First report of complete albinism in Mazama americana (Erxleben, 1777) in the Biological Reserve of Tapirapé, Oriental Amazon, Brazil

Albinism is a genetic condition that results in total hypopigmentation of the eyes, fur, skin, hair, scales, and feathers of an organism. Albinism might result in a selective disadvantage for affected animals. Cases of albinism have been previously recorded in Neotropical vertebrates, such as reptiles, mammals, birds, and fish. However, observing albinism in a wild population is still considered to be a rare event. This paper reports a unique case of complete albinism in a red-brocket deer (Mazama americana) living in the Brazilian Amazon rainforest. The individual was observed within the Biological Reserve of Pará State, one of the most deforested regions of the Brazilian Amazon. The survival of the albino red-brocket deer in the wild can be related to mechanisms of apostatic selection, which theorize the survival of individual prey animals whose mutations make them less likely to be attacked by predators. In other words, the more different a prey animal is from others, the less likely it will be targeted by predators. The high abundance prey animals within the Biological Reserve of Tapirapé seems to support this prediction. This report exemplifies the importance of monitoring the biodiversity and promoting the conservation of favorable habitats to support species multiplicity in highly fragmented regions, as in the Brazilian Amazon.

First report of complete albinism in Mazama americana (Erxleben, 1777) in the Biological Reserve of Tapirapé, Oriental Amazon, Brazil EN

Albinism is a genetic condition that results in total hypopigmentation of the eyes, fur, skin, hair, scales, and feathers of an organism. Albinism might result in a selective disadvantage for affected animals. Cases of albinism have been previously recorded in Neotropical vertebrates, such as reptiles, mammals, birds, and fish. However, observing albinism in a wild population is still considered to be a rare event. This paper reports a unique case of complete albinism in a red-brocket deer (Mazama americana) living in the Brazilian Amazon rainforest. The individual was observed within the Biological Reserve of Pará State, one of the most deforested regions of the Brazilian Amazon. The survival of the albino red-brocket deer in the wild can be related to mechanisms of apostatic selection, which theorize the survival of individual prey animals whose mutations make them less likely to be attacked by predators. In other words, the more different a prey animal is from others, the less likely it will be targeted by predators. The high abundance prey animals within the Biological Reserve of Tapirapé seems to support this prediction. This report exemplifies the importance of monitoring the biodiversity and promoting the conservation of favorable habitats to support species multiplicity in highly fragmented regions, as in the Brazilian Amazon.(AU)

Avaliação do acetato de melengestrol (MGA) na sincronização do estro em fêmeas de veado-mão-curta (Mazama nana) e veado-roxo (Mazama nemorivaga): estudo piloto / Assessment of melengestrol acetate on estrus synchronization in female of Brazilian dwarf brocket deer and Amazonian brown brocket deer: pilot study

A introdução de dispositivos intravaginais em protocolos tradicionais de sincronização do estro (SE) exige contenção física e/ou química, o que pode resultar em estresse e efeitos negativos na fisiologia reprodutiva de animais selvagens. Portanto, o uso de protocolos não invasivos pode ser mais eficaz para o manejo da reprodução ex situ. O objetivo deste estudo foi avaliar a eficácia do acetato de melengestrol (MGA), na SE de uma fêmea de veado-mão-curta (Mazama nana) e uma de veado-roxo (Mazama nemorivaga). Ambas receberam uma aplicação via intramuscular de 0,25 mg de benzoato de estradiol (Sincrodiol® ) no dia 0 (D0). Entre o D0 e o D7, foi administrado 1 mg/animal/dia de MGA® Premix fracionado em duas porções (0,5 mg pela manhã e 0,5 mg a tarde), misturadas com banana. No D8, um análogo de PGF2α (Cloprostenol - Ciosin® ) foi administrado via intramuscular. Após o tratamento, o estro comportamental (EC) foi avaliado com auxílio de um macho da respectiva espécie desde D9 a D13, primeiramente a cada seis horas e, após o início do EC, a cada quatro horas. As duas fêmeas apresentaram sinais de EC nos dias 12 e 13. Na espécie Mazama nana, o EC teve uma duração aproximada de 16 horas e, na espécie Mazama nemorivaga, 20 horas. Os resultados obtidos neste estudo sugerem a eficácia da dose de 1,0 mg/animal/dia de MGA, fracionada em duas doses, na manipulação estral em fêmeas de veado-mão-curta e veado-roxo, uma vez que ambas demonstraram EC quatro dias após o protocolo de sincronização proposto.(AU)

The introduction of intravaginal devices in traditional estrus synchronization protocols requires physical and/or chemical restraint, which can result in stress and negative effects on the reproductive physiology of wild animals. Therefore, the use of non-invasive protocols might be more effective for the reproductive management ex situ. The objective of this study was to evaluate the efficacy of the melengestrol acetate (MGA) for estrus synchronization of two females: one deer-short-hand (Mazama nana) and one deer-purple (Mazama nemorivaga). Both were given an application of estradiol benzoate (Sincrodiol® ) on day 0 (D0). From D0 to D7, 1 mg/female/day of oral MGA® Premix was fractionated in two administrations (0.5 mg morning and 0.5mg afternoon) mixed with banana. On D8, a PGF2α analogue were given intramuscularly (Cloprostenol - Ciosin® ). After treatment, behavioural estrus was evaluated with the aid of a male of the respective species from D9 to D13, initially every six hours then every four hours after the onset of behavioural estrus. The two females showed behavioural estrus on days 12 and 13. In the Mazama nana, the behavioral estrus had duration of approximately 16 hours and in the Mazama nemorivaga 20 hours. The results obtained in this study suggest the efficacy of 1.0 mg/female/day of MGA fractionated in two doses for the estrus manipulation in deer-short-hand and deer-purple females, since both showed behavioural estrus four days after the proposed synchronization protocol.(AU)

Avaliação do acetato de melengestrol (MGA) na sincronização do estro em fêmeas de veado-mão-curta (Mazama nana) e veado-roxo (Mazama nemorivaga): estudo piloto / Assessment of melengestrol acetate on estrus synchronization in female of Brazilian dwarf brocket deer and Amazonian brown brocket deer: pilot study

A introdução de dispositivos intravaginais em protocolos tradicionais de sincronização do estro (SE) exige contenção física e/ou química, o que pode resultar em estresse e efeitos negativos na fisiologia reprodutiva de animais selvagens. Portanto, o uso de protocolos não invasivos pode ser mais eficaz para o manejo da reprodução ex situ. O objetivo deste estudo foi avaliar a eficácia do acetato de melengestrol (MGA), na SE de uma fêmea de veado-mão-curta (Mazama nana) e uma de veado-roxo (Mazama nemorivaga). Ambas receberam uma aplicação via intramuscular de 0,25 mg de benzoato de estradiol (Sincrodiol® ) no dia 0 (D0). Entre o D0 e o D7, foi administrado 1 mg/animal/dia de MGA® Premix fracionado em duas porções (0,5 mg pela manhã e 0,5 mg a tarde), misturadas com banana. No D8, um análogo de PGF2α (Cloprostenol - Ciosin® ) foi administrado via intramuscular. Após o tratamento, o estro comportamental (EC) foi avaliado com auxílio de um macho da respectiva espécie desde D9 a D13, primeiramente a cada seis horas e, após o início do EC, a cada quatro horas. As duas fêmeas apresentaram sinais de EC nos dias 12 e 13. Na espécie Mazama nana, o EC teve uma duração aproximada de 16 horas e, na espécie Mazama nemorivaga, 20 horas. Os resultados obtidos neste estudo sugerem a eficácia da dose de 1,0 mg/animal/dia de MGA, fracionada em duas doses, na manipulação estral em fêmeas de veado-mão-curta e veado-roxo, uma vez que ambas demonstraram EC quatro dias após o protocolo de sincronização proposto.

The introduction of intravaginal devices in traditional estrus synchronization protocols requires physical and/or chemical restraint, which can result in stress and negative effects on the reproductive physiology of wild animals. Therefore, the use of non-invasive protocols might be more effective for the reproductive management ex situ. The objective of this study was to evaluate the efficacy of the melengestrol acetate (MGA) for estrus synchronization of two females: one deer-short-hand (Mazama nana) and one deer-purple (Mazama nemorivaga). Both were given an application of estradiol benzoate (Sincrodiol® ) on day 0 (D0). From D0 to D7, 1 mg/female/day of oral MGA® Premix was fractionated in two administrations (0.5 mg morning and 0.5mg afternoon) mixed with banana. On D8, a PGF2α analogue were given intramuscularly (Cloprostenol - Ciosin® ). After treatment, behavioural estrus was evaluated with the aid of a male of the respective species from D9 to D13, initially every six hours then every four hours after the onset of behavioural estrus. The two females showed behavioural estrus on days 12 and 13. In the Mazama nana, the behavioral estrus had duration of approximately 16 hours and in the Mazama nemorivaga 20 hours. The results obtained in this study suggest the efficacy of 1.0 mg/female/day of MGA fractionated in two doses for the estrus manipulation in deer-short-hand and deer-purple females, since both showed behavioural estrus four days after the proposed synchronization protocol.

Low invasive estrous synchronization protocol for wild animals: an example with melengestrol acetate in brown brocket deer (Mazama gouazoubira)

Deer are sensitive to stressful stimuli by handling and their reproductive physiology could be altered by these procedures, making it necessary to develop less invasive protocols for ART. Melengestrol acetate (MGA), a synthetic progestin administered orally, appears as an alternative for estrous synchronization protocols (ESP), such as reported in cattle. Firstly, we compared two MGA doses (0.5 and 1.0 mg/day/animal), which would have suppression effect in estrous behavior (EB). Eight females were randomly and equally distributed in Group 1 (G1) and Group 2 (G2), which received 0.5 and 1.0 mg/day/animal respectively for 15 days (D1 to D15). Two cloprostenol (CP) applications were performed on D0 and D11. Estrus detection (ED) was performed every day. All females from G1 displayed estrus during treatment period, whereas all females from G2 displayed estrus after treatment, suggesting a suppressive effect of 1.0 mg in the EB. Once the suppressive MGA dose (1.0 mg) was defined, we used this dose for assessing ESP. The same eight females received 1.0 mg/animal for eight days (D-8 to D-1), followed by 0.25 mg of estradiol benzoate on D-8 and 265 g of CP on D0. Feces for fecal progesterone metabolites (FPM) measurement were collected from D0 until seven days after the last day of estrus. Seven females displayed estrus between 12 and 72 h after CP application, which was followed by a significant increase in FPM levels (except female MG6), suggesting the formation of corpus luteum. After ED, females were placed with a fertile male to assess the fertility of the protocol. Pregnancy was confirmed by ultrasound 30 days after mating in 3/6 individuals. Although the low effectiveness of MGA protocol, it should be considered as a promising alternative in deer ESP since this protocol has less stressful effect on the animal during reproductive management when compared to other ESP.

Low invasive estrous synchronization protocol for wild animals: an example with melengestrol acetate in brown brocket deer (Mazama gouazoubira)

Deer are sensitive to stressful stimuli by handling and their reproductive physiology could be altered by these procedures, making it necessary to develop less invasive protocols for ART. Melengestrol acetate (MGA), a synthetic progestin administered orally, appears as an alternative for estrous synchronization protocols (ESP), such as reported in cattle. Firstly, we compared two MGA doses (0.5 and 1.0 mg/day/animal), which would have suppression effect in estrous behavior (EB). Eight females were randomly and equally distributed in Group 1 (G1) and Group 2 (G2), which received 0.5 and 1.0 mg/day/animal respectively for 15 days (D1 to D15). Two cloprostenol (CP) applications were performed on D0 and D11. Estrus detection (ED) was performed every day. All females from G1 displayed estrus during treatment period, whereas all females from G2 displayed estrus after treatment, suggesting a suppressive effect of 1.0 mg in the EB. Once the suppressive MGA dose (1.0 mg) was defined, we used this dose for assessing ESP. The same eight females received 1.0 mg/animal for eight days (D-8 to D-1), followed by 0.25 mg of estradiol benzoate on D-8 and 265 g of CP on D0. Feces for fecal progesterone metabolites (FPM) measurement were collected from D0 until seven days after the last day of estrus. Seven females displayed estrus between 12 and 72 h after CP application, which was followed by a significant increase in FPM levels (except female MG6), suggesting the formation of corpus luteum. After ED, females were placed with a fertile male to assess the fertility of the protocol. Pregnancy was confirmed by ultrasound 30 days after mating in 3/6 individuals. Although the low effectiveness of MGA protocol, it should be considered as a promising alternative in deer ESP since this protocol has less stressful effect on the animal during reproductive management when compared to other ESP.(AU)

Electroretinography in eight species of neotropical deer / Eletrorretinografia em oito espécies de cervídeos neotropicais

The aim of this study was to establish normal baseline ERG values of 23 anesthetized deer belonging to 8 neotropical species (Mazama americana, Mazama nemorivaga, Mazama gouazoubira, Mazama nana, Mazama bororo, Ozotocerus bezoarticus, Odocoileus virginianus and Blastocerus dichotomus). Only right eyes were studied. Chemical restraint was performed using xylazine associated with ketamine, IM, for M. americana, M. gouazoubira, M. nemorivaga, M. nana, M. bororo, O. bezoarticus and O. virginianus. A combination of tiletamine/zolazepam diluted in xylazine 2% was used for B. dichotomus individuals. After 20min of dark adaptation, electroretinograms were obtained using a handheld electroretinography (ERG) machine using the QuickRetCheck Protocol at three different light intensities: 0.01cd.s/m2, 3cd.s/m2, and 10cd.s/m2. After light adaptation, photopic phase was recorded. A-wave amplitude recorded during pattern mixed rod/cone response in M. americana was significantly lower when compared to B. dichotomus. No other differences were observed between the species studied. ERG in Neotropical deer is applicable using a portable ERG system and did not show differences among species in relation to the retinal response at different light intensities. Therefore, the lifestyle of the species is more dictated by the selection pressure of the environment than by physiological factors.(AU)

Objetivou-se estabelecer valores de referência para eletrorretinografia (ERG) de 23 cervídeos anestesiados, de oito espécies neotropicais (Mazama americana, Mazama nemorivaga, Mazama gouazoubira, Mazama nana, Mazama bororo, Ozotocerus bezoarticus, Odocoileus virginianus e Blastocerus dichotomus). Somente os olhos direitos foram estudados. A contenção química foi realizada com cetamina/xilazina, IM, nas seguintes espécies: M. americana, M. gouazoubira, M. nemorivaga, M. nana, M. bororo, O. bezoarticus e O. virginianus. Para o B. dichotomus, foi utilizada a associação de tiletamina/zolazepam e xilazina. Após 20 minutos de adaptação ao escuro, os eletrorretinogramas foram obtidos com aparelho portátil de ERG, utilizando-se o protocolo "QuickRet Check", em três intensidades de luz: 0.01cd.s/m2, 3cd.s/m2 e 10cd.s/m2. Após adaptação à luz, realizou-se a fase fotóptica. Os valores para amplitude da onda A durante a resposta padrão mista de cones/bastonetes em M. americana foram significativamente menores quando comparados aos do B. dichotomus. Não foram observadas outras diferenças entre as espécies. A realização de ERG em cervídeos neotropicais é aplicável utilizando-se aparelho portátil e não demonstrou diferenças quanto à resposta retiniana a diferentes intensidades de luz. Dessa forma, o estilo de vida das espécies é ditado mais pela pressão de seleção do ambiente do que por fatores fisiológicos.(AU)

Electroretinography in eight species of neotropical deer / Eletrorretinografia em oito espécies de cervídeos neotropicais

The aim of this study was to establish normal baseline ERG values of 23 anesthetized deer belonging to 8 neotropical species (Mazama americana, Mazama nemorivaga, Mazama gouazoubira, Mazama nana, Mazama bororo, Ozotocerus bezoarticus, Odocoileus virginianus and Blastocerus dichotomus). Only right eyes were studied. Chemical restraint was performed using xylazine associated with ketamine, IM, for M. americana, M. gouazoubira, M. nemorivaga, M. nana, M. bororo, O. bezoarticus and O. virginianus. A combination of tiletamine/zolazepam diluted in xylazine 2% was used for B. dichotomus individuals. After 20min of dark adaptation, electroretinograms were obtained using a handheld electroretinography (ERG) machine using the QuickRetCheck Protocol at three different light intensities: 0.01cd.s/m2, 3cd.s/m2, and 10cd.s/m2. After light adaptation, photopic phase was recorded. A-wave amplitude recorded during pattern mixed rod/cone response in M. americana was significantly lower when compared to B. dichotomus. No other differences were observed between the species studied. ERG in Neotropical deer is applicable using a portable ERG system and did not show differences among species in relation to the retinal response at different light intensities. Therefore, the lifestyle of the species is more dictated by the selection pressure of the environment than by physiological factors.(AU)

Objetivou-se estabelecer valores de referência para eletrorretinografia (ERG) de 23 cervídeos anestesiados, de oito espécies neotropicais (Mazama americana, Mazama nemorivaga, Mazama gouazoubira, Mazama nana, Mazama bororo, Ozotocerus bezoarticus, Odocoileus virginianus e Blastocerus dichotomus). Somente os olhos direitos foram estudados. A contenção química foi realizada com cetamina/xilazina, IM, nas seguintes espécies: M. americana, M. gouazoubira, M. nemorivaga, M. nana, M. bororo, O. bezoarticus e O. virginianus. Para o B. dichotomus, foi utilizada a associação de tiletamina/zolazepam e xilazina. Após 20 minutos de adaptação ao escuro, os eletrorretinogramas foram obtidos com aparelho portátil de ERG, utilizando-se o protocolo "QuickRet Check", em três intensidades de luz: 0.01cd.s/m2, 3cd.s/m2 e 10cd.s/m2. Após adaptação à luz, realizou-se a fase fotóptica. Os valores para amplitude da onda A durante a resposta padrão mista de cones/bastonetes em M. americana foram significativamente menores quando comparados aos do B. dichotomus. Não foram observadas outras diferenças entre as espécies. A realização de ERG em cervídeos neotropicais é aplicável utilizando-se aparelho portátil e não demonstrou diferenças quanto à resposta retiniana a diferentes intensidades de luz. Dessa forma, o estilo de vida das espécies é ditado mais pela pressão de seleção do ambiente do que por fatores fisiológicos.(AU)

Electroretinography in eight species of neotropical deer / Eletrorretinografia em oito espécies de cervídeos neotropicais

The aim of this study was to establish normal baseline ERG values of 23 anesthetized deer belonging to 8 neotropical species (Mazama americana, Mazama nemorivaga, Mazama gouazoubira, Mazama nana, Mazama bororo, Ozotocerus bezoarticus, Odocoileus virginianus and Blastocerus dichotomus). Only right eyes were studied. Chemical restraint was performed using xylazine associated with ketamine, IM, for M. americana, M. gouazoubira, M. nemorivaga, M. nana, M. bororo, O. bezoarticus and O. virginianus. A combination of tiletamine/zolazepam diluted in xylazine 2% was used for B. dichotomus individuals. After 20min of dark adaptation, electroretinograms were obtained using a handheld electroretinography (ERG) machine using the QuickRetCheck Protocol at three different light intensities: 0.01cd.s/m2, 3cd.s/m2, and 10cd.s/m2. After light adaptation, photopic phase was recorded. A-wave amplitude recorded during pattern mixed rod/cone response in M. americana was significantly lower when compared to B. dichotomus. No other differences were observed between the species studied. ERG in Neotropical deer is applicable using a portable ERG system and did not show differences among species in relation to the retinal response at different light intensities. Therefore, the lifestyle of the species is more dictated by the selection pressure of the environment than by physiological factors.(AU)

Objetivou-se estabelecer valores de referência para eletrorretinografia (ERG) de 23 cervídeos anestesiados, de oito espécies neotropicais (Mazama americana, Mazama nemorivaga, Mazama gouazoubira, Mazama nana, Mazama bororo, Ozotocerus bezoarticus, Odocoileus virginianus e Blastocerus dichotomus). Somente os olhos direitos foram estudados. A contenção química foi realizada com cetamina/xilazina, IM, nas seguintes espécies: M. americana, M. gouazoubira, M. nemorivaga, M. nana, M. bororo, O. bezoarticus e O. virginianus. Para o B. dichotomus, foi utilizada a associação de tiletamina/zolazepam e xilazina. Após 20 minutos de adaptação ao escuro, os eletrorretinogramas foram obtidos com aparelho portátil de ERG, utilizando-se o protocolo "QuickRet Check", em três intensidades de luz: 0.01cd.s/m2, 3cd.s/m2 e 10cd.s/m2. Após adaptação à luz, realizou-se a fase fotóptica. Os valores para amplitude da onda A durante a resposta padrão mista de cones/bastonetes em M. americana foram significativamente menores quando comparados aos do B. dichotomus. Não foram observadas outras diferenças entre as espécies. A realização de ERG em cervídeos neotropicais é aplicável utilizando-se aparelho portátil e não demonstrou diferenças quanto à resposta retiniana a diferentes intensidades de luz. Dessa forma, o estilo de vida das espécies é ditado mais pela pressão de seleção do ambiente do que por fatores fisiológicos.(AU)

Accessing camera trap survey feasibility for estimating Blastocerus dichotomus (Cetartiodactyla, Cervidae) demographic parameters

ABSTRACT Demographic information is the basis for evaluating and planning conservation strategies for an endangered species. However, in numerous situations there are methodological or financial limitations to obtain such information for some species. The marsh deer, an endangered Neotropical cervid, is a challenging species to obtain biological information. To help achieve such aims, the study evaluated the applicability of camera traps to obtain demographic information on the marsh deer compared to the traditional aerial census method. Fourteen camera traps were installed for three months on the Capão da Cruz floodplain, in state of São Paulo, and ten helicopter flyovers were made along a 13-kilometer trajectory to detect resident marsh deer. In addition to counting deer, the study aimed to identify the sex, age group and individual identification of the antlered males recorded. Population estimates were performed using the capture-mark-recapture method with the camera trap data and by the distance sampling method for aerial observation data. The costs and field efforts expended for both methodologies were calculated and compared. Twenty independent photographic records and 42 sightings were obtained and generated estimates of 0.98 and 1.06 ind/km², respectively. In contrast to the aerial census, camera traps allowed us to individually identify branch-antlered males, determine the sex ratio and detect fawns in the population. The cost of camera traps was 78% lower but required 20 times more field effort. Our analysis indicates that camera traps present a superior cost-benefit ratio compared to aerial surveys, since they are more informative, cheaper and offer simpler logistics. Their application extends the possibilities of studying a greater number of populations in a long-term monitoring.

RESUMO Informações demográficas constituem a base para a avaliação e planejamento de estratégias de conservação de uma espécie ameaçada. No entanto, em muitas situações existem limitações metodológicas ou financeiras para a obtenção de tais informações para algumas espécies. O cervo-do-pantanal, um cervídeo neotropical ameaçado de extinção, é uma espécie desafiadora para obtenção de informações biológicas. Para suprir essa demanda, o presente trabalho avaliou a aplicabilidade das armadilhas fotográficas para obtenção de informações demográficas de cervo-do-pantanal em comparação com o tradicional método de censo aéreo. Na várzea Capão da Cruz, Estado de São Paulo, foram instaladas 14 armadilhas fotográficas durante três meses e realizados dez sobrevoos de helicóptero num trajeto de 13 km para detecção dos cervos-do-pantanal ali residentes. Além da contagem dos animais, objetivou-se identificar o sexo, a faixa etária e a identificação individual dos machos galhados registrados. As estimativas populacionais foram realizadas pelo método de captura-marcação-recaptura com os dados de armadilhas fotográficas e pelo método de amostragem por distâncias para os dados de observação aérea. Foram contabilizados e ponderados os custos e esforços de campo despendidos para ambas metodologias. Obteve-se 20 registros fotográficos independentes e 42 visualizações que geraram estimativas de 0,98 e 1,06 ind./km² respectivamente. Ao contrário do censo aéreo, as armadilhas fotográficas permitiram a identificação individual dos machos galhados, a proporção sexual e a detecção de filhotes na população. O custo das armadilhas fotográficas foi 78% menor, porém demandou um esforço de campo 20 vezes maior. Avaliamos que as armadilhas fotográficas apresentaram uma relação custo-benefício superiores em relação aos levantamentos aéreos, por ser mais informativa e barata e com uma logística mais simples. Sua aplicação abre a possibilidade para o estudo de um número maior de populações e o monitoramento contínuo e de longo prazo.

Accessing camera trap survey feasibility for estimating Blastocerus dichotomus (Cetartiodactyla, Cervidae) demographic parameters / Avaliação da viabilidade do uso de armadilhas fotográficas para estimar parâmetros demográficos de Blastocerus dichotomus (Cetartiodactyla, Cervidae)

Demographic information is the basis for evaluating and planning conservation strategies for an endangered species. However, in numerous situations there are methodological or financial limitations to obtain such information for some species. The marsh deer, an endangered Neotropical cervid, is a challenging species to obtain biological information. To help achieve such aims, the study evaluated the applicability of camera traps to obtain demographic information on the marsh deer compared to the traditional aerial census method. Fourteen camera traps were installed for three months on the Capão da Cruz floodplain, in state of São Paulo, and ten helicopter flyovers were made along a 13-kilometer trajectory to detect resident marsh deer. In addition to counting deer, the study aimed to identify the sex, age group and individual identification of the antlered males recorded. Population estimates were performed using the capture-mark-recapture method with the camera trap data and by the distance sampling method for aerial observation data. The costs and field efforts expended for both methodologies were calculated and compared. Twenty independent photographic records and 42 sightings were obtained and generated estimates of 0.98 and 1.06 ind/km², respectively. In contrast to the aerial census, camera traps allowed us to individually identify branch-antlered males, determine the sex ratio and detect fawns in the population. The cost of camera traps was 78% lower but required 20 times more field effort. Our analysis indicates that camera traps present a superior cost-benefit ratio compared to aerial surveys, since they are more informative, cheaper and offer simpler logistics. Their application extends the possibilities of studying a greater number of populations in a long-term monitoring.(AU)

Informações demográficas constituem a base para a avaliação e planejamento de estratégias de conservação de uma espécie ameaçada. No entanto, em muitas situações existem limitações metodológicas ou financeiras para a obtenção de tais informações para algumas espécies. O cervo-do-pantanal, um cervídeo neotropical ameaçado de extinção, é uma espécie desafiadora para obtenção de informações biológicas. Para suprir essa demanda, o presente trabalho avaliou a aplicabilidade das armadilhas fotográficas para obtenção de informações demográficas de cervo-do-pantanal em comparação com o tradicional método de censo aéreo. Na várzea Capão da Cruz, Estado de São Paulo, foram instaladas 14 armadilhas fotográficas durante três meses e realizados dez sobrevoos de helicóptero num trajeto de 13 km para detecção dos cervos-do-pantanal ali residentes. Além da contagem dos animais, objetivou-se identificar o sexo, a faixa etária e a identificação individual dos machos galhados registrados. As estimativas populacionais foram realizadas pelo método de captura-marcação-recaptura com os dados de armadilhas fotográficas e pelo método de amostragem por distâncias para os dados de observação aérea. Foram contabilizados e ponderados os custos e esforços de campo despendidos para ambas metodologias. Obteve-se 20 registros fotográficos independentes e 42 visualizações que geraram estimativas de 0,98 e 1,06 ind./km² respectivamente. Ao contrário do censo aéreo, as armadilhas fotográficas permitiram a identificação individual dos machos galhados, a proporção sexual e a detecção de filhotes na população. O custo das armadilhas fotográficas foi 78% menor, porém demandou um esforço de campo 20 vezes maior. Avaliamos que as armadilhas fotográficas apresentaram uma relação custo-benefício superiores em relação aos levantamentos aéreos, por ser mais informativa e barata e com uma logística mais simples. Sua aplicação abre a [...](AU)

Accessing camera trap survey feasibility for estimating Blastocerus dichotomus (Cetartiodactyla, Cervidae) demographic parameters / Avaliação da viabilidade do uso de armadilhas fotográficas para estimar parâmetros demográficos de Blastocerus dichotomus (Cetartiodactyla, Cervidae)

Demographic information is the basis for evaluating and planning conservation strategies for an endangered species. However, in numerous situations there are methodological or financial limitations to obtain such information for some species. The marsh deer, an endangered Neotropical cervid, is a challenging species to obtain biological information. To help achieve such aims, the study evaluated the applicability of camera traps to obtain demographic information on the marsh deer compared to the traditional aerial census method. Fourteen camera traps were installed for three months on the Capão da Cruz floodplain, in state of São Paulo, and ten helicopter flyovers were made along a 13-kilometer trajectory to detect resident marsh deer. In addition to counting deer, the study aimed to identify the sex, age group and individual identification of the antlered males recorded. Population estimates were performed using the capture-mark-recapture method with the camera trap data and by the distance sampling method for aerial observation data. The costs and field efforts expended for both methodologies were calculated and compared. Twenty independent photographic records and 42 sightings were obtained and generated estimates of 0.98 and 1.06 ind/km², respectively. In contrast to the aerial census, camera traps allowed us to individually identify branch-antlered males, determine the sex ratio and detect fawns in the population. The cost of camera traps was 78% lower but required 20 times more field effort. Our analysis indicates that camera traps present a superior cost-benefit ratio compared to aerial surveys, since they are more informative, cheaper and offer simpler logistics. Their application extends the possibilities of studying a greater number of populations in a long-term monitoring.

Informações demográficas constituem a base para a avaliação e planejamento de estratégias de conservação de uma espécie ameaçada. No entanto, em muitas situações existem limitações metodológicas ou financeiras para a obtenção de tais informações para algumas espécies. O cervo-do-pantanal, um cervídeo neotropical ameaçado de extinção, é uma espécie desafiadora para obtenção de informações biológicas. Para suprir essa demanda, o presente trabalho avaliou a aplicabilidade das armadilhas fotográficas para obtenção de informações demográficas de cervo-do-pantanal em comparação com o tradicional método de censo aéreo. Na várzea Capão da Cruz, Estado de São Paulo, foram instaladas 14 armadilhas fotográficas durante três meses e realizados dez sobrevoos de helicóptero num trajeto de 13 km para detecção dos cervos-do-pantanal ali residentes. Além da contagem dos animais, objetivou-se identificar o sexo, a faixa etária e a identificação individual dos machos galhados registrados. As estimativas populacionais foram realizadas pelo método de captura-marcação-recaptura com os dados de armadilhas fotográficas e pelo método de amostragem por distâncias para os dados de observação aérea. Foram contabilizados e ponderados os custos e esforços de campo despendidos para ambas metodologias. Obteve-se 20 registros fotográficos independentes e 42 visualizações que geraram estimativas de 0,98 e 1,06 ind./km² respectivamente. Ao contrário do censo aéreo, as armadilhas fotográficas permitiram a identificação individual dos machos galhados, a proporção sexual e a detecção de filhotes na população. O custo das armadilhas fotográficas foi 78% menor, porém demandou um esforço de campo 20 vezes maior. Avaliamos que as armadilhas fotográficas apresentaram uma relação custo-benefício superiores em relação aos levantamentos aéreos, por ser mais informativa e barata e com uma logística mais simples. Sua aplicação abre a [...]

PROSPECÇÃO DE REGIÕES INFORMATIVAS DO GENOMA MITOCONDRIAL DE CERVIDAE

A tribo Odocoileini é o grupo mais heterogêneo, com maiores problemas e controvérsias taxonômicas dos cervídeos. Ela é dividida em duas subtribos bem suportadas: Odocoileina e Blastocerina. Todos os cervídeos da região Neotropical são da tribo Odocoileini e suas espécies representantes destacam-se pela ampla variedade morfológica e de habitats. Dentre as espécies tem Mazama gouazoubira (veado-catingueiro) a qual possui uma grande amplitude em sua distribuição geográfica e na diversidade de habitats que ocupa. No Brasil pode ocupar quase todos os biomas, exceto a Amazônia. O veado-catingueiro apresenta ainda variações regionais, ecológicas e individuais de coloração, além de uma alta diversidade haplotípica. Por essa razão análises genéticas são importantes, já que, fornecem informações valiosas para taxonomia e para determinação da existência de estruturação populacional e, consequentemente, unidades evolutivamente significativas distintas. Para tanto, primers foram confeccionados a partir das sequências existentes (Genbank) e das produzidas no presente projeto em uma análise in silico das sequências das regiões Citocromo B, ND5, ND2 e D-loop (região controle) do DNA mitocondrial, visto que já se conhece o mitogenoma da espécie. As sequências foram alinhadas com as várias existentes para a mesma espécie e de espécies distintas, buscando-se áreas polimórficas flanqueadas por regiões conservadas. Prospectamos primers que permitam amplificação de pequenos fragmentos (150-250pb) informativos das diferentes regiões. Os primers foram utilizados para amplificação do mtDNA em amostras de fezes de veado-catingueiro, sendo testada a eficiência de amplificação para os diferentes marcadores. Também foram realizadas duas análises Máxima Verossimilhança e a Inferência Bayesiana para confirmação dos sinais filogenéticos e uma rede de haplotipos para analises intrapopulacionais das matrizes dos fragmentos separados e concatenadas. Nossos resultados mostraram que os marcadores testados possuem sinal filogenético relevante para estudos filogenéticos preliminares, identificação de gêneros e populações, principalmente quando a amostra contém pouco DNA de qualidade. Os fragmentos das regiões podem apresentar resultados de diversidade genética similares ao da região completa, a diversidade depende do local da região onde fragmento se encontra. Os amplicons menores tem maior facilidade de amplificação no material fecal e que sua concatenação pode gerar um marcador de importância para análises filogenéticas em cervídeos.

The Odocoileini tribe is the most heterogeneous group, with the greatest taxonomic problems and controversies among deer. It is divided into two well-supported subtribes: Odocoilein and Blastocerin. All deer in the Neotropical region are from the Odocoileini tribe and their representative species stand out for their wide morphological and habitat variety. Among the species there is Mazama gouazoubira (brocket deer) which has a wide range of geographic distribution and the diversity of habitats it occupies. In Brazil it can occupy almost all biomes, except for the Amazon. The brocket deer also presents regional, ecological and individual color variations, in addition to a high haplotype diversity. For this reason genetic analyzes are important, as they provide valuable information for taxonomy and for determining the existence of population structure and, consequently, distinct evolutionarily significant units. For this purpose, primers were made from existing sequences (Genbank) and those produced in this project in an in silico analysis of sequences from the Cytochrome B, ND5, ND2 and D-loop (control region) regions of the mitochondrial DNA, since the mitogenome of the species is known. The sequences were aligned with the several existing ones for the same species and from different species, looking for polymorphic areas flanked by conserved regions. We are looking for primers that allow the amplification of small fragments (150-250bp) that are informative from different regions. The primers were used for mtDNA amplification in brocket deer feces samples, and the amplification efficiency for the different markers was tested. Two Maximum Likelihood analyzes and Bayesian Inference were also performed to confirm the phylogenetic signals and a haplotype network for intrapopulation analyzes of the matrices of the separated and concatenated fragments. Our results showed that the tested markers have a relevant phylogenetic signal for preliminary phylogenetic studies, identification of genera and populations, especially when the sample contains little quality DNA. The fragments of the regions can show similar genetic diversity results to the complete region, the diversity depends on the location of the region where the fragment is found. Smaller amplicons are easier to amplify in fecal material and their concatenation can generate an important marker for phylogenetic analysis in deer.

CARACTERIZAÇÃO DE HOMOLOGIAS ENTRE SONDAS DE BACs DE BOVINO (Bos taurus) E CROMOSSOMOS DE VEADO-CATINGUEIRO (Mazama gouazoubira): NOVAS PERSPECTIVAS EM ESTUDOS INTRA E INTERESPECÍFICOS DO GÊNERO MAZAMA

A família Cervidae é reconhecida por uma acentuada diversidade cariotípica, reflexo de sua elevada taxa de evolução cromossômica. Os cervídeos neotropicais do gênero Mazama destacam-se por um expressivo polimorfismo cromossômico. Embora as espécies desse gênero demonstrem uma elevada variação nos valores de seus números diploides (2n), elas são morfologicamente semelhantes e estão intimamente relacionadas. Por consequência, o grupo é cercado de incertezas taxonômicas. A evolução cromossômica das espécies do gênero a partir do cariótipo hipotético ancestral, retido pelo veado-catingueiro (Mazama gouazoubira, 2n = 70), é pouco compreendida e carece de análise citogenética molecular. Dessa forma, o presente estudo caracterizou as homologias cromossômicas entre bovino (Bos taurus, 2n = 60) e M. gouazoubira usando uma combinação de clones cromossomos artificiais de bactéria (BAC) derivados do genoma bovino. Por hibridização in situ fluorescente, foi construído um mapa citogenético com 106 novos marcadores para os 34 pares de autossomos e para o cromossomo X do veado-catingueiro. As sondas de BACs de bovino mostraram-se satisfatórias para o estabelecimento de marcadores cromossômicos em cervídeos. Foi demonstrado que as diferenças evolutivas entre o cariótipo de B. taurus e os cromossomos do M. gouazoubira incluem 5 fissões e uma fusão em tandem em bovino. Cada grupo de sondas de BACs derivadas dos pares cromossômicos 1, 2, 5, 6, 8 e 9 apresentaram sinais de hibridização em dois cromossomos diferentes, enquanto os pares 28 e 26 estão fusionados em tandem em um único cromossomo acrocêntrico em M. gouazoubira. Para os demais cromossomos, as BACs derivadas do mesmo autossomo bovino apresentaram sinais em um único par cromossômico no veado-catingueiro. Além disso, as análises detectaram que os homólogos aos pares do autossomo 1 e do cromossomo X apresentaram rearranjos intracromossômicos no M. gouazoubira. Sendo assim, espera-se que os estudos futuros usando os marcadores produzidos resultem em um grande conhecimento taxonômico e reprodutivo para o gênero os cervídeos neotropicais.

The Cervidae family presents a marked karyotypic variation as a reflection of its high rate of chromosome evolution. The Neotropical deer from the genus Mazama stands out for its expressive chromosomal polymorphism. Although the species of the genus differ in the values of their diploid number (2n), they are closely related and similar morphologically. Due to this, the group exhibits taxonomic uncertainties. The chromosomal evolution of the Mazama species from the hypothetical ancestral karyotype, retained by the gray brocket Mazama gouazoubira (2n = 70), is poorly understood and lacks molecular cytogenetic analysis. Then, the present study revealed chromosomal homologies between bovine (Bos taurus, 2n = 60) and M. gouazoubira using a combination of bacterial artificial chromosome (BAC) clones derived from cattle. By fluorescent in situ hybridization, we constructed a cytogenetic map with 106 new markers to the 34 gray brocket autosomes and the X chromosome. Our results showed that bovine BAC probes proved to be satisfactory for the establishment of chromosomal markers in deer. The evolutionary differences between the bovine and gray brocket deer chromosomes include five fissions and one tandem fusion in the cattle. Each group of BAC probes derived from bovine chromosomes pairs 1, 2, 5, 6, 8, and 9 presented hybridization signals on two different chromosomes, while pairs 28 and 26 are fused in tandem on a single acrocentric chromosome in M. gouazoubira. For the other chromosomes, the BAC probes derived from the same bovine autosome showed signals in a unique chromosome pair in M. gouazoubira. Moreover, we detected that the homologous to the autosome pair 1 and X chromosome are intrachromosomally rearranged in M. gouazoubira. Therefore, it is expected that future studies using the produced markers result in great taxonomic and reproductive knowledge for brocket deer.

PADRONIZAÇÃO DE ELISA PARA DETECÇÃO DE ANTICORPOS ANTI-Toxoplasma gondii E Neospora caninum EM SORO E FEZES DE CERVÍDEOS

A maior parte dos dados descritos na literatura sobre patógenos de cervídeos neotropicais são provenientes de levantamentos sorológicos, informações sobre vías de transmissão e avaliações clínicas ainda são escasos. O presente trabalho teve como objetivos: a) estimar a prevalência de cervídeos positivos para Toxoplasma gondii e Neospora canium em 92 animais mantidos em cativeiro; b) Avaliar a probabilidade de diferentes vias de transmissão do T. gondii e N. caninum; c) avaliar a sintomatologia clínica e resposta imune humoral de machos de veados-catingueiros (Mazama gouazoubira) infectados experimentalmente com oocistos da cepa ME49 (genotipo tipo II) de T. gondii e d) padronizar a técnica de ELISA indireta para detecção de anticorpos fecais específicos para T. gondii e N. caninum. Inicialmente, foram colhidas amostras dos animais cervídeos pertencentes a dois criadouro conservacionistas e comparados os resultados sorológicos obtidos nos testes de imunofluorescência indireta (RIFI) e ELISA indireto pelo teste de concordância Kappa de Cohen. Em seguida, foram desenhadas árvores genealógicas dos animais de cada espécie para estimativa da taxa de transmissão congênita de cada doença. A prevalência estimada para T. gondii foi de 20,73% pela tecnica de RIFI e 25,60% por ELISA, apresenando uma concordância rasoável ( = 0,277) entre as duas técnicas sorológicas utilizadas. Já para N. caninum a prevalência estimada foi de 40,24% por RIFI e 39,02% por ELISA com uma correlação quase perfeita ( = 0,83) entre as técnicas. A taxa de transmissão congênita, estimada com base em números de filhos positivos de mães positivas entre o número total de filhos de mães positivas, diferiu bastante entre as doenças, sendo de 0% para toxoplasmose e 81,25% para neosporose. No capítulo 3, para a infecção experimental dos animais, quatro machos da espécie Mazama gouazoubira foram infectados experimentalmente com 5000 oocistos esporulados de T. gondii da cepa ME49, enquanto um animal soronegativo foi usado como controle. Os animais foram monitorados quanto aos parâmetros clínicos de -7 a 40 dias após a infecção (dpi). Amostras de sangue foram coletadas semanalmente até 49 dpi para detecção de anticorpos pelo teste de ELISA. A cada 15 dias os animais foram submetidos à contenção química e coleta de sêmen por eletroejaculação e o material genético das amostras de semen foi extraído para posterior análise por PCR para T. gondii. Apenas dois dos quatro animais infectados desenvolveram resposta de anticorpos detectável no teste de ELISA, e mesmo sem nenhum animal ter manifestado sinais clínicos da infecção, o material genético do parasita foi encontrado no sêmen dos animais soropositivos aos 35 e 49 dpi. A terceira etapa do projeto visou a padronização da técnica de ELISA para detecção de imunoglobulinas fecais contra os dois patógenos. Amostras de fezes frescas foram coletadas, extraídas e armazenadas em nitrogênio líquido ou processadas imediatamente. Um pool de amostras de animais soropositivos foi utilizado como controle positivo para N. caninum e um pool de amostras de animais experimentalmente infectados foi usado como controle para T. gondii. Mesmo com diversas alterações de protocolos não foi possível contornar o problema da baixa iv especificidade do teste, constatada pelos altos ruídos nas leituras das placas. Foi possível concluir que as técnicas sorológicas provaram ser muito úteis para estudos epidemiológicos em animais de cativeiro, tendo diversas aplicações além da simples estimativa da prevalência, porém sem a padronização de um método não invasivo de detecção de anticorpos, estudos epidemiológicos em populações de vida-livre ainda são um grande desafio. Nesses estudos foi possível inferir que a principal via de transmissão do N. caninum em cervídeos é a via congênita, de forma semelhante ao que se observa em bovinos , enquanto que o T. gondii parece utilizar da via horizontal para a transmissão na maioria dos casos. Além disso , a infecção experimental com 5000 oocistos esporulados de T. gondii não causou sinais clínicos nos animais estudados, sugerindo que a espécie apresenta certa resistência à doença, por outro lado, a detecção do DNA do parasito no sêmen dos animais sugere que a transmissão sexual é uma possibilidade nessas espécies, o que deve ser levado em consideração por criadouros conservacionistas.

Most of the data on neotropical deer pathogens come from serological surveys, little is known about transmission routes and clinical evaluations.The present study aimed to: a) estimate the prevalence of positive cervids for Toxoplasma gondii and Neospora canium in animals kept in captivity; b) Assess different routes of infection of T. gondii and N.caninum on these deer populations; c) Evaluate the clinical symptomatology and humoral immune response of male brocket deer (Mazama gouazoubira) experimentally infected with T. gondii (ME49 strain) oocysts; and d) Standardize an indirect ELISA technique for non-invasive detection of specific fecal antibodies to T. gondii and N. caninum. Initially, deer serum samples collected from animals from two conservation breeding centers were tested by both techniques making it possible to compare the results obtained in the indirect immunofluorescence tests (IFAT) and indirect ELISA by the Cohen's Kappa concordance test. Furthermore, family trees were drawn for each species to estimate the congenital transmission rate of both diseases. The T. gondii prevalence were 20,73% by IFAT and 25,60 by ELISA, with , with an fair agreement of = 0.277 between the two serological techniques. For N. caninum, the antibody prevalence was 40,24% by IFAT and 39,02% by ELISA, with a almost perfect correlation of = 0.83 between techniques. The congenital transmission rate, estimated by the number of positive offspring from positive mothers by the total of positive mother offspring, differed significantly between diseases, resulting in 0% for Toxoplasmosis and 81,25% for Neosporosis. In Chapter 3, four Mazama gouazoubira males were inoculated with 5000 sporulated T. gondii oocysts (ME49), while one seronegative animal was used as a control. Animals were monitored for clinical parameters from -7 to 40 days post-infection (dpi). Blood samples were collected weekly up to 49 dpi for antibody detection by the previously standardized ELISA test. Once every 15 days, the animals were chemical restraint for semen collection by electroejaculation. DNA of the semen samples was extracted for T. gondii PCR analysis. Only two from four infected animals developed an antibody response detectable in the ELISA test, and despite the animals didnt manifest any clinical signs, the parasite's genetic material was found in the semen of the seropositive animals at 35 and 49 dpi. In the third step, the standardization of ELISA technique for detection of fecal immunoglobulins against the two pathogens was carried out, aiming to apply the methodology to epidemiological studies in free-living animals. Fresh stool samples were collected, extracted and stored in liquid nitrogen or processed immediately. A pool of samples from seropositive animals was used as a positive control for N. caninum and a pool of samples from experimentally infected animals was used as a control for T. gondii. Even with several protocol changes, it was not possible to overcome the problem of the low specificity evidenced by the high background at plate readings. Finally, it was possible to conclude that serological techniques have proved very useful for epidemiological studies in captive animals, having several applications beyond the simple estimation of prevalence, but without the standardization of a non-invasive method of detection of antibodies, epidemiological studies in free-living populations are still challenging. Whith these studies it was possible to infer tha the congenital transmission is the major route of infection os N. caninum in neotropical deer, in the other hand, horizontal transmission seem to be more important to T. gondii epidemiology in these species. Furthermore, the experimental infection with 5000 T. gondii oocysts did not caused clinical signs in Mazama gouazoubira, implying that the specie present some resistance to the disease, still, the detection of the parasite in semen samples indicate the possibility of sexual transmission of T. gondii in cervids, vi and breeding centers should take this into account for better reproductive performance of the animals

SEGREGAÇÃO GAMÉTICA DE CROMOSSOMOS ENVOLVIDOS EM TRANSLOCAÇÕES E SEU PAPEL NO ISOLAMENTO REPRODUTIVO DE ESPÉCIES DO GÊNERO Mazama (MAMMALIA; CERVIDAE)

A família Cervidae destaca-se por possuir uma das maiores taxas de evolução cariotípica dentre os mamíferos, reflexo de uma fragilidade cromossômica acentuada, que facilita a ocorrência de quebras e rearranjos cromossômicos. Estas, quando vinculadas ao isolamento geográfico em um curto período, poderiam levar as populações a um processo de especiação. Isso é evidenciado na ampla diversificação cariotípica da família, apresentando exemplos extremos de baixo e alto número diploide, como Muntiacus muntjak (2n = 6/7) e Capreolus pygargus (2n = 70 + 1 14 Bs), respectivamente. Muitas espécies crípticas estão escondidas pela grande similaridade morfológica, acompanhada de ampla variação cariotípica, intra e interespecífica. Animais portadores de rearranjos cromossômicos podem apresentar diferentes padrões na segregação meiótica durante a espermiogênese, dando passo à formação de gametas desbalanceados. Isso pode estar relacionado com desordens reprodutivas, como evidenciado em animais domésticos, onde é observada a queda da capacidade reprodutiva. A técnica de hibridização in situ fluorescente (FISH) permite a marcação, identificação e localização dos cromossomos envolvidos nas translocações a partir de sondas de DNA com marcadores fluorescentes. Dada a falta de sondas específicas para espécies de cervídeos, diversos estudos apontam para o uso de sondas bovinas devido ao conhecido mapa genético bovino e à proximidade filogenética entre as famílias Cervidae e Bovidae. Dessa forma, a aplicação da FISH em células espermáticas (também chamada de sperm-FISH) permite estimar a proporção de gametas normais/balanceados e desbalanceados (portadores de aneuploidias). Assim, o presente estudo teve como objetivo: a) Estimar a proporção dos produtos da segregação meiótica em indivíduos portadores de translocações cromossômicas dentro do gênero Mazama, b) Avaliar os potenciais efeitos dos rearranjos cromossômicos na aptidão reprodutiva dos portadores, e c) Avaliar o papel dos rearranjos cromossômicos nos processos de especiação dentro do gênero Mazama. Na espécie M. gouazoubira foi possível avaliar uma translocação Robertsoniana (TR) em quatro animais, sendo que dois incluíam a presença de uma inversão paracêntrica (IPA). O valor médio dos espermatozoides desbalanceados nos portadores da TR/IPA (6,68%) quase dobrou em relação àquele dos portadores de TR (3,76%), mas não houve diferença significativa. Na espécie M. americana, foram avaliadas TRs em diferentes citótipos e fusões em tandem (FT) heterozigotas em híbridos entre citótipos da mesma linhagem cromossômica. Os portadores de TR apresentaram valor médio para a taxa de segregação adjacente de 1,80% e os portadores da FT apresentaram valor médio de 29,07% para os produtos equivalentes a aqueles da segregação adjacente na TR. Nossos resultados indicam um impacto de baixo a moderado do rearranjo cromossômico na aptidão reprodutiva dos machos de M. gouazoubira heterozigotos para TR e TR/IPA e um impacto baixo no caso das TRs em M. americana. No caso dos híbridos de M. americana portadores de FT em heterozigose, os resultados sugerem a formação de uma barreira pós-zigótica eficiente representada pela redução severa da fertilidade dos indivíduos.

The family Cervidae stands out for showing one of the highest rates of karyotype evolution among mammals, reflecting a marked chromosomal fragility. Thus, the occurrence of chromosomal breaks and rearrangements is facilitated and lead populations to process of speciation when linked to geographic isolation in a short period. Besides, a wide karyotype diversification of the family has been observed in their extreme examples of low and high diploid numbers, such as Muntiacus muntjak (2n = 6/7) and Capreolus pygargus (2n = 70 + 1 14 Bs), respectively. Many cryptic species are hidden due to the great morphological similarity, accompanied by wide intra and interspecific karyotypic variation. Thus, animals with chromosomal rearrangements may present different patterns of meiotic segregation during spermiogenesis, giving way to the formation of unbalanced gametes. This can be related to reproductive disorders, as observed in domestic animals with reproductive fitness reduction. The fluorescent in situ hybridization (FISH) technique allows the marking, identification, and location of the chromosomes involved in translocations using DNA probes with fluorescent markers. Given the lack of specific probes for deer species, several studies point to the use of bovine probes due to the well-known bovine genetic map and the phylogenetic proximity between families Cervidae and Bovidae. Thus, the application of FISH in sperm cells (also called sperm-FISH) allows estimating the proportion of normal/balanced and unbalanced gametes (carriers of aneuploidies). The present study aimed to a) Estimate the mean rate of meiotic segregation products in carriers of chromosomal translocations within the genus Mazama, b) Assess the potential effects of chromosomal translocations on the reproductive fitness of carriers, and c) Assess the role of chromosomal polymorphisms in speciation processes within the genus Mazama. In the M. gouazoubira species, it was possible to evaluate a Robertsonian translocation (RT) in four animals, two of which included the presence of a paracentric inversion (PAI). The mean value of unbalanced gametes in carriers of the RT/PAI (6.68%) almost doubled in relation to that of carriers with the RT (3.76%); however, no significant difference was observed. Regarding M. americana, RTs were evaluated in different cytotypes and heterozygous tandem fusion (TF) was evaluated in hybrids from the same chromosomal lineage cytotypes. Carriers of RT showed a mean value for the adjacent segregation rate of 1.80% and carriers of TF showed a mean value of 29.07% for products equivalent to those of the adjacent segregation in RT. Our results indicate low to moderate impacts of chromosomal rearrangement on the reproductive fitness of M. gouazoubira heterozygotes for RT and RT/PAI and a low impact in the case of RTs in M. americana. In the case of M. americana hybrids with heterozygous TF, our results suggest an efficient postzygotic barrier represented by the severe reduction in the individuals' fertility.

EFEITO DA OCITOCINA E CLOPROSTENOL NOS PARÂMETROS SEMINAIS DE VEADO-MATEIRO-DO-SUL (Mazama rufa) AO LONGO DO PROCEDIMENTO DE ELETROEJACULAÇÃO

O veado-mateiro (Mazama americana) é uma espécie de cervídeo neotropical com ampla distribuição classificado como Dados Deficientes pela IUCN. Essa classificaçãoo se dá pelo fato da espécie possuir inconsistência taxonômica que inviabiliza a aplicação dos protocolos utilizados para categorizar as espécies em categorias de ameaça. Estudos morfológicos, moleculares e citogenéticos demonstraram que se trata de um complexo de espécies que possuem características morfológicas semelhante, demonstrando a existência de seis citótipos para a espécie. A partir de material coletado na localidade tipo da espécie (Caiena Guiana Francesa) e de material coletado próximo localidade tipo de M. rufa (Foz do Iguaçu, PR) ficou comprovado que o citotipo Paraná é na verdade a espécie de ceado-mateiro-do-sul (M. rufa) descrito por Illiger em 1811. O veado-mateiro-do-sul ainda não foi classificado devido a sua redescrição recente (2018), porém acredita-se que este esteja vulnerável. Sendo assim, se faz prioritário o estabelecimento de estratégias de conservação in situ e ex situ para a espécie, destacando a formação de banco de germoplasma. A colheita de sêmen pode ser feita por diferentes técnicas, porém para cervídeos as técnicas mais utilizadas são a colheita por vagina artificial e a eletroejaculação. Na colheita por eletroejaculação, o animal deve estar contido quimicamente e recebe estímulos elétricos nas glândulas acessórias que irão promover a ejaculação. A desvantagem da técnica sêmen colhido é mais diluído devido a maior secreção de plasma seminal, mas apresenta a vantagem de poder coletar material de animal cativo e de vida livre sem a necessidade que que o mesmo apresente libido. Com a finalidade de se minimizar os efeitos deletérios da técnica, tem se associado o uso de protocolos hormonais utilizando ocitocina e cloprostenol (prostaglandina F2 sintética) aumentando o volume e concentração seminal, além de diminuir o tempo e número de estímulos necessário para a eletroejaculação devido a sua ação favorecendo a contração de musculo liso dos túbulos seminíferos e epididimo. Assim, no presente trabalho o objetivo foi avaliar se protocolos utilizando ocitocina e cloprostenol (associados ou não) podem aumentar o volume e concentração hormonal de M. rufa ao longo do procedimento de eletroejaculação sem que houvesse a alteração de parâmetros de avaliação seminal. Ficou demonstrado que não houve aumento significativo no volume e concentração espermática entre os tratamentos realizados. O tratamento em que utilizou apenas cloprostenol apresentou os piores resultados, sendo este não indicado para a colheita de sêmen de M. rufa.

The Red Brocket deer (Mazama americana) is a neotropical deer species with large distribution, and taxonomic inconsistency so is classified as Data Deficient by IUCN. Because of this, it is impossible to apply the protocols used to categorize the species into threat categories. Morphological, molecular and cytogenetic studies have shown that it is a complex of species that have similar morphological characteristics, demonstrating the existence of six cytotypes for the species. From material collected in the type locality of the species (Cayenne - French Guiana) and material collected near the type locality of M. rufa (Foz do Iguaçu, PR), it was proven that the cytotype Paraná is actually the species of Southern Red Brocket deer (M. rufa) described by Illiger in 1811. Southern Red Brocket deer has not yet been classified due to its recent redescription (2018), but it is believed to be vulnerable. Therefore, it is a priority to establish in situ and ex situ conservation strategies for the species, highlighting the formation of a germplasm bank. Semen collection can be done by different techniques, but for deer, the most used techniques are artificial vagina collection and electroejaculation. With electroejaculation, the animal must be chemically contained and receive electrical stimuli in the accessory glands that will promote ejaculation. The disadvantage of this technique is more diluted semen due to greater secretion of seminal plasma, but it is useful to collect material from captive and wild life animals without the need for it to show libido. In order to minimize the deleterious effects of the technique, the use of hormonal protocols using oxytocin and cloprostenol (synthetic prostaglandin F2) has been associated, increasing seminal volume and concentration, in addition to decreasing the time and number of stimuli required for electroejaculation. This is possible because the hormonal action favoring the contraction of smooth muscle of the seminiferous and epididymal tubules. Thus, in the present study, the objective was to evaluate whether protocols using oxytocin and cloprostenol (associated or not) can increase the volume and hormonal concentration of M. rufa throughout the electroejaculation procedure without changing seminal evaluation parameters. It was demonstrated that there was no significant increase in the volume and sperm concentration between the treatments performed. The treatment using only cloprostenol showed the worst results, which has not indicated for the collection of M. rufa semen.

AVALIAÇÃO DA CONTENÇÃO QUÍMICA E RECUPERAÇÃO ANESTÉSICA DE CERVÍDEOS NEOTROPICAIS SUBMETIDOS A DIFERENTES PROTOCOLOS ANESTÉSICOS

Objetivou-se avaliar a contenção química e a recuperação anestésica de cervídeos neotropicais submetidos a diferentes protocolos anestésicos. No primeiro estudo, dez veados-catingueiro (Mazama gouazoubira) foram contidos quimicamente com 7 mg/kg de cetamina associada à 1 mg/kg de xilazina (CX) ou 0,2 mg/kg de detomidina (CD) ou 0,02 mg/kg de dexmedetomidina (CDx) administrados pela via intramuscular. A indução anestésica foi avaliada por meio da escala visual analógica (VAS) e as variáveis cardiorrepiratórias, hemogasométricas, lactato e glicose séricos foram registradas. No segundo estudo, 17 animais de oito espécies de cervídeos foram contidos quimicamente com 7 mg/kg de cetamina e 1 mg/kg de xilazina pela via intramuscular e submetidos a anestesia inalatória com isofluorano. Foram monitoradas frequências cardíaca (FC) e respiratória (f), saturação de oxigênio na hemoglobina (SpO2) e temperatura retal (TR). A recuperação anestésica foi avaliada por meio da VAS e escala descritiva qualitativa em ambos estudos. Os dados foram analisados para normalidade usando o teste de Shapiro-Wilk e comparados pelo teste de Kruskal-Wallis seguido de Dunn ou ANOVA seguido de Tukey. Todos os dados foram submetidos a análise multivariada de correspondência múltipla (ACM). No primeiro estudo, os animais tratados com CX foram associados à hipoxemia (SpO2 entre 61 e 74%), os tratados com CD associados com hipertensão (iPAM entre 118 e 159 mmHg) e os tratados com CDx associados a taquicardia (FC entre 80 e 126 bpm). Um animal tratado com CX e outro com CD foram eutanasiados após apresentarem edema pulmonar hemorrágico durante a recuperação anestésica. Os animais tratados com CD, durante a recuperação, apresentaram atitude geral levemente excitada, posição quadrupedal apoiando-se nas paredes e com quedas repetidas, sendo considerada de pior qualidade quando comparada com os animais tratados com CX e CDx. No segundo estudo, a FC de Blastocerus dichotomus (40 [31-95] bpm) e Ozotocerus bezoarticus (40 [38-45] bpm) foi menor entre as espécies. A f foi menor em B. dichotomus (20 [6-28] mpm) e Odocoileus virginianus (20 [20- 22] mpm). A TR foi menor (36,1 [35,6-37,5] °C) em O. bezoarticus que em Mazama americana (38,1 [36,8-38,8] °C). A mediana (mínimo-máximo) da VAS de recuperação foi de 8,2 (4,7-9,4) em animais da espécie B. dichotomus, 8,8 (5,3-10) em M. gouazoubira, 8,7 (5,8-9,7) em M. americana, 9 (8,5-9,6) em Mazama nana, 7,9 (6,9-9,8) em Mazama nemorivaga, 6,9 (6,3-8,1) em Mazama bororo, 8 (6,6-8,9) em O. virginianus e 7,6 (6,2-9) em O. bezoarticus. Cervídeos da espécie M. bororo, M. gouazoubira e M. nemorivaga tiveram recuperação anestésica com incoordenação e queda. Conclui-se que o protocolo de contenção química obtido com a associação de cetamina e dexmedetomidina é o mais indicado nas condições deste estudo. Os cervídeos das espécies M. gouazoubira, M. nemorivaga e M. bororo tiveram recuperação de pior qualidade quando comparados com as espécies B. dichotomus, O. virginianus, O. bezoarticus, M. americana e M. nana.

This study aimed to evaluate the chemical restraint and anesthetic recovery of neotropical deer submitted to different anesthetic protocols. In the first study, 10 brown brocket deer (Mazama gouazoubira) were chemically contained with 7 mg/kg ketamine and associated to 1 mg/kg xylazine (CX) or 0.2 mg/kg detomidine (CD) or 0.02 mg/kg dexmedetomidine (CDx) administered intramuscularly. Anesthetic induction was assessed by visual analogue scale (VAS) and cardiorespiratory, hemogasometric, lactate and serum glucose variables were recorded. In the second study, 17 animals of eight deer species were chemically restrained with 7 mg/kg ketamine and 1 mg/kg xylazine, administered intramuscularly, followed by isofluorane inhalant anesthesia. Heart rate (HR), respiratory rate (f), peripheral oxygen saturation (SpO2) and rectal temperature (RT) were monitored. Anesthetic recovery was assessed by VAS and qualitative descriptive scale in both studies. Data were analyzed for normality using the Shapiro-Wilk test and compared by Kruskal-Wallis test followed by Dunn or ANOVA followed by Tukey. Data were submitted to multivariate multiple correspondence analysis (MCA). In the first study, animals treated with CX were associated hypoxemia (SpO2 between 61 and 74%), animals treated with CD were associated hypertension (iPAM between 118 and 159 mmHg), and animals treated with CDx were associated tachycardia (FC between 80 and 126 beats minute). One animal treated with CX and one treated with CD were euthanized after presenting hemorrhagic pulmonary edema during anesthetic recovery. The anesthetic recovery of animals treated with CD was associated with a slightly excited attitude, quadrupedal position leaning against the walls and repeated falls being considered of poorer quality when compared to the animals treated with CX and CDx. In the second study, HR for Blastocerus dichotomus (40 [31-95] beats minute) and Ozotocerus bezoarticus (40 [38-45] beats minute) was lower among species. The f was lower for B. dichotomus (20 [6-28] breaths minute) and Odocoileus virginianus (20 [20-22] breaths minute). RT was lower (36.1 [35.6- 37.5] °C) for O. bezoarticus than for Mazama americana (38.1 [36.8-38.8] °C). The median (minimum-maximum) VAS recovery score was 8.2 (4.7-9.4) for B. dichotomus, 8.8 (5.3-10) for M. gouazoubira, 8.7 (5.8-9.7) for M. americana, 9 (8.5-9.6) for Mazama nana, 7.9 (6.9-9.8) for Mazama nemorivaga, 6.9 (6.3-8.1) for Mazama bororo, 8 (6.6-8.9) for O. virginianus and 7.6 (6.2-9) for O. bezoarticus. The deer species M. bororo, M. gouazoubira and M. nemorivaga had anesthetic recovery with incoordination and fall. It was concluded that the chemical restraint protocol obtained with the combination of ketamine and dexmedetomidine is the most indicated in the conditions of this study. The deer of the species M. gouazoubira, M. nemorivaga and M. bororo had recovery of worse quality when compared with the species B. dichotomus, O. virginianus, O. bezoarticus, M. americana and M. nana.

AVALIAÇÃO DE PROTOCOLOS DE SUPEROVULAÇÃO EM CERVOS-DO-PANTANAL (Blastocerus dichotomus)

O cervo-do-pantanal (Blastocerus dichotomus) é uma espécie emblemática dentro dos cervídeos neotropicais. Nas últimas décadas, suas populações têm sofrido declínio notório devido, principalmente, à destruição do seu habitat. Isto causa a perda da diversidade genética, que junto à depressão endogâmica (pelo isolamento de pequenas populações) pode levar à espécie a extinções locais. Nesse contexto, as técnicas de reprodução assistida podem auxiliar no processo de manutenção da diversidade genética nestas populações isoladas. Desta forma, o objetivo deste estudo foi elaborar um protocolo de superovulação para cervo-do-pantanal em cativeiro. Assim, foram testados protocolos sucessivamente (A, B, C) até que fossem obtidos resultados satisfatórios. Para que se pudesse chegar a um protocolo viável, foram testadas três combinações farmacológicas. Tratamento A: CIDR® durante sete dias, seguido de 0,5 mg de BE e 0,11 mg de GnRH no dia 0, 800UI de eCG no dia 5 após inserção do CIDR®, 530 µg de PGF2 no dia 7 e 0,11 mg de GnRH logo após a detecção do estro, para a indução da ovulação. Tratamento B: CIDR® durante oito dias, seguido de 0,5 mg de BE e 0,11 mg de GnRH no dia 0, 1200UI de eCG no dia 5 após inserção do CIDR®, 530 µg de PGF2 no dia 8 e 0,11 mg de GnRH logo após a detecção do estro, para a indução da ovulação. Tratamento C: CIDR® durante oito dias, seguido de 0,5 mg de BE e 0,11 mg de GnRH no dia 0, 1200UI de eCG no dia 5 após inserção do CIDR®, 530 µg de PGF2 no dia 8 e 2,5 mg de LH, entre 12-18 horas após a detecção do estro para a indução da ovulação. A detecção de estro foi realizada com o auxílio de um macho, sendo permitida a cópula. Oito dias após a cópula foi realizada a contagem dos CL e folículos anovulatórios mediante laparotomia mediana ventral, assim como a colheita de embriões. O Tratamento A resultou em 2 CL. O Tratamento B resultou em 1 CL e 8 folículos anovulatórios. O Tratamento C resultou em 10, 3 e 11 CL, e 0, 1 e 5 folículos anovulatórios para as fêmeas 3, 4 e 5, respectivamente. Além disso foi realizada a colheita de 2, 2 e 5 embriões das fêmeas FBD3, FBD4 e FBD5, respectivamente. Obtendo uma taxa de recuperação de 37,5% (9/24), dos quais dois eram embriões viáveis para transferência. Todos os tratamentos foram efetivos na sincronização do estro. O Tratamento C, com a aplicação i.m. de 1200UI de eCG e de LH, como indutor da ovulação, teve a melhor resposta em termos de superovulação, assim como de colheita de embriões.

The marsh deer (Blastocerus dichotomus) is an emblematic species within the neotropical deer. In the last decades, their populations have suffered a notable decline due, mainly, to the destruction of their habitat. This causes loss of genetic diversity, which together with inbreeding depression (by the isolation of many small populations) can lead this species to local extinctions. In this context, assisted reproduction techniques can help in the process of maintaining genetic diversity in these isolated populations. Thus, the aim of this study was to elaborate a superovulation protocol for captive marsh deer. Therefore, protocols were successively tested (A, B, C) until satisfactory results were obtained. To be able to achieve a viable protocol, three pharmacological combination were tested. Treatment A: CIDR® for 7 days, followed by 0.5 mg of EB and 0.11 mg of GnRH on D0, 800IU of eCG on day 5 after CIDR® insertion, 530 µg PGF2 on day 7, and 0.11 mg of GnRH soon after estrus detection, for ovulation induction. Treatment B: CIDR® for 8 days, followed by 0.5 mg of EB and 0.11 mg of GnRH on D0, 1200IU of eCG on day 5 after CIDR® insertion, 530 µg PGF2 on day 8, and 0.11 mg of GnRH soon after estrus detection, for ovulation induction. Treatment C: CIDR® for 8 days, followed by 0.5 mg of EB and 0.11 mg of GnRH on D0, 1200IU of eCG on day 5 after CIDR® insertion, 530 µg PGF2 on day 8, and 0.25 mg of LH, between 12-18 hours post estrus detection, for ovulation induction. Estrus detection was performed with the aid of a male, and copulation was allowed. Eight days after copulation, CL and anovulatory follicles were counted through median ventral laparotomy, as well as the collection of embryos. Treatment A resulted in 2 CL. Treatment B resulted in 1 CL and 8 anovulatory follicles. Treatment C resulted in 10, 3 and 11 CL, and 0, 1 and 5 anovulatory follicles for hinds FBD3, FBD4, and FBD5, respectively. In addition, 2, 2 and 5 embryos were harvested from hinds FBD3, FBD4 and FBD5, respectively. Obtaining a recovery rate of 37.5% (9/24), of which two were viable embryos for transfer. All treatments were effective in synchronizing estrus. Treatment C, with an i.m. application of 1200IU of eCG and LH, as ovulation inducer, had the best response in terms of superovulation, as well as embryo collection.

CARACTERIZAÇÃO MORFOLÓGICA, CITOGENÉTICA E MOLECULAR DE Mazama nemorivaga (CUVIER, 1817) A PARTIR DE UM TOPOTIPO ATUAL

A espécie M. nemorivaga corresponde ao cervídeo neotropical que ocupa a região Amazônica. Com base em estudos anteriores, a atual classificação taxonômica da espécie apresenta inconsistências, que sugerem a presença de mais de uma espécie dentro do que hoje é classificado como M. nemorivaga. Desta forma, o presente trabalho tem como objetivo contribuir com a taxonomia do gênero Mazama, mediante a coleta de um exemplar em sua localidade tipo (Caiena, Guiana Francesa), caracterizando-o morfológica, citogenética e molecularmente, permitindo a comparação da espécie em estudo com outros espécimes utilizados em publicações, a fim de conhecer diferenças entre eles e revisar a taxonomia da espécie. Para tanto, foi coletado um exemplar na localidade tipo da espécie (Guiana Francesa), caraterizado por técnicas de morfologia tradicional (medidas crânio-mandibulares, medidas biométricas, coloração da pele), morfologia geométrica, assim como análises citogenéticas (Banda G, Banda C, coloração convencional de Giemsa e coloração Ag-NOR, FISH telomérica) e moleculares (análises filogenéticas de genes mitocôndrias Cyt b de 920 pb, COI I de 658 pb, D-loop 610 pb). Os resultados da caracterização citogenética e molecular, mostraram um claro agrupamento do topótipo de M. nemorivaga junto com exemplares da região do Amapá, constituindo o clado Norte (Guiana Francesa e Amapá). Além disso, sugere-se a existência de três espécies distintas, com base no nível de diferenças em relação ao topótipo da espécie, uma ocorrendo na Amazônia oriental, acima do rio Amazonas (Amapá e Guiana Francesa), outra na Amazônia central (Mato Grosso, Pará e Maranhão) e uma outra na Amazônia ocidental (Acre e Rondônia). Além disso, foi identificada a presença de pelos na região tarsal como um dos carácteres morfológicos que pode ser utilizado na diagnose da espécie em relação ao outros membros do gênero. Desta maneira, contribuiu-se na taxonomia da espécie Mazama nemorivaga, esclarecendo o nível de diferenças entre indivíduos já estudados e o topótipo da espécie.

The species M. nemorivaga corresponds to the neotropical deer that occupies the Amazon region. Based on previous studies, the current taxonomic classification of the species presents inconsistencies, which suggest the presence of more than one species within what is now classified as M. nemorivaga. In this way, the present research project aims to contribute with the taxonomy of the Mazama genus, by collecting a specimen in its type locality (Cayenne, French Guiana). Characterizing the morphological specimen, Cytogenetic and molecular, allowing the comparison of the species under study with other specimens used in publications, in order to know the differences between them and to review the taxonomy of the species. For this, a specimen was collected in the locality of the species (French Guiana), characterized by traditional morphology techniques. (craniomandibular measurements, biometric measurements, skin coloration), geometric morphology, as well as by cytogenetic analyzes (Band G, C-band, conventional Giemsa staining and Ag-NOR staining, telomeric FISH) and molecular (phylogenetic analyzes of mitochondrial genes Cyt b of 920 bp, IOC I of 658 bp, D-loop 610 bp). The results of the cytogenetic and molecular characterization showed a clear grouping of M. nemorivaga topotype along with specimens from the Amapá region, constituting the northern clade (French Guiana and Amapá). In addition, it is suggested the existence of three distinct species, based on differences in relation to the topotype of the species. One occurred in the eastern Amazon, above the Amazon River (Amapá and French Guiana), another in central Amazonia (Mato Grosso, Pará and Maranhão) and another one in western Amazonia (Acre and Rondônia). The presence of hairs in the tarsal region was identified as one of the morphological characters that can be used to diagnose the species in relation to other members of the genus. In this way, we contribute to the taxonomy of the Mazama nemorivaga species, clarifying the level of differences between individuals already studied and the topotype of the species.