacteria. There was isolation of Corynebacterium pseudotuberculosis in 8 (66.66%) goats and 17 (60.71%) sheep, and simultaneous isolation of mycobacteria and C. pseudotuberculosis in 1 (8.33%) goat and 1 (3.57%) sheep. The isolation of mycobacteria of the M. tuberculosis complex in goats in this study raises concerns of public health, as professionals involved in handling these animals and the meat and milk consumers are exposed to the risk [...](AU)

O objetivo do presente trabalho foi isolar e tipificar micro-organismos presentes em linfonodos hipertrofiados ou lesões macroscópicas sugestivas de tuberculose colhidos de 12 caprinos e 28 ovinos abatidos no matadouro público do município de Patos, Paraíba. A identificação de micobactérias foi feita com o método PRA (PCR-Restriction Enzyme Analysis). Também foi realizado o exame histopatológico das lesões. Os órgãos afetados foram fígado, pulmão, glândula mamária, bexiga e linfonodos mediastínicos, mesentéricos, submandibulares, parotídeos, poplíteos, pré-crural, pré-escapular e inguinal superficial. O exame histopatológico apontou a presença de granulomas em 8 (20,00%) animais. Dos 12 caprinos, 1 (8,33%) foi positivo no cultivo de micobactérias, e pelo método PRA o isolado foi classificado como pertencente ao complexo M. tuberculosis. Dois (7,14%) ovinos foram positivos para a presença de micobactérias ambientais. Houve isolamento de Corynebacterium pseudotuberculosis em 8 (66,66%) caprinos e em 17 (60,71%) ovinos, e isolamento simultâneo de micobactérias e C. pseudotuberculosis em 1 (8,33%) caprino e 1 (3,57%) ovino. O isolamento de micobactéria do complexo M. tuberculosis em caprinos no presente trabalho levanta preocupações do ponto de vista de saúde pública, uma vez que profissionais envolvidos na manipulação destes animais, bem como a população consumidora de carne [...](AU)

Tuberculose em caprinos e ovinos abatidos no semiárido da Paraíba, Brasil

The aim of this work was to isolate and characterize microorganisms in hypertrophied lymph nodes or gross lesions suggestive of tuberculosis collected from 12 goats and 28 sheep slaughtered at the public slaughterhouse of Patos municipality, Paraíba State, in the Northeast region of Brazil. The identification of mycobacteria was performed by the PRA method (PCR-Restriction Enzyme Analysis). Histopathological examination of lesions was also performed. Organs affected were liver, lung, mammary gland, bladder and mediastinal, mesenteric, submandibular, parotid, popliteal, precrural, prescapular and superficial inguinal lymph nodes. Histopathological examination showed the presence of granulomas in 8 (20.00%) animals. Of the 12 goats, 1 (8.33%) was positive in the culture of mycobacteria, and by PRA method the isolate was classified as belonging to the M. tuberculosis complex. Two (7.14%) sheep were positive for the presence of environmental mycobacteria. There was isolation of Corynebacterium pseudotuberculosis in 8 (66.66%) goats and 17 (60.71%) sheep, and simultaneous isolation of mycobacteria and C. pseudotuberculosis in 1 (8.33%) goat and 1 (3.57%) sheep. The isolation of mycobacteria of the M. tuberculosis complex in goats in this study raises concerns of public health, as professionals involved in handling these animals and the meat and milk consumers are exposed to the risk of infection.

O objetivo do presente trabalho foi isolar e tipificar micro-organismos presentes em linfonodos hipertrofiados ou lesões macroscópicas sugestivas de tuberculose colhidos de 12 caprinos e 28 ovinos abatidos no matadouro público do município de Patos, Paraíba. A identificação de micobactérias foi feita com o método PRA (PCR-Restriction Enzyme Analysis). Também foi realizado o exame histopatológico das lesões. Os órgãos afetados foram fígado, pulmão, glândula mamária, bexiga e linfonodos mediastínicos, mesentéricos, submandibulares, parotídeos, poplíteos, pré-crural, pré-escapular e inguinal superficial. O exame histopatológico apontou a presença de granulomas em 8 (20,00%) animais. Dos 12 caprinos, 1 (8,33%) foi positivo no cultivo de micobactérias, e pelo método PRA o isolado foi classificado como pertencente ao complexo M. tuberculosis. Dois (7,14%) ovinos foram positivos para a presença de micobactérias ambientais. Houve isolamento de Corynebacterium pseudotuberculosis em 8 (66,66%) caprinos e em 17 (60,71%) ovinos, e isolamento simultâneo de micobactérias e C. pseudotuberculosis em 1 (8,33%) caprino e 1 (3,57%) ovino. O isolamento de micobactéria do complexo M. tuberculosis em caprinos no presente trabalho levanta preocupações do ponto de vista de saúde pública, uma vez que profissionais envolvidos na manipulação destes animais, bem como a população consumidora de carne e leite, estão expostos ao risco de infecção.

Análise de detecção de cluster na caracterização espaço-temporal da tuberculose bovina no estado da Bahia / Cluster detection analyses for temporal-spatial characterization of bovine tuberculosis in Bahia, Brazil

A tuberculose bovina (BTB) é uma enfermidade causada pela infecção pelo Mycobacterium bovis que acomete o homem e diversas espécies de mamíferos. A BTB tem grande importância por causar prejuízos econômicos nas regiões infectadas e por seu impacto na saúde pública. Foi realizado inquérito epidemiológico no Estado da Bahia, entre 2008 e 2010, com o objetivo de estimar a prevalência e conhecer a distribuição espaço temporal da enfermidade. O Estado foi estratificado em quatro regiões, cada uma com características epidemiológicas e demográficas homogêneas representativas de formas de produção pecuária. Um total de 18.810 cabeças com idade superior a 2 anos foi amostrado em 1350 propriedades. O teste cervical comparativo foi aplicado em cada animal selecionado, sendo considerados positivos os animais reagentes positivos ou duas vezes inconclusivos. Latitude e Longitude foram tomadas para cada propriedade amostrada com o auxilio do aparelho de Global Positioning System (GPS). O teste de Cuzick-and-Edwards e a análise de rastreio espacial (spatial scan statistic) foram utilizados para identificar qualquer agrupamento espacial de BTB. A prevalência de rebanho na Bahia, indicando a proporção de propriedades foco, foi de 1,6% (IC 95%: 1,0% - 2,69% por região). Nenhuma evidência significativa (P<0.05) de aglomeração espacial ou clustering foi detectada, possivelmente devido à baixa prevalência da doença. Estes resultados sugerem que a BTB tem baixa prevalência no estado da Bahia e que, nestas condições epidemiológicas, os focos encontrados não podem ser explicados por fatores espacialmente estruturados. (AU)

Bovine tuberculosis (BTB) is a disease caused by the infection with Mycobacterium bovis that affects humans and several mammalian species. BTB is important, because it inflicts far-reaching economic losses to infected regions, and due to its impact on public health. Epidemiological surveys were conducted in the State of Bahia between 2008 and 2010 with the objective to estimate the prevalence and to assess the spatial distribution of the disease. The State of Bahia has been stratified into four regions, each of them representing a set of homogeneous epidemiological and demographic characteristics, referred to as Production Circuits. A total of 18,810 more than 2-year-old cattle in 1,305 herds, ranging from 320 to 370 ones per region, and 20 to 40 cattle per herd were randomly selected. A cervical comparative test was applied to each selected animal; reactive cattle and cattle with two consecutive inconclusive tests were considered BTB-positive, whereas non-reactive cattle were considered BTB-negative. Positive herds were classified as those with <20 sampled cattle and at least one BTB-positive, as well as those with 40 cattle sampled with <2 BTB-positive animals. Latitude and longitude were recorded for each sampled herd with a generic Global Positioning System (GPS). The Cuzick-and-Edwards' test and the spatial scan statistic were used to assess whether BTB was spatially clustered. Herd-level prevalence, as indicated by the proportion of case-herds, was 1.6% (range 0.3 to 2.9% per region). No significant evidence (P<0.05) of spatial clustering was detected, most likely due to the low disease prevalence in the region. Results here suggest that BTB is low prevalent in the State of Bahia and that under these conditions epidemiological outbreaks found cannot be explained by spatially-structured factors. (AU)

Diagnóstico diferencial de cistos e linfadenite granulomatosa em linfonodos suínos

As infecções por Mycobacterium sp. têm grande importância na suinocultura devido às perdas econômicas decorrentes da alteração do destino de carcaças, tais como condenação total, aproveitamento condicional, ou mercado interno. As principais causadoras de linfadenite granulomatosa (LG), encontradas em matadouros frigoríficos, são as micobactérias pertencentes ao complexo Mycobacterium avium-intracellulare. Na inspeção post mortem não há como determinar a espécie de micobactéria envolvida na linfadenite granulomatosa. Por esse motivo, as carcaças e vísceras dos suínos com lesões granulomatosas em linfonodos seguem a destinação prevista para casos de tuberculose. Em 2009, verificou-se aumento nas condenações por LG em um frigorífico de suínos, sob inspeção federal, na região do Vale do Taquari, RS. Na tentativa de identificar as causas e, possivelmente, adequar os critérios para tais condenações, o presente estudo teve como objetivo determinar a prevalência de LG no período de 2008 a 2011, através da inspeção visual e através de exames histopatológicos e microbiológicos em 47 linfonodos das regiões mesentérica, traqueobrônquica e submandibular, amostrados na linha de abate que foram processados pelos métodos de rotina histológica e corados pela técnica de Ziehl-Neelsen. Em vinte e uma amostras, realizou-se, também, a técnica de PCR quantitativo para circovirus suíno tipo 2 (PCV2) e em 26 amostras exame bacteriológico de rotina. Em vinte (42,6%), dos 47 linfonodos analisados, a lesão foi classificada, visualmente, como cisto sendo 90% destes confirmados pela histologia. Entre os 27 linfonodos classificados como LG na inspeção visual, 19 (70,4%) foram confirmados na histologia. As principais diferenciações da lesão cística para LG, ao exame visual, incluíram a fácil remoção do conteúdo sob leve pressão e a ausência de granuloma ao corte. Na análise histopatológica, observaram-se áreas císticas com conteúdo proteináceo, algumas amostras com infiltrado linfocítico. PCV2 não foi detectado nas amostras testadas e identificou-se Corynebacterium (1/26), Staphylococcus coagulase negativa (4/26) e Staphylococcus hyicus (2/26). A adoção de novos critérios na diferenciação entre lesões tuberculoides e císticas, à inspeção post mortem de linfonodos mesentéricos, determinou a redução da prevalência das condenações por LG de 5,81% em 2009 para 1,47%, em 2011. Não foram detectados agentes infecciosos associados à lesão cística de linfonodos mesentéricos. No entanto, a etiologia dessas lesões císticas não foi determinada

Infection by Mycobacterium sp. has a great economic impact on the swine industry due to the economic looses associated with condemnation or altered destination of the carcass in slaughterhouse. The main causes of granulomatous lymphadenitis (GL) in pigs are bacterium belonging to the Mycobacterium avium-intracellularis group. Since visual differentiation among Mycobacterium species involved in GL is not possible, carcass and viscera from GL-affected pigs follow the same destination from that of tuberculosis. An increased number of condemnations due to GL in a swine slaughterhouse under federal inspection in the region of Taquari Valley were recorded. In an attempting to identify the causes and to adapt the inspection criteria for such condemnations, this study aimed to determine the prevalence of GL from 2008 to 2011 through visual inspection, histopathological and microbiological examinations in lymph nodes. Forty seven lymph nodes were collected and processed by the routine histological methods and stained by Ziehl-Neelsen. In 21 samples, quantitative PCR for PCV2 was performed. The other 26 samples were analyzed by standard bacteriology. From 47 lymph nodes analyzed, 20 (42.6 %) were classified as cysts by visual inspection, 90% of which were confirmed by histology. A total of 19 (70.4%) of the 27 lymph nodes visually classified as GL were confirmed by histology. The main visual differences between cysts and GL were the easy content removal under light pressure and absence of granuloma at the cut surface. At histopathological examination, cysts showed areas with proteinaceous contents, some of them with histiocytic infiltrate. PCV2 was not detected in the tested samples. Bacteriological analysis identified Corynebacterium (1/26), Staphylococcus coagulase negative (4/26) and Staphylococcus hyicus (2/26). Adoption of a new criteria for differentiating cystic from tuberculous lesions, at the post mortem inspection of mesenteric lymph nodes, decreased the prevalence of 5.81% recorded in 2009 to 1.47% in 2011, in the condemnation due to GL. It is suggested that most lesions previously classified as GL were truly cysts. No infectious agents were associated with such lesions. However, the etiology of these lymph nodal cystic lesions could not be determined

Characteristics of tuberculosis in slaughtered water buffaloes / Características da tuberculose observada em búfalos abatidos para consumo: aspectos patológicos e identificação de micobactérias

According to anatomopathologic and isolation diagnosis and identification assays, a study on tuberculosis in 133 (7.7%) slaughtered water buffaloes has demonstrated that localized alterations occurred in 72.1% of infected animals, generalized alterations occurred in 27.9% of them, 60.3% of lesions were presented in the respiratory system, 20.3% in the head and mouth conjugate, 9.6% in the carcasse, 6.3% in the abdominal cavity and 3.8% in the breast; from 49 identified strains 33 (67.3%) were of M. bovis, two (4.1%) of M. gordonae, eight (16.3%) of M. fortuitum, two (4.1%) of M. avium complex and four (8.2%) of rapid and schotocromogenic growth strains. The predominant M. bovis strain has corresponded to 70.4% of species identified in the lungs and 87.5% of them identified in the respiratory system. Respiratory system was the primary route of infection, which had a certain progressive disease characteristics.

Um estudo anatomopatológico e microbiológico a respeito da tuberculose em búfalos abatidos para consumo revelou taxa de prevalência de 7,7%, 72,1% de alterações localizadas e 27,9% de alterações generalizadas. No aparelho respiratório estavam localizadas 60,3% das alterações, no conjunto cabeça-língua 20,3%, na carcaça 9,6%, na cavidade abdominal 6,3% e nas mamas 3,8%. O Mycobacterium bovis foi a espécie predominante, correspondendo a 67,3% das cepas isoladas, 70,3% dos isolamentos micobacterianos no aparelho respiratório e 87,5 dos isolamentos no parênquima pulmonar. Entre outras micobactérias isoladas, oito (16,3%) eram cepas de M. fortuitum, quatro (8,2%) de crescimento rápido e escotocromogênico, duas (4,1%) do complexo M. avium e duas (4,1%) de M. gordonae. O aparelho respiratório foi a via primária de infecção observada nos animais abatidos, a qual apresentava um certo grau de doença progressiva, similar à de bovinos.

Identificação de mycobacterium bovis emturculosis por PCR

Tuberculose bovina é uma doença infecciosa causada por Mycobacterium bovis, pertencentes ao complexo Mycobacterium tuberculosis (MTB). Este grupo de bactérias é de grande importância em saúde pública e animal. O diagnóstico e a diferenciação dos membros do MTB por técnicas convencionais de microbiologia são caras e demoradas. O presente estudo teve como objetivo analisar os marcadores moleculares para diagnóstico de M. bovis e desenvolver duas reações em cadeia pela polimerase (PCR) em tempo real para o diagnóstico de M. bovis e M. tuberculosis em amostras de suspensão bacteriana. Os iniciadores e as regiões descritas na literatura como específico para M. bovis revelaram-se ineficazes para o diagnóstico específico. A região de diferença (DR4) foi eficiente (0,8843) e específica (0,9404) para o diagnóstico de bacilos bovina em uma PCR convencional. Para a PCR em tempo real para M. Bovis foi escolhido o gene PE-PGRS 20, que codifica uma proteína da família do PE-PGRS. A PCR em tempo real mostrou uma eficiência de 90,969% e um limite de detecção de 0,16 ng de DNA/ul. Para o bacilo humano, a PCR em tempo real foi concebida para a detecção do gene Rv1510, com a especificidade diagnóstica de 0,9120 e de 0,9655 de eficiência. A PCR em tempo real padronizada pode ser utilizado em um grande número de amostras e com testes de robustez, repetibilidade e reprodutibilidade demonstrando alta concordância entre os resultados, tornando-se ensaios exelentes para o diagnóstico da tuberculose humana e bovina

DETECÇÃO DE Mycobacterium spp. E COMPLEXO M. tuberculosis EM LINFONODOS DE ANIMAIS PELA TÉCNICA DA REAÇÃO EM CADEIA DA POLIMERASE (PCR), BACTERIOLOGIA ASSOCIADA A HISTOPATOLOGIA

No presente estudo empregou-se a técnica de PCR, e cultivo bacteriológico convencional na detecção de Mycobacterium spp. e do complexo M. tuberculosis em 73 linfonodos de animais com lesões sugestivas de tuberculose, sendo 66 de de bovinos com lesões detectadas durante a inspeção post-mortem, cinco de suínos e dois bovinos com sintomatologia clínica de tuberculose. Além disso, fêz-se a histopatologia em 37 amostras de linfonodos de bovinos. Foram utilizados iniciadores genéricos TB-1 e TB-2 (HANCE et al., 1989) e MT-1 e MT-2 (SJÖBRING et al., 1990) para o complexo, que amplificam produtos de 383 e 419 pb, respectivamente. A eletroforese foi realizada em gel de agarose a 1,5% corado com brometo de etídeo (10 mg/mL) e visualizados em luz UV. As extrações foram realizadas com kit comercial e técnica de van SOOLINGEN et al. (1991), tendo sido utilizados procedimentos de extração para amostras descontaminadas, sem descontaminar, enriquecidas e não enriquecidas. Das 36 amostras positivas identificadas no trabalho, 35/73,12/37 e 35/73 foram detectadas pela cultura em em ágar LJ, histopatológico e PCR, respectivamente. Das 35 amostras positivas pelo PCR, 22 (62,86%) foram positivas para o gênero e 23 (65,71%) para o complexo. Considerando as amostras de bovinos com lesões em linfonodos, 30/66 (45,45%) foram positivas, sendo 17 (56,67%) para gênero e 20 (66,67%) para o complexo M. tuberculosis. Considerando os procedimentos de extração, no total das extrações realizadas foram detectadas 54/294 (18,37%) positivas, sendo 23/294 (7,82%) positivas para gênero e 31/294 (10,54%) para o complexo M. tuberculosis. 31/65 (47,69%) amostras foram positivas entre as não enriquecidas dos três procedimentos avaliados (.1, .3 e .4), independente da técnica de extração. Das não enriquecidas descontaminadas (procedimentos .1 e .3) foram detectadas 23/65 (35,38%) positivas, das não enriquecidas e não descontaminadas (procedimento .4) 12/65 (18,46%) e 09/72 (12,50%) das enriquecidas (procedimento .2). Das positivas sem enriquecimento, 23 eram descontaminadas (procedimentos .1 e .3) e 12 não descontaminadas (procedimento .4); das não enriquecidas e descontaminadas positivas (procedimentos .1 e .3), 14/23 (60,87%) foram positivas para o gênero e 11/23 (47,83%) para o complexo. Das amostras positivas não enriquecidas e não descontaminadas (procedimento .4), 04/12 (33,33%) foram positivas para o gênero e 08/12 (66,67%) para o complexo. Das enriquecidas positivas (procedimento .2), 06/09 (66,66%) foram positivas para o gênero e 08/09 (88,88%) para o complexo MTB. Das amostras descontaminadas e enriquecidas, extraídas pela técnica de pela van SOOLINGER et al. (1991), 20/35 (57,14%) foram positivas e, das enriquecidas, 9/35 (25,71%). Das não enriquecidas e descontaminadas desta técnica, 19/35 (54,29%) foram positivas para gênero e 15/35 (42,86%) para o complexo. Das extraídas pelo kit, 6/35 (17,14%) foram positivas, mas apenas para o complexo M. tuberculosis. Das amostras não descontaminadas (kit) 4/35 (11,43%) foram positivas para gênero e 8/35 (22,86%) para o complexo. Das 35 amostras positivas identificadas no presente trabalho pela técnica de PCR, daquelas não enriquecidas, extraídas pelo kit, 16/35 (45,71%) foram positivas e 19/35 (54,29%) negativas; as da técnica de van SOOLINGER et al. (1991), 27/35 (77,14%) foram positivas e 8/35 (22,86%) negativas. Neste trabalho foi observada a necessidade de associação entre as técnicas de diagnóstico, procedimentos e métodos