Differential gene expression pattern and plasma sex steroids during testicular development in Genyatremus luteus (Perciforme: Haemulidae) (Bloch, 1790) / Padrão diferencial de expressão gênica e esteróides sexuais plasmáticos durante o desenvolvimento testicular em Genyatremus luteus (Pisces: Haemulidae) (Bloch, 1790)

The aim of the current study is to evaluate gene expression patterns of LH (lhr) and estrogen (er) receptors and plasma steroid levels during testicular development in Genyatremus luteus. Males were histologically classified as immature (n=7), maturing (n=7) and mature (n=7), based on the cellular structure of their testes. Plasma 11-KT concentration recorded peak at the final maturation stage. The highest plasma 17α-OHP concentrations were observed at the immature stage; they decreased at the maturation and mature stages. On the other hand, 17ß-estradiol (E2) recorded higher concentrations at the maturation stage. Er expression has significantly increased along the maturational development of animals' testes. The mRNA observed for the LH receptor has decreased from immature to maturing stage; it presented expression peak at the mature stage. There was high association between receptor gene expression and plasma steroid levels, mainly E2. The current study was the first to feature different reproductive maturation stages in male G. luteus specimens, based on cellular, endocrine and molecular aspects. In addition, it has shown that the gene expression profile for er and lhr receptors, as well as plasma 11-KT and E2 concentrations, are directly linked to testicular maturation, although they are not necessarily associated with the gonadosomatic index.

O objetivo deste estudo foi avaliar os padrões de expressão gênica dos receptores de LH (lhr) e de estrogênio (er) e dos níveis de esteróides plasmáticos durante o desenvolvimento testicular de Genyatremus luteus. Os machos foram classificados histologicamente em imaturos, em maturação e maduros, de acordo com a estrutura celular dos testículos. A concentração plasmática de 11-KT apresentou um pico na fase de maturação final (P<0.05). As maiores concentrações plasmáticas de 17α-OHP foram encontradas no estádio imaturo (P<0.05), com consequente diminuição nos estádios em maturação e maturo. O 17ß-estradiol (E2) apresentou maiores níveis de concentração no estádio em maturação (P<0.05). A expressão de er aumentou significativamente ao longo do desenvolvimento maturacional dos testículos (P<0.05). O mRNA para o receptor de LH diminuiu do estádio imaturo para o estádio em maturação (P<0.05) com consequente pico de expressão no estádio maduro. Houve alta relação entre a expressão gênica dos receptores e os níveis de esteróides plasmáticos, especialmente com E2. Em conclusão, este estudo caracterizou pela primeira vez, sob os aspectos celular, endócrino e molecular, os diferentes estádios de maturação reprodutiva em machos de G. luteus, demonstrando que o perfil da expressão gênica para os receptores er e lhr, bem como as concentrações plasmáticas de 11-KT e E2 foram diretamente relacionados à maturação testicular, apesar de não se relacionarem necessariamente com o índice gonadossomático.

Endometrial receptivity in cattle: the mutual reprogramming paradigm

Prior to implantation in cattle, the mucous medium contained in the uterine lumen serves as a working interface for molecular exchange and signaling between the lining endometrium and the embryo. The composition of this luminal fluid changes temporally according to the secretory and reabsorptive activities of the uterus and the embryo, which are under complex regulation. Via this interface, both the embryo and the endometrium reprogram each other's functions to support pregnancy continuation beyond the pre-implantation period. More specifically, the embryo receives elongation signals and the uterus receives anti-luteolytic stimuli. Here, characteristics of the luminal compartment as well as the regulation of its composition to determine the pregnancy outcome will be discussed.(AU)

Fisiologia reprodutiva aplicada ao cultivo de peixes neotropicais / Reproductive physiology applied to neotropical fish rearing

A reprodução dos peixes teleósteos é regulada pela interação dos sistemas nervoso e endócrino, e essa interação é realizada pelo eixo hipotálamo-hipófise-gônadas (H-H-G). No entanto, sabe-se que os sinais ambientais (fotoperíodo, temperatura, pluviosidade entre outros fatores), são responsáveis por modular este processo. O eixo H-H-G, sintetiza e libera fatores internos (neuro-hormônios e neurotransmissores) e hormônios hipotalâmicos, hipofisários e gonadais que permitem a sincronização dos reprodutores aptos, que com condições ambientais adequadas permitem a reprodução em momento propício, com consequentemente maior sobrevivência da prole. O entendimento da fisiologia do eixo H-H-G tem sido muito importante para compreender os mecanismos regulatórios do controle neuroendócrino da reprodução em peixes teleósteos, possibilitando entender as razões do bloqueio da reprodução em cativeiro (piscicultura), ou quando a interrupção da migração reprodutiva (peixes reofílicos) por barragens é bloqueada, o que pode levar à extinção de espécies endêmicas. Esta revisão abordará o controle fisiológico do eixo H-H-G, com ênfase nas espécies neotropicais nacionais (espécies marinhas e dulciaquícolas) e discutirá as disfunções reprodutivas observadas nestes animais, quando em cativeiro. Neste contexto, a partir deste conhecimento teórico na fisiologia reprodutiva, a aplicação e/ou sugestões de tecnologias com o objetivo de obter sucesso na reprodução de espécies ameaçadas de extinção em cativeiro também serão abordados. É importante salientar que esta revisão não pretende cobrir todo o conhecimento sobre a fisiologia reprodutiva dos peixes teleósteos.

Teleost fish reproduction is regulated by the interaction of the nervous and endocrine systems, and this interaction is performed by the hypothalamic-pituitary-gonadal axis (H-H-G). However, it is known that environmental signals (photoperiod, temperature, rainfall, among other factors), are responsible to modulate this entire process. The H-H-G axis, synthesizes and releases internal factors (neurohormones and neurotransmitters) and hypothalamic, pituitary, and gonadal hormones that allow the synchronization of the able broodstocks and that, with adequate environmental conditions allow reproduction in the right time, and consequently, with a greater offspring survival. Understanding the physiology of the H-H-G axis has been important to understand the regulatory mechanisms of neuroendocrine control of reproduction in teleost fish, making it possible to understand the reasons for blocking reproduction in captivity (fish farming), or when the interruption of reproductive migration (reophilic fish) by dams is blocked, taking to the extinction of endemic species. This review will address the physiological control of the H-H-G axis, with an emphasis on National neotropical species (marine and freshwater species) and will discuss the reproductive dysfunctions observed in these animals when they are in captivity. In this context, from this theoretical knowledge about reproductive physiology, the application and/or suggestions of technologies with the objective of obtaining success in the reproduction of endangered species in captivity will also be considered. It is important to note that this review does not intend to cover all knowledge about the reproductive physiology of teleost fish.

Fisiologia reprodutiva aplicada ao cultivo de peixes neotropicais / Reproductive physiology applied to neotropical fish rearing

A reprodução dos peixes teleósteos é regulada pela interação dos sistemas nervoso e endócrino, e essa interação é realizada pelo eixo hipotálamo-hipófise-gônadas (H-H-G). No entanto, sabe-se que os sinais ambientais (fotoperíodo, temperatura, pluviosidade entre outros fatores), são responsáveis por modular este processo. O eixo H-H-G, sintetiza e libera fatores internos (neuro-hormônios e neurotransmissores) e hormônios hipotalâmicos, hipofisários e gonadais que permitem a sincronização dos reprodutores aptos, que com condições ambientais adequadas permitem a reprodução em momento propício, com consequentemente maior sobrevivência da prole. O entendimento da fisiologia do eixo H-H-G tem sido muito importante para compreender os mecanismos regulatórios do controle neuroendócrino da reprodução em peixes teleósteos, possibilitando entender as razões do bloqueio da reprodução em cativeiro (piscicultura), ou quando a interrupção da migração reprodutiva (peixes reofílicos) por barragens é bloqueada, o que pode levar à extinção de espécies endêmicas. Esta revisão abordará o controle fisiológico do eixo H-H-G, com ênfase nas espécies neotropicais nacionais (espécies marinhas e dulciaquícolas) e discutirá as disfunções reprodutivas observadas nestes animais, quando em cativeiro. Neste contexto, a partir deste conhecimento teórico na fisiologia reprodutiva, a aplicação e/ou sugestões de tecnologias com o objetivo de obter sucesso na reprodução de espécies ameaçadas de extinção em cativeiro também serão abordados. É importante salientar que esta revisão não pretende cobrir todo o conhecimento sobre a fisiologia reprodutiva dos peixes teleósteos.(AU)

Teleost fish reproduction is regulated by the interaction of the nervous and endocrine systems, and this interaction is performed by the hypothalamic-pituitary-gonadal axis (H-H-G). However, it is known that environmental signals (photoperiod, temperature, rainfall, among other factors), are responsible to modulate this entire process. The H-H-G axis, synthesizes and releases internal factors (neurohormones and neurotransmitters) and hypothalamic, pituitary, and gonadal hormones that allow the synchronization of the able broodstocks and that, with adequate environmental conditions allow reproduction in the right time, and consequently, with a greater offspring survival. Understanding the physiology of the H-H-G axis has been important to understand the regulatory mechanisms of neuroendocrine control of reproduction in teleost fish, making it possible to understand the reasons for blocking reproduction in captivity (fish farming), or when the interruption of reproductive migration (reophilic fish) by dams is blocked, taking to the extinction of endemic species. This review will address the physiological control of the H-H-G axis, with an emphasis on National neotropical species (marine and freshwater species) and will discuss the reproductive dysfunctions observed in these animals when they are in captivity. In this context, from this theoretical knowledge about reproductive physiology, the application and/or suggestions of technologies with the objective of obtaining success in the reproduction of endangered species in captivity will also be considered. It is important to note that this review does not intend to cover all knowledge about the reproductive physiology of teleost fish.(AU)

Leporinus elongatus induced spawning using carp pituitary extract or mammalian GnRH analogue combined with dopamine receptor antagonists

Several studies have been developed to support the replacement of the crude carp pituitary extract (CPE) by synthetic products for induced reproduction of South American rheophilic species. However, results have been quite heterogeneous and there is no consensus or a routine use of synthetic products in these species. Thus, the aim of this study was to evaluate the ovulatory process in L. elongatus using different protocols of hormonal induction. Thus, fifteen wild mature females maintained at the Experimental Fish Station, Salto Grande, SP, Brazil were submitted to three different hormonal treatments: CPE (fractioned dose: 0.5 and 5.0 mg kg-1 ); mGnRHa (single dose: 3.5 µg kg-1 ) and mGnRHa (single dose: 5.0 µg kg-1 ). The spawning rate and absolute fecundity were similar among the treatments, but fertility rates were higher for CPE treatment (23.60 ± 9.40) then for mGnRHa treatments (close to or zero zero). Although females ovulated in all treatments, none of them provided viable embryos, showing hatching rates close to zero or zero. Both mGnRHa treatments were more potent for inducing the ovulatory process then CPE treatment, which was evidenced by the fact that the formers showed higher volume density of postovulatory follicles (POF). Accordingly, E2 and 17α-OHP plasma levels were higher for the mGnRHa treated females compared to the CPE one at the time of ovulation. In this study we confirmed previous scientific evidence that, regardless of whether promoting ovulation, the use of conventional CPE and GnRH doses are not appropriate for some South American migratory species, due to the nonattainment of viable embryos. Moreover, we have brought new information about the relationship between reproductive performance and gonadal steroids concentrations using different hormonal therapies, contributing to understand the reasons for Leporinus elongatus embryo loss in induced spawning.

Leporinus elongatus induced spawning using carp pituitary extract or mammalian GnRH analogue combined with dopamine receptor antagonists

Several studies have been developed to support the replacement of the crude carp pituitary extract (CPE) by synthetic products for induced reproduction of South American rheophilic species. However, results have been quite heterogeneous and there is no consensus or a routine use of synthetic products in these species. Thus, the aim of this study was to evaluate the ovulatory process in L. elongatus using different protocols of hormonal induction. Thus, fifteen wild mature females maintained at the Experimental Fish Station, Salto Grande, SP, Brazil were submitted to three different hormonal treatments: CPE (fractioned dose: 0.5 and 5.0 mg kg-1 ); mGnRHa (single dose: 3.5 µg kg-1 ) and mGnRHa (single dose: 5.0 µg kg-1 ). The spawning rate and absolute fecundity were similar among the treatments, but fertility rates were higher for CPE treatment (23.60 ± 9.40) then for mGnRHa treatments (close to or zero zero). Although females ovulated in all treatments, none of them provided viable embryos, showing hatching rates close to zero or zero. Both mGnRHa treatments were more potent for inducing the ovulatory process then CPE treatment, which was evidenced by the fact that the formers showed higher volume density of postovulatory follicles (POF). Accordingly, E2 and 17α-OHP plasma levels were higher for the mGnRHa treated females compared to the CPE one at the time of ovulation. In this study we confirmed previous scientific evidence that, regardless of whether promoting ovulation, the use of conventional CPE and GnRH doses are not appropriate for some South American migratory species, due to the nonattainment of viable embryos. Moreover, we have brought new information about the relationship between reproductive performance and gonadal steroids concentrations using different hormonal therapies, contributing to understand the reasons for Leporinus elongatus embryo loss in induced spawning.(AU)

Controle neuroendócrino da ovogênese em peixes teleósteos / Neuroendocrine control of oogenesis in teleost fish

O estudo sobre o controle neuroendócrino da reprodução em teleósteos tem sido importante paracompreender os mecanismos regulatórios da atividade reprodutiva destes animais e possibilitado entender asrazões do bloqueio da reprodução no cativeiro. A reprodução em peixes é modulada por fatores ambientais econtrolada endogenamente por um sistema neuroendócrino, principalmente pelo eixo hipotálamo-hipófisegônadas(H-H-G). Este eixo coordena a síntese de hormônios liberadores, inibidores, gonadotropinas, esteroidesgonadais, regulando assim a reprodução. Este controle endócrino se altera quando espécies migradoras sãotransferidas para o cativeiro, pois neste ambiente confinado, algumas espécies não conseguem eliminar os seusgametas. Neste caso, intervenções hormonais exógenas em diferentes níveis do eixo H-H-G são necessárias paradar continuidade ao processo de maturação gonadal. Esta revisão aborda a fisiologia do eixo H-H-G, com ênfasenos estudos realizados nas espécies neotropicais nacionais e discute disfunções decorrentes do bloqueio dareprodução em animais em cativeiro.(AU)

The study on the neuroendocrine control of teleost reproduction has been important to understand theregulatory mechanisms of reproductive activity of these animals, allowing the understanding the reasons ofreproduction impairment when they are under captivity conditions. The reproduction in fish is modulated byenvironmental factors and endogenously controlled by a neuroendocrine system, mainly by the hypothalamicpituitary-gonadsaxis (H-P-G). This axis coordinates the synthesis of releasing and inhibitory hormones,gonadotropins, gonadal steroids, controlling therefore reproduction. The endocrine control is altered whenmigratory species are transferred to captivity, where some species cannot release their gametes. In this case,exogenous hormones interventions at different levels of the H-P-G axis are necessary to continue the gonadalmaturation process. This review addresses the physiology of the H-P-G axis, emphasizing the studies with thenational neotropical species and discusses dysfunctions resulting from reproduction impairment in captivity.(AU)

Controle neuroendócrino da ovogênese em peixes teleósteos / Neuroendocrine control of oogenesis in teleost fish

O estudo sobre o controle neuroendócrino da reprodução em teleósteos tem sido importante paracompreender os mecanismos regulatórios da atividade reprodutiva destes animais e possibilitado entender asrazões do bloqueio da reprodução no cativeiro. A reprodução em peixes é modulada por fatores ambientais econtrolada endogenamente por um sistema neuroendócrino, principalmente pelo eixo hipotálamo-hipófisegônadas(H-H-G). Este eixo coordena a síntese de hormônios liberadores, inibidores, gonadotropinas, esteroidesgonadais, regulando assim a reprodução. Este controle endócrino se altera quando espécies migradoras sãotransferidas para o cativeiro, pois neste ambiente confinado, algumas espécies não conseguem eliminar os seusgametas. Neste caso, intervenções hormonais exógenas em diferentes níveis do eixo H-H-G são necessárias paradar continuidade ao processo de maturação gonadal. Esta revisão aborda a fisiologia do eixo H-H-G, com ênfasenos estudos realizados nas espécies neotropicais nacionais e discute disfunções decorrentes do bloqueio dareprodução em animais em cativeiro.

The study on the neuroendocrine control of teleost reproduction has been important to understand theregulatory mechanisms of reproductive activity of these animals, allowing the understanding the reasons ofreproduction impairment when they are under captivity conditions. The reproduction in fish is modulated byenvironmental factors and endogenously controlled by a neuroendocrine system, mainly by the hypothalamicpituitary-gonadsaxis (H-P-G). This axis coordinates the synthesis of releasing and inhibitory hormones,gonadotropins, gonadal steroids, controlling therefore reproduction. The endocrine control is altered whenmigratory species are transferred to captivity, where some species cannot release their gametes. In this case,exogenous hormones interventions at different levels of the H-P-G axis are necessary to continue the gonadalmaturation process. This review addresses the physiology of the H-P-G axis, emphasizing the studies with thenational neotropical species and discusses dysfunctions resulting from reproduction impairment in captivity.

Efeitos da exposição ao microplástico na estrutura gonadal e no sucesso reprodutivo de Danio rerio (Teleostei: Cypriniformes)

Os plásticos vêm se tornando uma crescente ameaça para o meio ambiente, afetando diversos organismos em quase todos os ecossistemas. Dentre os habitats mais afetados, destacam-se os ambientes aquáticos, visto que neles as condições adversas transformam grandes pedaços de plásticos em pequenas partículas, chamadas de microplásticos (MPs). Essas micropartículas entram na cadeia alimentar de diversos organismos causando inúmeras alterações fisiológicas que podem ser irreparáveis. Neste aspecto, o presente estudo teve por objetivo verificar a influência de MPs na biologia reprodutiva de Danio rerio (zebrafish) através de técnicas de histologia, imunohistoquímica e ensaio sorológico imunoenzimático de esteroides sexuais. Machos e fêmeas adultos de D. rerio foram expostos por 30 dias a duas concentrações diferentes de MPs (0,5g/L e 2,5g/L) e, posteriormente, separados para a reprodução. Todos os grupos experimentais foram capazes de reproduzir, entretanto o tempo de desenvolvimento embrionário foi retardado significativamente, embora a prole não tenha sido exposta diretamente aos MPs, resultando em alta mortalidade dos ovos nas duas concentrações testadas, além de causar malformações nos embriões que conseguiram se desenvolver. Análises histológicas demonstraram que a exposição aos MPs causou esteatoses, rompimento de hepatócitos, dilatação de sinusoides e lacerações em fígados de machos e fêmeas. Nos ovários houve hipertrofização das células foliculares, alterações estruturais nos oócitos vitelogênicos e aumento de centros melanomacrofágicos. Nos testículos, o acúmulo de gordura e vacuolizações nos compartimentos intersticial e germinativo levou a uma descaracterização do epitélio germinativo. Análises de imunohistoquímica demonstraram que a exposição aos MPs induziu a produção de vitelogenina em fígados de machos e possivelmente afetou sua produção em fêmeas com esteatose hepática, embora os níveis plasmáticos de hormônios esteroides sexuais masculinos e femininos não tenham sido alterados substancialmente, contribuindo para a fecundação dos ovos. Diante do exposto, a detecção de micropartículas nos diferentes tecidos de fêmeas e machos de zebrafish denunciam a ameaça dos MPs para a sobrevivência das espécies, especialmente dos peixes e outros animais aquáticos

The plastics are becoming a growing threat to the environment, affecting many organisms in almost all ecosystems. Among the most affected habitats, aquatic environments stand out, once that some adverse conditions transform big plastics into small particles, called microplastics (MPs). These microparticles enter the food chain of several organisms causing numerous physiological changes, and sometomes irreparable. In this respect, the present study aimed to verify the influence of MPs on the reproductive biology of Danio rerio (zebrafish) through histology, immunohistochemistry and enzyme-linked immunosorbent assay of sex steroids. Adults males and females of D. rerio were exposed for 30 days to two different concentrations of MPs (0.5g/L and 2.5g/L) and, later, separated for reproduction. All experimental groups were able to reproduce, however the embryo development time was significantly delayed, although the offspring were not directly exposed to MPs, resulting in high egg mortality at the two concentrations tested, in addition to causing malformations in embryos that managed to develop. Histological analyzes showed that exposure to MPs caused steatosis, hepatocyte disruption, sinusoid dilatation and lacerations in male and female livers. In the ovaries, there was hypertrophy of follicle cells, structural changes in the vitellogenic oocytes and an increase in melanomacrophage centers. In the testes, the fat accumulation and vacuolization in the interstitial and germinal compartments led to a mischaracterization of the germinal epithelium. Immunohistochemical analyzes demonstrated that exposure to MPs induced vitellogenin production by the male livers and possibly it affected vitellogenin production in females with hepatic steatosis, although plasma levels of male and female sex steroid hormones were not altered, contributing to the success reproductive. Given the results presented, the detection of microparticles in different tissues from zebrafish females and males reveals the threat of MPs to the survival of species, especially fish and other aquatic animals

Selection of pacu females to hormonal induction: effect of age and of evaluation methods / Seleção de fêmeas de pacu para indução hormonal: efeito da idade e dos métodos de avaliação

In this study, we investigated the reproductive cycle and spawning season of old (OFs) and young (YFs) P. mesopotamicus females, aiming to improve the process of selection of suitable fish for induced spawning. We also evaluated the accuracy of using external body characteristics in selecting suitable females. To that, 60 OFs and 60 YFs (10 and four years old, respectively) were submitted to seven samplings during two reproductive cycles. In each sampling, females (five to 10 per treatment) were randomly chosen to evaluation of plasma concentrations of gonadal steroids and ovary composition (biopsies and stereology). Females were also submitted to an external evaluation concerning the length of abdominal thickness, the degree of the abdominal rigidity and the aspect of urogenital papilla. In spite of OFs have shown reduced concentrations of 17α- hydroxyprogesterone during the spawning season, we observed that OFs and YFs kept in captivity had similar reproductive cycles and spawning seasons (in December for both groups). We do not recommend the exclusive use of external evaluation for selecting breeders to spawning induction due to a great inaccuracy of data and lack of association with histology and ovarian biopsy, which are more accurate and reliable.(AU)

Neste estudo, investigamos o ciclo reprodutivo e a época de desova de fêmeas “velhas” (FVs) e fêmeas “jovens” (FJs) de P. mesopotamicus, visando melhorar o processo de seleção de peixes para a indução hormonal. Avaliamos também a acurácia do uso de características corporais externas para a seleção de fêmeas para indução hormonal. Para isso, 60 FVs e 60 FJs (10 e quatro anos, respectivamente) foram submetidas a sete amostragens durante dois ciclos reprodutivos. Em cada amostra, as fêmeas (cinco a 10 por tratamento) foram capturadas para avaliação das concentrações plasmáticas de esteroides gonadais e composição dos ovários (biópsias e estereologia). As fêmeas foram também submetidas à uma avaliação externa relativa à espessura abdominal, o grau de rigidez abdominal e o aspecto da papila urogenital. Exceto pela ocorrência de concentrações reduzidas de 17α-hidroxiprogesterona nas FVs, durante a época de desova, observamos que FVs e FJs, mantidas em cativeiro, apresentam ciclos reprodutivos e épocas de desova similares (em dezembro para ambos os grupos). Não recomendamos o uso exclusivo da avaliação externa para a seleção de reprodutores para indução a desova, devido a uma imprecisão dos dados e falta de associação destes com a histologia e biópsia de ovário, os quais são mais precisos e confiáveis.(AU)

Selection of pacu females to hormonal induction: effect of age and of evaluation methods / Seleção de fêmeas de pacu para indução hormonal: efeito da idade e dos métodos de avaliação

In this study, we investigated the reproductive cycle and spawning season of old (OFs) and young (YFs) P. mesopotamicus females, aiming to improve the process of selection of suitable fish for induced spawning. We also evaluated the accuracy of using external body characteristics in selecting suitable females. To that, 60 OFs and 60 YFs (10 and four years old, respectively) were submitted to seven samplings during two reproductive cycles. In each sampling, females (five to 10 per treatment) were randomly chosen to evaluation of plasma concentrations of gonadal steroids and ovary composition (biopsies and stereology). Females were also submitted to an external evaluation concerning the length of abdominal thickness, the degree of the abdominal rigidity and the aspect of urogenital papilla. In spite of OFs have shown reduced concentrations of 17α- hydroxyprogesterone during the spawning season, we observed that OFs and YFs kept in captivity had similar reproductive cycles and spawning seasons (in December for both groups). We do not recommend the exclusive use of external evaluation for selecting breeders to spawning induction due to a great inaccuracy of data and lack of association with histology and ovarian biopsy, which are more accurate and reliable.

Neste estudo, investigamos o ciclo reprodutivo e a época de desova de fêmeas “velhas” (FVs) e fêmeas “jovens” (FJs) de P. mesopotamicus, visando melhorar o processo de seleção de peixes para a indução hormonal. Avaliamos também a acurácia do uso de características corporais externas para a seleção de fêmeas para indução hormonal. Para isso, 60 FVs e 60 FJs (10 e quatro anos, respectivamente) foram submetidas a sete amostragens durante dois ciclos reprodutivos. Em cada amostra, as fêmeas (cinco a 10 por tratamento) foram capturadas para avaliação das concentrações plasmáticas de esteroides gonadais e composição dos ovários (biópsias e estereologia). As fêmeas foram também submetidas à uma avaliação externa relativa à espessura abdominal, o grau de rigidez abdominal e o aspecto da papila urogenital. Exceto pela ocorrência de concentrações reduzidas de 17α-hidroxiprogesterona nas FVs, durante a época de desova, observamos que FVs e FJs, mantidas em cativeiro, apresentam ciclos reprodutivos e épocas de desova similares (em dezembro para ambos os grupos). Não recomendamos o uso exclusivo da avaliação externa para a seleção de reprodutores para indução a desova, devido a uma imprecisão dos dados e falta de associação destes com a histologia e biópsia de ovário, os quais são mais precisos e confiáveis.

Estudo in vitro da hipófise e testículos de Astyanax altiparanae (Characiformes:Characidae) e os anti-inflamatórios não esteroidais como desreguladores endócrinos.

O eixo hipotálamo-hipófise-gônadas (HHG) modula o processo reprodutivo nos vertebrados e pode ser alvo de diversas substâncias que podem de alguma forma alterar a reprodução em diferentes espécies, dentre elas os teleósteos. Em condições favoráveis, ocorre a sinalização do hormônio liberador de gonadotropinas (GnRH), produzido e liberado por neurônios hipotalâmicos, que atua nas células gonadotrópicas da adeno-hipófise, estimulando a síntese e liberação do hormônio folículo-estimulante (Fsh) e o hormônio luteinizante (Lh). Esses, por sua vez, chegam às gônadas, promovendo a produção dos esteroides gonadais, maturação e liberação dos gametas. Enquanto o GnRH exerce papeis estimuladores, as ações do GnIH (hormônio inibidor de gonadotropinas) permanecem controversas para muitas espécies de teleósteos. Sabe-se que alguns compostos químicos podem interferir no funcionamento do eixo HHG dos peixes e os anti-inflamatórios não esteroidais (AINEs) podem atuar como desreguladores endócrinos e afetar a produção das gonadotropinas. O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos in vitro do GnRH e do GnIH, além dos AINEs diclofenaco e ibuprofeno, na regulação da expressão gênica das gonadotropinas utilizando explantes de hipófise, e o efeitos dos AINEs sob a liberação dos esteroides gonadais em explantes de testículos, de uma espécie neotropical, Astyanax altiparanae. Nossos resultados mostraram que o cGnRH2 (chicken GnRH2) aumentou os níveis de expressão de fshb e lhb, e o zGnIH-3 (zebrafish GnIH-3) não teve efeito direto sobre a expressão das gonadotropinas. No entanto, o zGnIH-3 diminuiu da expressão de fshb e lhb induzidos por cGnRH2. Em relação aos efeitos dos AINEs sobre o eixo reprodutivo in vitro, tanto o diclofenaco quanto o ibuprofeno foram capazes de inibir a expressão gênica das gonadotropinas e o ibuprofeno diminuiu a liberação de estradiol e testosterona por fragmentos de testículos.

The hypothalamus-pituitary-gonads (HPG) axis modulates the reproductive process in vertebrates and may be the target of several substances that may in some way alter reproduction in different species, including teleosts. Under favorable conditions, the gonadotropin releasing hormone (GnRH), produced and released by hypothalamic neurons acts in the adenohypophysis gonadotropic cells stimulates the synthesis and release of the follicle-stimulating hormone (Fsh) and the luteinizing hormone (LH), that act in the gonads promoting the production of gonadal steroids, for maturation and release of gametes. While GnRH exerts stimulatory roles, GnIH (gonadotropin inhinitory hormone) actions remain controversial for many species of teleosts. Some chemical compounds may interfere in the HPG axis in fish, and nonsteroidal anti-inflammatory drugs (NSAIDs) may act as endocrine disrupters and affect the production of gonadotropins. The objective of this study was to evaluate the in vitro effects of GnRH and GnIH and NSAIDs - diclofenac and ibuprofen - on the regulation of gonadotropins gene expression using pituitary explants and the effects of NSAIDs on the release of gonadal steroids in testicular explants from a Neotropical species, Astyanax altiparanae. Our results showed that in males, cGnRH2 (chicken GnRH2) increased the expression levels of fshb and lhb, and zGnIH-3 (zebrafish GnIH-3) had no direct effect on gonadotropin expression. However, zGnIH-3 stimulated the decrease of the expression of fshb and lhb induced by cGnRH2. Regarding the effects of NSAIDs on the reproductive axis in vitro, diclofenac and ibuprofen were able to decrease the gonadotropin gene expression and ibuprofen decreased the release of estradiol and testosterone by the testicular fragments

Pheromones from male domestic mice influences the sexual function and gonadal steroids levels of female laboratory rats / Feromônios de influências masculinos nos ratos domésticos a função e os níveis de esteróides sexuais dos ratos de laboratório fêmeas / Feromonas de influencias masculinos en ratones domésticos la función y los niveles de esteroides sexuales en ratas hembras de laboratorio

It is well established that the behavior of different mammalians, including rodents, may undergo profound changes in the presence of individuals of other species. Therefore, the aim of this study was to verify if the presence of pheromones from male mice could influence the reproductive parameters of female rats. Twenty Swiss (SW) male mice and 16 Long Evans (LE) female Rats were housed in separate rooms, with communication in the ceiling in its entire length. A continuous flow of air was planned to pass through the room of the mice before the room of the rats and finally be exchanged with the external environment. During 45 days, vaginal smears were collected. Relative weights of reproductive organs, estradiol, progesterone, and dehydroepiandrosterone levels were also measured. The total duration of the estrous cycle and relative organ weight remained unchanged. On the other hand, the proestrus and estrus phases, as well as the estradiol levels were increased, while the diestrus phase was significantly reduced. The results have shown that maintaining LE female rats in the presence of pheromones from male SW mice can significantly change the sexual function and gonadal steroid levels.(AU)

É bem conhecido que o comportamento de diferentes mamíferos, incluindo roedores podem sofrer alterações profundas na presença de indivíduos de outras espécies. Portanto, estudamos se a presença de feromônios de camundongos machos poderiam influenciar os parâmetros reprodutivos de ratas. Vinte suíços (SW) ratos do sexo masculino e 16 Long Evans (LE) ratas foram colocadas em locais distintos, com a comunicação no teto em toda a sua extensão. Um fluxo contínuo de ar foi planejado para passar através da sala de ratinhos antes da sala de ratos e, finalmente, ser trocado com o ambiente externo. Durante 45 dias, esfregaços vaginais foram recolhidas. Os pesos relativos dos órgãos reprodutores, o estradiol, progesterona e níveis de dehidroepiandrosterona também foram medidos. A duração total do ciclo estral e peso de órgãos em relação, manteve-se inalterada. Por outro lado, as fases de proestro e estro, bem como os níveis de estradiol foram aumentadas, enquanto que a fase diestro foi reduzida significativamente. Os resultados mostraram que a manutenção de ratas LE na presença de feromônios de camundongos SW do sexo masculino pode alterar significativamente a função sexual e os níveis de esteróides sexuais.(AU)

Es bien sabido que el comportamiento de diferentes mamíferos incluyendo roedores pueden sufrir cambios profundos en la presencia de individuos de otras especies. Por lo tanto, se estudió si la presencia de feromonas de ratones machos podrían influir en los parámetros reproductivos de las ratas hembra. Veinte suizos (SW) ratones machos y 16 Long Evans (LE) ratas hembras, fueron alojados en habitaciones separadas, con la comunicación en el techo en toda su extensión. Se planificó un flujo continuo de aire para pasar a través de la habitación de los ratones antes de la habitación de las ratas y, finalmente, ser intercambiado con el ambiente externo. Durante 45 días se recogieron frotes vaginales. También se midieron los pesos relativos de los órganos reproductivos, estradiol, progesterona, y los niveles de dehidroepiandrosterona. La duración total del ciclo estral y el peso relativo de órganos se mantuvo sin cambios. Por otro lado, las fases de proestro y de estro, así como los niveles de estradiol aumentaron, mientras que la fase de diestro redujo significativamente. Los resultados han demostrado que el mantenimiento de LE en ratas hembras, con presencia de feromonas de ratones SW macho puede cambiar significativamente la función sexual y los niveles de esteroides sexuales.(AU)

Estudo endócrino reprodutivo e do comportamento sócio-sexual de sagui-de-tufo-preto (Callithrix penicillata) mantido em cativeiro / Reproductive endocrine and socio-sexual behavior study of black-tufted-marmoset (Callithrix penicillata) kept in captivity

A comunicação do estado reprodutivo nos primatas da família Callithrichidae, depende principalmente dos comportamentos sócio-sexuais como um sistema de sinalização primário, uma vez que nestas espécies a ovulação não é percebida pelos machos. Neste trabalho, os padrões de comportamentos sócio-sexuais foram analisados em conjunto com as concentrações de metabólitos fecais dos esteróides sexuais progesterona (MFP), estradiol (MFE) e testosterona (MFT) em casais cativos de Sagüi-de-tufos-pretos (Callithrix penicillata), nas diferentes fases do ciclo ovariano. O grupo estudado era composto por quarto casais adultos, mantidos no Centro de Reabilitação de Animais Selvagens da prefeitura de São Paulo. Os padrões comportamentais foram registrados pelo método de amostragem focal por intervalo de tempo a cada 30 segundos, cinco vezes por semana, totalizando 14.400 registros por animal. A mensuração das concentrações de metabólitos fecais dos esteroides sexuais foram realizados pelo método de enzima imunoensaio (EIE). Os resultados obtidos dessas concentrações possibilitaram a determinação endócrina das fases do ciclo ovariano (folicular e luteal) e de suas respectivas durações, assim como a determinação da fase periovulatória. Foram caracterizados 31 ciclos ovarianos completos, com duração de 24,3±4,1 dias (média ±DP), sendo que a fase folicular compreendeu 13,04±4,8dias e a fase lútea 11,2±4,2 dias. Os comportamentos sócio-sexuais (marcação por cheiro, cheirar genitália, catação e apresentação sexual) e a variável "proximidade" mostraram-se significativamente mais prevalentes na fase periovulatória do que nas demais fases do ciclo. Não houve alteração das concentrações de MFT dos machos ao longo de todo o período estudado. A análise conjunta das concentrações de metabólitos fecais de esteróides sexuais e dos comportamentos sócio-sexuais possibilitou um melhor entendimento das relações endócrino-comportamentais e reprodutivas de C. penicillata. .(AU)

The communication of the female reproductive status in Callithrichidae relies mainly on the socio-sexual behavior, as generally the ovulation is concealed in this primate family by a primary signaling system. In this study the socio-sexual behavior patterns was analyzed in association with the concentration of fecal metabolites of sex steroid hormones progesterone (MFP), estradiol (MFE) and testosterone (MFT) in captive couples of Black-Tufted-Marmoset (Callithrix penicillata), during the different phases of the ovarian cycle. The studied group was composed of four adult couples kept in the São Paulo City Wild Animals Rehabilitation Center. The behavioral patterns were record by focal samplings, with 30 seconds intervals for each observation, five days a week, totalizing 14.400 registers per animal. The measurement of fecal metabolites of progesterone (MFP), estradiol (MFE) and testosterone (MFT) proceeded by enzyme immune assay (EIA). The results allowed to determine the duration of the ovarian cycle and to characterize three different phases (follicular, periovulatory and luteal). It was possible to determine 31 complete cycles that lasted 24.3±4.1 days (Mean ± SD). The follicular and luteal phases lasted 13.04±4.8 and the luteal phase 11.2±4.2 days. The behavioral patterns (scent marking, sniff genitals, grooming and sexual presentation) were more prevalent in the periovulatory phase as the behavioral variable "proximity" as well. There were no variations in the concentration of MFT in the males during the period studied. The associated analyses of the fecal metabolite of sex steroids and the socio-sexual behaviors led to a better understanding of the factors involved in the reproduction of C. penicillata.(AU)

Insights of sex determination and sex differentiation in fish

A decisao sobre se uma gônada bipotencial se desenvolverá em um testículo ou em um ovário e considerado um estágio critico na diferenciacao sexual dos vertebrados. A administração de esteróides exógenos durante este período pode afetar essa plasticidade, promovendo a diferenciação sexual na direção feminina ou masculina. Dessa forma, o objetivo desta tese foi avaliar os efeitos do tratamento de 17-estradiol no desenvolvimento de Astyanax altiparanae (lambari), através de análises histológicas e de análises de expressão genica de possíveis genes envolvidos em vias masculinas e femininas. Para isso, larvas com gônadas indiferenciadas foram alimentadas com Artemia contendo diferentes concentrações de estradiol durante 28 dias, desde o 1 dia pós-eclosão (dpe) até o período que precede a diferenciação gonadal. Nossos resultados mostraram que o E2 modificou o fenotípo e a relação sexual histológica e, surpreendentemente, induziu intersexo com com a presença de óvulos nos testículos nas concentrações de 2 e 6 mg de E2/kg de alimento. Esses dados são uma evidência clara de que o tratamento utilizado não foi suficiente para induzir a reversão completa do sexo em A. altiparanae. Em termos de expressão gênica, o tratamento com E2 (6 mg/kg de alimento) produziu uma notável plasticidade gonadal entre machos e fêmeas aos 90 dias após a eclosão (dph). Os machos, denominados machos resistentes ao estradiol, superexpressaram os genes masculinos, como dmrt1, sox9 e amh. Dessa forma, nós sugerimos esses machos foram capazes de resistir à feminização induzida por estradiol, aumentando a expressão de genes relacionados à diferenciação testicular. Interessantemente, também encontramos fêmeas derivadas de estradiol com maior expressão de genes masculinos como dmrt1 e sox9. Em conclusão, nossos resultados mostraram que menores concentrações de E2 administradas durante o desenvolvimento larval induziram uma reversão incompleta do sexo masculino para feminino em A. altiparanae e produziram uma complexa plasticidade gonadal genética a 90 dph.

The decision whether a bipotential gonad will become a testis or ovary is considered a critical stage in vertebrate sex determination. Administration of exogenous steroids can affect this plasticity by skewing the sex gonadal differentiation towards a male or female. The aim of this study is to evaluate the effects of 17-estradiol (E2) diet on Astyanax altiparanae (lambari) development, focusing on the gonadal development and gene expression analysis of possible candidate genes involved in either male or female pathways. Larvae with undifferentiated gonads were fed with steroid diet containing different concentrations of E2 during 28 days, from the mouth opening until a period that precedes the gonadal differentiation. Animals were sampled at 90 days post-hatching (dhp) for histology and gene expression analysis. Our results showed that E2 disrupted both phenotypic and histological sex ratios, and surprisingly, induced intersex with testis-ova in the concentrations of 2 and 6 mg E2/Kg food. This data is a clear evidence that the treatment used was not enough to induce complete sex reversal in A. altiparanae. However, in terms of gene expression, E2 (6mg/Kg food) induced a remarkable gonadal plasticity between males and females at 90 dph. The males, named as E2 resistant males, overexpressed the male-biased genes, such as dmrt1, sox9 and amh. We suggested that these males were able to resist the E2-induced feminization by the expression of genes related to testis differentiation. Strikingly, we also found E2-derived females with normal ovarian morphology but with higher or lower expression of dmrt1 and sox9. In conclusion, our results showed that lower E2 concentrations administered during larval development induced an incomplete male-to-female sex reversal in A. altiparanae and produced a complex genetic gonadal plasticity at 90 dph.

Endocrinologia aplicada na reprodução de peixes / Applied endocrinology forfish reproduction

Os eventos regulatórios da puberdade dos teleósteos são semelhantes dentro da classe e mesmo em comparação com outros vertebrados, entretanto existem particularidades entre as espécies que tornam os estudos de reprodução de peixes espécie-específicos. Essa especificidade se estende à prática, em que os protocolos de manipulação da reprodução de peixes nem sempre têm o mesmo efeito nas diferentes espécies, acarretando, portanto, resultados finais diferentes. Ainda, na indústria de aquicultura, o manejo hormonal com finalidade de ganhos econômicos não se limita à reprodução artificial. A manipulação do sexo é uma técnica muito utilizada quando, em espécies de interesse econômico, determinado sexo apresenta superioridade zootécnica. Nesta palestra,serão apresentados os principais hormônios envolvidos na formação e na maturação gonadal de peixes, bem como suas atividades, funções e singularidades pertinentes, buscando estender dos conhecimentos fisiológicos aos tecnológicos, na intersecção entre biologia básica e aplicada. (AU)

Although the events regulating puberty in teleost are very similar inside the class, and even if compared with other vertebrates, there are particularities between the species that make studies in fish reproduction very species-specific. This specificity extends to the practical activities, where the protocols of artificial reproduction have different effects in different species. In the aquaculture industry, the administration of hormones for economic purposes goes beyond reproduction in captivity. Sex manipulation is a technique largely used in species where one gender is superior in production. In the current talk, the main hormones controlling gonadal development and maturation will be presented, as well as their activities, functions and singularities, aiming at extending the knowledge from physiology to technology, at the intersection between applied and basic science.(AU)

Endocrinologia aplicada na reprodução de peixes / Applied endocrinology forfish reproduction

Os eventos regulatórios da puberdade dos teleósteos são semelhantes dentro da classe e mesmo em comparação com outros vertebrados, entretanto existem particularidades entre as espécies que tornam os estudos de reprodução de peixes espécie-específicos. Essa especificidade se estende à prática, em que os protocolos de manipulação da reprodução de peixes nem sempre têm o mesmo efeito nas diferentes espécies, acarretando, portanto, resultados finais diferentes. Ainda, na indústria de aquicultura, o manejo hormonal com finalidade de ganhos econômicos não se limita à reprodução artificial. A manipulação do sexo é uma técnica muito utilizada quando, em espécies de interesse econômico, determinado sexo apresenta superioridade zootécnica. Nesta palestra,serão apresentados os principais hormônios envolvidos na formação e na maturação gonadal de peixes, bem como suas atividades, funções e singularidades pertinentes, buscando estender dos conhecimentos fisiológicos aos tecnológicos, na intersecção entre biologia básica e aplicada.

Although the events regulating puberty in teleost are very similar inside the class, and even if compared with other vertebrates, there are particularities between the species that make studies in fish reproduction very species-specific. This specificity extends to the practical activities, where the protocols of artificial reproduction have different effects in different species. In the aquaculture industry, the administration of hormones for economic purposes goes beyond reproduction in captivity. Sex manipulation is a technique largely used in species where one gender is superior in production. In the current talk, the main hormones controlling gonadal development and maturation will be presented, as well as their activities, functions and singularities, aiming at extending the knowledge from physiology to technology, at the intersection between applied and basic science.

Gonadal steroids levels and vitellogenesis in the formation of oocytes in Prochilodus lineatus (Valenciennes) (Teleostei: Characiformes)

The objective of this study was to obtain information about the possible mechanisms related to poor reproductive performance in tropical rheophilic fish. To that effect, cages (Cs) and earthen ponds (EPs) were used as experimental systems to provide unsuitable and suitable conditions, respectively, for curimbatá (Prochilodus lineatus) breeders. Fish were maintained under experimental conditions for 18 months, and during this period females were randomly sampled every two months for biometric analysis (n=30), blood (n=5/sampling) and ovary (n=5/sampling). After this period EPs females (EPFs) and Cs females (CFs) were submitted to the induced breeding experiments. The results showed that rearing curimbatá for such long time in a cage at this stocking density, reduces its growth, plasma E2 levels and vitellogenesis. During vitellogenesis, the mean plasma estradiollevels of CFs were three times lower than those of EPFs (P<0.01). CFs presented poorer results than EPFs for all the examined parameters of reproductive performance. Taken together these data showed that the reduced estradiol levels during vitellogenesis (and the consequently less intense transition from the previtellogenic to vitellogenic phase) and reduced amounts of yolk are mechanisms associated with the formation of low quality oocytes and shortened and delayed breeding season in this species. Moreover, our data showed that the onset of vitellogenesis (six months before the spawning season) must be considered as a key period related to the formation of oocytes of good quality, and adequate management should be provided throughout the year.(AU)

Este estudo teve como objetivo gerar informações básicas sobre os possíveis mecanismos relacionados com os resultados desfavoráveis obtidos com o desempenho reprodutivo em peixes reofílicos tropicais. Para isso tanques-rede (Cs) e viveiros escavados (EPs) foram utilizados como sistemas experimentais para propociar respectivamente condições inadequadas e adequadas para reprodutores de Prochilodus lineatus. Os peixes foram mantidos por 18 meses em viveiros escavados (EPs) e tanques-rede (Cs), e durante este período, foram aleatoriamente coletados a cada dois meses para análise biométrica (n=30), coleta de sangue (n=5/tratamento) e amostragem do ovário (n=5/tratamento). Após este período as fêmeas mantidas em EPs (EPFs) e as fêmeas mantidas em Cs (CFs) foram submetidas aos experimentos de reprodução induzida. Os resultados mostraram que manter curimbatás por este período em Cs, na densidade de estocagem utilizada, reduz seu crescimento, níveis plasmáticos de E2 e vitelogênese. Durante a vitelogênese, os níveis plasmáticos de estradiol das CFs foram três vezes menores do que os das EPFs (P <0,01). As CFs apresentaram resultados inferiores aos das EPFs para todos os parâmetros analisados de desempenho reprodutivo. Em conjunto, estes dados mostram que os níveis reduzidos de estradiol durante a vitelogênese (bem como o consequente atraso na transição da fase previtelogênica para a vitelogênica) e as quantidades reduzidas de vitelo são mecanismos associados com a formação de ovócitos de baixa qualidade; redução e atraso na época de desova nesta espécie. Além disso, nossos dados mostraram que o início da vitelogênese (seis meses antes da época de desova) é um período-chave para formação de ovócitos de boa qualidade, e o manejo adequado deve ser aplicado durante todo o ano.(AU)

Aspectos reprodutivos do robalo-flecha, Centropomus undecimalis, durante a primeira maturação sexual

O robalo-flecha, Centropomus undecimalis, é um hermafrodita protândrico, considerado uma espécie emergente para piscicultura intensiva no continente americano. Não há informações sobre o desenvolvimento inicial dos testículos e a ação de hormônios reprodutivos durante a puberdade do robalo-flecha em cativeiro. O conhecimento sobre estes assuntos poderá gerar informações fundamentais para o avanço desta espécie na aquicultura. Sendo assim, o objetivo da primeira parte desta tese foi descrever o início da puberdade, correlacionando os parâmetros de crescimento, morfologia das gônadas (histologia) e as concentrações plasmáticas da testosterona (T), 11-cetotestosterona (11-KT) e estradiol (E2) em tanque-rede e sistema de recirculação de água. Neste estudo, foi possível constatar uma plasticidade no início da puberdade relacionado ao crescimento somático, que os esteroides possuem um papel relevante no desenvolvimento dos testículos. Além disso, o ambiente de criação tem influência nas concentrações plasmáticas dos esteroides gonadais. O objetivo da segunda parte da tese foi avaliar os efeitos da 17-metiltestosterona (MT) na espermatogênese e esteroidogênese do robalo-flecha durante a primeira maturação sexual. Os resultados demonstraram que a MT pode induzir o crescimento da gônada e acelerar a espermatogênese. Entretanto, ocorreu uma supressão parcial dos níveis plasmáticos de T e 11-KT, indicando um feedback negativo da MT na esteroidogênese. Simultaneamente, ocorreu um aumento dos níveis plasmáticos de E2 nos tratamentos com maiores concentrações de MT. Com os resultados desta tese, espera-se contribuir para a criação do robalo-flecha na aquicultura

The common snook, Centropomus undecimalis, is a protandrous hermaphrodite, considered an emerging species for intensive fish farming in the American continent. There is no information about initial development of spermatogenesis and the action of reproductive hormones during the puberty of common snook. Information about these subjects could generate fundamental subsidies for the advancement of this species in aquaculture. The aim of the first part of this thesis was to describe the onset of puberty, correlating growth parameters, gonad morphology (histology) and plasma concentrations of testosterone (T), 11-ketotestosterone (11-KT), and oestradiol (E2) in a net pen tank and a recirculating aquaculture system. In this study, it was possible to observe a plasticity at the beginning of puberty related to somatic growth, that the steroids play a relevant role in the development of the testes. Thus, the rearing environment influences the plasma concentrations of gonadal steroids. The objective of the second part was to evaluate the effects of 17-methyltestosterone (MT) on spermatogenesis and steroidogenesis of common snook during the first sexual maturation. The results demonstrated that MT can induce gonad growth and accelerate spermatogenesis. However, there was a partial suppression of plasma T and 11-KT levels, indicating a negative feedback of MT in steroidogenesis. Simultaneously, there was an increase in plasma levels of E2 in the treatments with higher concentrations of MT. With the results of this thesis, it is expected to contribute to the rearing of common snook in aquaculture

Perfil hormonal durante o ciclo reprodutivo e reprodução induzida da garoupa verdadeira (Epinephelus marginatus) (Teleostei: Serranidae) em cativeiro

Muitos peixes de interesse na aquicultura, dentre eles a garoupa-verdadeira, Epinephelus marginatus, exibem disfunções reprodutivas devido ao confinamento, que por sua vez, afetam o eixo hipotálamohipófisegônadas que controla os processos reprodutivos em vertebrados. O objetivo deste trabalho foi estudar o perfil dos esteroides gonadais e hôrmonio folículo estimulate (FSH) ao longo do ciclo reprodutivo, durante a reprodução induzida e na estimulação da vitelogênese em fêmeas de E. marginatus em cativeiro. Durante o ciclo anual a concentração de andrógenos não se alterou. Por outro lado, o nível plasmático de 17-estradiol (E 2 ) foi significativamente superior no período final, em comparação com o período inicial de confinamento. Concentrações plasmáticas de 17 -hidroxiprogesterona (17-OHP) foram significativamente mais elevadas nos meses de outubro, novembro e janeiro em relação aos meses de maio, junho, julho e agosto, e os níveis de FSH plasmáticos foram superiores em janeiro quando comparados aos meses de junho, julho, agosto e setembro, porém, os ovócitos permaneceram na fase de crescimento primário durante todo o ciclo anual. No primerio experimento de indução hormonal (fêmeas não vitelogênicas) apenas a concentração de 17-OHP aumentou após a estimulação com gonadotropina coriônica humana (hCG), mas este aumento não se refletiu no diâmetro dos ovócitos e ovulação. No segundo experimento, fêmeas vitelogênicas capturadas no ambiente natural foram induzidas e ovularam no período de 24 a 32 horas após a terceira dose de hCG, apresentando dois padrões diferentes de desova: a desova total ou em pequenos lotes, e os níveis plasmáticos de E 2 , testosterona (T) e 17-OHP apresentaram aumento progressivo ao longo dos períodos amostrais. No experimento com implantes de estradiol houve aumento deste estrógeno no plasma, mas sem desencadear a vitelogênese. Por fim, consideramos que o uso de hCG é viável para induzir a maturação final e ovulação em fêmeas vitelogênicas e sugerimos um periodo aproximado de 3 anos de aclimatação dos animais mantidos em condições de cativeiro para que possa ocorrer o inicio da vitelogênese.

Many fish of interest in aquaculture, including the dusky grouper, Epinephelus marginatus exhibit reproductive dysfunctions due to confinement, which in turn affect the hypothalamus-pituitary-gonadal axis that controls the reproductive processes in vertebrates. The aim of this study was to evaluate the profile of gonadal steroids and follicle-stimulating hormone (FSH) throughout the reproductive cycle, during the induced spawning and vitellogenesis induction in E. marginatus females in captivity. During the annual cycle, the concentration of androgens did not change. Moreover, the plasma levels of 17-estradiol (E 2 ) was significantly higher in the end of the period compared with the initial period of confinement. Plasma concentrations of 17 -hydroxyprogesterone (17-OHP) were significantly higher in October, November and January than May, June, July and August, and serum FSH levels were higher in January compared to June, July, August and September, however, the oocytes remained at the stage of primary growth throughout the annual cycle. In the first hormonal induction experiment (non vitellogenic females) only 17-OHP increased after stimulation with human chorionic gonadotropin (hCG), however this increase was not reflected in the diameter of oocytes and ovulation. In the second experiment, vitellogenic females captured in the natural environment were induced to spawning and ovulated within 24 to 32 hours after the third dose of hCG, showing two different patterns of spawning: the total spawning or spawning in small batches, and plasma levels of E2, testosterone (T) and 17 -OHP presented a progressive increase over the sampling periods. In the experiment with estradiol implants, an increase of this estrogen was observed, but vitellogenesis was not triggered. Finally, we consider that the use of hCG is viable to induce the final maturation and ovulation in vitellogenic females and we suggest a period of about 3 years of acclimatization of the animals in captivity conditions to trigger vitellogenesis.