Mammary fibroadenomatoid hyperplasia in a heifer / Hiperplasia fibroadenomatoide mamária em uma novilha

This manuscript described the anatomopathological and immunohistochemical findings in a rare case of mammary fibroadenomatoid hyperplasia in a 12-month-old Holstein heifer. A yellow, multilobulated, firm 20cm x 9cm x 6.5cm mass affecting the right quarters of the udder was observed. Total mastectomy was performed. Microscopic evaluation revealed severe hyperplasia of the mammary epithelium and numerous well-differentiated and mildly pleomorphic acini. Additionally, moderate proliferation of the fibrous connective tissue and the myoepithelial cells near the proliferating acini was evident. About 50% of the proliferating epithelial cells showed positive nuclear labeling for estrogen and progesterone receptors, and approximately one-third were positive for Ki-67. In addition, the myoepithelial cells exhibited diffuse nuclear immunoreactivity for p63. Based on the clinical, morphologic, and immunohistochemical findings, a diagnosis of mammary fibroadenomatoid hyperplasia with probable influence of ovarian steroids was made.

Este artigo descreve os achados anatomopatológicos e imuno-histoquímicos de um caso raro de hiperplasia fibroadenomatoide mamária em uma novilha Holandesa de 12 meses. Observou-se uma massa amarelada, firme, multilobulada, medindo 20 x 9 x 6,5 cm e afetando os quartos direitos do úbere. Mastectomia total foi realizada. Microscopicamente, notou-se hiperplasia acentuada do epitélio mamário e numerosos ácinos levemente pleomórficos e bem diferenciados. Proliferação moderada do tecido conjuntivo fibroso e das células mioepiteliais próximos aos ácinos proliferados era também evidente. Aproximadamente 50% das células epiteliais proliferadas mostraram marcação nuclear positiva para receptores de estrógeno e progesterona e cerca de um terço dessas células era positivo para Ki-67. Além disso, as células mioepiteliais exibiram reação nuclear e difusa para p63. Com base nos achados clínicos, morfológicos e imuno-histoquímicos, firmou-se o diagnóstico de hiperplasia fibroadenomatoide mamária com provável influência de esteroides ovarianos.

Mammary fibroadenomatoid hyperplasia in a heifer / Hiperplasia fibroadenomatoide mamária em uma novilha

This manuscript described the anatomopathological and immunohistochemical findings in a rare case of mammary fibroadenomatoid hyperplasia in a 12-month-old Holstein heifer. A yellow, multilobulated, firm 20cm x 9cm x 6.5cm mass affecting the right quarters of the udder was observed. Total mastectomy was performed. Microscopic evaluation revealed severe hyperplasia of the mammary epithelium and numerous well-differentiated and mildly pleomorphic acini. Additionally, moderate proliferation of the fibrous connective tissue and the myoepithelial cells near the proliferating acini was evident. About 50% of the proliferating epithelial cells showed positive nuclear labeling for estrogen and progesterone receptors, and approximately one-third were positive for Ki-67. In addition, the myoepithelial cells exhibited diffuse nuclear immunoreactivity for p63. Based on the clinical, morphologic, and immunohistochemical findings, a diagnosis of mammary fibroadenomatoid hyperplasia with probable influence of ovarian steroids was made.(AU)

Este artigo descreve os achados anatomopatológicos e imuno-histoquímicos de um caso raro de hiperplasia fibroadenomatoide mamária em uma novilha Holandesa de 12 meses. Observou-se uma massa amarelada, firme, multilobulada, medindo 20 x 9 x 6,5 cm e afetando os quartos direitos do úbere. Mastectomia total foi realizada. Microscopicamente, notou-se hiperplasia acentuada do epitélio mamário e numerosos ácinos levemente pleomórficos e bem diferenciados. Proliferação moderada do tecido conjuntivo fibroso e das células mioepiteliais próximos aos ácinos proliferados era também evidente. Aproximadamente 50% das células epiteliais proliferadas mostraram marcação nuclear positiva para receptores de estrógeno e progesterona e cerca de um terço dessas células era positivo para Ki-67. Além disso, as células mioepiteliais exibiram reação nuclear e difusa para p63. Com base nos achados clínicos, morfológicos e imuno-histoquímicos, firmou-se o diagnóstico de hiperplasia fibroadenomatoide mamária com provável influência de esteroides ovarianos.(AU)

PAPEL DA HIPERPROLACTINEMIA E CLORIDRATO DE PIRIDOXINA NA EXPRESSÃO DE MEDIADORES HORMONAIS NO ÚTERO DE CADELAS COM PSEUDOCIESE

A pseudociese, também conhecida como pseudogestação é caracterizada como uma síndrome, em que cadelas não castradas apresentam sinais clássicos de peri e pós-parto. Os sinais clínicos vão desde alterações comportamentais, perda de apetite, perda de peso, vômito até o sinal mais evidente que é o aumento das glândulas mamárias e secreção de leite. A secreção láctea está relacionada com a redução dos níveis de progesterona plasmática associada ao aumento de prolactina. A prolactina exerce importante papel nas funções reprodutivas, no entanto, o excesso dessa substância está associado a alterações na fertilidade tanto em animais quanto em humanos, pela inibição da kisspeptina, peptídeo essencial para a reprodução, bloqueando o eixo hipotalâmico-hipofisário-gonadal (HPG). Para o tratamento farmacológico, as substâncias mais indicadas são os inibidores de prolactina, agonistas dopaminérgicos, a cabergolina e a bromocriptina. Uma alternativa terapêutica segura, capaz de reduzir os quadros de hiperprolactinemia em cadelas pseudogestantes é a vitamina B6 (cloridrato de piridoxina). Tanto os efeitos da hiperprolactinemia quanto do cloridrato de piridoxina sobre a expressão de mediadores hormonais no útero ainda é desconhecido. Acredita-se que a infertilidade causada pela hiperprolactinemia seja, além de origem central, no eixo HPG, como também de ação periférica, particularmente no útero. Nesse sentido, objetivou-se avaliar o efeito da hiperprolactinemia e do cloridrato de piridoxina na expressão de receptores de progesterona, estrógeno, andrógeno, hormônio tireoidiano, kisspeptina e KISS-1R, através da imunohistoquímica pela técnica da estreptavidina-biotina-peroxidase no útero de cadelas pseudogestantes. Foram utilizados fragmentos uterinos de 18 cadelas, divididos em três grupos: 1) controle não tratado, 2) tratado com cloridrato de piridoxina (50 mg/kg/dia; n=6) e 3) tratado com cabergolina (5µg/kg/dia; n=6). As cadelas com pseudogestação foram tratadas por 20 dias, submetidas a cirurgia de ovário-salpingo-histerectomia e os fragmentos uterinos foram fixados em formaldeído a 10% por 24 horas e depois processados pela técnica de inclusão em parafina. Avaliou-se a expressão de marcação nas regiões de epitélio endometrial, glândulas profundas e miométrio. A expressão de receptores de progesterona é maior em glândula profunda e miométrio nos grupos tratados (P <0,05). A expressão de receptores de estrógeno e KISS-1R é fraca nas regiões uterinas em todos grupos estudados (P > 0,05). Percebe-se expressão fraca ou nula de receptores de andrógeno em glândula profunda e miométrio nos grupos tratados (P < 0,001), resposta inversa a observada para progesterona. Nota-se expressão fraca de TR no grupo tratado com piridoxina em todas as regiões uterinas (P < 0,001) e expressão fraca de kisspeptina na superfície epitelial no grupo tratado com cabergolina

Pseudocyesis, also known as pseudogestation, is characterized as a syndrome, in which non-castrated bitches show classic signs of peri and postpartum. The signs range from behavioral changes, loss of appetite, weight loss, vomiting to the most obvious sign that the mammary glands are enlarged and milk is secreted. Milk secretion is related to the reduction in plasma progesterone levels associated with increased prolactin. Prolactin plays an important role in reproductive functions, however, the excess of this substance is associated with changes in fertility in both animals and humans, by inhibiting kisspeptin, a peptide essential for reproduction, blocking the hypothalamic-pituitary-gonadal axis (HPG ) For pharmacological treatment, the most suitable substances are prolactin inhibitors, dopaminergic agonists, cabergoline and bromocriptine. A safe therapeutic alternative capable of reducing hyperprolactinemia in pseudo-pregnant dogs is a vitamin B6 (pyridoxine hydrochloride). Both the effects of hyperprolactinemia and pyridoxine hydrochloride on the expression of hormonal mediators in the uterus are still unknown. It is believed that the infertility caused by hyperprolactinemia is not only central in the HPG axis, but also of peripheral action, particularly in the uterus. In this sense, the objective was to evaluate the effect of hyperprolactinemia and pyridoxine hydrochloride on the expression of progesterone, estrogen, androgen receptors, thyroid hormone, kisspeptin and KISS-1R, through immunohistochemistry by streptavidin-biotinperoxidase in the uterus in pseudostatic bitches. Uterine fragments of 18 dogs were used, divided into three groups: 1) untreated control, 2) treated with pyridoxine hydrochloride (50 mg / kg / day; n = 6) and 3) treated with cabergoline (5µg / kg / day ; n = 6). Pseudogestation bitches were treated for 20 days, submitted to ovariansalpingo-hysterectomy surgery and the uterine fragments were fixed in 10% formaldehyde for 24 hours and then processed using the paraffin inclusion technique. Marking expression is frequent in the regions of endometrial epithelium, deep glands and myometrium. The expression of progesterone receptors is greater in the deep gland and myometrium in the treated groups (P <0.05). An expression of estrogen receptors and KISS-1R is weak in the uterine regions in all groups studied (P> 0.05). The perception of weak or null expression of androgen receptors in the deep gland and myometrium in the treated groups (P <0.001), an inverse response to that observed for progesterone. There is a weak expression of TR in the group treated with pyridoxine in all uterine regions (P <0.001) and a weak expression of kisspeptin on the epithelial surface in the group treated with cabergoline.

Efeitos de doses subletais de inseticidas biológicos, administrados durante prenhez e lactação, sobre aspectos reprodutivos, hepático e renal em filhotes de ratas Wistar.

Devido à utilização em larga escala, os inseticidas estão entre os fatores de risco mais importantes para a saúde do homem, animais e meio ambiente. Como alternativa ao uso de inseticidas químicos, os bioinseticidas à base das proteínas Cry de Bacillus thuringiensis são uma estratégia significativa e muito utilizada contra insetos praga. Porém, apesar destas proteínas serem consideradas seguras para vertebrados, estudos tem apresentado resultados que discordam dessa afirmação. Sendo assim, esta pesquisa se propõe a investigar os possíveis efeitos na morfofisiologia reprodutiva, hepática e renal, em filhotes de ratas que receberam os inseticidas biológicos XenTari® WG e Dipel® durante prenhez e lactação. Foram utilizadas 20 ratas, Rattus norvegicus albinus da linhagem Wistar com 90 dias de idade, acasaladas e divididas nos seguintes grupos: GC Ratas prenhes; GX Ratas prenhes que receberam XenTari® WG (B. thuringiensis subsp. Aizawai); GDi Ratas prenhes que receberam Dipel® (B. thuringiensis var. Kurstaki); e GDe Ratas prenhes que receberam deltametrina (Keshet® 25EC). A administração dos inseticidas foi realizada por gavagem, na dosagem de 1mg/100g/dia (Grupos GX e GDi), e 2mg/Kg/dia (Grupo GDe), durante toda a gestação e lactação. Os resultados revelaram que a administração dos inseticidas biológicos e sintético reduziu o ganho de peso das matrizes quando comparados ao grupo controle. Os inseticidas biológicos também promoveram redução da prole, do peso, do comprimento, causaram malformação e mortalidade. Houve retardo no período de abertura vaginal, aumento do metaestro em relação as outras fases, redução do estrógeno, progesterona (fêmeas) e testosterona (machos), ovários com numerosos folículos terciários, atrésicos e poucos corpos lúteos na prole dos três grupos que receberam inseticidas e, apenas nos grupos XenTari® e Dipel® foi observado alterações histopatológicas nos testículos, com vacuolizações e descamação do epitélio seminífero. A análise quantitativa dos receptores de andrógeno e estrógeno revelou redução significativa para ambos nas gônadas da prole cujas ratas receberam os inseticidas biológicos e a deltametrina e, nestes mesmos grupos, a morfometria testicular revelou redução do diâmetro tubular, da altura do epitélio seminífero e do comprimento total tubular, e nos ovários observouse menor número de folículos primários, secundários e corpos lúteos, e aumento no número de folículos terciários e atrésicos. A administração dos inseticidas também reduziu os níveis dos biomarcadores de toxicidade alanina aminotransferase (ALT), aspartato aminotransferase (AST), ureia e creatinina, e os inseticidas biológicos promoveram alterações histopatológicas no fígado, com a presença de congestão de veia porta, centrolobular e nos capilares sinusóides, e no rim presença de congestão cortical e redução do espaço subcapsular. Houve redução significativa de glicogênio no fígado, e a morfometria revelou redução do parênquima lobular e aumento no parênquima não lobular, enquanto no rim observou-se redução do diâmetro e volume do glomérulo e da cápsula de Bowman na prole das ratas tratadas com os inseticidas. Assim, conclui-se que tanto os inseticidas biológicos XenTari® e Dipel®, quanto o inseticida sintético deltametrina, em doses subletais em ratas prenhes, promovem alterações reprodutivas, hepáticas, renais, e no desenvolvimento dos filhotes, que se prolongam até a fase adulta, sendo a maioria desses efeitos ainda mais expressivos nos grupos que receberam os inseticidas biológicos.

Due to their large-scale use, insecticides are among the most important risk factors for the health of man, animals, and the environment. As an alternative to the use of chemical insecticides, bioinsecticides based on the Cry proteins of Bacillus thuringiensis are a significant and widely used strategy against insect pests. However, although these proteins are considered safe for vertebrates, studies have shown results that disagree with this statement. Therefore, this research aims to investigate the possible effects on reproductive, hepatic and renal morphophysiology in puppies of rats that received the biological insecticides XenTari® WG and Dipel® during pregnancy and lactation. Twenty rats, Rattus norvegicus albinus of the Wistar strain, 90 days old, mated and divided into the following groups were used: CG - Pregnant rats; GX - Pregnant rats that received XenTari® WG (B. thuringiensis subsp. Aizawai); GDi - Pregnant rats that received Dipel® (B. thuringiensis var. Kurstaki); and GDe - Pregnant rats that received deltamethrin (Keshet® 25EC). Insecticides were administered by gavage, at a dosage of 1mg/100g/day (Groups GX and GDi), and 2mg/Kg/day (Group GDe), throughout pregnancy and lactation. The results revealed that the administration of biological and synthetic insecticides reduced the weight gain of the matrices when compared to the control group. Biological insecticides also promoted a reduction in offspring, weight, and length, causing malformation and mortality. There was a delay in the vaginal opening period, an increase in the metestrus about the other phases, a reduction in estrogen, progesterone (females) and testosterone (males), ovaries with numerous tertiary follicles, atresia and few corpus luteum in the offspring of the three groups that received insecticides and, only in the XenTari® and Dipel® groups, histopathological changes in the testicles were observed, with vacuolations and desquamation of the seminiferous epithelium. Quantitative analysis of androgen and estrogen receptors revealed a significant reduction for both offspring gonads whose rats received biological insecticides and deltamethrin, and in these same groups, testicular morphometry revealed a reduction in tubular diameter, height of seminiferous epithelium and tubular total length, and in the ovaries there was a smaller number of primary, secondary and corpus luteum follicles, and an increase in the number of tertiary and atretic follicles. The administration of insecticides also reduced the levels of biomarkers of toxicity alanine aminotransferase (ALT), aspartate aminotransferase (AST), urea and creatinine, and the biological insecticides promoted histopathological changes in the liver, with the presence of portal vein, centrilobular and sinusoid capillaries congestion, and in the kidney, presence of cortical congestion and reduction of the subcapsular space. There was a significant reduction in glycogen in the liver, and the morphometry revealed a reduction in the lobular parenchyma and an increase in the non-lobular parenchyma, while in the kidney there was a reduction in the diameter and volume of the glomerulus and Bowman's capsule in the offspring of the rats treated with the insecticides. Thus, it is concluded that both the biological insecticides XenTari® and Dipel®, as well as the synthetic insecticide deltamethrin, in sublethal doses in pregnant rats, promote reproductive, hepatic and renal changes, and in the development of the puppies, being which last until the adult phase, most of these effects were even more expressive in the groups that received biological insecticides.

Sincronização de receptoras no diestro para utilização em programa de transferência de embriões em equinos / Synchronization of estrus in the recipient for use in program embryo transfer in horses / La sincronización del estro en el receptor para su uso en la transferencia de embriones programa en caballos

Um dos grandes problemas da técnica de transferência de embriões continua sendo a seleção de éguas aptas para serem utilizadas como receptoras de embrião e aumentar o seu período de utilização é sempre um desafio. A utilização de receptoras acíclicas sincronizadas pela reposição hormonal apresenta taxas de gestação similares a receptoras ciclantes. O objetivo do presente trabalho foi estudar o efeito da utilização do estrógeno e progesterona em receptoras de embrião na fase de diestro. Foram utilizadas 60 éguas dividas em três grupos experimentais, sendo grupo controle, grupo aciclicas preparadas com a administração de 20mg de 17ẞ estradiol e 3g de progesterona natural injetável em veiculo de liberação lenta e o grupo diestro receptoras entre o D8 e D14 do ciclo estral (diestro) preparadas com a administração de 50mg de 17 ẞ estradiol e 3g de progesterona natural injetável em veiculo de liberação lenta. Foi avaliada a porcentagem de prenhez e valor médio e desvio padrão do grau máximo de edema uterino de receptoras que ficaram prenhes ou ficaram vazias nos diferentes grupos, porcentagem de receptoras do grupo diestro que apresentaram grau de edema uterino e taxa de prenhez em relação ao grau de edema, média e desvio padrão do grau de edema uterino e número de animais em relação ao dia do inicio do protocolo e respectiva taxa de prenhez das éguas do grupo diestro. Os dois protocolos de sincronização no grupo controle e grupo acíclicas com 80% de prenhez foram eficazes para a preparação de éguas como receptoras de embrião. O protocolo utilizado no grupo diestro obteve a taxa de gestação de 40% podendo ser uma alternativa estratégica em um programa de TE, desde que a receptora se encontre após o D10 do diestro e apresente grau de edema uterino superior a 2, após a aplicação do 17 ẞ estradiol.

A major problem of the technique of embryo transfer remains the selection of suitable mares to be used as embryo recipients and increase their usage period is always a challenge. Knowing that the use of acyclic receptor synchronized by hormone replacement shows pregnancy rates similar to receiving ciclantes. The aim of this work was to study the effect of the use of estrogen and progesterone receptors in embryo at the stage of estrus. 60 mares were used divided into three experimental groups and control group, acyclic prepared with the administration of 20 mg of 17ẞ estradiol and 3g of natural progesterone injection in vehicle slow release and the group receiving diestrus between D8 and D14 of the estrous cycle (diestrus) prepared by administering 50 mg of estradiol, and 17 ẞ 3g natural progesterone injection in slow release vehicle. Being evaluated pregnancy rate and mean value and standard deviation of the maximum degree of uterine edema of recipients who were pregnant or became empty in the different groups, the percentage of recipients diestrus group that showed uterine edema and pregnancy rate in relation to the degree of edema, mean and standard deviation of the degree of uterine edema and numbers of animals in relation to the day of the beginning of the protocol and rate of pregnancy in mares group diestrus. The two synchronization protocols in the control group and acyclic group with 80% pregnancy were effective for the preparation of mares as embryo recipients. The protocol used in diestrus group obtained pregnancy rate of 40% could be an alternative strategy in a program TE, provided the receptor is found after D10 diestrus and present uterine edema grade greater than 2, after application 17 ẞ estradiol.

Un problema importante de la técnica de transferencia de embriones sigue siendo la selección de yeguas adecuadas para que puedan ser utilizadas como receptoras de embriones y aumentar su periodo de uso es siempre un desafío. Sabiendo que el uso del receptor acíclico sincronizado por reemplazo hormonal muestra las tasas de embarazo similares a recibir ciclantes. El objetivo de este trabajo fue estudiar el efecto de la utilización de los receptores de estrógeno y progesterona en embrión en la fase de estro. 60 yeguas que se dividieron en tres grupos experimentales y el grupo de control, acíclicos preparado con la administración de 20 mg de 17ẞ estradiol y 3 g de inyección de progesterona natural en el vehículo de liberación lenta y el grupo que recibió el diestro entre D8 y D14 del ciclo estral (diestro) preparado por la administración de 50 mg de estradiol y 17 de inyección de progesterona natural 3g ẞ en un vehículo de liberación lenta. Siendo evaluada tasa de embarazo y el valor y la desviación estándar del máximo grado de edema uterino de las receptoras que estaban embarazadas o se convirtieron en vacío en los diferentes grupos de media, el porcentaje de receptoras grupo diestro que mostró edema uterino y la tasa de embarazo en relación con el grado edema, media y desviación estándar del grado de edema uterino y el número de animales en relación con el día del comienzo del protocolo y la velocidad de la gestación en yeguas diestro grupo. Los dos protocolos de sincronización en el grupo control y el grupo acíclico con 80% de embarazo fueron eficaces para la preparación de yeguas como receptoras de embriones. El protocolo utilizado en el grupo diestro obtuvo tasa de embarazo del 40% podría ser una estrategia alternativa en un programa de TE, siempre y cuando la receptora se encuentre después de D10 diestro y presente edema uterino de grado mayor que 2, después de la aplicación 17 ẞ estradiol.

Estrogen and oxytocin receptors in the canine corpus luteum during pregnancy and parturition / Receptores de estrógeno e ocitocina no corpo lúteo durante a gestação e parto em cadelas

The expression of genes encoding the receptors for estrogen (ERαmRNA) and oxytocin (OTRmRNA) was studied in the corpus luteum during pregnancy and parturition in dogs. Real-time PCR was performed to quantify the levels of ERαmRNA and OTRmRNA in the corpus luteum of bitches during Early (up to 20 days of gestation), Mid (20 to 40 days) and Late Pregnancy (40 to 60 days), and Parturition (first stage of labor). The corpus luteum expressed mRNA for OTR, however ERα mRNA was not detected. There was a reduction of OTR mRNA expression in the corpus luteum from gestational Day 20 onward, which suggests an important role of OTR mRNA in the mechanism of pregnancy recognition in dogs. We concluded that the expression of OTR mRNA in canine corpus luteum vary over time, which support the idea that the sensitivity and response to hormone therapy can vary along the course of pregnancy and labor. Moreover, the canine CL lacks ERα mRNA expression during pregnancy.(AU)

A expressão dos genes que codificam os receptores de estrógeno (REα RNAm) e ocitocina (ROT RNAm) foi estudado no corpo lúteo de cadelas durante a gestação e parto. A técnica de PCR em tempo real foi realizada para quantificar a expressão do REα RNAm e ROT RNAm no corpo lúteo de cadelas durante o início (até 20 dias de gestação), meio (20 a 40 dias) e final da gestação (40 a 60 dias), e durante o parto (pródomos do parto). O corpo lúteo apresentou expressão do RNAm para o ROT, entretanto o RNAm para o REα não foi detectado. Houve redução na expressão do ROT RNAm no corpo lúteo a partir de 20 dias da gestação, indicando papel no mecanismo de reconhecimento gestacional em cadelas. Em conclusão, a expressão do ROT RNAm no corpo lúteo de cadelas apresentou variação ao longo do tempo de gestação, sugerindo que a resposta e sensibilidade à terapia hormonal pode variar conforme o momento da gestação e parto. Ademais, o corpo lúteo canino não expressa REα RNAm durante a gestação.(AU)

The testis of the mice C57/BL6 offspring in adulthood have alterations due to maternal caffeine consumption

To investigate the effects of the maternal caffeine consumption during pregnancy to adult male testis mice offspring. METHODS: Twenty pregnant mice were divided into control group (c) and caffeine group (cf). dams received daily saline or 20 mg/kg of caffeine subcutaneously. Male offspring were monitored daily until 13th week. The testis were used to evaluate both the proliferation (pcna) and apoptosis (bax); leptin receptor (ob-r); aromatase; follicle stimulating hormone (fshr), luteinizing hormone (lhr) and androgen receptors (ar); steroidogenic acute regulatory protein (star); vascular endothelial growth factor (vegf) and estrogen receptors (erα and erβ) by western blotting. Serum concentrations of testosterone, estradiol and leptin were measured. RESULTS: There was a significant reduction in food intake and the body mass gain (p<0.05) in the cf ; pcna (p=0.01), fshr (p=0.02), star (p=0.0007), vegf (p=0.009), ar (p=0.03) in the cf. while an increase were note in bax (p=0.01), ob-r (p=0.02), lhr (p=0.04) and in the aromatase (p=0.03) in the cf. only erα and erβ were not changed by maternal caffeine. The serum testosterone levels in the cf offspring were 90% lower than in the c offspring (p=0.04). CONCLUSION: Maternal caffeine consumption has a role and alters the testis of the offspring in adulthood.(AU)

Identificação de receptores hormonais na placenta e avaliação do efeito da hormonioterapia em éguas com placentite

Foi realizado um estudo com o objetivo de identificar a imunomarcação dos receptores de progesterona, receptores de estrógeno alfa (RE), beta (RE) e receptor relacionado ao estrógeno gama (RRE), e de aromatase na placenta de éguas com placentite ascendente, tratadas com diferentes terapias hormonais, bem como a avaliação da imunolocalização de leptina e seu receptor na placenta de éguas saudáveis. O primeiro estudo teve como objetivo avaliar a presença da leptina e seu receptor na placenta equina a termo, bem como as concentrações de leptina durante a gestação e no pós-parto. Foram utilizadas 8 (oito) éguas, mestiças Crioulas, com gestações saudáveis. Foram coletados fragmentos placentários para avaliação da imunolocalização da leptina e seu receptor através da técnica de imunofluorescência. Também foram realizadas dosagens séricas de leptina do 8º mês de gestação até 24 horas pós-parto. Foi identificada a presença de leptina e seu receptor no epitélio de microcotilédones e região areolar, caracterizando possível função autócrina e parácrina da leptina em relação a gestação em equinos. No segundo estudo, o objetivo foi descrever a imunomarcação e quantificação de receptores de progesterona (RP), receptores de estrógeno (RE), (RE) e receptor relacionado ao estrógeno (RRE), e de aromatase na placenta de éguas com placentite ascendente tratadas com diferentes terapias hormonais. Foram utilizadas 23 gestações, de 20 éguas mestiças Crioulas, com indução de placentite experimental aos 300 dias de gestação, e sobre diferentes terapias hormonais. Os grupos foram constituídos de um grupo controle sem indução de placentite (n=6); sem tratamento (com indução de placentite, porém sem terapia, n=3); sulfametoxazole+trimetoprima e flunixim meglumine junto a terapia hormonal com altrenogest (n=6); sulfametoxazole+trimetoprima e flunixim meglumine junto a terapia hormonal com altrenogest associada com cipionato de estradiol (n=4); e sulfametoxazole+trimetoprima e flunixim meglumine junto a terapia hormonal com cipionato de estradiol (n=4). Foi observada marcação consistente de receptores de progesterona, de estrógeno , e RRE, e de aromatase, predominantemente no citoplasma das células de microcotilédoens e epitélio coriônico de região areolar. As éguas com placentite recebendo terapia com cipionato de estradiol demonstraram maior tempo de gestação e quantificação de aromatase na placenta. Enquanto, as éguas com terapia de altrenogest demonstraram menor tempo gestacional, e menor expressão de receptores de estrógeno . Já nas éguas sem tratamento e com terapia associada de altrenogest e cipionato, foi observado elevado número de receptores de progesterona na placenta.

The aim of this study was to identify the expression of progesterone receptors, alpha (RE), beta (RE) receptors and estrogen related-receptor gamma (RE), and aromatase expression in placenta of mares with ascending placentitis treated with different hormonal therapies, as well as the evaluation of leptin expression and its receptor in the placenta of healthy mares. The first study aimed to evaluate the presence of leptin and its receptor in the placenta at term, as well as leptin concentrations during pregnancy and after delivery. Eight (8) mares, crossbred Crioulo, with healthy pregnancies were used in the study. Placental fragments were collected to evaluate the immunolocalization of leptin and its receptor by the immunofluorescence technique. Serum levels of leptin from the 8th month of gestation up to 24 hours postpartum were also performed. Expression of leptin and its receptor in the microcotilednary epithelium and areolar region were identified, characterizing an autocrine and paracrine function of leptin in equine placenta. In the second study, the aim was to describe the expression and quantification of progesterone (PR) receptors, estrogen receptors (RE), (RE) and estrogen-related receptor (RE), and aromatase in the placenta of mares with ascending placentitis treated with different hormonal therapies. Twenty-three (23) pregnancies of twenty (20) crossbred Crioulo mares were used, the mares had induction of experimental ascending placentitis at 300 days of gestation, and were treated with different hormonal therapies. The groups was formed by control group, without induction of placentitis (n=6), no tretament group (with placentitis induced but without tretament n=3); trimetoprim+sulfamethoxazole with flunixim meglumine and hormonal therapy with altrenogest (n=6); trimetoprim+sulfamethoxazole with flunixim meglumine and hormonal therapy with altrenogest and estradiol cypionate (n=4); and trimetoprim+sulfamethoxazole with flunixim meglumine and hormonal therapy with estradiol cypionate (n=4). Consistent immunostaining of progesterone, , and estrogen receptors was observed, and also aromatase, all the immunostaining with predominance in the cytoplasm of the microcotyledons cells and areolar region of chorionic epithelium. Mares with placentitis on estradiol cypionate therapy demonstrated higher gestation length and quantification of aromatase in the placenta. The mares with altrenogest therapy have demonstrated shorter gestational length, and least immunostaining for oestrogens. Meanwhile, mares without treatment and those with associated altrenogest and estradiol cypionate therapy have demonstrated increased immunostaining to progesterone receptors in the placenta.

PROTOCOLOS HORMONAIS PARA TRANSFERÊNCIA DE EMBRIÕES EQUINOS EM TEMPO FIXO

Nos programas de transferência de embriões um dos principais entraves são a disponibilidade de receptoras aptas por doadora de embrião. Sendo assim, estudos estão sendo desenvolvidos utilizando de diferentes protocolos hormonais para utilização nas receptoras em programas de TE .O objetivo do presente trabalho foi sincronizar éguas receptoras de embriões, independentes da fase do ciclo estral e da atividade ovariana, com o ciclo da doadora, maximizando a utilização das receptoras no programa de transferência de embriões (TE). Foram utilizadas 160 éguas, que foram separadas em grupos de 20 animais conforme a fase do ciclo estral: 1) éguas acíclicas em anestro e transição, 2) cíclicas em estro com folículos < 35 mm, 3) em estro com folículos 35 mm,4) em diestro com CL < 5 dias e 5) em diestro com CL 5 dias. Inicialmente, todos os animais receberam uma aplicação de 10mg de dinoprosttrometamina e 1 aplicação de 17 estradiol por 4 dias consecutivos seguido por uma aplicação de 300 mg de altrenogest. Posteriormente, o protocolo foi modificado e realizado em mais um grupo 6) com uma dose de 10mg de dinoprosttrometamina no segundo dia do tratamento. Os embriões foram transferidos de três a oito dias após a aplicação do altrenogest. O diagnóstico de gestação foi efetuado 5 a 7 dias após a TE. Com apenas uma aplicação de prostaglandina no primeiro dia de tratamento todos os animais apresentaram edema uterino acentuado e taxas de prenhez superior a 70%, entretanto as receptoras que ao início do tratamento apresentavam a presença de CL < 5 dias mostraram um edema uterino significativamente menor que os demais grupos e índices de gestação de 40%, inferiores aos observados nos demais grupos. Entretanto, quando este grupo foi submetido a duas aplicações de prostaglandina nos dois primeiros dias do tratamento as taxas de gestação aumentaram para 70%. Baseado nos dados obtidos pode-se concluir que boas taxas de prenhez de receptoras de embrião estão relacionadas a uma eficiente sensibilização uterina ao estrógeno que contribui para a posterior ação progesteronica fundamental para obtenção da sincronização do ambiente uterino.

In embryo transfer programs, one of the main obstacles is the availability of recipients suitable for embryo donors. Thus, studies are being developed using different hormonal protocols for use in recipients in ET programs. The objective of the present study was to synchronize the uterine environment of embryo recipient mares, independent of the estrous phase and ovarian activity, with the donor cycle, maximizing the use of recipients in the embryo transfer program. A total of 160 mares were used, which were separated into groups of 20 animals according to the estrous phase: acyclic mares in anestrus and transition, cyclic estrus with follicles <35 mm, estrus with follicles 35 mm, in right ventricle with CL<5 Days and in right arm with CL 5 days. Initially, all animals received an application of 10 mg of Dinoprost tromethamine and 1 application of 17 estradiol for 4 consecutive days followed by a 300 mg application of altrenogest. Subsequently, the protocol was modified and another 10mg dose of Dinoprost tromethamine was added on the second day of treatment. The embryos were transferred three to eight days after the application of altrenogest. The diagnosis of gestation was made 5 to 7 days after ET. With only one application of prostaglandin on the first day of treatment, all the animals had marked uterine edema and pregnancy rates higher than 70%; however, those receiving at the start of treatment had a CL <5 days showed significantly lower uterine edema than The other groups and gestation rates of 40%, lower than those observed in the other groups. However, when this group underwent two prostaglandin applications on the first two days of treatment, gestation rates increased to 70%. Based on the data obtained it can be concluded that good pregnancy rates of embryo recipients are related to an efficient uterine sensitization to estrogen that contributes to the subsequent progesterone action fundamental to obtain the synchronization of the uterine environment.

IMUNOEXPRESSÃO DE RECEPTORES DE ESTRÓGENO ALFA (ER-), BETA (ER-) E PROGESTERONA (PR) EM COTILÉDONES FETAIS OVINOS ORIUNDOS DE EMBRIÕES TRANSFERIDOS COLETADOS NO MOMENTO DO PARTO

Devido a sua facilidade de manejo, a espécie ovina é um modelo experimental para estudos nas áreas de cirurgia, obstetrícia e reprodução animal. A prática da transferência de embrião vem sendo aperfeiçoada visando a seleção de animais geneticamente superiores. A estrutura placentária permite trocas gasosas, metabólicas e transporte de nutrientes, tornando-se responsável pelo desenvolvimento fetal. O presente estudo teve como objetivo relacionar a técnica de TE às alterações morfológicas e analisar receptores de estrógeno alfa (ER-), beta (ER-) e progesterona (PR). Foram utilizados 20 animais, os quais foram divididos em dois grupos, 10 (TE) e 10 (controle). Foram colhidos 4 cotilédones de cada animal e o material foi fixado em formalina tamponada com pH 7,4 para inclusão em Paraplast® e glutaraldeído para historesina. As amostras foram seccionadas a 4µm e coradas em HE, que após análise prévia foram encaminhadas para coloração específica, PAS, tricômico de masson, von kossa e Perl. Para a análise morfométrica utilizou-se três amostras de cada animal de ambos os grupos, analisados da base ao ápice da microviloside no aumento de 400X em 10 campos. Para o estudo de receptores, seis cotilédones de seis animais de ambos os grupos foram selecionados, analisados e contados por três observadores em 10 campos por amostra. No presente estudo observou-se trombo arterial e venoso, esclerose, aderência de fibrina, espessamento endotelial, hialinização de vasos e infiltrados inflamatórios, tais alterações foram evidentes nas árvores vilosas primárias do grupo TE. Na região do epitélio cotiledonário, encontrou-se acúmulo de hemossiderina, células trofoblásticas binucleadas (CTBs), micronúcleo, condensação citoplasmática e nuclear nas CTBs, e projeções citoplasmáticas apicais. Ainda no epitélio observou-se presença de fosfato de cálcio, os quais também foram identificados na região do cório, também no espaço interviloso foi observado sangue extravasado. Essas características foram encontradas em ambos os grupos. Entretanto, na análise morfométrica houve diferença estatística entre as medidas M2 e M3 (p<0,05), porém entre os grupos não houve diferença estatística. Para os receptores estudados, apenas o ER- mostrou-se ausente em todo epitélio trofoblástico no grupo TE; já no grupo controle a imunorreatividade foi fraca nas CTBs, porém positiva (p<0,001). O ER- e PR foram imunoexpressos em ambos os grupos, os quais não mostraram diferença estatística. Também constatou-se decréscimo das CTBs no grupo TE, porém essa característica foi observada independente dos receptores estudados (p=0,013). Podemos concluir que as alterações vasculares, bem como os infiltrados inflamatórios, são sugestivas de placentite, e as alterações encontradas no epitélio são condizentes à maturidade e expulsão da placenta no momento do parto. A diferença entre ER- e ER- possivelmente estão relacionadas aos mecanismos fisiológicos no momento do parto, e a ausência de ER- supostamente está associada aos receptores de PR, sugerindo uma regulação hormonal negativa. Palavras-chaves: placenta, epitélio coriônico, vascularização, células binucleadas, receptores hormonais e ovelhas.

Due to its easy management, the ovine species are na experimental model for studies in areas such as surgery, obstetrics and animal reproduction. The embryo transfer practice has be perfected saiming the selecton of genetically superior animals. The placental structures enables gas exchanges, metabolic exchanges and transporto of nutrientes, becoming responsible for the fetal development. The objective of this study was to relat the ET technique to the morphological changes, and to analyze estrogen alpha (ER-), beta (ER-) and progesterone (PR) receptors. 20 animals divided in two groups, 10 (ET) and 10 (control), were used 4 cotyledons from each animal were collected and the material was fixed in buffered formaline with pH 7,4 for inclusion in Paraplast® and glutaraldehyde for historesin. The samples were sectioned in 4 µm and stained with HE, which after previous analyses were forwarded to specific staning, PAS, massons trichrome, von kossa and Perl. For the mophometric analyses, three samples of each animal form both groups were used, they were analysed from base to the apex of the microvillous at the magnification of 400X ib 10 fields. For the receptors study, six cotyledons of six animals from both groups were used, they analyzed and counted in 10 fields per sample by three observers. In this study, arterial and venous thrombus, sclrerosis, fibrina adhesion, endotelial thickening, hyalinizing vessels and inflammatory infiltrades, were observed, such alterations were apparent in primary villous trees from ET group. In cotyledondary epithelium region, accumulation of hemosiderin, binucleate trophoblastic cells (BTC), micronucleus, cytoplasmatic and nuclear presence of calcium phosphate was observed in the epithelium and wich was also indentified in the corium region, and spilled blood was observed in the intervillous space. Those characteristics were found in both groups. However, there were statical diferences between the measurements M2 and M3 (p<0,05) in the morphometric analysis, although there was no statistical difference between the groups. For the receptor studied, only ER- was absent from the trophoblastic epithelium in the ET group; in the control group, the immunoreactivity was weak in the BTC, although positive (p<0,001). ER- and PR were immunoexpressed in both groups, wich did no show statistical difference. A decrease of BTC was detected in the ET group, this characteristic was observed regardless of the receptors studied (p=0,013). We can conclude that vascular alterations, as well as inflammatory infiltrades, suggest placentitis, and the alterations found in the epithelium are consistente with maturity and expulsion of the placenta at moment of the birth. The difference between ER- and ER- is possibly related to physiological mechanisms at the moment of parturition, and absence of ER- is supposedly associated to PR receptors, suggesting down-regulation. ¨¨

EFEITOS DO ACETATO DE DESLORELINA SOBRE A PRODUÇÃO IN VIVO E IN VITRO DE EMBRIÕES DE GATAS DOMÉSTICAS

O acetato de deslorelina promove uma contracepção de longa duração segura e eficaz, porém a reversibilidade espontânea é progressiva e assincrônica. O objetivo geral foi avaliar os efeitos do acetato de deslorelina sobre a produção in vivo e in vitro de embriões de gatas domésticas. Para tanto foram realizados 2 experimentos. Experimento 1: Objetivou-se avaliar a taxa de produção de embriões in vitro em gatas tratadas com acetato de deslorelina. Foram utilizadas 21 fêmeas (Tratado n=11 e Controle n=10). Onze gatas receberam um implante de deslorelina (4,7mg/animal) e o tratamento durou 6 meses. Após o tratamento, todas as fêmeas (Tratado e Controle) foram submetidas à OSH para que seus ovários fossem incluídos em rotinas de produção de embriões in vitro (PIV). A taxa de recuperação de COC foi submetida ao teste t de Student. As taxas de clivagem e blastocisto foram expressas em porcentagem e submetidas ao teste exato de Fisher. Todas as análises foram realizadas no programa GraphPad v5.0, P<0.05. Uma gata apresentou galactorréia e foi retirada do grupo experimental. Foram obtidos 184 COC grau I, a taxa de clivagem foi em média de 55,97% (total de 103 mórulas) e de blastocisto de 33,99% (total de 33 blastocistos) no grupo Controle. Já no grupo Tratado foram obtidos 83 COC grau I e a taxa de clivagem foi em média 60,24% (total de 50 mórulas) e de blastocisto foi de 36% (total de 18 blastocistos). Só houve diferença estatística entre os grupos na taxa de recuperação de COC grau I. A taxa de recuperação de COC foi menor em gatas tratadas, porém a PIV apresentou taxas similares à de fêmeas não tratadas. Devem-se considerar as variações individuais no grupo tratado. Experimento 2: Objetivou-se avaliar a produção de embriões in vivo, a taxa de concepção, bem como a presença de receptores de estrógeno e progesterona no útero, e receptores de LH e FSH em ovários de gatas submetidas ao tratamento com acetato de deslorelina. Foram utilizadas 25 gatas domésticas, 15 foram tratadas com 4,7mg de acetato de deslorelina por 3 meses. Após esse período os implantes foram retirados e o estro e a ovulação induzidos. Cinco gatas foram mantidas com um macho comprovadamente fértil e submetidas à monta natural, a gestação foi confirmada 30 dias após a última monta. As outras 20 fêmeas foram castradas três dias após indução da ovulação e seus ovários e úteros foram avaliados por imunoistoquímica (receptores de estrógeno ER-¿ e progesterona PgR ¿ útero; receptores de LH e FSH ¿ ovário). Para análise estatística foi utilizado o teste exato de Fisher, com tabelas de contingência 2x2 para avaliar diferenças entre os grupos avaliados (P < 0,05). O acetato de deslorelina suprimiu a atividade ovariana nas gatas tratadas, e a indução do estro e ovulação foi realizada com sucesso. Nenhuma das fêmeas do grupo gestação estava prenhe e uma fêmea desenvolveu piometra. A imunoexpressão de ER-¿ apresentou declínio discreto quando comparado com os animais controle, a expressão de PgR se apresentou complexa e variável, sendo reduzida a quase nulo em alguns animais. A expressão de FSH-R e LH-R não foram alteradas. Concluiu-se que o primeiro estro induzido é infértil e que a falha gestacional ocorre provavelmente devido à alteração da expressão de PgR uterina.

Deslorelin acetate promotes a long, safe and efficient contraception; however reversibility is consider progressive and asynchronous. We aim to evaluate the effects of deslorelin acetate on in vitro and in vivo embryo production in domestic cats. For that 2 experiments were performed. Experiment 1: The objective was to investigate the effect of contraceptive treatment with deslorelin acetate in in vitro embryo production and oocyte recovery in domestic queens. Twenty one queens (Treated n=11 and Control n=10) and one tom were used. Eleven queens were treated with deslorelin acetate (4.7mg/animal) during 6 months. Thereafter all females (treated and control) were spayed and the ovaries were included in in vitro embryo production routines (PIV). Rate of COC recovery was submitted to t test. Cleavage and blastocyst rate were expressed in percentage and submitted to Fisher s exact test. All analyses were performed in GraphPad Pisma v5.0 program, P < 0.05. One female developed galactorrhoea and was removed from experimental group. In Control group we recovered 18.4±3.21 of COC I, cleavage rate was 55.97% and blastocyst rate was 33.99%.In Treated group we recovered 8.3±1.15 of COC I, cleavage rate was 60.24% and blastocyst rate was 36%. Statistical difference was only observed in COC recovery, were treated cats had fewer than control group. Although we didn¿t found differences on embryo production, individual variation must be considered. Experiment 2: We aimed to evaluate in vivo embryo production, trough pregnancies, and also identify estrogen (ER-¿) and progesterone (PgR) receptors in uterus and FSH (FSH-R) and LH (LH-R) receptors in ovaries from queen treated with deslorelin acetate. We used 25 queens and one tom, 15 queens were treated with deslorelin acetate (4.7mg/animal) for 3 months. After that, all implants were removed and estrous and ovulation was induced. After 24hs five queens were maintained with one tom and mating was allowed (Pregnancy group), 30 days after the last mating pregnancy was confirmed using ultrasound. The other 10 treated queens were spayed three days after ovulation induction, such as the control group queens. All ovaries and uterus were submitted to immunohistochemistry evaluation (ER-¿ and PgR in uterus and LH-R and FSH-R in ovaries). Fisher exact test with 2x2 contingency tables was used as statistical analysis (p < 0.05). Deslorelin acetate was effective in suppress reproductive activity and estrus and ovulation were performed successfully. None of the cats got pregnant and one developed pyometra. ER-¿ expression had a discrete decline in treated animals PgR was complex and variable, being reduced to almost null in some treated cats. FSH-R and LH-R were similar in both groups. We concluded that the first induced estrous after deslorelin acetate treatment in domestic cats should be considered infertile and that the gestational failure observed probably occurred due to alterations in uterine PgR expression.

Expressão de marcadores de células-tronco em carcinoma espontaneo de mama em cadelas e sua correlação com o grau de agressividade nos diferentes subtipos de tumores

Por ser a maior causa de morte entre as fêmeas caninas, o câncer de mama desperta o interesse da comunidade científica, pois sua apresentação e evolução clínica são muito semelhantes aos casos de câncer de mama na mulher. No intuito de permitir a continuação dos estudos comparativos entre os tumores de cadelas e os das mulheres, foram realizadas as marcações imunoistoquímicas para receptores de estrógeno (RE), HER-2, p63 e CK5, a fim de classificar os tumores de acordo com sua expressão, nos diferentes subtipos. Além disso, foram utilizados os marcadores para CD10, BMI-1, CD44, CD24, ESA e MUC-1 por meio da imunoistoquímica em lâminas confeccionadas pela técnica de Tissue microarray (TMA) para avaliar a presença de células-tronco tumorais. A partir dos resultados da imunoistoquímica os tumores foram classificados em Luminal A (RE+ e HER-2- ) (25,89%), Luminal B (RE+ e HER-2+) (33,93%), Superexpressão de HER-2 (RE- e HER-2 +) (14,29%) e Basal (RE-, HER-2- e p63 e/ou CK5 +) (25,89%). Dos 112 tumores, 75 foram positivos para CD10 (66,96%), 81 positivos para BMI-1 (72,32%), para o CD44 apenas seis tumores (5,35%) foram positivos, 48 tumores positivos para CD24 (42,86%), 24 positivos para ESA (21,43%) e 23 tumores foram positivos para MUC-1 (20,54%). Desses tumores, quatro apresentaram o imunofenótipo CD44+CD24-, representando 3,57% dos tumores. Ao correlacionar as marcações para células-tronco tumorais com os diferentes subtipos, alguns marcadores apresentaram diferença estatística, sugerindo que os tumores com imunofenótipo mais agressivo (Superexpressão de HER-2 e Basal) foram positivos para a marcação de células-tronco tumorais. Além disso, houve uma maior marcação das células-tronco tumorais para os carcinomas classificados em complexo, o que desafia os dados de literatura, já que esses tumores eram considerados com melhor prognóstico do que os carcinomas simples. São necessários novos estudos

For being the biggest cause of death among the canine females, mammary cancer arises the interest of the scientific community; therefore its presentation and clinical outcome are very similar to the cases of breast cancer in woman. In intention to allow the following of comparative studies between the tumors of dogs and women, immunohistochemical markers were performed to estrogen receptors (RE), HER-2, p63 e CK5, to classify the tumors according to their expression, in different subtypes. Beyond that, markers to CD10, BMI-1, CD44, CD24, ESA e MUC-1 were used through the immunohistochemical in slides made by Tissue microarray technique (TMA) to evaluate the presence of cancer stem cells. From the immunohistochemical results, tumors were classified in Luminal A (RE+ e HER-2-) (25,89%), Luminal B (RE+ e HER-2+) (33,93%), HER-2 Overexpression (RE- e HER-2 +) (14,29%) and Basal (RE-, HER-2- e p63 e/ou CK5 +) (25,89%). Among 112 tumors, 75 were positive to CD10 (66,96%), 81 positive to BMI-1 (72,32), to CD44 only six tumors (5,35%) were positive, 48 positive tumors to CD24 (42,86%), 24 positive to ESA (21,43%) and 23 tumors were positive to MUC-1 (20,54%). In these tumors, four presents CD44+CD24- immunophenotypes, performing 3,57% of tumors. To correlate cancer stem cells markers with the distinct subtypes, some markers presented statistical differences, suggesting that more aggressive tumors immunophenotypes (HER-2 Overexpression and Basal) were positive to cancer stem cells markers. Besides, there were higher cancer stem cell markers in complex carcinomas, which challenge literature data because this kind of tumor was considered with better prognosis when compared with simple carcinomas. More studies are necessary with new samples to confront this research results? and determinate the more indicated markers. Still, the female dog must be considered to be used as experimental model for breast cancer

Efeito da administração da Deslorelina por 70 dias na forma de implante na dinâmica folicular, perfil endócrino e expressão de receptores endométriais de estrógeno, progesterona e ocitocina de vacas nelore (Bos taurus indicus)

O objetivo deste foi avaliar os efeitos da utilização de implantes subcutâneos de Deslorelina (agonista de GnRH-Suprelorin®) por 70 dias sob a dinâmica folicular, secreção de FSH, LH e P4 e, a expressão gênica e proteica dos receptores endometriais de estrógeno e (E R e E R), de progesterona isoformas A e B (PABR e PBR) e de ocitocina (OTR) em vacas Nelore (Bos taurus indicus). Foi sincronizada a ovulação de 15 vacas Nelore com escore de condição corporal (ECC) 3 e, no D0 foram aleatoriamente selecionados 7 animais para serem submetidos a implantação subcutânea de Deslorelina por 70 dias. O exame ultra-sonográfico foi realizado para caracterização da dinâmica folicular e os folículos foram classicados em classes: I (< 0,4 cm), II (0,4-0,6cm) e III (> 0,6cm). Amostras de sangue foram coletadas para mensuração das concentrações plasmáticas de FSH, LH e P4. A pulsatilidade e os picos de LH foram determinados a partir de amostras sanguíneas coletadas a cada 15 minutos por 6 horas em 4 vacas escolhidas aleatoriamente nos D20 e D62. A mensuração da expressão proteica dos E R, E R, PABR e PBR no epitélio glandular e estroma uterino foram mensurados por meio da técnica da imunoistoquímica e, a expressão gênica dos E R, E R, PABR e OTR foi avaliada com auxílio da técnica de qRT-PCR, ambas...

The objective this study is to evaluate the effects of subcutaneous implant Deslorelin (GnRHa-Suprelorin®) by 70 days on the endocrine dynamic, the follicular development and, gene and protein expression of endometrial receptors of estrogen and (E R and E R), progesterone isoforms A and B (PABR and PBR), and oxytocin (OTR) of Nelore (Bos taurus indicus) cows . Ovulation of 15 Nelore cows with BCS 3 was synchronized following of implantation of Deslorelin in 7 animals for 70 days. During this period, the ovaries were scanned by ultrasonography to characterize the follicular dynamics, where the follicles were divided in class: I (< 0.4 cm), II (0.4-0.6 cm) and III (> 0.6 cm). Blood samples were collected before of each ultrasonographic exam for later measurement of plasma FSH, LH and P4. The assessment of LH pulsatile secretion was measured on blood samples collected every 15 minutes for six hours through the jugular catheterization in fourrandomly chosen cows on D20 and D62. The protein expression of E R and E R, PABR and PBR of endometrial glandular epithelial and stromal was measured using the technique of immunohistochemistry and the quantification of gene expression of E R, E R, PABR and OTR by qRT-PCR technique from fragments collected through endometrials biopsies on days 0, 4, 20 and 27. Others two samples of endometrium were used for. The comparison between the moments of the measures was performed using the nonparametrics tests of the Friedman and Fisher's Exact. The relationship between the results of follicular dynamics, gene and protein expression was performed by Pearson correlation, all with a significance level of 0.05. During the 70 days of implantation of Deslorelin neither animal ovulated, indicating that the preovulatory peak of LH was abolished. The maximum number of follicles...