Subcutaneous dirofilariasis due to Dirofilaria immitis in a dog in Brazil: first report / Dirofilariose subcutânea por Dirofilaria immitis em canino no Brasil: primeiro relato

The aim of this study was to report on the presence of microfilariae of Dirofilaria immitis causing nodular pyogranulomatous dermatitis in a dog in the state of Rio Grande do Norte, northeastern Brazil. A 4-year-old male dachshund dog with lesions in the nostrils and left dorsolateral regions was treated. Tests were requested to aid in making the diagnosis, such as skin cytology, Knott's test, thick smear and histopathology of the lesions. From these, presence of a diffuse pyogranulomatous process was observed and, amidst the cellular material, microfilariae of Dirofilaria spp. A conventional polymerase chain reaction test on tissue samples from the lesions revealed the presence of the species D. immitis. Treatment based on ivermectin (3mg) was administered at a single oral dose of 0.6 mg/kg. In the first seven days there was regression of the lesions, but after 30 days there was recurrence. A new treatment was administered, consisting of 10% imidacloprid + 2.5% moxidectin (4-10 mg/kg), with one application per month for 6 months, and doxycycline (100 mg), 10 mg/kg, 1 tablet, 2 times a day, for 30 days. In conclusion, D. immitis microfilariae caused pyogranulomatous lesions in the subcutaneous tissue of a dog. This had not previously been described in Brazil.(AU)

Resumo O objetivo deste trabalho foi relatar a presença de microfilárias de Dirofilaria immitis causando dermatite nodular piogranulomatosa em cão no estado do Rio Grande do Norte, região Nordeste do Brasil. Um cão de 4 anos, da raça Dachshund, foi atendido com lesões nas regiões das narinas e dorsolateral esquerda. Foram realizados exames de citologia cutânea, teste de Knott, gota espessa e histopatologia das lesões, sendo observada a presença de um processo piogranulomatoso difuso e microfilárias de Dirofilaria spp. Na reação em cadeia da polimerase convencional constatou-se a espécie D. immitis nas amostras de tecido das lesões. Foi efetuado um tratamento à base de Ivermectina (3mg) 0,6 mg/kg - 1 aplicação, via oral. Nos sete primeiros dias, houve regressão das lesões, porém, depois de 30 dias, houve recidiva. Foi efetuado um novo tratamento com imidacloprida 10% + moxidectina 2,5% (4-10 mg/kg), 1 aplicação por mês durante 6 meses, e Doxiciclina (100 mg), 10 mg/kg, 1 comprimido, duas vezes ao dia, por 30 dias. Em conclusão, microfilárias de D. immitis causaram lesões piogranulomatosas em tecido subcutâneo de um cão, relato anteriormente não descrito no Brasil.(AU)

Dirofilaria immitis parasite infection in cats: first case reported in the Legal Amazon region, Brazil: case report / Infecção por Dirofilaria immitis em gato: primeiro registro na região da Amazônia Legal, Brasil: relato de caso

A case of infection with Dirofilaria immitis in a cat is reported here with clinical signs of apathy, anorexia, dyspnea, polypnea, slight dehydration and pale mucus membranes. The radiographic examination showed cardiomegaly, lobar arteries dilation of the cranial lobes and tortuosity, enlargement of the caudal lobar arteries. In the right lobe of the lung parenchyma, interstitial pulmonary opacification tending to alveolar opacification was seen. The clinical signs, the movements, and the morphology of the microfilariae in the direct examination of fresh blood, peripheral blood smear and Knott's modified test supported the diagnosis. We alert to the need for clinicians to consider feline heartworm diseases as a differential diagnosis in endemic areas when cats show respiratory signs.

Descreve-se um caso de infecção por Dirofilaria immitis em gato com sinais clínicos de apatia, anorexia, dispneia, polipneia, leve desidratação e mucosas pálidas. O exame radiográfico demonstrou cardiomegalia, dilatação da artéria lobar cranial e tortuosidade, alargamento dos lobos caudais da artéria lobar. No lobo direito do parênquima pulmonar, opacificação pulmonar intersticial tendendo à opacificação foi observada. O diagnóstico foi baseado nos sinais clínicos, nos movimentos e na morfologia das microfilárias detectadas no exame de sangue a fresco, no esfregaço de sangue periférico e no teste de Knott modificado. Alertou-se para a necessidade de os clínicos considerarem a dirofilariose felina como diagnóstico diferencial em áreas endêmicas quando os gatos apresentam sinais respiratórios.

Granuloma caused by Acanthocheilonema spp. in a canine: case report / [Granuloma por Acanthocheilonema spp. em um cão: relato de caso]

A canine patient, 13-year-old mixed breed male, 24kg, was seen at a private clinic in the city of Guayaquil, Ecuador. The main reason for consultation was the evaluation of a mass in the right knee and neck that had previously been cytologically diagnosed of neoplastic origin by another team of veterinarians through fine needle puncture and cytology. The contacts were asymptomatic. At the time of the consultation, a detailed exploration and complementary methods were performed that included hematological and urinary exams, mass cytology, serological test, chest radiography and biopsy for further histopathological study. The final diagnosis was a cutaneous granuloma due to microfilariae of Acanthocheilonema spp. and its subsequent surgical and medical treatment with excellent results. The canine heartworm is a cosmopolitan disease caused by nematodes of the genus Dirofilaria, with D. immitis being the best-known species. Less frequently, the species Acanthocheilonema spp., found in this patient, is also reported in Americas, with little knowledge about it. This is the first report of its kind hoping that it will serve as a basis for future studies.

Foi atendido, em uma clínica particular, na cidade de Guaiaquil, Equador, um paciente canino, sem raça definida, de 13 anos de idade, macho, não castrado, de 24kg. O motivo da consulta foi a avaliação de uma massa em região de articulação de joelho direito e de pescoço, que havia sido previamente diagnosticada como de origem neoplásica por outra equipe de médicos veterinários, mediante punção por agulha fina e citologia. Os contactantes eram assintomáticos. No momento da consulta, realizaram-se detalhadas avaliações clínica e complementar, que incluíram exames hematológicos, urinálise, citologia da massa, teste sorológico, radiografia torácica e biopsia para posterior estudo histopatológico. O diagnóstico final foi granuloma cutâneo por microfilária de Acanthocheilonema spp., para o qual os tratamentos clínico e cirúrgico apresentaram excelentes resultados. A dirofilariose é uma enfermidade cosmopolita causada por nematódeos do gênero Dirofilaria, sendo a espécie D. immitis a mais conhecida. Em menor frequência, a espécie Acanthocheilonema spp. encontrada neste paciente é também relatada na América, existindo pouco conhecimento a seu respeito. Este é o primeiro relato de caso sobre este tema e espera-se que sirva como base para futuros estudos.

Litomosoides brasiliensis (Nematoda: Onchocercidae) infecting chiropterans in the Legal Amazon region, Brazil / Litomosoides brasiliensis (Nematoda: Onchocercidae) em morcegos na Amazônia Legal, Brasil

Chiropterans play an important role in the maintenance of the environmental balance, since they are pollinators, seed dispersers and predators. They contribute to transmission and spreading of microorganisms such as helminths, fungi, protozoa, bacteria and virus. The aim of the present study was to investigate natural filariid infection among bats in the Legal Amazon region, Brazil, by means of parasitological and molecular analyses. Blood samples were collected from 82 bats for blood smears and for DNA extraction via the polymerase chain reaction (PCR) assay. Microfilariae were observed in blood smears from Carollia perspicillata (2), Artibeus lituratus (1), Artibeus fimbriatus (2), Dermanura gnoma (2) and Glossophaga soricina (1). Five positive samples were detected through the PCR assay and four of these were also positive in blood smears. From genome sequencing and comparative analysis with sequences deposited in GenBank, one sample showed 99.31% similarity to the species Litomosoides brasiliensis. The present study expands the geographical distribution of L. brasiliensis, to include the state of Maranhão as an area of occurrence of this species and includes D. gnoma and A. fimbriatus as hosts in Brazil.(AU)

Os quirópteros desempenham um papel importante na manutenção do equilíbrio ambiental, pois são polinizadores, dispersores de sementes e predadores. Contribuem para a transmissão e disseminação de microrganismos, como helmintos, fungos, protozoários, bactérias e vírus. O objetivo do presente estudo foi investigar a infecção natural por filariídeos em morcegos na região da Amazônia Legal, Brasil, por meio de análises parasitológicas e moleculares. Amostras de sangue foram coletadas de 82 morcegos para confecção de esfregaços e para extração de DNA para a Reação em Cadeia da Polimerase (PCR). Microfilárias foram observadas em esfregaços sanguíneos de Carollia perspicillata (2), Artibeus lituratus (1), Artibeus fimbriatus (2), Dermanura gnoma (2) e Glossophaga soricina (1). Cinco amostras positivas foram detectadas por meio do ensaio de PCR, e quatro destas também foram positivas em esfregaços de sangue. A partir do sequenciamento do genoma e análise comparativa com sequências depositadas no GenBank, uma amostra apresentou 99,31% de similaridade com a espécie Litomosoides brasiliensis. O presente estudo expande a distribuição geográfica de L. brasiliensis, abrangendo o estado do Maranhão como área de ocorrência desta espécie, e inclui D. gnoma e A. fimbriatus como hospedeiros no Brasil.(AU)

Prevalence and factors associated with Dirofilaria immitis infection in dogs in Sertão Paraibano, Northeast Brazil / Prevalência e fatores associados à infecção por Dirofilaria immitis em cães no Sertão Paraibano, Nordeste do Brasil

Dirofilaria immitis is a heart and large vessel parasite that mainly affects domestic dogs and has shown a re-emerging zoonosis in recent years. The objective of this study was to determine the prevalence, associated factors, and geographic areas of D. immitis in dogs in the city of Sousa, Paraíba, Northeast Brazil. A total of 320 dogs were selected and evaluated, 160 domiciled and 160 wandering, from the 32 districts of the city. Clinical examination, blood collection, and epidemiological data retrieval were performed for each animal. The sanitation conditions of the environment were visually observed at the time of evaluation. Three methods were used to investigate the morphometric diagnosis of microfilariae: capillary blood smear (ESC), peripheral blood smear (ESP), and modified Knott test. The data were subjected to univariate and multivariate statistics for the observation of risk factors and qualitative assessment of the examinations. Of the 17.5% (56/320) of animals testing positive for D. immitis, 25% (40/160) were wandering and 10% (16/160) were domiciled dogs. Positive dogs were found in 24 of the 32 neighborhoods evaluated, with Angelim and Doutor Zezé having the highest percentages of 1.56% (5/320) each. Only the categories of cardiac alterations (OR 6.231 [1,539-25,236]) and stray dogs (OR 2.463 [1,281-4,735]) demonstrated potential risk factors for infection. Of the 56 positive animals, 28 were positive in the three tests, and another 28 showed variance between methods and/or between prepared slides. No other filaridae were observed. The city of Sousa is considered to have a significant prevalence of infection by D. immitis, and forms of control and prophylaxis are required to reduce the risks of transmission to animals, as well as to humans.

Dirofilaria immitis é um parasito de coração e de grandes vasos que acomete principalmente cães domésticos, também causador de uma zoonose reemergente nos últimos anos. O objetivo deste trabalho foi determinar a prevalência, fatores associados e áreas geográficas de D. immitis em cães na cidade de Sousa, Paraíba, Nordeste do Brasil. Para isso, foram selecionados e avaliados 320 cães, sendo 160 domiciliados e 160 errantes, provenientes dos 32 bairros da cidade. Foi realizado o exame clínico, coleta de sangue e dados epidemiológicos de cada animal. O ambiente foi observado visualmente quanto as condições de saneamento no momento de avaliação. Para pesquisa de microfilárias, foram realizados três métodos: esfregaço sanguíneo capilar (ESC), periférico (ESP) e teste de Knott-modificado, associado ao diagnóstico morfométrico das microfilárias. Os dados foram submetidos a estatísticas uni e multivariadas para observação de fatores de risco e avaliação qualitativa dos exames. Obteve-se prevalência de 17,5% (56/320) de animais positivos para D. immitis, sendo 25% (40/160) errantes e 10% (16/160) domiciliados. Dos 32 bairros avaliados, em 24 foram encontrados cães positivos, sendo Angelim e Doutor Zezé, os bairros com maior percentual 1,56% (5/320) cada. Somente as categorias de alterações cardíacas (OR 6,231 [1.539-25.236]) e cães errantes (OR 2,463 [1.281-4.735]) demonstraram potencial fator de risco para infecção. Dos 56 animais positivos, 28 apresentaram positividade nos três testes, e outros 28 demonstraram variância entre métodos e/ou entre lâminas confeccionadas. Não foram observados outros filarídeos. Considerou-se que a cidade de Sousa apresenta prevalência significativa de infecção por D. immitis, sendo necessário estabelecer formas de controle e profilaxia, para reduzir os riscos da transmissão para animais, como também para humanos.

Free-living capybaras (Hydrochoerus hydrochaeris) in an urban area in Brazil: biochemical and hematological parameters

Capybaras have found favorable conditions for survival and reproduction in green urban environments. In recent years, the population of these large rodents has been increasingly abundant in several brazilian cities such as Uberlândia, a municipality of the southeastern region with a Cerrado biome. Capybaras are important in the Brazilian Spotted Fever epidemiological chain, by amplifying infection rates of the vector population. However, knowledge of this host's physiology is scarce. Thus, the aim of this work was to describe hematological and biochemical parameters of free-living capybaras groups in urbanized areas in the city of Uberlândia, Minas Gerais State, Brazil. Capybaras were captured in 4 different locations of Uberlândia city, Minas Gerais state, including 1 Condominium (P1), 1 Private Market Garden (P2), 1 Private Club (P3) and 1 Municipal Park (P4). The animals were baited into an octagonal iron corral and chemically contained with anesthetic darts. After sedated, blood was collected from the femoral vein in tubes with and without EDTA. Biochemical evaluation, hematological analysis with differential leukocyte counts and search for Dirofilaria sp. were done. The blood count and biochemistry values obtained from animals of different ages, sex and sectors (P1, P2, P3 and P4) were submitted to the Shapiro-Wilk normality test, considering 95% significance. Values that had a normal distribution were subjected to ANOVA tests followed by Student's t-test. Values that did not follow normality were submitted to the Kruskal-Wallis test, to obtain a P-value, with a significance level of 95%. A total of 19 capybaras were captured: 4 in P1, 6 in P2, 4 in P3 and 5 in P4. From the 19 animals, 13 were females (68.42%) and 6 were males (31.57%), 12 adults (63.15%) and 7 juveniles (36.84%). Apart from occasional skin scars and moderate to intense Ambyomma spp. tick infestations, all captured animals were healthy on a broad examination. From 5 animals captured in P4, despite the use of anticoagulant, blood from 4 animals clotted fast. No microfilariae were found in the thick drop test in any of the 19 animals sampled, and in 2 adult female capybaras captured in P1, Kurloff cells were observed. Hematological and biochemical values presented no major differences when comparing sex and age. Nevertheless, differences in liver and kidney profile were observed between the capybara groups, including ALT, alkaline phosphorus, BUN and creatinine. Blood from 4 animals clotted fast, despite the use of EDTA tubes. Blood clotting of samples with anticoagulant in this work could be associated with some physiological features inherent to capybaras. Many attempts were required to obtain enough blood from each individual due to the rapid hemostasis, what come in accordance with reports in literature. Kurloff cells were observed in 2 adult female capybaras captured in P1, which can be found in peripheral blood of female rodents during follicular phase of estrous cycle. Hematological and biochemical values differences in liver enzymes such as ALT and alkaline phosphorus, and kidney profile enzymes including BUN and creatinine could be associated to capture stress or dietetic variation between groups. Despite statistical relevant, the values were still in accordance with other works, although comparisons should be done with caution since various environments exert a diverse array of stimulus upon the animals such as parasitic, infective, stress, nutritional, social and undoubtedly blood parameters mirror them. In conclusion, this work contributes to the standardization of free-living capybaras' physiological parameters in urban areas.(AU)

First canine dirofilariosis report (Dirofilaria immitis) in Campo Grande, Mato Grosso do Sul, Brazil / Primeiro relato de dirofilariose canina (Dirofilaria immitis) em Campo Grande, Mato Grosso do Sul, Brasil

Dirofilariosis is an emerging zoonosis with a wide distribution worldwide. In Brazil, it is caused by the nematode, Dirofilaria immitis, and transmitted by different species of culicide mosquitoes. The present work aimed to report the first case of canine dirofilariasis in the municipality of Campo Grande, Mato Grosso do Sul. On September 6, 2018, a 14-year-old female canine poodle with a history of traveling to the coastal region was seen at a private veterinary clinic in Campo Grande, with hypertension and eosinophilia. The animal was medicated with dipyrone and anlodipine for control of the hypertension and, after nine days, it returned with worsening of the clinical picture (êmese, melena, tacquicardia, tacquipnea). Complementary laboratory tests were requested, observing cardiac, hepatic, renal and pancreatic alterations, besides the presence of microfilaria, morphologically identified and confirmed as D. immitis by serological and molecular tests. The animal was hospitalized, but died on the fifth day after hospitalization. The fact that the animal has a report of a trip to the coastal region, without prophylactic treatment, characterizes the case as an allochthonous of dirofilariasis in the region.

A dirofilariose é uma zoonose emergente de ampla distribuição mundial. No Brasil, é causada pelo nematódeo, Dirofilaria immitis,e transmitida por diferentes espécies de mosquitos culicídeos. O presente trabalho teve por objetivo relatar o primeiro caso de dirofilariose canina no município de Campo Grande, Mato Grosso do Sul. No dia 6 de setembrode 2018, um canino, fêmea, poodle, de 14 anos de idade, com histórico de viagem para região litorânea,foi atendido em uma clínica veterinária particular de Campo Grande, apresentando hipertensão arterial e eosinofilia. O animal foi medicado com dipirona e anlodipino para controle da hipertensão arterial e, após nove dias, retornou com piora do quadro clínico (êmese, melena, taquicardia, taquipneia). Exames laboratoriais complementares foram solicitados, observando-se alterações cardíacas, hepáticas, renais e pancreáticas, além da presença de microfilárias, identificadas morfologicamente e confirmada como D. immitispor teste sorológico e molecular. O animal foi internado, mas veio a óbito no quinto dia após internação. O fato de o animal possuir relato de viagem para região litorânea, sem realização de tratamento profilático, caracteriza o caso como alóctone de dirofilariose na região.

First canine dirofilariosis report (Dirofilaria immitis) in Campo Grande, Mato Grosso do Sul, Brazil / Primeiro relato de dirofilariose canina (Dirofilaria immitis) em Campo Grande, Mato Grosso do Sul, Brasil

Dirofilariosis is an emerging zoonosis with a wide distribution worldwide. In Brazil, it is caused by the nematode, Dirofilaria immitis, and transmitted by different species of culicide mosquitoes. The present work aimed to report the first case of canine dirofilariasis in the municipality of Campo Grande, Mato Grosso do Sul. On September 6, 2018, a 14-year-old female canine poodle with a history of traveling to the coastal region was seen at a private veterinary clinic in Campo Grande, with hypertension and eosinophilia. The animal was medicated with dipyrone and anlodipine for control of the hypertension and, after nine days, it returned with worsening of the clinical picture (êmese, melena, tacquicardia, tacquipnea). Complementary laboratory tests were requested, observing cardiac, hepatic, renal and pancreatic alterations, besides the presence of microfilaria, morphologically identified and confirmed as D. immitis by serological and molecular tests. The animal was hospitalized, but died on the fifth day after hospitalization. The fact that the animal has a report of a trip to the coastal region, without prophylactic treatment, characterizes the case as an allochthonous of dirofilariasis in the region.(AU)

A dirofilariose é uma zoonose emergente de ampla distribuição mundial. No Brasil, é causada pelo nematódeo, Dirofilaria immitis,e transmitida por diferentes espécies de mosquitos culicídeos. O presente trabalho teve por objetivo relatar o primeiro caso de dirofilariose canina no município de Campo Grande, Mato Grosso do Sul. No dia 6 de setembrode 2018, um canino, fêmea, poodle, de 14 anos de idade, com histórico de viagem para região litorânea,foi atendido em uma clínica veterinária particular de Campo Grande, apresentando hipertensão arterial e eosinofilia. O animal foi medicado com dipirona e anlodipino para controle da hipertensão arterial e, após nove dias, retornou com piora do quadro clínico (êmese, melena, taquicardia, taquipneia). Exames laboratoriais complementares foram solicitados, observando-se alterações cardíacas, hepáticas, renais e pancreáticas, além da presença de microfilárias, identificadas morfologicamente e confirmada como D. immitispor teste sorológico e molecular. O animal foi internado, mas veio a óbito no quinto dia após internação. O fato de o animal possuir relato de viagem para região litorânea, sem realização de tratamento profilático, caracteriza o caso como alóctone de dirofilariose na região.(AU)

Microfilaremia by Cercopithifilaria bainae in a dog from the central western region of Brazil: case report / Microfilaremia por Cercopithifilaria bainae em um cão da região Centro-Oeste do Brasil: relato de caso

Cercopithifilaria bainae is a nematode belonging to the family Onchocercidae that parasitizes the subcutaneous tissue of dogs. Its transmission occurs through the tick Rhipicephalus sanguineus and its geographical distribution overlaps that of this vector. The present study reports the detection of microfilaremia by C. bainae in an eight-year-old male dog that presented anorexia, hyperthermia, motor incoordination, mydriasis, a nodule in the left testicle and concomitant infection by Ehrlichia sp. Blood samples were analyzed using microscopy, PCR and DNA sequencing. Microfilariae measuring 150±5.5µm in length and 7±1.8µm in width were retrieved. The DNA sequence exhibited 98% identity with C. bainae sequences available in Genbank. This is the first report of microfilaremia by C. bainae in a dog in the central western region of Brazil.(AU)

Cercopithifilaria bainae é um nematoide pertencente à família Onchocercidae, que parasita o tecido subcutâneo de cães. Sua transmissão ocorre pelo carrapato Rhipicephalus sanguineus, e sua distribuição geográfica se sobrepõe ao espalhamento desse vetor. O presente estudo relata a detecção de microfilaremia por C. bainae em um cão macho de oito anos que apresentava anorexia, hipertermia, incoordenação motora, midríase e nódulo no testículo esquerdo e infecção concomitante por Ehrlichia sp. A coleta de sangue foi realizada, e o material analisado por meio dos exames de microscopia, PCR e sequenciamento de DNA. Microfilárias medindo 150±5,5µm de comprimento e 7±1,8µm de largura foram recuperadas. A sequência de DNA obtida mostrou 98% de identidade com sequências de C. bainae disponíveis no Genbank. Este é o primeiro relato de microfilaremia de C. bainae em um cão na região Centro-Oeste do Brasil.(AU)

Microfilaremia by Cercopithifilaria bainae in a dog from the central western region of Brazil: case report / Microfilaremia por Cercopithifilaria bainae em um cão da região Centro-Oeste do Brasil: relato de caso

Cercopithifilaria bainae is a nematode belonging to the family Onchocercidae that parasitizes the subcutaneous tissue of dogs. Its transmission occurs through the tick Rhipicephalus sanguineus and its geographical distribution overlaps that of this vector. The present study reports the detection of microfilaremia by C. bainae in an eight-year-old male dog that presented anorexia, hyperthermia, motor incoordination, mydriasis, a nodule in the left testicle and concomitant infection by Ehrlichia sp. Blood samples were analyzed using microscopy, PCR and DNA sequencing. Microfilariae measuring 150±5.5µm in length and 7±1.8µm in width were retrieved. The DNA sequence exhibited 98% identity with C. bainae sequences available in Genbank. This is the first report of microfilaremia by C. bainae in a dog in the central western region of Brazil.(AU)

Cercopithifilaria bainae é um nematoide pertencente à família Onchocercidae, que parasita o tecido subcutâneo de cães. Sua transmissão ocorre pelo carrapato Rhipicephalus sanguineus, e sua distribuição geográfica se sobrepõe ao espalhamento desse vetor. O presente estudo relata a detecção de microfilaremia por C. bainae em um cão macho de oito anos que apresentava anorexia, hipertermia, incoordenação motora, midríase e nódulo no testículo esquerdo e infecção concomitante por Ehrlichia sp. A coleta de sangue foi realizada, e o material analisado por meio dos exames de microscopia, PCR e sequenciamento de DNA. Microfilárias medindo 150±5,5µm de comprimento e 7±1,8µm de largura foram recuperadas. A sequência de DNA obtida mostrou 98% de identidade com sequências de C. bainae disponíveis no Genbank. Este é o primeiro relato de microfilaremia de C. bainae em um cão na região Centro-Oeste do Brasil.(AU)

Prevalence of Dirofilaria immitis in dogs from shelters in Vojvodina, Serbia

Background: Dirofilaria immitis is vector borne parasite of carnivores, with zoonotic potential, endemic in many parts of the world, including Europe. The aim of this study was to determine the prevalence of Dirofilaria immitis infection in dogs from shelters, especially compared to their lifestyle. Dogs living in shelters in Serbia may be at high risk of acquiring vector borne pathogens, mainly because most of them live outside in pens and backyards, in contact with vectors. Also, dogs in shelters are not always regularly treated against ectoparasites, thus, representing an easy feeding source for the vectors. The objective of this study was to determine the prevalence of Dirofilaria immitis infection in dogs from 5 shelters in South Bačka and Central Banat districts, in Autonomous Province of Vojvodina, Northern part of Serbia. Also, the objective was to compare the relation of infection with Dirofiaria immitis with age, sex, type of keeping the animals and preventive treatment in dogs. Materials, Methods & Results: Between May 2017 and October 2019, blood samples were collected from 336 randomly selected dogs from 5 shelters in 2 districts, South Bačka and Central Banat districts, in Autonomous Province of Vojvodina, Northern part of Serbia. The epidemiological survey has been conducted with all of the dogs involved in this research. The survey was designed to collect data about sex, age, lifestyles, food type, treatment against mosquitoes with insecticides and filarioid worms with macrocyclic lactones, regular testing for Dirofilaria infections. The presence of circulating microfilariae was examined using a modified Knott’s test. For the presence of circulating adult female Dirofilaria immitis antigen, serum samples were tested by commercially available enzyme-linked immunosorbent assay, which reacts to antigen of female Dirofilaria. In total, 336 dogs were examined for the presence of Dirofilaria...

Unusual feline Dirofilaria immitis infection: a case report / Infecção incomum por Dirofilaria immitis em felino: relato de caso

Cats are less susceptible to Dirofilaria immitis infection than dogs. Although rare, the feline disease can be fatal even with low parasitic loads. The infection is often asymptomatic or has non-specific symptoms that are mainly associated with the death of immature worms. Microfilaremia is rare and transient. Normally, microfilaremia, when present, lasts for not more than 33 days. This study describes a feline case presenting with non-specific clinical signs and prolonged microfilaremia. Case: a random bred cat infected by feline leukemia virus (FeLV) that was found to be microfilaremic by chance. The infection was detected by the presence of microfilariae in a blood smear and was confirmed by antigen test (SNAP Feline Triple Test, Idexx®) and echocardiogram.(AU)

Gatos são menos susceptíveis à infecção por Dirofilaria immitis do que cães. Apesar de rara, a doença nos gatos pode ser fatal mesmo com baixas cargas parasitárias. Muitas vezes, a doença é assintomática ou apresenta sintomas inespecíficos, principalmente associados com a morte de formas parasitárias imaturas. Microfilaremia é rara e transitória. Normalmente, quando ocorre microfilaremia, ela permanece por, no máximo, 33 dias. Este estudo descreve o caso de um felino que apresentava sinais inespecíficos e microfilaremia prolongada: um gato sem raça definida, portador de infecção pelo vírus da leucemia felina (FeLV) que foi diagnosticado como microfilaremico ao acaso. A infecção foi detectada pela presença de microfilárias em esfregaço sanguíneo e, posteriormente, confirmada pelo teste de antígenos (SNAP Feline Triple Test, Idexx®) e por ecocardiograma.(AU)

Detection of Dirofilaria immitis using microscopic, serological and molecular techniques among dogs in Cabo Frio, RJ, Brazil / Detecção de Dirofilaria immitis utilizando técnicas microscópicas, imunológicas e moleculares em cães de Cabo Frio, RJ

Heartworm disease is a health problem for dogs and cats, especially in tropical and subtropical coastal regions of the world. Some studies have compared the efficacy of the diagnostic techniques used to detect this parasitosis. Therefore, the aim of this study was to compare parasitological optical microscopy (POM), serological and molecular techniques for diagnosing canine heartworm infection. Samples were collected between July 2015 and April 2016 from 103 dogs in Cabo Frio, RJ, Brazil. The wet fresh blood, thick smears, thin smears and modified Knotts test were used to detect microfilariae. ELISA (Snap 4Dx ® IDEXX) was used to detect antigens and the polymerase chain reaction (PCR) was used to detect DNA and enable sequencing for species differentiation and confirmation. 19.4% of samples were positive according to microscopy. Through PCR, 15.5% of the total were positive. Using ELISA, the positivity rate was 29.1%. Occult heartworm infection was detected in 11.6% of the samples. ELISA sensitivity was shown to be higher than PCR or microscopy (P = 0.001). Sequencing of samples confirmed the presence of Dirofilaria immitis and Acanthocheilonema reconditum . ELISA was more effective for serological diagnosis canine heartworm and should be used in clinical and epidemiological studies.(AU)

A dirofilariose é um problema de saúde para cães e gatos, especialmente nas regiões costeiras tropicais e subtropicais do mundo. Alguns estudos compararam a eficácia das técnicas de diagnóstico usadas para detectar esta parasitose. Portanto, o objetivo deste estudo foi comparar a microscopia óptica (OM), técnicas sorológicas e moleculares para o diagnóstico de infecção por Dirofilaria immitis . Foram coletadas, entre julho de 2015 e abril de 2016, amostras de 103 cães em Cabo Frio, RJ, Brasil. O exame direto, distensão espessa, distensão delgada e o teste de Knott modificado foram usados para detectar microfilárias. O ELISA (Snap 4Dx ® IDEXX) foi usado para detectar antígenos e a reação em cadeia da polimerase (PCR) foi usada para detectar DNA e o sequenciamento para diferenciação e confirmação de espécie. Das amostras, 19,4% foram positivas de acordo com a microscopia. Por PCR, 15,5% do total foram positivos. Utilizando o ELISA, a taxa de positividade foi de 29,1%. Dirofilariose oculta foi detectada em 11,6% das amostras. A sensibilidade ao ELISA mostrou-se superior à PCR ou microscopia (P = 0,001). O sequenciamento das amostras confirmou a presença de Dirofilaria immitis e Acanthocheilonema reconditum . O ELISA foi mais eficaz no diagnóstico sorológico de dirofilariose canina e deve ser usado em estudos clínicos e epidemiológicos.(AU)

Dirofilaria immitis infestation in imported police (K-9) dogs in Iraq: clinicopathological and molecular investigations study / Infecção por Dirofilaria immitis em cães policiais importados no Iraque: estudo clínico-patológico e de investigações moleculares

Dirofilaria immitis, the cause of heartworm infestation (HWI) or dirofilariasis, affects members of the Canidae and remains a worldwide clinical problem. In Iraq, dirofilariasis was believed absent until 2009, when the Karbala Governorate was reported as an endemic area for canine dirofilariasis. Consequently, this study intended to investigate the occurrence of Dirofilaria immitis in police dogs in one police academy in Iraq and to study the gross and histopathological changes in 5 dead dogs, as well as to identify the species of the causative parasite using PCR technique. Thirty-nine police dogs, aged between 6 months and 12 years were included in this study. For the microfilariae investigation, 5 ml blood samples were collected from all dogs in EDTA tubes and examined by Knott's method. The systemic necropsy performed in five dead dogs showed severe clinical signs of dirofilariasis and tissue specimens were sent for routine histopathological processing. For the molecular analysis, adult worms of the detected Dirofilaria spp. were used for DNA extraction and amplification of the cox1 gene. Fifteen of 39 (38.46%) dogs were diagnosed with moderate to severe microfilariasis. The dead dogs revealed typical severe clinical signs of dirofilariasis. Moreover, typical gross and histopathological changes were also seen, accompanied by generalized thromboembolic lesions, suggesting the occurrence of the caval syndrome. The PCR investigation confirmed that D. immitis was the species present in Iraq. In conclusion, this study establishes that Iraq is a newly reported endemic area for dirofilariasis. Moreover, the infestation occurring in these cases most probably happened inside Iraq. The authors recommend doing further epidemiological studies concerning the occurrence of D. immitis in local dogs as well as in the imported dogs in all Iraqi governorates to better understand the epidemiological map of this disease and to introduce an active treatment and preventive program. Awareness and education regarding this disease should be provided to the veterinarians, dog guiders and people in direct contact with dogs, as this disease is one of the important zoonotic diseases.(AU)

A Dirofilaria immitis, causadora da infestação pelo verme do coração (IVC) ou dirofilariose afeta os membros da família Canidae e ainda é um problema clínico mundial. Até o ano de 2009, acreditava-se que o Iraque fosse livre da dirofilariose, porém nessa ocasião a governadoria de Kerbala foi relatada como uma área endêmica de dirofilariose. Assim, o presente trabalho foi realizado para investigar a ocorrência da Dirofilaria immitis em cães policiais em uma academia de polícia do Iraque, estudar as alterações macroscópicas e histopatológicas em cinco cães mortos, bem como, identificar as espécies do parasita causador com o emprego da técnida de PCR. Trinta e nove cães policiais com 6 meses a 12 anos de idade foram incluídos no estudo. Amostras de sangue de cinco mililitros foram colhidas por animal, em tubos com EDTA e foram examinadas pelo método de Knott. A necropsia sistêmica foi realizada em cinco cães que haviam apresentado sinais clínicos severos de dirofilariose e espécimens dos seus tecidos foram enviados para o processamento histopatológico de rotina. Para a análise molecular dos vermes adultos de Dirofilaria spp, foi empregada a extração do DNA e a amplificação do gene cox1. Quinze de 39(38,46%) cães foram diagnosticados com uma microfilariase variável de moderada para severa. As alterações macroscópicas e histopatológicas foram acompanhadas por lesões generalizadas tromboembólicas sugestivas da ocorrência da síndrome da veia cava. A investigação de PCR confirmou que a D.immitisera a espécie presente no Iraque. A conclusão do estudo estabeleceu que o Iraque deve passar a ser considerado como uma nova área endêmica da dirofilariose. Além da infestação registrada nos casos descritos é provável que ela também esteja presente em outras regiões do Iraque. Os autores recomendam a realização de estudos epidemiológicos para investigar a ocorrência de D.immitis tanto nos cães locais bem como em cães importados em todas as governadorias do Iraque, para ser construído o mapa epidemiológico da distribuição da doença e implantadas as ações de tratamento e de um progrma preventivo. Ações de educação em saúde sobre a doença deverão ser dirigidas para os veterinários, tratadores de cães e para pessoas em geral que tenham contato com os cães, pois esta doença é uma importante zoonose.(AU)

Dirofilaria immitis infection in dogs in Algodoal Island, Brazilian Amazon

ABSTRACT: Dirofilaria immitis, a parasite that mainly infects domestic or wild canids, but can infect felines or humans as well, is frequent in many Brazilian areas. The main objective of this research was to determine the prevalence of natural canine infection at the Algodoal-Maiandeua Island complex, in the coastal region of the state of Pará, Brazil. A total of 67 dogs were sampled for blood microfilariae detection and for D. immitis DNA detection. Microfilaria and D. immitis DNA could be detected in 35.8% (24/67) of the animals. In one dogs sample no microfilariae were detected, but the PCR was positive, suggesting that either larvae recently were eliminated or adults died shortly before sample collecting. Therefore, it can be concluded that the occurrence of D. immitis is a health threat for domestic and wild canids at the Island of Algodoal, as well as for feline or human health.

RESUMO: Dirofilaria immitis, um parasito que infecta principalmente canídeos domésticos ou selvagens, embora também possa infectar felinos e humanos, é frequente em muitas áreas do Brasil. O objetivo deste estudo foi determinar a ocorrência da infecção natural em cães provenientes do complexo da Ilha de Algodoal-Maiandeua, região litorânea do estado do Pará, Brasil. Um total de 67 cães tiveram o sangue coletado para detecção de microfilárias de D. immitis e seu DNA. Microfilárias e o DNA de D. immitis foram detectados em 35,8% (24/67) dos animais. Na amostra de um animal, não foram observadas microfilárias, mas o seu DNA foi detectado, sugerindo que as larvas tenham sido recentemente eliminadas ou os adultos tenham morrido antes da coleta da amostra. Portanto, pode-se concluir que a ocorrência de D. immitis é uma ameaça à saúde de canídeos domésticos no complexo da Ilha de Algodoal-Maiandeua, bem como para felinos e seres humanos.

Dirofilaria immitis infestation in imported police (K-9) dogs in Iraq:: clinicopathological and molecular investigations study / Infecção por Dirofilaria immitis em cães policiais importados no Iraque:: estudo clínico-patológico e de investigações moleculares

Dirofilaria immitis, the cause of heartworm infestation (HWI) or dirofilariasis, affects members of the Canidae and remains a worldwide clinical problem. In Iraq, dirofilariasis was believed absent until 2009, when the Karbala Governorate was reported as an endemic area for canine dirofilariasis. Consequently, this study intended to investigate the occurrence of Dirofilaria immitis in police dogs in one police academy in Iraq and to study the gross and histopathological changes in 5 dead dogs, as well as to identify the species of the causative parasite using PCR technique. Thirty-nine police dogs, aged between 6 months and 12 years were included in this study. For the microfilariae investigation, 5 ml blood samples were collected from all dogs in EDTA tubes and examined by Knotts method. The systemic necropsy performed in five dead dogs showed severe clinical signs of dirofilariasis and tissue specimens were sent for routine histopathological processing. For the molecular analysis, adult worms of the detected Dirofilaria spp. were used for DNA extraction andamplification of the cox1 gene. Fifteen of 39 (38.46%) dogs were diagnosed with moderate to severe microfilariasis. The dead dogs revealed typical severe clinical signs of dirofilariasis. Moreover, typical gross and histopathological changes were also seen, accompanied by generalized thromboembolic lesions, suggesting the

A Dirofilaria immitis, causadora da infestação pelo verme do coração (IVC) ou dirofilariose afeta os membros da família Canidae e ainda é um problema clínico mundial. Até o ano de 2009, acreditava-se que o Iraque fosse livre da dirofilariose, porém nessa ocasião a governadoria de Kerbala foi relatada como uma área endêmica de dirofilariose. Assim, o presente trabalho foi realizado para investigar a ocorrência da Dirofilaria immitis em cães policiais em uma academia de polícia do Iraque, estudar as alterações macroscópicas e histopatológicas em cinco cães mortos, bem como, identificar as espécies do parasita causador com o emprego da técnida de PCR. Trinta e nove cães policiais com 6 meses a 12 anos de idade foram incluídos no estudo. Amostras de sangue de cinco mililitros foram colhidas por animal, em tubos com EDTA e foram examinadas pelo método de Knott. A necropsia sistêmica foi realizada em cinco cães que haviamapresentado sinais clínicos severos de dirofilariose e espécimens dos seus tecidos foram enviados para o processamento histopatológico de rotina. Para a análise molecular dos vermes adultos de Dirofilaria spp, foi empregada a extração do DNA e a amplificação do gene cox1. Quinze de 39(38,46%) cães foram diagnosticados com uma microfilariase variável de moderada para severa. As alterações macroscópicas e histopatológicas foram acompanhadas por lesões generalizadas tro

Dirofilaria immitis infestation in imported police (K-9) dogs in Iraq: / Infecção por Dirofilaria immitis em cães policiais importados no Iraque:

Dirofilaria immitis, the cause of heartworm infestation (HWI) or dirofilariasis, affects members of the Canidae and remains a worldwide clinical problem. In Iraq, dirofilariasis was believed absent until 2009, when the Karbala Governorate was reported as an endemic area for canine dirofilariasis. Consequently, this study intended to investigate the occurrence of Dirofilaria immitis in police dogs in one police academy in Iraq and to study the gross and histopathological changes in 5 dead dogs, as well as to identify the species of the causative parasite using PCR technique. Thirty-nine police dogs, aged between 6 months and 12 years were included in this study. For the microfilariae investigation, 5 ml blood samples were collected from all dogs in EDTA tubes and examined by Knotts method. The systemic necropsy performed in five dead dogs showed severe clinical signs of dirofilariasis and tissue specimens were sent for routine histopathological processing. For the molecular analysis, adult worms of the detected Dirofilaria spp. were used for DNA extraction andamplification of the cox1 gene. Fifteen of 39 (38.46%) dogs were diagnosed with moderate to severe microfilariasis. The dead dogs revealed typical severe clinical signs of dirofilariasis. Moreover, typical gross and histopathological changes were also seen, accompanied by generalized thromboembolic lesions, suggesting the

A Dirofilaria immitis, causadora da infestação pelo verme do coração (IVC) ou dirofilariose afeta os membros da família Canidae e ainda é um problema clínico mundial. Até o ano de 2009, acreditava-se que o Iraque fosse livre da dirofilariose, porém nessa ocasião a governadoria de Kerbala foi relatada como uma área endêmica de dirofilariose. Assim, o presente trabalho foi realizado para investigar a ocorrência da Dirofilaria immitis em cães policiais em uma academia de polícia do Iraque, estudar as alterações macroscópicas e histopatológicas em cinco cães mortos, bem como, identificar as espécies do parasita causador com o emprego da técnida de PCR. Trinta e nove cães policiais com 6 meses a 12 anos de idade foram incluídos no estudo. Amostras de sangue de cinco mililitros foram colhidas por animal, em tubos com EDTA e foram examinadas pelo método de Knott. A necropsia sistêmica foi realizada em cinco cães que haviamapresentado sinais clínicos severos de dirofilariose e espécimens dos seus tecidos foram enviados para o processamento histopatológico de rotina. Para a análise molecular dos vermes adultos de Dirofilaria spp, foi empregada a extração do DNA e a amplificação do gene cox1. Quinze de 39(38,46%) cães foram diagnosticados com uma microfilariase variável de moderada para severa. As alterações macroscópicas e histopatológicas foram acompanhadas por lesões generalizadas tro

Occurrence of filarid parasites in household and sheltered dogs in the city of Joinville - Santa Catarina, Brazil / Ocorrência de filarídeos parasitos em cães domiciliados e provenientes de abrigo animal de Joinville - Santa Catarina, Brasil

Parasites from the Filariidae family are among the nematodes that can infest dogs. Some may be apathogenic, such as Acanthocheilonema reconditum, and others such as Dirofilaria immitis are potentially zoonotic and may lead dogs to death. Thus, the aim of this study was to perform a survey on filarid infection in dogs with a fixed domicile and wandering dogs temporarily sheltered in the city of Joinville, SC, Brazil. Blood samples from 429 animals were collected from 2015 to 2017 and submitted to screening for microfilariae and/or D. immitis antigens. Our results revealed that twenty-four samples (5.6%) displayed A. reconditum microfilariae and three samples (0.7%) were positive for D. immitis, totaling 27 (6.3%) positive animals for filarid parasites. Additionally, A. reconditum was more prevalent in dogs from shelters, whereas the three D. immitis positive samples were from household dogs that displayed no clinical signs of the presence of parasites. The occurrence of these parasites in dogs from Joinville indicates the importance of differential diagnosis of microfilaria species for the correct clinical management of infected dogs. Our epidemiological information may help the medical and veterinary community of the region regarding clinical suspicion of canine and human heartworm disease, as well as guide preventive actions targeting public and animal health.

Dentre os diversos nematódeos filarídeos que parasitam cães, alguns podem ser apatogênicos como Acanthocheilonema reconditum e outros como Dirofilaria immitis podem levar esses animais a óbito, além de terem potencial zoonótico. Nesse sentido, o objetivo deste trabalho foi realizar um levantamento da ocorrência de filarídeos em cães residentes em domicílio fixo e cães errantes que estavam temporariamente em um abrigo animal de Joinville-SC. Entre 2015 e 2017, amostras de sangue de 429 animais foram submetidas à busca de microfilárias ou antígenos de D. immitis, utilizando-se Método de Knott modificado e kit comercial de diagnóstico clínico. Vinte e quatro amostras (5,6%) apresentaram microfilárias de A. reconditum e três (0,7%) foram positivas para D. immitis, totalizando 27 (6,3%) cães positivos para a presença de filarídeos parasitos. A. reconditum teve maior ocorrência em cães provenientes de abrigos, já os três cães positivos para D. immitis eram domiciliados e não apresentavam suspeita clínica de dirofilariose. A presença desses parasitos em cães da região denota a importância do diagnóstico diferencial das espécies de microfilárias para o encaminhamento clínico adequado dos cães parasitados. As informações epidemiológicas obtidas podem orientar a comunidade médica e veterinária em relação à atenção para as suspeitas clínicas de dirofilariose canina e humana, assim como na orientação das medidas de prevenção visando a saúde pública e animal.

Occurrence of filarid parasites in household and sheltered dogs in the city of Joinville - Santa Catarina, Brazil / Ocorrência de filarídeos parasitos em cães domiciliados e provenientes de abrigo animal de Joinville - Santa Catarina, Brasil

Parasites from the Filariidae family are among the nematodes that can infest dogs. Some may be apathogenic, such as Acanthocheilonema reconditum, and others such as Dirofilaria immitis are potentially zoonotic and may lead dogs to death. Thus, the aim of this study was to perform a survey on filarid infection in dogs with a fixed domicile and wandering dogs temporarily sheltered in the city of Joinville, SC, Brazil. Blood samples from 429 animals were collected from 2015 to 2017 and submitted to screening for microfilariae and/or D. immitis antigens. Our results revealed that twenty-four samples (5.6%) displayed A. reconditum microfilariae and three samples (0.7%) were positive for D. immitis, totaling 27 (6.3%) positive animals for filarid parasites. Additionally, A. reconditum was more prevalent in dogs from shelters, whereas the three D. immitis positive samples were from household dogs that displayed no clinical signs of the presence of parasites. The occurrence of these parasites in dogs from Joinville indicates the importance of differential diagnosis of microfilaria species for the correct clinical management of infected dogs. Our epidemiological information may help the medical and veterinary community of the region regarding clinical suspicion of canine and human heartworm disease, as well as guide preventive actions targeting public and animal health.(AU)

Dentre os diversos nematódeos filarídeos que parasitam cães, alguns podem ser apatogênicos como Acanthocheilonema reconditum e outros como Dirofilaria immitis podem levar esses animais a óbito, além de terem potencial zoonótico. Nesse sentido, o objetivo deste trabalho foi realizar um levantamento da ocorrência de filarídeos em cães residentes em domicílio fixo e cães errantes que estavam temporariamente em um abrigo animal de Joinville-SC. Entre 2015 e 2017, amostras de sangue de 429 animais foram submetidas à busca de microfilárias ou antígenos de D. immitis, utilizando-se Método de Knott modificado e kit comercial de diagnóstico clínico. Vinte e quatro amostras (5,6%) apresentaram microfilárias de A. reconditum e três (0,7%) foram positivas para D. immitis, totalizando 27 (6,3%) cães positivos para a presença de filarídeos parasitos. A. reconditum teve maior ocorrência em cães provenientes de abrigos, já os três cães positivos para D. immitis eram domiciliados e não apresentavam suspeita clínica de dirofilariose. A presença desses parasitos em cães da região denota a importância do diagnóstico diferencial das espécies de microfilárias para o encaminhamento clínico adequado dos cães parasitados. As informações epidemiológicas obtidas podem orientar a comunidade médica e veterinária em relação à atenção para as suspeitas clínicas de dirofilariose canina e humana, assim como na orientação das medidas de prevenção visando a saúde pública e animal.(AU)

Presença de Leishmania sp. e Dirofilaria immitis em / Tumor Venéreo Transmissível Canino cutâneo / Presence of Leishmania sp. and Dirofilaria immitis in Cutaneous Canine Transmissible Venereal Tumor

Background: Canine Transmissible Venereal Tumor (CTVT) is a neoplasm transmitted by implantation of its cells into genitaland extragenital organs, while Heartworm and Visceral Leishmaniasis are zoonosis transmitted by hematophagous insectsthat are often underdiagnosed in asymptomatic animals. Coinfection by the agents of these parasitosis is well documented,however, the association of both diseases with the CTVT is still unusual. Thus, it was aimed to report a case of incidentalidentification of microfilariae of D. immitis and amastigotes forms of Leishmania sp. in cutaneous CTVT by cytology in anasymptomatic dog for the parasitosis.Case: A 6-year-old, male, mongrel, sexually intact dog from the city of Patos, Paraiba, Brazil, was presented with a cutaneouscircumscribed tumoral lesion in a region adjacent to the right olecranon, with an ulcerated surface of reddish color, havingareas of necrosis inside and larvae (myiasis), draining bloody secretion. The material was collected for cytological analysis,which proved to be Canine Transmissible Venereal Tumor (CTVT) with the presence of amastigote forms of Leishmania sp.and microfilariae of D. immitis among neoplastic cells. Blood count, serum urea, creatinine and albumin, ALT, AST, FA,CK, Na+, K+, Ca++, CK-MB, Troponin I (cTnI), Snap 4Dx Plus (Idexx®), Snap Leishmania (Idexx®), and Knott’s test wereperformed, plus chest radiography, blood pressure measurements and electrocardiogram (ECG). The alterations found corresponded to normochromic normocytic anemia, thrombocytopenia, hypoalbuminemia, microfilariae in the Knott test, increaseof CK, CK-MB and cTnI, positivity for Erlichia sp., Anaplasma sp., Leishmania sp. and Dirofilaria immitis. Furthermorecardiomegaly on radiographs and sinus arrhythmia associated with atrioventricular block (AVB) of the first degree on theECG. Euthanasia was performed after necropsy, in which adult worms were...