An RT-rtPCR assay for detection of rabies virus in bovine specimens / Um ensaio RT-rtPCR para detecção de vírus da raiva em espécimes bovinos

ABSTRACT: Bovine rabies is endemic in most Brazilian States, including Rio Grande do Sul (RS), which has faced an unprecedented rabies outbreak between 2011 and 2018. We described a real-time reverse transcription quantitative PCR (RT-rtPCR) for detection of rabies virus (RABV) in bovine samples. The primers were designed targeting a highly conserved region of the nucleoprotein (N) gene of RABV obtained from cattle. The detection limit corresponded to 13 DNA copies and the intra- and inter-run repeatability was adequate (CV<9%) in all dilutions tested. Amplification of other pathogens associated with neurological disease in cattle or cross-contamination was not observed. Brain samples from cattle suspicious of rabies (n=21) were tested in triplicate by the RT-rtPCR and by the gold-standard direct fluorescent antibody test (DFAT), resulting in 100% of sensitivity and specificity of the RT-rtPCR. Testing of additional 41 bovine brain samples submitted to the routine DFAT testing yielded 37 (90.2%) concordant results (30 positive/7 negative) and 4 (9.7%) inconclusive in DFAT and RT-rtPCR positive. These results showed a good concordance between the tests and a higher sensitivity of the RT-rtPCR. This assay represents an alternative for RABV detection, either as a confirmatory test or for large-scale diagnosis in endemic regions.

RESUMO: A raiva bovina é endêmica na maioria dos estados brasileiros, inclusive no Rio Grande do Sul (RS), que enfrentou um surto de raiva sem precedentes entre 2011 e 2018. Descrevemos um PCR quantitativo de transcrição reversa em tempo real (RT-rtPCR) para detecção do vírus da raiva (RABV) em bovinos. Os primers foram desenhados visando uma região altamente conservada do gene da nucleoproteína (N) de RABV obtido de bovinos. O limite de detecção correspondeu a 13 cópias de DNA e a repetibilidade intra e inter-ensaios foi adequada (CV <9%) em todas as diluições testadas. Não foi observada amplificação de outros patógenos associados a doenças neurológicas em bovinos ou contaminação cruzada. Amostras de cérebro de bovinos com suspeita de raiva (n = 21) foram testadas em triplicata no RT-rtPCR e pelo teste de anticorpo fluorescente padrão ouro (DFAT), resultando em 100% de sensibilidade e especificidade do RT-rtPCR. O teste de 41 amostras de cérebro bovino adicionais submetidas ao teste de DFAT de rotina rendeu 37 (90,2%) resultados concordantes (30 positivos / sete negativos) e quatro (9,7%) inconclusivos em DFAT e RT-rtPCR positivo. Esses resultados mostraram boa concordância entre os testes e maior sensibilidade do RT-rtPCR. Este ensaio representa uma alternativa para a detecção do vírus da raiva, seja como teste confirmatório ou para diagnóstico em larga escala em regiões endêmicas.

Neurological diseases of viral origin in cattle in the state of Pernambuco, Brazil: clinical and anatomopathological study / Enfermidades neurológicas de origem viral em bovinos no estado de Pernambuco, Brasil: estudo clínico e anatomopatológico

Studies related to neurological diseases are of great importance in Veterinary Medicine, particularly those involving production animals, such as cattle, due to their wide sanitary and public health significance. Therefore, the current study aims to describe the frequency of occurrence of the main clinical, laboratory, and anatomopathological findings of cattle diagnosed with neurological diseases of viral origin. Screening was performed in the general register of patients diagnosed through anatomopathological and/or complementary examination with illnesses of viral origin, admitted (live or dead) to the Clínica de Bovinos de Garanhuns-UFRPE from January 2009 to December 2019. The information recovered was entered in a database created in the computer program Microsoft Excel 2010®, distributed into clinical, laboratory, and anatomopathological data. The clinical findings on neurological diseases of viral etiology were very varied and non-specific, and the anatomopathological findings, together with laboratory methods, were of fundamental importance for the establishment of the diagnosis. The high frequency of rabies cases in this study demonstrates the importance of this disease for cattle rearing, as well as for Public Health. We emphasize the importance of including malignant catarrhal fever and herpes meningoencephalitis in the differential diagnosis of neurological diseases in the region, as well as the adoption of sanitary measures.

Os estudos relacionados as doenças neurológicas assumem grande importância na Medicina Veterinária, particularmente os que envolvem animais de produção como os bovinos, em virtude da grande importância sanitária e de saúde pública. Nesse contexto, este trabalho teve como objetivo descrever a frequência de ocorrência dos principais achados clínicos, laboratoriais e anatomopatológicos dos bovinos diagnosticados com doenças neurológicas de origem viral. Realizou-se a triagem no livro de registro geral dos pacientes com enfermidades que cursaram com sintomatologia neurológica e que foram diagnosticados através de exame anatomopatológico e/ou complementares com enfermidades de origem viral, os quais deram entrada (vivos ou mortos) na Clínica de Bovinos de Garanhuns-UFRPE no período de janeiro de 2009 a dezembro de 2019. As informações obtidas foram inseridas em um banco de dados elaborado no programa de computador Microsoft Excel 2010® distribuídas em dados clínicos, laboratoriais e anatomopatológicos. Os achados clínicos das enfermidades neurológicas de etiologia viral foram muito variados e inespecíficos, sendo os achados anatomopatológicos, aliados aos métodos laboratoriais, de importância fundamental para o estabelecimento do diagnóstico. A elevada frequência dos casos de raiva neste estudo demonstra a importância sanitária desta enfermidade para a pecuária bovina, como também para a saúde pública. Ressalta-se a importância da inclusão da febre catarral maligna e da meningoencefalite herpética no diagnóstico diferencial das doenças neurológicas na região, assim como a adoção de medidas sanitárias.

An RT-rtPCR assay for detection of rabies virus in bovine specimens / Um ensaio RT-rtPCR para detecção de vírus da raiva em espécimes bovinos

Bovine rabies is endemic in most Brazilian States, including Rio Grande do Sul (RS), which has faced an unprecedented rabies outbreak between 2011 and 2018. We described a real-time reverse transcription quantitative PCR (RT-rtPCR) for detection of rabies virus (RABV) in bovine samples. The primers were designed targeting a highly conserved region of the nucleoprotein (N) gene of RABV obtained from cattle. The detection limit corresponded to 13 DNA copies and the intra- and inter-run repeatability was adequate (CV<9%) in all dilutions tested. Amplification of other pathogens associated with neurological disease in cattle or cross-contamination was not observed. Brain samples from cattle suspicious of rabies (n=21) were tested in triplicate by the RT-rtPCR and by the gold-standard direct fluorescent antibody test (DFAT), resulting in 100% of sensitivity and specificity of the RT-rtPCR. Testing of additional 41 bovine brain samples submitted to the routine DFAT testing yielded 37 (90.2%) concordant results (30 positive/7 negative) and 4 (9.7%) inconclusive in DFAT and RT-rtPCR positive. These results showed a good concordance between the tests and a higher sensitivity of the RT-rtPCR. This assay represents an alternative for RABV detection, either as a confirmatory test or for large-scale diagnosis in endemic regions.

A raiva bovina é endêmica na maioria dos estados brasileiros, inclusive no Rio Grande do Sul (RS), que enfrentou um surto de raiva sem precedentes entre 2011 e 2018. Descrevemos um PCR quantitativo de transcrição reversa em tempo real (RT-rtPCR) para detecção do vírus da raiva (RABV) em bovinos. Os primers foram desenhados visando uma região altamente conservada do gene da nucleoproteína (N) de RABV obtido de bovinos. O limite de detecção correspondeu a 13 cópias de DNA e a repetibilidade intra e inter-ensaios foi adequada (CV <9%) em todas as diluições testadas. Não foi observada amplificação de outros patógenos associados a doenças neurológicas em bovinos ou contaminação cruzada. Amostras de cérebro de bovinos com suspeita de raiva (n = 21) foram testadas em triplicata no RT-rtPCR e pelo teste de anticorpo fluorescente padrão ouro (DFAT), resultando em 100% de sensibilidade e especificidade do RT-rtPCR. O teste de 41 amostras de cérebro bovino adicionais submetidas ao teste de DFAT de rotina rendeu 37 (90,2%) resultados concordantes (30 positivos / sete negativos) e quatro (9,7%) inconclusivos em DFAT e RT-rtPCR positivo. Esses resultados mostraram boa concordância entre os testes e maior sensibilidade do RT-rtPCR. Este ensaio representa uma alternativa para a detecção do vírus da raiva, seja como teste confirmatório ou para diagnóstico em larga escala em regiões endêmicas.

Viral diseases of sheep in Brazil: a review and current status / Doenças virais em ovinos no Brasil: revisão e status atual

The increase in sheep production is directly related to the health status of the flock. Brazil is one of the largest sheep producers in the world, and the sheep flock is concentrated in southern and northeast regions. Infectious diseases are responsible for severe economic losses resulting from a decrease in milk and meat production, deaths, and cost of treatment. Among infectious diseases, viral diseases are described chiefly in case reports or retrospective studies. This study aimed to review the main features of viral diseases that affect sheep in Brazil and their current situation in the Brazilian territory. We included eight viral diseases described in Brazil: rabies, bluetongue, contagious ecthyma, foot and mouth disease, visna-maedi, enzootic nasal tumor, ovine pulmonary adenocarcinoma, and border disease. We review the etiological, epidemiological, clinical, and pathological findings for each agent and included differential diagnoses, information on recommended diagnostic methods to confirm the disease etiology, and control measures. This study served as quick consultation material for field veterinarians for an accurate diagnosis.

O aumento da produção ovina está diretamente relacionado ao status sanitário do rebanho. O Brasil é um dos maiores produtores mundiais de ovinos, e o rebanho está concentrado nas regiões nordeste e sul do país. As doenças infecciosas são responsáveis por perdas econômicas severas que resultam da diminuição na produção de leite e carne, mortes e custos com tratamentos. Entre os agentes infecciosos, as doenças de origem viral são, em sua maioria, descritas em relatos de caso ou estudos retrospectivos. Este estudo teve como objetivo revisar as principais características das doenças virais que afetam ovinos no território brasileiro, e qual sua situação atual. Nós incluímos oito doenças virais diagnosticadas no Brasil: raiva, língua azul, ectima contagioso, febre aftosa, maedi-visna, tumor enzoótico nasal, adenocarcinoma pulmonar ovino, e pestivirose. Revisamos os achados etiológicos, epidemiológicos, clínicos e patológicos de cada agente e incluímos seus respectivos diagnósticos diferenciais, informações acerca dos métodos diagnósticos para confirmação da etiologia da doença e medidas de controle e prevenção. Esse estudo tem o propósito de servir como objetivo servir de material de consulta rápida, especialmente para veterinários de campo realizar um diagnóstico acurado.

Descriptive cross-sectional study on major bovine diseases and associated risk factors in north-eastern Ecuadorian Amazon / Estudo transversal descritivo sobre as principais doenças bovinas e fatores de risco associados no nordeste da Amazônia equatoriana

Cattle raising is a crucial element of production systems in the tropics and subtropics. However, in recent years, global public health security has been threatened by disease emergence. In Orellana Province, livestock is the most important activity to generate economic income. Nevertheless, there is no available data about Animal Health status. With this objective, a study was performed to describe the major Bovine diseases recorded between 2011 to 2019, and the main Risk factors associated. Data on main Bovine diseases were retrieved from the World Animal Health Information System database. Whereas Bovine population data used to calculate the prevalence rates and confidence intervals were obtained from Ecuador's Ministry of Agriculture. By contrast, the Risk factors identified with an epidemiological questionnaire were applied to 300 livestock farmers. As a result, from 2011 to 2019 in Orellana has been confirmed: 90 cases of Infectious Bovine Rhinotracheitis (31.58%), Bovine Rabies by hematophagous bats (Desmodus rotundus), 83 cases (29.12%), Bovine viral diarrhea with 43 cases (15.10%), Brucellosis by Brucella abortus 35 cases, which was (12.28%), and 34 cases related to Enzootic bovine leukosis (11.92%). Overall, the prevalence rates ranged from (0.24 to 15.37%). In addition, farm size, presence of forest, herd, and paddock sizes, cutting frequency of forages, and other animal species were involved as Risk factors (OR = 3.15 to 11.75; 95% CI, 0.01 to 0.69). In conclusion, there are animal diseases with reproductive and neurologic symptomology and high-Risk factors implicated in the transmission. Consequently, space-temporal and seroprevalence epidemiological studies should be performed in Orellana.

A criação de gado é um elemento crucial dos sistemas de produção nos trópicos e subtrópicos. No entanto, nos últimos anos, a segurança da saúde pública global tem sido ameaçada pelo surgimento de doenças. Na província de Orellana, a pecuária é a atividade mais importante para gerar renda econômica. Contudo, não há dados disponíveis sobre o estado de saúde animal. Com este objetivo, foi realizado um estudo para descrever as principais doenças dos bovinos registradas entre 2011 e 2019, além dos principais fatores de risco associados. Os dados sobre as principais doenças bovinas foram recuperados do banco de dados do World Animal Health Information System. Os dados da população bovina usados para calcular as taxas de prevalência e os intervalos de confiança foram obtidos do Ministério da Agricultura do Equador. Por outro lado, os fatores de risco identificados com um questionário epidemiológico foram aplicados a 300 criadores de gado. Como resultado, de 2011 a 2019 em Orellana foram confirmados: 90 casos (31,58%) de rinotraqueíte infecciosa bovina, 83 casos (29,12%) de raiva bovina por morcegos hematófagos (Desmodus rotundus), 43 casos (15,10%) de diarreia viral bovina, 35 casos (12,28%) de brucelose por Brucella abortus e 34 casos relacionados à leucose enzoótica bovina (11,92%). No geral, as taxas de prevalência variaram de 0,24 a 15,37%. Além disso, tamanho da fazenda, presença de floresta, tamanho do rebanho e dos piquetes, frequência de corte de forragens e outras espécies animais estiveram envolvidos como fatores de risco (OR = 3,15-11,75; IC 95% 0,01-0,69). Em conclusão, existem doenças animais com sintomatologia reprodutiva e neurológica e fatores de alto risco implicados na transmissão. Portanto, estudos epidemiológicos espaço-temporais e de soroprevalência devem ser realizados em Orellana.

Human rabies post-exposure prophylaxis: a review of the treatment of accidents involving domestic cats / Profilaxia pós-exposição da raiva humana: uma revisão dos tratamentos envolvendo gatos domésticos

Rabies is an anthropozoonosis that presents approximately 100% lethality and expensive preventive assistance. Many human post-exposure anti-rabies treatments indicated for people at risk of exposure to rabies virus, usually due to some aggression by a mammalian animal, are instituted annually. This study aimed to evaluate the initial care of post-exposure prophylaxis of human rabies in Belo Horizonte between 2007 and 2016, involving accidents with domestic cats. It was found 71.1% agreement between the treatments instituted by health services and the protocol of the Ministry of Health. Treatments classified as insufficient totaled 18.3% and excessive, 10.6%. The animals were healthy in 68% and observable in 68.4% of the cases. Treatments involving the use of anti-rabies vaccine totaled 87.7%. The most frequent treatment adopted by the health services was observing the animals associated with the human anti-rabies vaccination in 56.7% of the cases. Imperfections in the filling of the notifications must be revised to enable improvements for future analyses. As for human prophylactic anti-rabies care, forming a multidisciplinary health team including veterinarians would be well on the way to improving the service offered.(AU)

A raiva é uma antropozoonose que apresenta aproximadamente 100% de letalidade e alto custo na assistência pre-ventiva. É instituído anualmente, um elevado número de tratamento antirrábico humano pós-exposição, o qual é indicado para pessoas que se encontram sob risco de exposição ao vírus rábico, geralmente devido a alguma agressão por animal mamí-fero. Este trabalho teve como objetivo avaliar o atendimento inicial da profilaxia pós-exposição da raiva humana, em Belo Horizonte, entre os anos de 2007 a 2016, envolvendo acidentes com gatos domésticos. Encontrou-se 71,1% de concordân-cia entre os tratamentos instituídos pelos serviços de saúde e o protocolo do Ministério da Saúde. Tratamentos classificados como insuficientes totalizaram 18,3% e excessivos 10,6%. Os animais eram sadios em 68% e observáveis em 68,4% dos casos. Tratamentos que envolviam o uso de vacina antirrábica totalizaram 87,7%. O tratamento adotado pelos serviços de saúde com maior frequência foi a observação do animal associada à vacinação antirrábica humana em 56,7% dos casos. É necessário que imperfeições no preenchimento das notificações sejam revistas de forma a possibilitar melhorias para análises futuras. Quanto ao atendimento antirrábico profilático humano, a formação de uma equipe multidisciplinar de saúde com inclusão de médi-cos veterinários seria uma forma de aprimorar o serviço oferecido.(AU)

Evaluation of maternal antibodies against rabies in puppies and kittens in Mazandaran Province, Iran / [Avaliação de anticorpos maternos contra a raiva em filhotes de cachorro e gatos na província de Mazandaran, Irã]

Rabies is a critical zoonotic high-risk disease, which has emerged as an important public-health problem. There are limited investigations that explore maternally derived antibody (MDA) in puppies and kittens from around the world. Furthermore, there is no such research in any province of Iran. This study measured the serum level of MDA in 10 puppies and their vaccinated bitches (n=20), 10 puppies and their unvaccinated bitches (n=20), 10 kittens with vaccinated queens and 10 kittens with unvaccinated queens. Antibodies against rabies were measured using quantitative, enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Our results showed that 90% (9 out of 10) of puppies from vaccinated bitches were positive for anti-rabies antibodies, while test results for all puppies from non-vaccinated bitches were negative (P=0.001). Moreover, puppies' titers were significantly higher in the vaccinated group than the non-vaccinated group (P=0.003). There was a similar condition between vaccinated and non-vaccinated bitches (P=0.008). Although kittens' titers were significantly higher in the vaccinated group than the non-vaccinated group (P=0.03), only 20 percent of the kittens with vaccinated queens showed positive results, while all kittens from non-vaccinated queens were negative for anti-rabies antibodies (P=0.137).

A raiva é uma doença zoonótica crítica de alto risco, que surgiu como um importante problema de saúde pública. Há investigações limitadas que exploram anticorpos derivados da maternidade (MDA) em filhotes e gatos de todo o mundo. Além disso, não existe tal pesquisa em nenhuma província do Irã. Este estudo mediu o nível sérico do MDA em 10 filhotes e suas cadelas vacinadas (n=20), 10 filhotes e suas cadelas não vacinadas (n=20), 10 filhotes com rainhas vacinadas e 10 filhotes com rainhas não vacinadas. Os anticorpos contra a raiva foram medidos usando o ensaio quantitativo de imunoabsorção enzimática (ELISA). Nossos resultados mostraram que 90% (9 em cada 10) dos filhotes de cadelas vacinadas foram positivos para anticorpos anti-rábicos, enquanto os resultados dos testes para todos os filhotes de cadelas não vacinadas foram negativos (P=0,001). Além disso, os títulos dos filhotes foram significativamente mais altos no grupo vacinado do que no grupo não vacinado (P=0,003). Havia uma condição similar entre cadelas vacinadas e não vacinadas (P=0,008). Embora os títulos dos filhotes fossem significativamente mais altos no grupo vacinado do que no grupo não vacinado (P=0,03), apenas 20% dos filhotes com rainhas vacinadas apresentaram resultados positivos, enquanto todos os filhotes de rainhas não vacinadas foram negativos para anticorpos anti-rábicos (P=0,137).

Critical analysis of the cat's role in the epidemiology of rabies / Análise crítica do papel do gato na epidemiologia da raiva

Rabies is a fatal zoonosis of world importance that in many aspects is still neglected. Due to national vaccination campaigns for dogs and cats, there has been a drastic reduction in the number of cases of human rabies transmitted by dogs. However, due to species peculiarities, the cat can act as an important link in the epidemiological chain of rabies. Thus, this study aimed to evaluate Brazilian data on canine and feline rabies surveillance to determine the importance of the cat in the current context of rabies epidemiology. In Brazil, recent cases of ORCID ID 1. https://orcid.org/0000-0003-0764-5234 2. https://orcid.org/0000-0002-6569-749X 3. https://orcid.org/0000-0003-2999-323X human rabies transmitted by cats have been reported, showing the importance of this species in the epidemiological chain of the disease.(AU)

A raiva é uma zoonose fatal de importância mundial que em muitos aspectos ainda é negligenciada. Devido às campanhas nacionais de vacinação de cães e gatos, houve uma redução drástica no número de casos de raiva humana transmitida por cães. Contudo, por peculiaridades da espécie, o gato doméstico pode atuar como um elo importante na cadeia epidemiológica da raiva. Posto isto, objetivou-se avaliar os dados brasileiros da vigilância da raiva canina e felina para se determinar a importância do gato no contexto atual da epidemiologia da raiva. No Brasil, casos recentes de raiva humana transmitida por gatos foram relatados, evidenciando a importância dessa espécie na cadeia epidemiológica da doença.(AU)

Rabies in a previously vaccinated horse: case report / Raiva em equino previamente vacinado: relato de caso

Rabies is an acute, progressive, and fatal encephalomyelitis caused by a Lyssavirus. Horses affected by the disease may be a source of infection for humans. A rapid diagnosis is crucial to initiate a prompt and adequate infection control and public health measures. This manuscript reports the case of a 4-year-old gelding, 370 kg, healthy and routinely used for veterinary teaching purposes that developed rabies although vaccinated against it. Clinical signs included lameness, ataxia, muscle tremors, decubitus and pedalling, progressive paralysis, profuse salivation, teeth grinding, and whinnying. After 4 days, the animal was euthanised and definitive diagnosis was achieved through an animal inoculation test which was positive. Complementary findings included encephalomyelitis with perivascular cuffs and identification of Negri bodies in various areas of the brain.(AU)

A raiva é uma encefalomielite aguda, progressiva e fatal causada por um Lyssavirus. Cavalos acometidos pela doença podem ser uma fonte de infecção para homens. O rápido diagnóstico é crucial para que iniciem medidas de controle de infecção e de saúde pública adequadas. Esse manuscrito descreve o caso clínico de um equino de 4 anos, macho castrado, 370 kg, hígido, usado nas práticas didáticas da escola de veterinária que desenvolveu quadro clínico de raiva, apesar de ser vacinado contra a referida doença. Os sinais clínicos incluíram claudicação, ataxia, tremores musculares, decúbito e movimentos de pedalagem, paralisia progressiva, salivação profusa, bruxismo e relinchos. Após 4 dias, o animal foi eutanasiado e o diagnóstico definitivo foi feito através de prova biológica positivada. Os achados complementares incluíram os achados histopatológicos nos quais destacam-se encefamolielite com manguitos perivasculares e identificação de Corpúsculos de Negri em várias áreas do cérebro.(AU)

Profilaxia antirrábica humana: um diagnóstico de riscos e desperdícios em Fortaleza, Ceará, 2009 a 2019 / Human anti-rabies prophylaxis: a diagnosis of risks and wastes in Fortaleza, Ceará, 2009 to 2019 / Profilaxia humana antirrábica: um diagnóstico de riesgos y desperdicios en Fortaleza, Ceará, 2009 a 2019

Introdução: A raiva é uma antropozoonose que acomete apenas mamíferos. Todo atendimento por acidente por animal potencialmente transmissor da raiva deve ser notificado. A correta indicação de uso dos insumos para o tratamento profilático deve obedecer às normas do Ministério da Saúde, para que não sejam prescritos tratamentos incorretos ou desnecessários. Objetivo: Avaliar o desperdício de imunobiológicos e os riscos aos quais pacientes foram expostos devido a prescrições inadequadas da profilaxia antirrábica humana no município de Fortaleza, Ceará, de 2009 a 2019. Método: Estudo descritivo com dados secundários consolidados das Fichas de Investigação de Atendimento Antirrábico Humano do Sistema de Informação de Agravos de Notificação (SINAN). Resultados: Foram incluídas 53.251 notificações de atendimento antirrábico humano nesse trabalho. Deste total, 43,8% prescrições foram incorretas, sendo que 55,7% ofereceram risco à vida do paciente e 42,9% envolveram excesso de vacinas. Além disso, 43,3% continham lacunas em seu preenchimento. Conclusão: Foi possível constatar o alto percentual de fichas de atendimento antirrábico humano com prescrições inadequadas e preenchimento incompleto, evidenciando a necessidade de capacitação dos profissionais de saúde. Sugere-se a inclusão de médicos veterinários nos serviços de Atenção Primária e Vigilância Epidemiológica para reduzir erros e otimizar a utilização dos recursos públicos.

Introduction: Rabies is an anthropozoonosis that affects only mammals. All care for an accident by a potential rabies-transmitting animal must be notified. The correct designation of supplies for prophylactic treatment in Brazil must comply with the norms of the Brazilian Ministry of Health, so that incorrect or unnecessary treatments are not prescribed. Objective: To evaluate the immunobiological waste and the risks to which patients were exposed due to inadequate prescriptions for human anti-rabies prophylaxis in the city of Fortaleza, Ceará, from 2009 to 2019. Methods: Descriptive study using with consolidated secondary data from the Investigation Forms of Human Anti-rabies Care of the Brazilian Notifiable Diseases Information System. Results: 53,251 notifications of human anti-rabies care were included in this study. Of this total, 43.8% prescriptions were incorrect, with 55.7% offering risk to the patient's life and 42.9% involving excess vaccines. In addition, 43.3% contained gaps on notification form filling. Conclusion: It was possible to verify high percentage of records of human anti-rabies care with inadequate prescriptions and incomplete form filling, showing the need of training of health professionals. It is suggested that veterinarians be included in Primary Care and Epidemiological Monitoring services to reduce errors and optimize the use of public resources.

Introducción: La rabia es una antropozoonosis que afecta únicamente a los mamíferos. Toda atención a un accidente por un animal potencialmente transmisor de la rabia debe ser notificada. La indicación correcta para el uso de insumos para el tratamiento profiláctico debe cumplir con las normas del Ministerio de Salud brasileño, para que no se prescriban tratamientos incorrectos O innecesarios. Objetivo: Evaluar el desperdicio de inmunobiológicos y los riesgos que estuvieron expuestos los pacientes por prescripción inadecuada de profilaxis antirrábica humana en la ciudad de Fortaleza, Ceará, de 2009 a 2019. Métodos: Estudio descriptivo con datos secundarios consolidados de los Formularios de Investigación de Atención Antirrábica Humana del Sistema de Información de Enfermedades de Declaración Obligatoria brasileño. Resultados: En este estudio se incluyeron 53.251 notificaciones de atención antirrábica en humanos. De este total, el 43,8% de las prescripciones fueron incorrectas, el 55,7% de las cuales ofrecieron riesgo para la vida del paciente y el 42,9% involucró un exceso de vacunas. Además, el 43,3% contenía lagunas em su llenado. Conclusión: Se pudo constatar el alto porcentaje de registros de atención antirrábica humana con prescripción inadecuada y llenado incompleto, evidenciando la necesidad de capacitación de los profesionales de la salud. Se sugiere incluir a los veterinarios en los servicios de Atención Primaria y Vigilancia Epidemiológica para reducir errores y optimizar el uso de los recursos públicos.

Investigação de evento adverso associado à vacinação antirrábica / Investigation of adverse event following immunization associated with antirabies vaccine / Investigación del evento adverso asociado a la vacunación antirrábica

A raiva é uma antropozoonose endêmica no Brasil. O animal infectado transmite o vírus rábico principalmente através de mordeduras. Por muitos anos cães e gatos representaram a principal fonte de infecção para seres humanos em áreas urbanas. Desde o ano de 1973, o Programa Nacional de Profilaxia da Raiva estabelece que cães e gatos devem ser imunizados contra raiva. A vacinação animal é um meio seguro, confiável e eficaz para proteger animais contra doenças infecciosas e prevenir a transmissão de zoonoses, contudo a administração de vacinas não é isenta de riscos. Portanto as ocorrências de evento adverso associados à vacinação devem ser investigadas, pois a demonstração da segurança das vacinas contribuiu para o sucesso dos programas de imunização. Este estudo descreve o relato de caso de um animal suspeito de apresentar reação adversa à vacinação antirrábica.

Rabies is an endemic anthropozoonosis in Brazil. The infected animal transmits the rabies virus mainly by bites. For many years dogs and cats represented the main source of infection to humans in urban areas. Since 1973, the National Rabies Prophylaxis Program has established that dogs and cats must be immunized against rabies. The animal vaccination is safe, reliable and effective to protect animals against infectious diseases and prevent the transmission of zoonoses, however the administration of vaccines is not without risks. The occurrences of adverse events associated with vaccination should be investigated, because the demonstration of vaccine safety contributed to the success of immunization programs. This study describes a case report of one animal suspected of having an adverse reaction to rabies vaccination.

La rabia es una antropozoonosis endémica en Brasil. El animal infectado transmite el virus de la rabia principalmente a través de mordeduras. Durante muchos años, los perros y gatos representaron la principal fuente de infección para los humanos en las zonas urbanas. Desde 1973, el Programa Nacional de Profilaxis de la Rabia ha establecido que los perros y gatos deben ser inmunizados contra la rabia. La vacunación animal es una forma segura, fiable y eficaz de proteger a los animales contra enfermedades infecciosas y prevenir la transmisión de zoonosis, sin embargo, la administración de vacunas no está exenta de riesgos. Por lo tanto, se debe investigar la ocurrencia de eventos adversos asociados con la vacunación, ya que la demostración de la seguridad de la vacuna contribuyó al éxito de los programas de inmunización. Este estudio describe el reporte de un caso de un animal sospechoso de tener una reacción adversa a la vacunación antirrábica.

Investigación del evento adverso asociado a la vacunación antirrábica / Investigation of adverse event following immunization associated with antirabies vaccine / Investigação de evento adverso associado à vacinação antirrábica

La rabia es una antropozoonosis endémica en Brasil. El animal infectado transmite el virus de la rabia principalmente a través de mordeduras. Durante muchos años, los perros y gatos representaron la principal fuente de infección para los humanos en las zonas urbanas. Desde 1973, el Programa Nacional de Profilaxis de la Rabia ha establecido que los perros y gatos deben ser inmunizados contra la rabia. La vacunación animal es una forma segura, fiable y eficaz de proteger a los animales contra enfermedades infecciosas y prevenir la transmisión de zoonosis, sin embargo, la administración de vacunas no está exenta de riesgos. Por lo tanto, se debe investigar la ocurrencia de eventos adversos asociados con la vacunación, ya que la demostración de la seguridad de la vacuna contribuyó al éxito de los programas de inmunización. Este estudio describe el reporte de un caso de un animal sospechoso de tener una reacción adversa a la vacunación antirrábica.

Rabies is an endemic anthropozoonosis in Brazil. The infected animal transmits the rabies virus mainly by bites. For many years dogs and cats represented the main source of infection to humans in urban areas. Since 1973, the National Rabies Prophylaxis Program has established that dogs and cats must be immunized against rabies. The animal vaccination is safe, reliable and effective to protect animals against infectious diseases and prevent the transmission of zoonoses, however the administration of vaccines is not without risks. The occurrences of adverse events associated with vaccination should be investigated, because the demonstration of vaccine safety contributed to the success of immunization programs. This study describes a case report of one animal suspected of having an adverse reaction to rabies vaccination.

A raiva é uma antropozoonose endêmica no Brasil. O animal infectado transmite o vírus rábico principalmente através de mordeduras. Por muitos anos cães e gatos representaram a principal fonte de infecção para seres humanos em áreas urbanas. Desde o ano de 1973, o Programa Nacional de Profilaxia da Raiva estabelece que cães e gatos devem ser imunizados contra raiva. A vacinação animal é um meio seguro, confiável e eficaz para proteger animais contra doenças infecciosas e prevenir a transmissão de zoonoses, contudo a administração de vacinas não é isenta de riscos. Portanto as ocorrências de evento adverso associados à vacinação devem ser investigadas, pois a demonstração da segurança das vacinas contribuiu para o sucesso dos programas de imunização. Este estudo descreve o relato de caso de um animal suspeito de apresentar reação adversa à vacinação antirrábica.

Infecção pelo vírus da Febre do Nilo Ocidental em equinos no Estado de São Paulo / West Nile Fever virus infection in horses in São Paulo state, Brazil

Background: The West Nile virus (WNV) antibodies were reported in Brazil in the serum samples taken from horses andbirds in the Midwest region and Paraíba state in 2008 and 2013, respectively. In 2014, the first human case was confirmedin a rural worker in the state of Piauí and, in 2018, the virus was isolated from the central nervous system of a horse withnervous symptoms in the state of Espírito Santo. The virus is a member of the Flaviviridae family of the genus Flavivirus(neurotropic), infecting several mammalian species, with humans and horses being the most susceptible. Approximately35% of horses develop clinical signs, thus they are considered the best sentinels for this disease. The aim of this case reportis to describe the first confirmed cases of West Nile Fever (WNF) in two horses in the state of São Paulo.Cases: Two horses with neurological symptoms were treated at the Veterinary Hospital of Cruzeiro do Sul University (SãoPaulo, SP), in 2019. Both horses came from neighboring regions that have a large Atlantic Forest preservation area and arealso routes for migratory birds, known to be competent hosts for transmitting the West Nile Fever virus, such as the swallow,the falcon and the hawk. The first one had symptoms, such as weakness and sporadic seizures; however, after recovering,it was hospitalized a few days later due to kidney failure and laminitis. The second one showed incoordination, pelviclimb weakness, and was walking in circles, evolving to seizures. Both animals were euthanized, and their central nervoussystem samples and total blood samples were tested for rabies, herpes virus, and WNV; the first 2 tests showed negativeresults. Ribonucleic acids (RNA) were extracted from erythrocytes using the polymerase...

Infecção pelo vírus da Febre do Nilo Ocidental em equinos no Estado de São Paulo / West Nile Fever virus infection in horses in São Paulo state, Brazil

Background: The West Nile virus (WNV) antibodies were reported in Brazil in the serum samples taken from horses andbirds in the Midwest region and Paraíba state in 2008 and 2013, respectively. In 2014, the first human case was confirmedin a rural worker in the state of Piauí and, in 2018, the virus was isolated from the central nervous system of a horse withnervous symptoms in the state of Espírito Santo. The virus is a member of the Flaviviridae family of the genus Flavivirus(neurotropic), infecting several mammalian species, with humans and horses being the most susceptible. Approximately35% of horses develop clinical signs, thus they are considered the best sentinels for this disease. The aim of this case reportis to describe the first confirmed cases of West Nile Fever (WNF) in two horses in the state of São Paulo.Cases: Two horses with neurological symptoms were treated at the Veterinary Hospital of Cruzeiro do Sul University (SãoPaulo, SP), in 2019. Both horses came from neighboring regions that have a large Atlantic Forest preservation area and arealso routes for migratory birds, known to be competent hosts for transmitting the West Nile Fever virus, such as the swallow,the falcon and the hawk. The first one had symptoms, such as weakness and sporadic seizures; however, after recovering,it was hospitalized a few days later due to kidney failure and laminitis. The second one showed incoordination, pelviclimb weakness, and was walking in circles, evolving to seizures. Both animals were euthanized, and their central nervoussystem samples and total blood samples were tested for rabies, herpes virus, and WNV; the first 2 tests showed negativeresults. Ribonucleic acids (RNA) were extracted from erythrocytes using the polymerase...(AU)

Zoonoses como importantes causas de internamento hospitalar: um estudo de 15 anos em Portugal / Zoonoses as important causes of hospital admission: a 15-year study in Portugal

As zoonoses representam 75% das doenças emergentes. Estas doenças são uma ameaça permanente à saúde e bem-estar humanos, e têm o potencial de se tornar cada vez mais frequentes devido à degradação de habitats, alteração de utilização das terras, e aumento da mobilidade global de pessoas, animais e produtos animais. O objetivo deste estudo foi investigar o impacto de dez zoonoses (brucelose, cisticercose, equinococose, leishmaniose, leptospirose, doença de Lyme, raiva, toxoplasmose, triquinelose e febre do Nilo Ocidental) nos internamentos em hospitais do Serviço Nacional de Saúde português entre 2002 e 2016.(AU)

The importance of the dog (Canis lupus familiaris) in cocoa farms as carriers of helminths potentially transmissible to humans and wildlife in the Southern Bahia, Brazil / A importância do cão (Canis lupus familiaris) nas fazendas de cacau como portador de helmintos potencialmente transmissíveis ao homem e à vida selvagem no sul da Bahia, Brasil

Domestic dogs (Canis lupus familiaris) can be considered an invasive species as they have been introduced by humans in different parts of the world and represent a risk to wildlife conservation. Large extensions of agroforestry systems, where cocoa is grown under the shade of native trees, contribute to wildlife conservation in southern Bahia, Brazil. However, this system can increase contact between species of the native fauna and domestic dogs, which are frequently taken to the fields by rural workers. The aims of this study were to investigate the presence of domestic dogs inside cocoa agroforestry systems and the occurrence of helminths in dogs from cocoa farms near two protected areas: the Una Biological Reserve (REBIO-Una) and the Serra das Lontras National Park in Una, Bahia. We also investigated general characteristics of the dogs such as age, sex, breed, feeding frequency, vaccination, deworming and others, and evaluated possible risks of wildlife and human contamination by the domestic dog parasites. Camera traps were set up on eight cocoa agroforestry systems and three adjacent forest fragments. For parasitological investigation, fecal samples were collected from domestic dogs that lived on the eight cocoa farms. A total of 539 photos of 12 mammals were registered, of which 15% were of domestic dogs. The parasitological research was carried out with fecal samples from 32 of the 39 dogs that lived in the cocoa farms. We found one genus of cestode, Dipylidium sp. (7.7%), and five genera of nematodes, Ancylostoma sp. (80.7%), Strongyloides sp. (38.4%), Toxocara sp. (30.7%), Spirocerca sp. (15.4%) and Trichuris sp. (11.5%). Regarding animal care, all dogs were in poor body condition, 49% were fed twice a day, 90% defecated in the forest or cocoa agroforestry systems, only 33% were periodically dewormed, 64% were vaccinated against rabies in less than 12 months, and only one dog was vaccinated against other viruses. The results showed that domestic dogs share the same environment as wild animals yet lack some basic health care, increasing the possibility of parasitic transmission between domestic dogs, wildlife and humans from environmental contamination. We highlight the need for responsible pet ownership and the monitoring the health of wild animals and the human population living in this region.

Cães domésticos (Canis lupus familiaris) podem ser considerados espécies invasoras introduzidas pelo ser humano em diversos lugares do mundo, representando risco para a conservação da fauna. Grandes extensões de sistemas agroflorestais, onde o cacau é cultivado sob a sombra de árvores nativas, contribuem para a conservação da vida selvagem no sul da Bahia, Brasil. Entretanto, esse sistema pode aumentar o contato entre espécies da fauna nativa e cães domésticos, frequentemente levados para o campo por trabalhadores rurais. Os objetivos deste estudo foram investigar a presença de cães domésticos em sistemas agroflorestais de cacau e a ocorrência de helmintos em cães de fazendas de cacau nas proximidades de duas áreas protegidas: a Reserva Biológica de Una (REBIO-Una) e o Parque Nacional da Serra das Lontras, em Una, Bahia. Também foram investigadas as características gerais dos cães como idade, sexo, raça, frequência de alimentação, vacinação, vermifugação e outros, e avaliados os possíveis riscos de contaminação da vida selvagem e seres humanos por parasitas de cães domésticos. Armadilhas fotográficas foram instaladas em oito sistemas agroflorestais de cacau e três fragmentos florestais adjacentes. Para investigação parasitológica, foram coletadas amostras fecais de cães domésticos que viviam nas oito fazendas de cacau. Foram registradas 539 fotos de 12 mamíferos, onde 15% das fotos pertenciam à cães domésticos. A pesquisa parasitológica foi realizada com amostras fecais de 32 dos 39 cães que viviam nas fazendas de cacau. Encontramos um gênero de cestóide: Dipylidium sp. (7,7%), e cinco gêneros de nematóides: Ancylostoma sp. (80,7%), Strongyloides sp. (38,4%), Toxocara sp. (30,7%), Spirocerca sp. (15,4%) e Trichuris sp. (11,5%). Em relação aos cuidados com os animais, todos estavam com score corporal baixo, 49% dos cães eram alimentados duas vezes ao dia, 90% defecam na floresta ou em sistemas agroflorestais de cacau, apenas 33% foram vermifugados periodicamente, 64% vacinados contra a raiva em menos de 12 meses e apenas um cão foi vacinado contra outros vírus. Os resultados mostram que os cães domésticos compartilham o mesmo ambiente que os animais silvestres e carecem de alguns cuidados básicos de saúde, aumentando a possibilidade de trânsito parasitário entre cães domésticos, animais silvestres e humanos por contaminação ambiental. Destaca-se a necessidade de atividades de posse responsável de animais de estimação e o monitoramento da saúde dos animais silvestres e da população humana que vive nesta região.

Bovine rabies in Rio Grande do Sul: positivity rates, geographical distribution, and seasonal occurrence / Raiva bovina no Rio Grande do Sul: taxas de positividade, distribuição geográfica e ocorrência sazonal

Rabies is a zoonotic disease characterized by acute viral encephalitis. It is almost 100% fatal for infected animals. While cases of human rabies have still been registered in Brazil, in the state of Rio Grande do Sul rabies is considered a controlled disease in urban areas. However, the transmission of bovine rabies – which has been largely associated with the Desmodus rotundus bat – is endemic. Additionally, there are estimates that only 10% of rabies cases are reported. Therefore, this study aimed to describe the positivity rates, geographical distribution, and seasonal occurrence of bovine rabies in RS, as well as the sampling practices in rabies surveillance. Using samples submitted for laboratory diagnosis from 2016 to 2019, we conducted a retrospective study of the sample results, positivity rates, and seasonal occurrence of rabies in cattle. Throughout these four years, less than a third of state municipalities sent samples for diagnosis, suggesting that the occurrence of rabies might still be underestimated in non-sampled areas. A higher number of rabies cases were reported in 2019, a year in which the most diagnosed samples and the highest positivity percentages were recorded. However, the case numbers registered between 2016 and 2019 were not significantly different. We found that the summer and autumn months presented statistically different positivity rates. Besides this, we did not find any positive D. rotundus samples, despite the positivity rates for bovine rabies. Active surveillance, especially of bat populations and under-sampled regions, must be strengthened to correctly estimate the impact of rabies.

A raiva é uma zoonose caracterizada por uma encefalite viral aguda, sendo fatal em quase 100% das infecções em animais. Ainda que casos humanos ainda sejam registrados no Brasil, no Rio Grande do Sul (RS) a raiva é considerada uma doença controlada em áreas urbanas. Entretanto, a transmissão da raiva bovina, que tem sido frequentemente associada ao morcego Desmodus rotundus, é endêmica. Ademais, estima-se que apenas 10% de todos os casos de raiva são notificados. Assim, este estudo buscou descrever as taxas de positividade, distribuição geográfica e a ocorrência sazonal da raiva bovina no RS, bem como as práticas de amostragem na vigilância da raiva. Utilizando amostras submetidas a diagnóstico laboratorial de 2016 a 2019, foi realizado um estudo retrospectivo dos resultados laboratoriais, taxas de positividade e ocorrência sazonal da raiva em bovinos. Ao longo dos quatro anos, menos de um terço dos municípios enviou amostras para diagnóstico, sugerindo que a ocorrência da raiva pode ainda ser subestimada em áreas sem amostragem. O maior número de casos de raiva foi notifi-cado em 2019, ano com o maior número de amostras enviadas para diagnóstico e maior taxa de positividade. Apesar disso, o número de casos registrados entre 2016 e 2019 não foram significativamente diferentes. Foram encontrados valores estatisti-camente diferentes nas taxas de positividade dos meses de verão e outono. Além disso, não foram detectadas amostras positivas de D. rotundus, apesar das taxas de positividade da raiva bovina. A vigilância ativa, especialmente das populações de morcegos e regiões não amostradas, deve ser fortalecida para mensurar adequadamente o impacto da raiva.

Bovine rabies in Rio Grande do Sul: positivity rates, geographical distribution, and seasonal occurrence / Raiva bovina no Rio Grande do Sul: taxas de positividade, distribuição geográfica e ocorrência sazonal

Rabies is a zoonotic disease characterized by acute viral encephalitis. It is almost 100% fatal for infected animals. While cases of human rabies have still been registered in Brazil, in the state of Rio Grande do Sul rabies is considered a controlled disease in urban areas. However, the transmission of bovine rabies which has been largely associated with the Desmodus rotundus bat is endemic. Additionally, there are estimates that only 10% of rabies cases are reported. Therefore, this study aimed to describe the positivity rates, geographical distribution, and seasonal occurrence of bovine rabies in RS, as well as the sampling practices in rabies surveillance. Using samples submitted for laboratory diagnosis from 2016 to 2019, we conducted a retrospective study of the sample results, positivity rates, and seasonal occurrence of rabies in cattle. Throughout these four years, less than a third of state municipalities sent samples for diagnosis, suggesting that the occurrence of rabies might still be underestimated in non-sampled areas. A higher number of rabies cases were reported in 2019, a year in which the most diagnosed samples and the highest positivity percentages were recorded. However, the case numbers registered between 2016 and 2019 were not significantly different. We found that the summer and autumn months presented statistically different positivity rates. Besides this, we did not find any positive D. rotundus samples, despite the positivity rates for bovine rabies. Active surveillance, especially of bat populations and under-sampled regions, must be strengthened to correctly estimate the impact of rabies.(AU)

A raiva é uma zoonose caracterizada por uma encefalite viral aguda, sendo fatal em quase 100% das infecções em animais. Ainda que casos humanos ainda sejam registrados no Brasil, no Rio Grande do Sul (RS) a raiva é considerada uma doença controlada em áreas urbanas. Entretanto, a transmissão da raiva bovina, que tem sido frequentemente associada ao morcego Desmodus rotundus, é endêmica. Ademais, estima-se que apenas 10% de todos os casos de raiva são notificados. Assim, este estudo buscou descrever as taxas de positividade, distribuição geográfica e a ocorrência sazonal da raiva bovina no RS, bem como as práticas de amostragem na vigilância da raiva. Utilizando amostras submetidas a diagnóstico laboratorial de 2016 a 2019, foi realizado um estudo retrospectivo dos resultados laboratoriais, taxas de positividade e ocorrência sazonal da raiva em bovinos. Ao longo dos quatro anos, menos de um terço dos municípios enviou amostras para diagnóstico, sugerindo que a ocorrência da raiva pode ainda ser subestimada em áreas sem amostragem. O maior número de casos de raiva foi notifi-cado em 2019, ano com o maior número de amostras enviadas para diagnóstico e maior taxa de positividade. Apesar disso, o número de casos registrados entre 2016 e 2019 não foram significativamente diferentes. Foram encontrados valores estatisti-camente diferentes nas taxas de positividade dos meses de verão e outono. Além disso, não foram detectadas amostras positivas de D. rotundus, apesar das taxas de positividade da raiva bovina. A vigilância ativa, especialmente das populações de morcegos e regiões não amostradas, deve ser fortalecida para mensurar adequadamente o impacto da raiva.(AU)

Blood metabolic and hematology parameters and survivorship in mice after application of the rabies challenge virus standard in vaccine potency test

Background: Rabies virus can cause intensive and lethal infection of the central nervous system (CNS) in animals andhumans. Metabolic examinations are conducted at the cerebrospinal fluid (CSF), and it has been found that many metabolicchanges occur during RABV infection. However, although it is a neurotropic virus, it can cause damage to extraneuraltissues - lungs, heart, kidneys and liver. This study aimed to determine differences in metabolic, endocrinology and hematologic parameters in blood of mice after application of rabies challenge with virus standard 27 strain (CVS-27).Materials, Methods & Results: This study included 30 survived, and 30 dead mice that were part of the standard procedureof NIH (National Institute of Health) test in Pasteur Institute in Novi Sad. Tests were performed in the following order: twogroups of mice were vaccinated in a 7 day period with different dilutions of standard vaccine and the examined vaccine.Seven days after the last vaccination, immunized animals and animals in the control group received test virus CVS-27.Blood samples were collected from a heart puncture. Differences in hematologic and biochemical parameters were determined by t-test. Due to a high number of blood parameters, we performed a joint analysis of multiple dependent variables.Higher pH value and higher concentrations of glucose, cholesterol, lactate dehydrogenase (LDH), creatine kinase (CK),albumin, urea, creatinine, α-amylase, magnesium (Mg), nonesterified fatty acids (NEFA), beta-hydroxybutyrate (BHB)and lactate were noted in dead mice. Higher granulocytes and mean platelet volume (MPV) were noted in mice whichdied, but also reduced lymphocytes, erythrocytes, haemoglobin, hematocrit and platelets count. Higher values of insulin,cortisol and HOMA-IR (homeostatic model assessment insulin resistance) were noted in the group of dead mice comparedto the surviving one. Reduced QUICKI...

Blood metabolic and hematology parameters and survivorship in mice after application of the rabies challenge virus standard in vaccine potency test

Background: Rabies virus can cause intensive and lethal infection of the central nervous system (CNS) in animals andhumans. Metabolic examinations are conducted at the cerebrospinal fluid (CSF), and it has been found that many metabolicchanges occur during RABV infection. However, although it is a neurotropic virus, it can cause damage to extraneuraltissues - lungs, heart, kidneys and liver. This study aimed to determine differences in metabolic, endocrinology and hematologic parameters in blood of mice after application of rabies challenge with virus standard 27 strain (CVS-27).Materials, Methods & Results: This study included 30 survived, and 30 dead mice that were part of the standard procedureof NIH (National Institute of Health) test in Pasteur Institute in Novi Sad. Tests were performed in the following order: twogroups of mice were vaccinated in a 7 day period with different dilutions of standard vaccine and the examined vaccine.Seven days after the last vaccination, immunized animals and animals in the control group received test virus CVS-27.Blood samples were collected from a heart puncture. Differences in hematologic and biochemical parameters were determined by t-test. Due to a high number of blood parameters, we performed a joint analysis of multiple dependent variables.Higher pH value and higher concentrations of glucose, cholesterol, lactate dehydrogenase (LDH), creatine kinase (CK),albumin, urea, creatinine, α-amylase, magnesium (Mg), nonesterified fatty acids (NEFA), beta-hydroxybutyrate (BHB)and lactate were noted in dead mice. Higher granulocytes and mean platelet volume (MPV) were noted in mice whichdied, but also reduced lymphocytes, erythrocytes, haemoglobin, hematocrit and platelets count. Higher values of insulin,cortisol and HOMA-IR (homeostatic model assessment insulin resistance) were noted in the group of dead mice comparedto the surviving one. Reduced QUICKI...(AU)