Colheita de sêmen e inseminação artificial em onças-pintadas (Panthera onca) / Semen collection and artificial insemination in jaguars (Panthera onca)

A onça-pintada encontra-se classificada como "quase ameaçada" na lista vermelha de animais ameaçados da União Internacional para Conservação da Natureza (IUCN), com tendência ao declínio na América Latina, o que pode afetar o fluxo gênico elevando o risco de endogamia. Técnicas de reprodução assistida (TRAs) como colheita de sêmen e inseminação artificial (IA), são ferramentas que podem se tornar essenciais a manutenção da diversidade genética desses animais. A colheita de sêmen pode ser realizada por eletroejaculação (EEJ) ou colheita farmacológica (CF), sendo que podem ser aplicadas individualmente ou associadas, embora EEJ tenha se mostrado mais eficiente em inseminação artificial (IA) com sêmen a fresco. Para realização de IA a utilização de progestina oral (altrenogest), seguida da aplicação de gonadotropinas exógenas (Gonadotropina Coriônica equina-eCG e Hormônio Luteinizante suíno-pLH), tem se mostrado eficiente, promovendo ovulações consistentes. IA intratubárica (IA-IT) mostrou-se eficiente, tendo a vantagem de utilizar sêmen com baixo número de espermatozoides. O sucesso alcançado com o nascimento do primeiro filhote de Panthera onca utilizando TRAs se deve a vários fatores, dentre eles, a utilização de um novo protocolo hormonal ajustado à espécie; e a utilização da IA-IT, que possibilitou a utilização de sêmen com reduzido número de espermatozoides viáveis por inseminação.(AU)

The jaguar is classified as "near threatened" according International Union for Conservation of Nature red list, with a decreasing trend in the population of Latin America, increasing the risk of inbreeding. Assisted reproduction techniques (ARTs), such as semen collection and artificial insemination (AI), are tools that can become essential to maintain the genetic diversity of jaguars. Semen collection can be performed by electroejaculation (EEJ) or pharmacological collection (PC); and can be applied individually or associated, however EEJ was more efficient for artificial insemination (AI) with fresh semen. To perform Artificial Insemination (AI), oral progestin (altrenogest) followed exogenous gonadotropins (Gonadotropin Chorionic equine-eCG e Hormone Luteinizing porcine-pLH) application was efficient, promoting consistent ovulations. Similarly, laparoscopic oviductal insemination (IA-IT) was efficient, with the advantage to use low viable spermatozoa number by insemination. The success of jaguar cub birth using ARTs is due to several factors, among than, a new hormonal protocol adjusted to the species; and the use of IA-IT, which allowed the reduction in the number of sperm by insemination.(AU)

Avaliação do acetato de melengestrol (MGA) na sincronização do estro em fêmeas de veado-mão-curta (Mazama nana) e veado-roxo (Mazama nemorivaga): estudo piloto / Assessment of melengestrol acetate on estrus synchronization in female of Brazilian dwarf brocket deer and Amazonian brown brocket deer: pilot study

A introdução de dispositivos intravaginais em protocolos tradicionais de sincronização do estro (SE) exige contenção física e/ou química, o que pode resultar em estresse e efeitos negativos na fisiologia reprodutiva de animais selvagens. Portanto, o uso de protocolos não invasivos pode ser mais eficaz para o manejo da reprodução ex situ. O objetivo deste estudo foi avaliar a eficácia do acetato de melengestrol (MGA), na SE de uma fêmea de veado-mão-curta (Mazama nana) e uma de veado-roxo (Mazama nemorivaga). Ambas receberam uma aplicação via intramuscular de 0,25 mg de benzoato de estradiol (Sincrodiol® ) no dia 0 (D0). Entre o D0 e o D7, foi administrado 1 mg/animal/dia de MGA® Premix fracionado em duas porções (0,5 mg pela manhã e 0,5 mg a tarde), misturadas com banana. No D8, um análogo de PGF2α (Cloprostenol - Ciosin® ) foi administrado via intramuscular. Após o tratamento, o estro comportamental (EC) foi avaliado com auxílio de um macho da respectiva espécie desde D9 a D13, primeiramente a cada seis horas e, após o início do EC, a cada quatro horas. As duas fêmeas apresentaram sinais de EC nos dias 12 e 13. Na espécie Mazama nana, o EC teve uma duração aproximada de 16 horas e, na espécie Mazama nemorivaga, 20 horas. Os resultados obtidos neste estudo sugerem a eficácia da dose de 1,0 mg/animal/dia de MGA, fracionada em duas doses, na manipulação estral em fêmeas de veado-mão-curta e veado-roxo, uma vez que ambas demonstraram EC quatro dias após o protocolo de sincronização proposto.(AU)

The introduction of intravaginal devices in traditional estrus synchronization protocols requires physical and/or chemical restraint, which can result in stress and negative effects on the reproductive physiology of wild animals. Therefore, the use of non-invasive protocols might be more effective for the reproductive management ex situ. The objective of this study was to evaluate the efficacy of the melengestrol acetate (MGA) for estrus synchronization of two females: one deer-short-hand (Mazama nana) and one deer-purple (Mazama nemorivaga). Both were given an application of estradiol benzoate (Sincrodiol® ) on day 0 (D0). From D0 to D7, 1 mg/female/day of oral MGA® Premix was fractionated in two administrations (0.5 mg morning and 0.5mg afternoon) mixed with banana. On D8, a PGF2α analogue were given intramuscularly (Cloprostenol - Ciosin® ). After treatment, behavioural estrus was evaluated with the aid of a male of the respective species from D9 to D13, initially every six hours then every four hours after the onset of behavioural estrus. The two females showed behavioural estrus on days 12 and 13. In the Mazama nana, the behavioral estrus had duration of approximately 16 hours and in the Mazama nemorivaga 20 hours. The results obtained in this study suggest the efficacy of 1.0 mg/female/day of MGA fractionated in two doses for the estrus manipulation in deer-short-hand and deer-purple females, since both showed behavioural estrus four days after the proposed synchronization protocol.(AU)

Avaliação do acetato de melengestrol (MGA) na sincronização do estro em fêmeas de veado-mão-curta (Mazama nana) e veado-roxo (Mazama nemorivaga): estudo piloto / Assessment of melengestrol acetate on estrus synchronization in female of Brazilian dwarf brocket deer and Amazonian brown brocket deer: pilot study

A introdução de dispositivos intravaginais em protocolos tradicionais de sincronização do estro (SE) exige contenção física e/ou química, o que pode resultar em estresse e efeitos negativos na fisiologia reprodutiva de animais selvagens. Portanto, o uso de protocolos não invasivos pode ser mais eficaz para o manejo da reprodução ex situ. O objetivo deste estudo foi avaliar a eficácia do acetato de melengestrol (MGA), na SE de uma fêmea de veado-mão-curta (Mazama nana) e uma de veado-roxo (Mazama nemorivaga). Ambas receberam uma aplicação via intramuscular de 0,25 mg de benzoato de estradiol (Sincrodiol® ) no dia 0 (D0). Entre o D0 e o D7, foi administrado 1 mg/animal/dia de MGA® Premix fracionado em duas porções (0,5 mg pela manhã e 0,5 mg a tarde), misturadas com banana. No D8, um análogo de PGF2α (Cloprostenol - Ciosin® ) foi administrado via intramuscular. Após o tratamento, o estro comportamental (EC) foi avaliado com auxílio de um macho da respectiva espécie desde D9 a D13, primeiramente a cada seis horas e, após o início do EC, a cada quatro horas. As duas fêmeas apresentaram sinais de EC nos dias 12 e 13. Na espécie Mazama nana, o EC teve uma duração aproximada de 16 horas e, na espécie Mazama nemorivaga, 20 horas. Os resultados obtidos neste estudo sugerem a eficácia da dose de 1,0 mg/animal/dia de MGA, fracionada em duas doses, na manipulação estral em fêmeas de veado-mão-curta e veado-roxo, uma vez que ambas demonstraram EC quatro dias após o protocolo de sincronização proposto.

The introduction of intravaginal devices in traditional estrus synchronization protocols requires physical and/or chemical restraint, which can result in stress and negative effects on the reproductive physiology of wild animals. Therefore, the use of non-invasive protocols might be more effective for the reproductive management ex situ. The objective of this study was to evaluate the efficacy of the melengestrol acetate (MGA) for estrus synchronization of two females: one deer-short-hand (Mazama nana) and one deer-purple (Mazama nemorivaga). Both were given an application of estradiol benzoate (Sincrodiol® ) on day 0 (D0). From D0 to D7, 1 mg/female/day of oral MGA® Premix was fractionated in two administrations (0.5 mg morning and 0.5mg afternoon) mixed with banana. On D8, a PGF2α analogue were given intramuscularly (Cloprostenol - Ciosin® ). After treatment, behavioural estrus was evaluated with the aid of a male of the respective species from D9 to D13, initially every six hours then every four hours after the onset of behavioural estrus. The two females showed behavioural estrus on days 12 and 13. In the Mazama nana, the behavioral estrus had duration of approximately 16 hours and in the Mazama nemorivaga 20 hours. The results obtained in this study suggest the efficacy of 1.0 mg/female/day of MGA fractionated in two doses for the estrus manipulation in deer-short-hand and deer-purple females, since both showed behavioural estrus four days after the proposed synchronization protocol.

Prepartum progestagen supplementation in swine: a strategy to facilitate piglet care and prevent early parturition / Suplementação de progestágenos no pré-parto em suínos: estratégia para facilitar assistência aos leitões e evitar partos precoces

Gestation length in swine has a considerable amplitude and both early and delayed parturition are common. This variation increases the occurrence of unassisted farrowing and could lead to a wide-ranging age at weaning for piglets born from one batch. Supervision of sow parturition is crucial to reduce mortality of neonate piglets. To facilitate assistance, induction of farrowing using prostaglandin F2α (PGF) has been widely used in batch farrowing systems, whereby synchronization would concentrate the time of farrowing, allowing for better organization of employees. However, a viable alternative method that can be implemented to manage farrowing is to sustain high progestagen levels in the final days of gestation and, consequently, prevent early parturition. Efficient techniques to delay farrowing such as using oral progestagen supplementation have been previously described, but are only recently being considered for commercial use. The present manuscript reviews publications regarding delaying parturition and discusses the use of intravaginal devices (IVDs) containing progestagen. There is limited data addressing the effect of progestagen treatment during gestation on productive and reproductive performance. Therefore, future studies should focus on improving synchronization protocols following progestagen supplementation and evaluating piglet viability and sow fertility, before widely using progestagen supplementation to manipulate parturition.(AU)

Como a duração da gestação de suínos pode ter ampla variação, é comum a ocorrência de partos antecipados ou gestações prolongadas. Isso aumenta as chances de partos sem assistência e leva a uma grande variação de idade dos leitões dentro do lote de produção. Portanto, a supervisão do parto é indispensável para reduzir as perdas neonatais. Para facilitar o auxílio aos leitões, a indução do parto com prostaglandina F2α (PGF) é eficaz e amplamente utilizada, sendo indicada para concentrar os partos em momentos mais adequados, preferencialmente durante o horário com maior disponibilidade de colaboradores. Uma alternativa viável é manipular o momento do parto, através da manutenção de níveis plasmáticos elevados de progestágeno durante o final da gestação, a fim de evitar partos antecipados. Formas eficientes de evitar o parto através de suplementação oral de progestágenos foram descritas há décadas, mas apenas recentemente tem sido cogitada a utilização comercial. A presente revisão aborda estudos disponíveis na literatura relacionados ao protelamento do parto, incluindo a utilização de dispositivos intravaginais (DIVs) impregnados com progestágeno. São poucos os dados disponíveis relacionados ao uso de progestágenos na gestação com índices produtivos e reprodutivos. Portanto, alguns pontos ainda devem ser melhor avaliados, especialmente com relação à determinação da sincronia dos partos após o fim da suplementação com progestágenos, à viabilidade dos neonatos e à fertilidade subsequente das fêmeas antes da ampla adoção desta técnica.(AU)

DESEMPENHO REPRODUTIVO DE FÊMEAS SUÍNAS DESMAMADAS TRATADAS COM DIFERENTES PROGESTÁGENOS

O progestágeno altrenogest (ALT) é utilizado para o manejo reprodutivo de fêmeas suínas para controle do ciclo estral. É a única molécula disponível comercialmente para leitoas e fêmeas desmamadas, necessitando ser fornecida de forma oral por vários dias. O acetato de medroxiprogesterona (MAP), outro progestágeno sintético, tem sido usado com sucesso para sincronizar o ciclo estral em outras espécies por décadas. Embora os dispositivos intravaginais impregnados com MAP (DIVs) tenham mostrado sincronizar o estro em fêmeas desmamadas, outros parâmetros reprodutivos não foram avaliados. Assim, os objetivos do presente estudo foram investigar o efeito da duração do tratamento com ALT sobre o desempenho reprodutivo de fêmeas desmamadas e avaliar se os DIV impregnados com MAP podem ser usados como uma alternativa para o controle do estro nesta categoria. No experimento 1, foram coletados dados retrospectivos do desempenho reprodutivo de fêmeas desmamadas que não foram tratadas (CONT, n = 259) ou tratadas com ALT durante 7 (ALT7; n = 226) ou 14 dias (ALT14; n = 234) pós-desmame. No experimento 2, as matrizes desmamadas não foram tratadas (CONT, n = 15) ou tratadas com DIV impregnadas com MAP por 7 (MAP7; n = 21) ou 14 dias (MAP14, n = 28) ou ALT (Regumate®) para 7 (ALT7, n = 22) ou 14 dias (ALT14, n = 31) pós-desmame. Na exp. 1, a taxa de parto ajustada foi menor (P<0,05) no grupo ALT7 (79,6%) quando comparada aos grupos ALT14 (85,1%) e controle (87,5%). O número total de leitões nascidos não diferiu (P>0,05) entre os grupos controle (13,6 ± 0,47), ALT7 (13,4 ± 0,48) e ALT14 (14,0 ± 0,48). No exp.2, a taxa de parto ajustada não diferiu (P>0,05) entre os grupos CONT (92,9%), ALT7 (72,2%), MAP7 (76,5%), ALT14 (96,1%) e MAP14 (87,0%). Da mesma forma, o número total de leitões nascidos vivos não diferiu (P>0,05) entre os grupos CONT (12,6 ± 1,0), ALT7 (11,9 ± 1,0), MAP7 (13,4 ± 1,0), ALT14 (13,1 ± 0,7) e MAP14 (13,6 ± 0,8). Em conclusão, o exp. 1 demonstrou resultados satisfatórios com o uso de ALT no controle do ciclo estral; no entanto, um comprometimento do desempenho reprodutivo ocorre quando a ALT é usada por 7 dias. Resultados do exp. 2 sugerem que os DIV impregnados com MAP são uma nova alternativa para o controle de estro em porcas desmamadas, embora sejam necessários mais estudos com um número maior de fêmeas para confirmar essa hipótese.

The progestin altrenogest (ALT) has been used in swine reproductive management to control estrous cycle. It is the only molecule available in the market for gilts and sows, being orally administered for several days. Medroxyprogesterone acetate (MAP), another synthetic progestin, has been successfully used to synchronize the estrous cycle in other species for decades. Although MAP-impregnated intravaginal devices (IVDs) were shown to synchronize estrus in weaned sows, other reproductive parameters were not evaluated. Thus, the objectives of the present study were to investigate the effect of the length of altrenogest treatment on the reproductive performance of weaned sows and to evaluate whether MAP-impregnated IVDs could be used as an alternative for estrous control in sows. In the experiment 1, retrospective data were collected regarding reproductive performance of weaned sows that were either not treated (CONT, n = 259) or treated with ALT during 7 (ALT7; n = 226) or 14 d (ALT14; n = 234) post-weaning. In experiment 2, weaned sows were either non-treated (CONT, n = 15) or treated with MAP-impregnated IVDs for 7 (MAP7; n = 21) or 14 d (MAP14, n = 28) or ALT (Regumate®) for 7 (ALT7, n = 22) or 14 d (ALT14, n = 31) post-weaning. In the exp. 1, the adjusted farrowing rate was lower (P < 0.05) in the ALT7 (79.6%) group when compared to ALT14 (85.1%) and control (87.5%) groups. The total number of piglets born did not differ (P > 0.05) among control (13.6 ± 0.47), ALT7 (13.4 ± 0.48) and ALT14 (14.0 ± 0.48) groups. In the exp.2, the adjusted farrowing rate did not differ (P > 0.05) among CONT (92.9%), ALT7 (72.2%), MAP7 (76.5%), ALT14 (96.1%) and MAP14 (87.0%) groups. Similarly, the total number of piglets born alive did not differ (P > 0.05) among CONT (12.6 ± 1.0), ALT7 (11.9 ± 1.0), MAP7 (13.4 ± 1.0), ALT14 (13.1 ± 0.7) and MAP14 (13.6 ± 0.8) groups. In conclusion, exp. 1 has shown satisfactory results using ALT for the control of estrous cycle; however, an impairment of reproductive performance occurs when ALT is used for 7 days. Results from exp. 2 suggest that MAP-impregnated IVDs are a novel alternative for estrus control in weaned sows, although further studies with a larger number of animals are necessary to confirm this hypothesis.

Increasing ovulation quota: more than a matter of energy

Background: Nutritional supplementation before breeding (Flushing) has become a common practice and is a reliable method to improve lambing and twining rates in sheep. The improvement of the body condition of a ewe is reflected in a higher number of ovulatory follicles and is termed "static effect of nutrition". Shorter periods of nutritional supplementation can also affect follicular development in the absence of changes in the body condition and weight of the animal, which is known as "acute effect of nutrition". Studies of follicular development in small ruminants have shown that 4 to 5 follicular waves occur during the estrous cycle, and that waves emerge every 5 to 7 days. However, the selection phase of the follicular wave occurs within 3 to 4 days, thus the length of flushing could last merely the time needed to push follicles over the selection threshold. Review: Here we examined the evidence produced by our research on the minimum length and appropriate timing of nutrient supplementation needed to enhance ovulation rate and prolificacy in sheep. Ewes have follicles ready to reach ovulatory size at any time of the estrous cycle and, when a follicular phase is induced, most show estrus and ovulate within 60 to 80 h. Hence, ovulatory follicles should commit for ovulation shortly after the decline in progesterone if they are to achieve ovulatory competence. We showed that an ultrashort flushing (USF) given as a single administration of a glycogenic substance at the time of prostaglandin-induced luteolysis (Control =1.6 ± 0.06 vs. USF= 2.08± 0.06) or progestin withdrawal (Control =1.64 ± 0.07 vs. USF= 2.41± 0.09) increased ovulation rate (P < 0.01). This increase was associated with elevated glucose and insulin concentrations for 12 h after USF (P < 0.01). However, the diameter of the three largest follicles did not change between the day of flushing and the day of estrus and did not differ between the control and the USF (P > 0.10). The USF could act either by advancing follicle maturation, or by affecting the feedback loop between the ovaries and gonadotrophin secretion. Therefore, we measured mRNA abundance for LH receptor (LHr), 3ß-hydroxysteroid dehydrogenase (3ß-HSD) and P450 aromatase at 0, 12, 24 and 48 h after the start of luteolysis in ewes treated or not with USF. Aromatase mRNA decreased in large follicles 12 h after USF (P < 0.01), with no changes on mRNA for LHr or 3ß-HSD. Further, we observed that the in vitro rumen fermentation and the in vivo glucose plasma concentrations in response to an isoenergetic (1470.83 kcal) single oral drench of glycerol, propylene glycol or molasses differed. The longer time to begin fermentation of glycerol allows for its absorption and its direct use for glucose production in the liver. Molasses was preferably fermented to butyrate, whereas propylene glycol was preferably fermented to propionic acid thus serving as glycogenic substrate. Glycerol and propylene glycol increased glucose and insulin concentrations in vivo, whereas molasses did not, thus the later may not be suitable for the USF. An increase in ovulation rate and prolificacy was also obtained with treatments that cause nutrient redistribution in the animal such as beta adrenergic receptor agonists and bovine somatotropin. Conclusions: We have developed an ultrashort flushing with glycogenic solutions that when applied at luteolysis will increase ovulation rate in sheep. This hyper-acute effect of nutrition caused a reduction in mRNA for P450 aromatase 12 hours after the glycogenic drench. In addition, from our results we can infer that ovine follicles can develop ovulatory capacity within 48 h after being selected when coinciding with the follicular phase.

Densidade mineral óssea em cadelas submetidas à ovarioisterectomia com e sem reposição estrogênica oral / Mineral density in bones of ovariohysterectomized bitches, with or without oral estrogen replacement

Estudaram-se os efeitos da ovarioisterectomia na densidade mineral óssea de cadelas e da reposição de estrógenos após a cirurgia. Foram utilizadas 12 cadelas, sem raça definida, entre dois e seis anos de idade e pesos entre 5 e 15kg. Os animais, submetidos à ovarioisterectomia, foram separados em dois grupos de seis. Um grupo serviu como controle, e o outro recebeu estrógenos naturais conjugados na dose de 0,01mg/kg via oral a cada 48 horas, durante 12 meses. No dia da cirurgia e após 12 meses, foram feitas radiografias com vistas à densitometria óptica em imagem radiográfica. A ovarioisterectomia diminuiu a densidade óssea, e a reposição estrogênica, na dose utilizada, foi capaz de preservá-la.(AU)

Effects on bone density of ovariohysterectomy and post-operative estrogen replacement were studied in bitches. Twelve mixed-breed bitches, ranging from 2 to 6 years of age and weighing between 5 and 15kg were submitted to ovariohysterectomy and separated in two groups of six, after a period of adaptation of 60 days. Bitches from the first group were an un-innoculated control; whereas treated bitches received 0.01mg/kg per os of natural estrogen every 48 hours for 12 months. Radiographs were taken on the day of surgery and 12 months later. Variation in bone density was quantified by optic densitometry in radiographic images. Ovariohysterectomy decreased bone density, whereas estrogen replacement moderated the effect.(AU)

Perfil lipoprotéico de cadelas submetidas à ovário-histerectomia com e sem reposição estrogênica / Lipoproteic profile of bitches submitted to ovaryhysterectomy with and without estrogen administration

Doze cadelas mestiças, adultas, foram submetidas à ovário-histerectomia e posteriormente distribuídas em dois grupos de seis animais. Um dos grupos recebeu estrógenos naturais conjugados na dose de 0,01mg/kg, via oral, a cada 48 horas, durante 12 meses, e o outro serviu como controle. A cada 60 dias foram realizadas colheitas de sangue e obtidos os valores de colesterol total, triglicerídeos, HDL, LDL e VLDL. Houve elevação do colesterol total e do LDL nas fêmeas sem reposição de hormônio. No grupo que recebeu estrógenos houve elevação do HDL. A ovário-histerectomia influenciou significativamente o perfil lipoprotéico; a reposição com estrógenos foi capaz de preservar esse perfil nas cadelas castradas.(AU)

Twelve mixed-bred, bitches were divided in two groups of six animals each after ovariohysterectomy. One group received 0.01mg/kg per os of natural conjugated estrogens every 48h for 12 months; the other group, used as control, was not treated with hormones. Blood samples were collected every 60 days and the levels of total cholesterol, triglycerides, HDL, LDL and VLDL were determined. Ovariohysterectomy affected the lipoproteic profile, increasing the total cholesterol and LDL levels; it also showed that the estrogen supplementation maintained the lipoproteic profile of castrated bitches within normal levels.(AU)