Aquatic pollutants are associated with reproductive alterations and genotoxicity in estuarine fish (Sciades herzbergii - Bloch, 1794) from the Amazon Equatorial Coast / Poluentes aquáticos estão associados a alterações reprodutivas e genotoxicidade em peixe estuarino (Sciades herzbergii - Bloch, 1794) da Costa Equatorial Amazônica

Estuaries are constantly subject to continuous environmental impacts of human activities, such as fisheries, port or industry, and domestic sewage, with fish being one of the most affected aquatic animals, reflecting the impacts directly on their bodies. Thus, the aim of this study was to carry out the biomonitoring of an estuary located on the Amazonian Equatorial Coast through analysis of PAHs (Polycyclic Aromatic Hydrocarbons) in the water, in addition to trace metals, histopathological alterations and analysis of erythrocyte micronuclei in Sciades herzbergii. S. herzbergii was used as a model species, due to its estuarine-resident behavior. Gonad and gill samples were subjected to histopathological evaluations. The quantification of trace metals was performed in samples of skeletal muscles of the animals collected, where concentrations of Lead (Pb), Copper (Cu), Zinc (Zn), Cadmium (Cd), Magnesium (Mg), Iron (Fe) and Aluminum (Al) were found. Except for Cadmium (Cd), all the concentrations were above the recommended limits. The PAHs analysis revealed the presence of Naphthalene and Acenaphthene in the water samples Histopathological and genotoxic analyses revealed of lesions in 100% of the study specimens. Thus, the histological and genotoxic alterations found in 100% of S. herzbergii specimens captured in São José Bay-MA are potentially associated with PAH concentrations present in the water. These results are potentially associated with the presence of PAH and trace metals, both in water and in animal tissues, inferring a general scenario of environmental contamination which directly implies a risk to the health and survival of the local biota. This study shows the relevance of continuous biomonitoring of estuarine ecosystems, in order to guide authorities regarding sewage management and ensure the evolutionary development of estuarine species, especially fishes of importance in the local cuisine, therefore related to human food security.

Os estuários estão constantemente sujeitos a impactos ambientais de atividades antropogênicas, como pesca, movimentação portuária, indústria ou esgoto doméstico, onde os peixes são um dos animais aquáticos mais atingidos, sendo capazes de refletir os impactos diretamente em seu organismo. Assim, o objetivo desse estudo foi realizar o biomonitoramento de um estuário da Costa Equatorial Amazônica por meio de análises de PAHs (Hidrocarboneto Policiclico Aromáticos) na água, além de metais traços, alterações histopatológicas e análises de micronúcleos eritrocitários em Sciades herzbergii.. O S. herzbergii foi utilizado como espécie modelo, devido seu comportamento estuarino residente. Amostras de gônadas e brânquias foram submetidas a avaliações histopatológicas. A quantificação de metais traços foi realizada em amostras de músculos esqueléticos dos animais coletados, onde foram encontrados teores de Chumbo (Pb), Cobre (Cu), Zinco (Zn), Cádmio (Cd), Magnésio (Mg), Ferro (Fe) e Alumínio (AL), e foram encontradas em concentrações acima dos limites recomendados, à exceção do Cádmio (Cd). A análise dos PAHs revelou a presença de Naftaleno e Acenafteno nas amostras de água. Análises histopatológicas e genotóxicas revelaram lesões em 100% dos espécimes estudados, resultados estes, potencialmente associados à presença de PAH e de metais traços, tanto na água quanto nos tecidos animais, comprovando um cenário geral de contaminação ambiental implicando diretamente em risco à saúde e sobrevivência da biota local. Esse estudo mostra a relevância do biomonitoramento contínuo dos ecossistemas estuarinos, afim de nortear autoridades no manejo de efluentes e assegurar o desenvolvimento evolutivo de espécies estuarinas, sobretudo dos peixes de importância na culinária regional, diretamente relacionados à segurança alimentar humana.

Evidence of mutagenic and lethal effects of herbicides on Amazonian frogs / Evidências de efeitos mutagênicos e letais de herbicidas em sapos da Amazônia

Amphibians are excellent bioindicators because they are sensitive to chemical pollution and can indicate ecosystem changes due to the presence of or exposure to chemical compounds. Here we report evidence of the impact of herbicides, including glyphosate, on amphibians in a locality in the central Brazilian Amazon and compare it with data from other biomes in Brazil. We observed malformations in three species of Leptodactylus and local extinctions of Scinax ruber and Rhinella marina from reproductive sites close to an area where herbicides had been applied. The observations in the Amazon are similar to reports from Brazils Atlantic forest on morphological anomalies and mortality in amphibians exposed to herbicides. We warn of the threat of expanding crops for the production of biofuels in the Amazon due to their cultivation being associated with agrochemicals, including glyphosate, posing a threat to the biodiversity of the Amazon biome.(AU)

Os anfíbios são ótimos bioindicadores porque são sensíveis à poluição química, indicando alterações ecossistêmicas pela presença de ou pela exposição a compostos químicos. Aqui nós relatamos evidências do impacto de herbicidas, incluindo glifosato, em anfíbios em uma localidade na Amazônia central brasileira e as comparamos com dados de outros biomas no Brasil. Nós observamos malformações em três espécies de Leptodactylus e extinção local de Scinax ruber e Rhinella marina em sítios reprodutivos próximos a uma área onde herbicidas haviam sido aplicados. Os resultados observados na Amazônia são semelhantes aos observados na Mata Atlântica do Brasil, com alterações morfológicas e mortalidade em anfíbios expostos a herbicidas. Alertamos para a ameaça de expansão de culturas para a produção de biocombustíveis na Amazônia, devido ao fato de o cultivo estar associado a agroquímicos, incluindo o glifosato, representando uma ameaça à biodiversidade do bioma Amazônia.(AU)

Evidence of mutagenic and lethal effects of herbicides on Amazonian frogs / Evidências de efeitos mutagênicos e letais de herbicidas em sapos da Amazônia

Amphibians are excellent bioindicators because they are sensitive to chemical pollution and can indicate ecosystem changes due to the presence of or exposure to chemical compounds. Here we report evidence of the impact of herbicides, including glyphosate, on amphibians in a locality in the central Brazilian Amazon and compare it with data from other biomes in Brazil. We observed malformations in three species of Leptodactylus and local extinctions of Scinax ruber and Rhinella marina from reproductive sites close to an area where herbicides had been applied. The observations in the Amazon are similar to reports from Brazils Atlantic forest on morphological anomalies and mortality in amphibians exposed to herbicides. We warn of the threat of expanding crops for the production of biofuels in the Amazon due to their cultivation being associated with agrochemicals, including glyphosate, posing a threat to the biodiversity of the Amazon biome.

Os anfíbios são ótimos bioindicadores porque são sensíveis à poluição química, indicando alterações ecossistêmicas pela presença de ou pela exposição a compostos químicos. Aqui nós relatamos evidências do impacto de herbicidas, incluindo glifosato, em anfíbios em uma localidade na Amazônia central brasileira e as comparamos com dados de outros biomas no Brasil. Nós observamos malformações em três espécies de Leptodactylus e extinção local de Scinax ruber e Rhinella marina em sítios reprodutivos próximos a uma área onde herbicidas haviam sido aplicados. Os resultados observados na Amazônia são semelhantes aos observados na Mata Atlântica do Brasil, com alterações morfológicas e mortalidade em anfíbios expostos a herbicidas. Alertamos para a ameaça de expansão de culturas para a produção de biocombustíveis na Amazônia, devido ao fato de o cultivo estar associado a agroquímicos, incluindo o glifosato, representando uma ameaça à biodiversidade do bioma Amazônia.

Avaliação da toxicidade pré-natal: estudo de teratogenicidade do inseticida piriproxifeno em ratos Wistar / Prenatal toxicity assessment: teratogenicity study of the insecticide pyriproxyfen in Wistar rats

Este estudo investigou a toxicidade pré-natal do inseticida piriproxifeno em ratos Wistar, de forma a detectar possíveis alterações no desenvolvimento fetal da progênie exposta durante o período organogênico. Três doses de piriproxifeno (100, 300 e 500mg.kg-1) foram administradas por via oral às progenitoras, do sexto ao 15º dia de gestação. Os fetos foram submetidos à técnica de diafanização modificada descrita por Taylor e Van Dyke, para avaliação de malformações e alterações esqueléticas. Os resultados não demonstraram a ocorrência de toxicidade materna sistêmica ou alterações nos índices reprodutivos avaliados. Malformações ou alterações teratogênicas não foram detectadas, no entanto alterações esqueléticas sugestivas de retardo no desenvolvimento foram observadas especialmente nas doses mais altas testadas (300mg.kg-1 e 500mg.kg-1). Considerando-se a situação complexa de risco para a saúde humana, mostra-se importante a execução de investigações adicionais, de modo a contribuir para a adequada avaliação de risco do piriproxifeno em água potável.(AU)

This study investigated the prenatal toxicity of the insecticide pyriproxyfen in Wistar rats to detect the possible changes in the fetal development of the progeny exposed during the organogenic period. Three doses of pyriproxyfen (100, 300, and 500mg.kg-1) were administered orally to the progenitors, from day 6 to 15 of gestation. The fetuses were processed using the Taylor and Van Dyke modified diaphanization technique to evaluate malformations and skeletal changes. The results did not demonstrate the occurrence of systemic maternal toxicity or changes in the reproductive indexes evaluated. Malformations or teratogenic changes were not detected, however, skeletal changes suggestive of developmental delay were observed, especially in the highest doses tested (300 mg.kg-1 and 500 mg.kg-1). Owing to the potentially complex situation regarding its risk to human health, it is important that further studies be performed to contribute to the risk assessment of the addition of pyriproxyfen in drinking water.(AU)

Avaliação da toxicidade pré-natal: estudo de teratogenicidade do inseticida piriproxifeno em ratos Wistar / Prenatal toxicity assessment: teratogenicity study of the insecticide pyriproxyfen in Wistar rats

Este estudo investigou a toxicidade pré-natal do inseticida piriproxifeno em ratos Wistar, de forma a detectar possíveis alterações no desenvolvimento fetal da progênie exposta durante o período organogênico. Três doses de piriproxifeno (100, 300 e 500mg.kg-1) foram administradas por via oral às progenitoras, do sexto ao 15º dia de gestação. Os fetos foram submetidos à técnica de diafanização modificada descrita por Taylor e Van Dyke, para avaliação de malformações e alterações esqueléticas. Os resultados não demonstraram a ocorrência de toxicidade materna sistêmica ou alterações nos índices reprodutivos avaliados. Malformações ou alterações teratogênicas não foram detectadas, no entanto alterações esqueléticas sugestivas de retardo no desenvolvimento foram observadas especialmente nas doses mais altas testadas (300mg.kg-1 e 500mg.kg-1). Considerando-se a situação complexa de risco para a saúde humana, mostra-se importante a execução de investigações adicionais, de modo a contribuir para a adequada avaliação de risco do piriproxifeno em água potável.(AU)

This study investigated the prenatal toxicity of the insecticide pyriproxyfen in Wistar rats to detect the possible changes in the fetal development of the progeny exposed during the organogenic period. Three doses of pyriproxyfen (100, 300, and 500mg.kg-1) were administered orally to the progenitors, from day 6 to 15 of gestation. The fetuses were processed using the Taylor and Van Dyke modified diaphanization technique to evaluate malformations and skeletal changes. The results did not demonstrate the occurrence of systemic maternal toxicity or changes in the reproductive indexes evaluated. Malformations or teratogenic changes were not detected, however, skeletal changes suggestive of developmental delay were observed, especially in the highest doses tested (300 mg.kg-1 and 500 mg.kg-1). Owing to the potentially complex situation regarding its risk to human health, it is important that further studies be performed to contribute to the risk assessment of the addition of pyriproxyfen in drinking water.(AU)

Perinatal glyphosate-based herbicide impaired maternal behavior by reducing the striatal dopaminergic activity and delayed the offspring reflex development / A administração perinatal do herbicida à base do glifosato prejudicou o comportamento maternal por reduzir a atividade do sistema dopaminérgico estriatal e atrasou o desenvolvimento de reflexos da prole

Glyphosate, a non-selective herbicide, causes in mammals’ cellular mutagenesisand toxic effects at the embryonic, fetal, and placental levels, even at lowconcentrations. This study investigated in rats the effects of perinatal exposureto glyphosate-base herbicide on maternal behavior and the hypothalamic andstriatal levels of dopamine and serotonin. The pup’s physical and behavioraldevelopment were observed. Glyphosate-base herbicide (50 or 150 mg/kg, peros) was administered in dams during gestation (15º gestational day to 7ºlactation day. The female body weight was recorded throughout the pregnancyand lactation. The dams’ reproductive performance was observed at postnatalday 2, the open field behavior at postnatal day 5 and the maternal behavior atpostnatal day 6. At weaning, the dam’s hypothalamic and striatal levels ofdopamine and serotonin were measured. Maternal exposure to both glyphosatebase herbicide doses: i) had few effects on maternal body weight gain; ii)decreased the number and body weight of the pups; iii) impaired the maternalcare; iv) both doses decreased the activity of striatal and hypothalamic dopaminergic systems; v) 50 mg/kg increased and 150 mg/kg decreased theserotoninergic hypothalamic activity. In offspring, no effects on physicaldevelopment but a delay on reflex development. Conclusions: perinatal exposureto glyphosate-base herbicide decreased the maternal care by a reduced striataldopaminergic activity and delayed the pup’s reflex development.

O glifosato é um herbicida não seletivo, que causa mutagênese celular e efeitostóxicos embrionário, fetal e placentário, mesmo em baixas concentrações. Esteestudo investigou, em ratos, os efeitos da exposição perinatal ao herbicida àbase de glifosato sobre o comportamento materno e os níveis hipotalâmicos eestriatais de dopamina e serotonina. O desenvolvimento físico e comportamentaldos filhotes foi observado. O herbicida (50 ou 150 mg / kg, per os) foiadministrado às mães durante a gestação (15º dia gestacional ao 7º dia delactação. O peso corporal foi registrado durante a gestação e lactação Odesempenho reprodutivo das mães foi observado no dia pós-natal 2, ocomportamento de campo aberto no dia pós-natal 5 e o comportamento maternono dia pós-natal 6. Ao desmame os níveis hipotalâmicos e estriatais da dopaminae da serotonina foram medidos. A exposição materna às duas doses do glifosato:i) teve poucos efeitos sobre o ganho de peso corporal materno; ii) diminuiu onúmero e peso corporal dos filhotes; iii) prejudicou o cuidado materno; iv)ambas as doses diminuíram a atividade dos sistemas dopaminérgicos estriatal ehipotalâmico; v) 50 mg / kg e 150 mg / kg do glifosato diminuíram a atividadehipotalâmica serotoninérgica. Na prole, não houve efeitos no desenvolvimentofísico, mas observou-se atraso no desenvolvimento reflexológico. Poucos efeitosna atividade geral do filhote foram observados. Conclusões: a exposiçãoperinatal ao herbicida à base de glifosato diminuiu o cuidado materno por umaatividade redução da atividade dopaminérgica estriatal e atrasou odesenvolvimento dos reflexos dos filhotes.

Perinatal glyphosate-based herbicide impaired maternal behavior by reducing the striatal dopaminergic activity and delayed the offspring reflex development / A administração perinatal do herbicida à base do glifosato prejudicou o comportamento maternal por reduzir a atividade do sistema dopaminérgico estriatal e atrasou o desenvolvimento de reflexos da prole

Glyphosate, a non-selective herbicide, causes in mammals cellular mutagenesisand toxic effects at the embryonic, fetal, and placental levels, even at lowconcentrations. This study investigated in rats the effects of perinatal exposureto glyphosate-base herbicide on maternal behavior and the hypothalamic andstriatal levels of dopamine and serotonin. The pups physical and behavioraldevelopment were observed. Glyphosate-base herbicide (50 or 150 mg/kg, peros) was administered in dams during gestation (15º gestational day to 7ºlactation day. The female body weight was recorded throughout the pregnancyand lactation. The dams reproductive performance was observed at postnatalday 2, the open field behavior at postnatal day 5 and the maternal behavior atpostnatal day 6. At weaning, the dams hypothalamic and striatal levels ofdopamine and serotonin were measured. Maternal exposure to both glyphosatebase herbicide doses: i) had few effects on maternal body weight gain; ii)decreased the number and body weight of the pups; iii) impaired the maternalcare; iv) both doses decreased the activity of striatal and hypothalamic dopaminergic systems; v) 50 mg/kg increased and 150 mg/kg decreased theserotoninergic hypothalamic activity. In offspring, no effects on physicaldevelopment but a delay on reflex development. Conclusions: perinatal exposureto glyphosate-base herbicide decreased the maternal care by a reduced striataldopaminergic activity and delayed the pups reflex development.(AU)

O glifosato é um herbicida não seletivo, que causa mutagênese celular e efeitostóxicos embrionário, fetal e placentário, mesmo em baixas concentrações. Esteestudo investigou, em ratos, os efeitos da exposição perinatal ao herbicida àbase de glifosato sobre o comportamento materno e os níveis hipotalâmicos eestriatais de dopamina e serotonina. O desenvolvimento físico e comportamentaldos filhotes foi observado. O herbicida (50 ou 150 mg / kg, per os) foiadministrado às mães durante a gestação (15º dia gestacional ao 7º dia delactação. O peso corporal foi registrado durante a gestação e lactação Odesempenho reprodutivo das mães foi observado no dia pós-natal 2, ocomportamento de campo aberto no dia pós-natal 5 e o comportamento maternono dia pós-natal 6. Ao desmame os níveis hipotalâmicos e estriatais da dopaminae da serotonina foram medidos. A exposição materna às duas doses do glifosato:i) teve poucos efeitos sobre o ganho de peso corporal materno; ii) diminuiu onúmero e peso corporal dos filhotes; iii) prejudicou o cuidado materno; iv)ambas as doses diminuíram a atividade dos sistemas dopaminérgicos estriatal ehipotalâmico; v) 50 mg / kg e 150 mg / kg do glifosato diminuíram a atividadehipotalâmica serotoninérgica. Na prole, não houve efeitos no desenvolvimentofísico, mas observou-se atraso no desenvolvimento reflexológico. Poucos efeitosna atividade geral do filhote foram observados. Conclusões: a exposiçãoperinatal ao herbicida à base de glifosato diminuiu o cuidado materno por umaatividade redução da atividade dopaminérgica estriatal e atrasou odesenvolvimento dos reflexos dos filhotes.(AU)

Laboratory animal welfare: environmental enrichment shows positive effect on animal testing / Bem-estar animal em laboratório: enriquecimento ambiental apresenta efeito positivo na experimentação animal

Reproductive and developmental toxicology has focused on the need to approach the effects of organism exposure to various drugs during pregnancy after the mid-50s, when the thalidomide tragedy stroke humanity. In recent decades, this area of study has developed a lot due to animal testing, raising awareness on the need to improve the quality of life of such animals. Therefore, this paper aims to investigate how the science of animal welfare can improve scientific research as a whole, including the reproductive and developmental toxicology fields, by emphasizing environmental enrichment in animal facilities. To do so, we conducted an integrative literature review on several quantitative and qualitative methodological approaches that are applicable to toxicology studies. Here, we present evidence that environmental enrichment improves animal welfare and prevents or reduces the negative effects of captive housing, which must be a principle of toxicological research for ethical, legal and scientific reasons.(AU)

Na toxicologia da reprodução e do desenvolvimento, a atenção necessária foi dada aos efeitos da exposição do organismo às inúmeras drogas durante o período gestacional somente após a metade dos anos 50, quando a tragédia da talidomida atingiu a humanidade. Assim, esta área alcançou desenvolvimento científico com a contribuição da experimentação animal nas últimas décadas. O uso de animais de laboratórios para a pesquisa científica expôs a necessidade de melhorar a qualidade de vida destas espécies. Portanto, este trabalho tem como objetivo investigar como a ciência do bem-estar animal pode melhorar a pesquisa científica como um todo, incluindo na área de toxicologia da reprodução e de desenvolvimento, enfatizando o enriquecimento ambiental em biotérios. Uma revisão integrativa de literatura foi realizada, incluindo abordagens quantitativas e qualitativas, quais podem ser aplicadas para estudos de toxicologia. Aqui, são mostradas evidências de que o enriquecimento ambiental melhora o bem-estar animal e previne ou reduz os efeitos negativos do cativeiro, qual deve um princípio da pesquisa toxicológica por razões éticas, argumentos legais e garantias científicas.(AU)

Laboratory animal welfare: environmental enrichment shows positive effect on animal testing / Bem-estar animal em laboratório: enriquecimento ambiental apresenta efeito positivo na experimentação animal

Reproductive and developmental toxicology has focused on the need to approach the effects of organism exposure to various drugs during pregnancy after the mid-50's, when the thalidomide tragedy stroke humanity. In recent decades, this area of study has developed a lot due to animal testing, raising awareness on the need to improve the quality of life of such animals. Therefore, this paper aims to investigate how the science of animal welfare can improve scientific research as a whole, including the reproductive and developmental toxicology fields, by emphasizing environmental enrichment in animal facilities. To do so, we conducted an integrative literature review on several quantitative and qualitative methodological approaches that are applicable to toxicology studies. Here, we present evidence that environmental enrichment improves animal welfare and prevents or reduces the negative effects of captive housing, which must be a principle of toxicological research for ethical, legal and scientific reasons.(AU)

Na toxicologia da reprodução e do desenvolvimento, a atenção necessária foi dada aos efeitos da exposição do organismo às inúmeras drogas durante o período gestacional somente após a metade dos anos 50, quando a tragédia da talidomida atingiu a humanidade. Assim, esta área alcançou desenvolvimento científico com a contribuição da experimentação animal nas últimas décadas. O uso de animais de laboratórios para a pesquisa científica expôs a necessidade de melhorar a qualidade de vida destas espécies. Portanto, este trabalho tem como objetivo investigar como a ciência do bem-estar animal pode melhorar a pesquisa científica como um todo, incluindo na área de toxicologia da reprodução e de desenvolvimento, enfatizando o enriquecimento ambiental em biotérios. Uma revisão integrativa de literatura foi realizada, incluindo abordagens quantitativas e qualitativas, quais podem ser aplicadas para estudos de toxicologia. Aqui, são mostradas evidências de que o enriquecimento ambiental melhora o bem-estar animal e previne ou reduz os efeitos negativos do cativeiro, qual deve um princípio da pesquisa toxicológica por razões éticas, argumentos legais e garantias científicas.(AU)

Laboratory animal welfare: environmental enrichment shows positive effect on animal testing / Bem-estar animal em laboratório: enriquecimento ambiental apresenta efeito positivo na experimentação animal

Reproductive and developmental toxicology has focused on the need to approach the effects of organism exposure to various drugs during pregnancy after the mid-50s, when the thalidomide tragedy stroke humanity. In recent decades, this area of study has developed a lot due to animal testing, raising awareness on the need to improve the quality of life of such animals. Therefore, this paper aims to investigate how the science of animal welfare can improve scientific research as a whole, including the reproductive and developmental toxicology fields, by emphasizing environmental enrichment in animal facilities. To do so, we conducted an integrative literature review on several quantitative and qualitative methodological approaches that are applicable to toxicology studies. Here, we present evidence that environmental enrichment improves animal welfare and prevents or reduces the negative effects of captive housing, which must be a principle of toxicological research for ethical, legal and scientific reasons.

Na toxicologia da reprodução e do desenvolvimento, a atenção necessária foi dada aos efeitos da exposição do organismo às inúmeras drogas durante o período gestacional somente após a metade dos anos 50, quando a tragédia da talidomida atingiu a humanidade. Assim, esta área alcançou desenvolvimento científico com a contribuição da experimentação animal nas últimas décadas. O uso de animais de laboratórios para a pesquisa científica expôs a necessidade de melhorar a qualidade de vida destas espécies. Portanto, este trabalho tem como objetivo investigar como a ciência do bem-estar animal pode melhorar a pesquisa científica como um todo, incluindo na área de toxicologia da reprodução e de desenvolvimento, enfatizando o enriquecimento ambiental em biotérios. Uma revisão integrativa de literatura foi realizada, incluindo abordagens quantitativas e qualitativas, quais podem ser aplicadas para estudos de toxicologia. Aqui, são mostradas evidências de que o enriquecimento ambiental melhora o bem-estar animal e previne ou reduz os efeitos negativos do cativeiro, qual deve um princípio da pesquisa toxicológica por razões éticas, argumentos legais e garantias científicas.

Desenvolvimento Físico e Neurocomportamental de Prole de Ratas Wistar após Tratamento com Ipriflavona durante a Lactação Plena / Physical and neurobehavioral development of rat offspring after maternal exposure to ipriflavoneduring lactation

A Ipriflavona (7-isopropoxi-3-fenil-4H-benzopiran-4-ona), um derivado sintético da isoflavona daidzeína, com ação estrogênica comprovada tem sido utilizado por mulheres com objetivo de aumentar a densidade óssea e prevenir a perda óssea. Estudos de toxicologia reprodutiva no período pré-implantacional apontam indícios de toxicidade, interferindo na implantação do blastocisto. Também foi demonstrado que a ipriflavona interfere na via de sinalização Hedgehog, importante no período de desenvolvimento embrionário. Estudos demonstram que as isoflavonas são transferidas para o leite materno o que poderia ocasionar danos a prole. Porém não foram encontrados estudos de toxicologia no período de lactação e desenvolvimento das crias utilizando-se da ipriflavona, sendo este o objetivo desse trabalho. Para o estudo foram utilizadas 48 ratas Wistar. Os animais foram distribuídos aleatoriamente em quatro grupos experimentais (n = 12): controle experimental e tratados I, II e III. O grupo controle experimental recebeu via intragástrica, duas vezes ao dia, do 2º ao 16º dia de lactação, 1 ml de água destilada e os grupos tratados receberam; pelo mesmo procedimento, 1 ml de suspensão aquosa de ipriflavona nas doses de 300, 1500 e 3000mg/kg/dose, respectivamente. As variáveis maternas analisadas foram: presença de sinais clínicos de toxicidade; ganho de peso corporal e consumo de ração. Foram observados comportamentos maternais como: postura de amamentação, organização e manutenção do ninho, ato de recuperar, recolher filhotes e lambê-los. Os filhotes foram analisados quanto ao desenvolvimento físico e reflexológico. Como variáveis de desenvolvimento físico foram analisados: peso corporal, abertura dos olhos, desdobramento das orelhas, aparecimento de lanugo e pêlos, erupção dos incisivos superiores e inferiores, a abertura vaginal ou descida dos testículos...(AU)

The Ipriflavone (7-isopropoxy-3-phenyl-4H-benzopyran-4-one), a synthetic derivative of the isoflavone daidzein, with proven estrogenic activity has been used by women in order to increase bone density and prevent bone loss. Reproductive toxicology studies in the pre-implantation show signs of toxicity, which interferes with implantation of the blastocyst. It was also shown that ipriflavone affects the Hedgehog signaling pathway, important during embryonic development. Studies show that isoflavones are transferred to breast milk which can cause damage to offspring. However no studies were found in toxicology during lactation and development of offspring using the ipriflavone, which is the aim of this work. For the study were used 48 female rats. The animals were randomly divided into four groups (n = 12) experimental control and treated I, II and III. The experimental control group received intragastrically, twice a day, from the 2nd to the 16th days of lactation, 1 ml of distilled water and the treated groups received, by the same procedure, 1 ml of water suspension of ipriflavone at doses of 300, 1500 and 3000mg / kg / dose, respectively. Maternal variables were analyzed: presence of clinical signs of toxicity, body weight gain and feed intake. Maternal behaviors were observed as: breastfeeding posture, organization and maintenance of the nest, the act of recovering, collect pups and licking them. The pups were assessed for physical development and reflexology. As physical variables were analyzed: body weight, eye opening, unfolding of the ears, and appearance of lanugo hair, eruption of upper and lower incisors, the vaginal opening or descent of the testicles. For observing the reflexology development were made the following tests: grip, posture response, dodging the abyss, orientation, and negative geotaxis. In the experimental model studied ipriflavone showed no signs of maternal toxicity, or changes in the physical and reflexology development of offspring.(AU)

Desenvolvimento Físico e Neurocomportamental de Prole de Ratas Wistar após Tratamento com Ipriflavona durante a Lactação Plena / Physical and neurobehavioral development of rat offspring after maternal exposure to ipriflavoneduring lactation

A Ipriflavona (7-isopropoxi-3-fenil-4H-benzopiran-4-ona), um derivado sintético da isoflavona daidzeína, com ação estrogênica comprovada tem sido utilizado por mulheres com objetivo de aumentar a densidade óssea e prevenir a perda óssea. Estudos de toxicologia reprodutiva no período pré-implantacional apontam indícios de toxicidade, interferindo na implantação do blastocisto. Também foi demonstrado que a ipriflavona interfere na via de sinalização Hedgehog, importante no período de desenvolvimento embrionário. Estudos demonstram que as isoflavonas são transferidas para o leite materno o que poderia ocasionar danos a prole. Porém não foram encontrados estudos de toxicologia no período de lactação e desenvolvimento das crias utilizando-se da ipriflavona, sendo este o objetivo desse trabalho. Para o estudo foram utilizadas 48 ratas Wistar. Os animais foram distribuídos aleatoriamente em quatro grupos experimentais (n = 12): controle experimental e tratados I, II e III. O grupo controle experimental recebeu via intragástrica, duas vezes ao dia, do 2º ao 16º dia de lactação, 1 ml de água destilada e os grupos tratados receberam; pelo mesmo procedimento, 1 ml de suspensão aquosa de ipriflavona nas doses de 300, 1500 e 3000mg/kg/dose, respectivamente. As variáveis maternas analisadas foram: presença de sinais clínicos de toxicidade; ganho de peso corporal e consumo de ração. Foram observados comportamentos maternais como: postura de amamentação, organização e manutenção do ninho, ato de recuperar, recolher filhotes e lambê-los. Os filhotes foram analisados quanto ao desenvolvimento físico e reflexológico. Como variáveis de desenvolvimento físico foram analisados: peso corporal, abertura dos olhos, desdobramento das orelhas, aparecimento de lanugo e pêlos, erupção dos incisivos superiores e inferiores, a abertura vaginal ou descida dos testículos...

The Ipriflavone (7-isopropoxy-3-phenyl-4H-benzopyran-4-one), a synthetic derivative of the isoflavone daidzein, with proven estrogenic activity has been used by women in order to increase bone density and prevent bone loss. Reproductive toxicology studies in the pre-implantation show signs of toxicity, which interferes with implantation of the blastocyst. It was also shown that ipriflavone affects the Hedgehog signaling pathway, important during embryonic development. Studies show that isoflavones are transferred to breast milk which can cause damage to offspring. However no studies were found in toxicology during lactation and development of offspring using the ipriflavone, which is the aim of this work. For the study were used 48 female rats. The animals were randomly divided into four groups (n = 12) experimental control and treated I, II and III. The experimental control group received intragastrically, twice a day, from the 2nd to the 16th days of lactation, 1 ml of distilled water and the treated groups received, by the same procedure, 1 ml of water suspension of ipriflavone at doses of 300, 1500 and 3000mg / kg / dose, respectively. Maternal variables were analyzed: presence of clinical signs of toxicity, body weight gain and feed intake. Maternal behaviors were observed as: breastfeeding posture, organization and maintenance of the nest, the act of recovering, collect pups and licking them. The pups were assessed for physical development and reflexology. As physical variables were analyzed: body weight, eye opening, unfolding of the ears, and appearance of lanugo hair, eruption of upper and lower incisors, the vaginal opening or descent of the testicles. For observing the reflexology development were made the following tests: grip, posture response, dodging the abyss, orientation, and negative geotaxis. In the experimental model studied ipriflavone showed no signs of maternal toxicity, or changes in the physical and reflexology development of offspring.

Experimental exposure to 3-monochloropropane-1,2-diol from the pre-puberty causes damage in sperm production and motility in adulthood / Exposição experimental ao 3-monocloropropano-1,2-diol, a partir da pré-puberdade, causaalteração na produção e motilidade espermática na idade adulta

3-Monochloropropane-1,2-diol (3-MCPD) is a food contaminant that can be formed during the thermic processing of various foodstuffs. Studies of reproductive toxicology of 3-MCPD are mainly concentrated in the evaluation of possible insults caused by exposure of adult animals. However, the prepuberty might be a period of different susceptibility to chemicals. The aim of this study was to evaluate the effects on reproductive endpoints of the 3-MCPD-exposure prepubertal male rats. Wistar male rats were assigned to 4 groups: control and exposed to 2.5; 5 or 10 mg kg-1 day-1 of 3-MCPD for 30 days by gavage. Testis and epididymis were used for sperm counts and histology analysis. Sertoli cell number and dynamic of the spermatogenesis were evaluated. Sperm were collected from the vas deferens for evaluation of the sperm motility and morphology. Number of sperm with progressive movement, number of Sertoli cells and germ cells and relative daily sperm production were decreased in the groups exposed to 5 and 10 mg kg-1 day-1 of 3-MCPD. Sperm morphology, testicular and epididymal histology were comparable among groups. Results show that 3-MCPD-exposure of rats from prepuberty might cause alterations in spermatogenesis and sperm maturation, similarly to exposure in adulthood.(AU)

3-monocloropropano-1,2-diol (3-MCPD) é um contaminante alimentar formado durante o processamento térmico de vários produtos. Estudos de toxicologia reprodutiva do 3-MCPD estão concentrados principalmente na avaliação de danos causados pela exposição de animais adultos. No entanto, a peri-puberdade pode ser um período de susceptibilidade diferente a produtos químicos. O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos reprodutivos da exposição de ratos machos pré-púberes ao 3- MCPD. Ratos Wistar machos foram divididos em quatro grupos: controle e expostos a 2,5; 5 ou 10 mg kg-1 dia-1 de 3-MCPD durante 30 dias, por gavagem. Os testículos e epidídimos foram usados para contagem espermática e análise histológica. Foram avaliados o número de células de Sertoli e a dinâmica da espermatogênese. Espermatozoides foram coletados a partir dos ductos deferentes para avaliação da motilidade e morfologia. O número de espermatozoides com movimento progressivo, o número de células de Sertoli e de células germinativas e a produção espermática foram reduzidos nos grupos expostos a 5 e 10 mg kg-1 dia-1 de 3-MCPD. A morfologia espermática e histologia testicular e epididimária foram semelhantes entre os grupos. Os resultados mostram que a exposição de ratos ao 3-MCPD, a partir da prépuberdade, pode causar alterações na espermatogênese e na maturação espermática, de forma semelhante à exposição na idade adulta.(AU)

Effects of 4-Nonylphenol on reproduction of exposed females during puberty

4-Nonylphenol (NP) is considered an endocrine disruptor due to its capacity to interact with endocrine system, mimicking estrogen activity. It is aubiquitous pollutant since it has been found in many human tissue samples and its precursor identified in sewage, sediments, rivers and drinking water. Thus, this work aimed to evaluate reproductive parameters in female Balb/C mice treated with 50 mg/kg body weight of NP for 21 days, a period in which they reach sexual maturity. Body weight during treatment, day of vaginal opening, organs weight, fertility rate and proportion of different follicle types were some of these parameters. Additionally, for analysis of some effect in littermates, a group of animals underwent two attempts at pregnancy after treatment. NP had no effect on body weight during treatment, nor did it alter the day of vaginal opening and fertility rate of females. The proportion of preantral, antral and degenerated ovarian follicles was not modified by treatment with NP, and no morphological or pathological alterations were observed. The number of pups did not differ between treatments in any attempt at pregnancy. Also the weight of pups on birth and female rate in littermates was similar among experimental groups after both trials of pregnancy. It is suggested that the NP available or accumulated during the period of sexual maturation (21 days) did not reach threshold levels capable of producing significant alterations in the reproductive parameters analyzed.

Effects of 4-Nonylphenol on reproduction of exposed females during puberty

4-Nonylphenol (NP) is considered an endocrine disruptor due to its capacity to interact with endocrine system, mimicking estrogen activity. It is aubiquitous pollutant since it has been found in many human tissue samples and its precursor identified in sewage, sediments, rivers and drinking water. Thus, this work aimed to evaluate reproductive parameters in female Balb/C mice treated with 50 mg/kg body weight of NP for 21 days, a period in which they reach sexual maturity. Body weight during treatment, day of vaginal opening, organs weight, fertility rate and proportion of different follicle types were some of these parameters. Additionally, for analysis of some effect in littermates, a group of animals underwent two attempts at pregnancy after treatment. NP had no effect on body weight during treatment, nor did it alter the day of vaginal opening and fertility rate of females. The proportion of preantral, antral and degenerated ovarian follicles was not modified by treatment with NP, and no morphological or pathological alterations were observed. The number of pups did not differ between treatments in any attempt at pregnancy. Also the weight of pups on birth and female rate in littermates was similar among experimental groups after both trials of pregnancy. It is suggested that the NP available or accumulated during the period of sexual maturation (21 days) did not reach threshold levels capable of producing significant alterations in the reproductive parameters analyzed.(AU)

EXPOSIÇÃO A METAIS AFETA PARÂMETROS ESPERMÁTICOS EM RUMINANTES DOMÉSTICOS? UM ESTUDO DE META-ANÁLISE

Durante a última década, os tóxicos ambientais foram sugeridos serem potenciais fatores de risco para a infertilidade masculina. Ao contrário dos poluentes orgânicos, os metais não são facilmente degradados e se acumulam ao longo da cadeia alimentar, tornando-se uma das principais causas da redução da qualidade seminal em animais. No entanto, ainda não está claro se os efeitos desses contaminantes são negativos, neutros ou positivos para as células espermáticas. Portanto, uma revisão meta-analítica foi conduzida para determinar se a exposição a doze metais afeta os parâmetros espermáticos de ruminantes domésticos. O modelo de efeitos aleatórios revelou que os metais provocaram um efeito forte e negativo na viabilidade espermática, um efeito moderado e negativo em parâmetros andrológicos e na motilidade espermática, e um efeito forte positivo na produção de metabólitos oxidativos. Por outro lado, a exposição aos metais não afetou a defesa antioxidante, níveis hormonais, concentração espermática e a fertilidade dos espermatozoides. Em geral, os mecanismos toxicológicos dos metais estão relacionados à sua capacidade de gerar estresse oxidativo, ligar-se a grupos tiol de proteínas e mimetizar minerais essenciais. O modelo de efeitos mistos mostrou que todos os moderadores metodológicos, como o tipo de metal, concentração de metal administrada, via de exposição, frequência de dosagem e modelo animal influenciaram de forma diferente os parâmetros espermáticos, considerando a variabilidade dos modelos. Em conclusão, nossos achados indicam que a exposição aos metais causa efeitos nocivos ao sistema reprodutor masculino ao inibir os parâmetros funcionais dos espermatozoides, importantes para uma fertilização bem-sucedida. Além disso, devido à característica ubíqua dos metais e sua alta toxicidade, esta revisão sugere que tais elementos podem contribuir para causas subjacentes de infertilidade. Além disso, este estudo pode direcionar pesquisas futuras sobre as consequências da contaminação por metais na fertilização e no desenvolvimento do embrião pré-implantação.

During the last decade, environmental toxicants have been suggested to be potential risk factors for male infertility. Unlike organic pollutants, metals are not easily degraded and accumulate along the food chain, making it a major cause of declined semen quality in animals. However, it is still unclear whether the effects of these contaminants are negative, neutral, or positive for sperm cells. Therefore, a meta-analytical review was conducted to determine whether the exposure to 12 metals affect the spermatozoa parameters and overall reproductive health of domestic ruminants. The random-effects model revealed that metals elicited a strong and negative effect on sperm viability, a moderate and negative effect on andrological parameters and sperm motility, and a strong positive effect on oxidative metabolites production. By contrast, metal exposure did not affect antioxidant defense, hormone levels, sperm concentration, and sperm fertility. Overall, the toxicological mechanisms of metals are related to their ability to generate oxidative stress, bind with thiol groups of proteins, and mimicry essential minerals. The mixed-effects model showed that all methodological moderators such as type of metal, metal concentration, exposure route, dosing frequency, and animal model differently influenced the spermatozoa parameters, accounting for variability in the models. In conclusion, our findings indicate that exposure to metals cause noxious effects to male reproductive system by inhibiting functional sperm parameters, important for a successful fertilization. Also, due to the ubiquitous characteristic of metals and its high toxicity, this review suggests that such elements may contribute to underlying causes of infertility. Furthermore, this study can direct future researches on the consequences of metal contamination on fertilization and pre implantation embryo development.

Gossypol promotes the degeneration of chicken ovarian follicles in vitro

Gossypol, a phenolic compound produced by the pigment glands of cotton, is known to affect male reproduction. In females, exposure to gossypol has been associated with interference with the estrous cycle and embryo development. In laying hens fed cottonseed, gossypol was found to reduce egg production and weight and to cause discoloration of the egg yolk and/or albumen. It is probable that gossypol directly affects ovarian follicles, but this has not been confirmed experimentally yet. Thus, the aim of the present study was to determine if gossypol affected cultivated ovarian follicles of the chicken. Ovarian follicles of adult female chickens were cultivated with different concentrations of gossypol (0, 5, 10 and 20 g/mL) and classified according to the stage of development as primordial, transitional, primary, secondary or antral, and as viable or atretic. The percentages of viable and atretic follicles in the ovaries cultivated for 24 hours in the presence of gossypol were significantly different from those of the controls for all types of follicles except for secondary follicles, but in all types after cultivation for 7 days. The percentage of viable follicles was higher than that of atretic follicles in ovaries cultivated without gossypol. In contrast, ovaries cultivated with gossypol showed a predominance of atretic follicles. Gossypol increased the proportion of atretic follicles at all stages of development in cultivated chicken ovaries. Thus, gossypol may affect ovarian follicular viability and maturation, which might interfere with female fertility.

Gossypol promotes the degeneration of chicken ovarian follicles in vitro

Gossypol, a phenolic compound produced by the pigment glands of cotton, is known to affect male reproduction. In females, exposure to gossypol has been associated with interference with the estrous cycle and embryo development. In laying hens fed cottonseed, gossypol was found to reduce egg production and weight and to cause discoloration of the egg yolk and/or albumen. It is probable that gossypol directly affects ovarian follicles, but this has not been confirmed experimentally yet. Thus, the aim of the present study was to determine if gossypol affected cultivated ovarian follicles of the chicken. Ovarian follicles of adult female chickens were cultivated with different concentrations of gossypol (0, 5, 10 and 20 g/mL) and classified according to the stage of development as primordial, transitional, primary, secondary or antral, and as viable or atretic. The percentages of viable and atretic follicles in the ovaries cultivated for 24 hours in the presence of gossypol were significantly different from those of the controls for all types of follicles except for secondary follicles, but in all types after cultivation for 7 days. The percentage of viable follicles was higher than that of atretic follicles in ovaries cultivated without gossypol. In contrast, ovaries cultivated with gossypol showed a predominance of atretic follicles. Gossypol increased the proportion of atretic follicles at all stages of development in cultivated chicken ovaries. Thus, gossypol may affect ovarian follicular viability and maturation, which might interfere with female fertility.(AU)

ESTUDOS DE TOXICOLOGIA PRÉ CLÍNICA DE UMA FORMULAÇÃO CONTENDO DERIVADOS DE CANNABIS SATIVA

O Brasil apresenta historicamente em seu cotidiano o uso de plantas e substâncias com ações calmantes, analgésicas dentre outros efeitos. Avanços na pesquisa com plantas medicinais apresentaram efetividade de tais substâncias, e o uso de ativos extraídos de plantas como a Cannabis sativa, maconha como é conhecida popularmente, tem demonstrado eficácia em tratamentos diversos, sendo uma alternativa em potencial para doenças do sistema nervoso central, porém seu uso é limitado devido à questões políticas e culturais. O objetivo do presente estudo foi realizar a comprovação de segurança de uma formulação contendo Canabidiol (CBD) 200mg/ml em solução de administração oral, com testes de avaliação pré-clínica que visam constatar possíveis alterações de parâmetros bioquímicos, hematológicos, alterações em órgãos alvo de metabolismo e avaliação do perfil reprodutivo dos animais a serem testados. Ratos e coelhos foram submetidos à tratamentos agudos e crônicos com diferentes dosagens da formulação de CBD, calculadas via extrapolação alométrica (33, 99 e 297 mg/Kg via oral, e 297 mg/Kg intraperitoneal em ratos, e 17, 51 e 153 mg/Kg via oral, e 153 mg/Kg intraperitoneal em coelhos). Todos protocolos experimentais foram realizados de acordo com as diretrizes da Organization for Economic Co-Operation and Development OECD e Agência Nacional de Vigilância Sanitária ANVISA, bem como também com aprovação no Comitê de Ética em Pesquisa Envolvendo Animais CEPEA da UNIPAR. Os números de animais utilizados em ambos os protocolos foram minimizados de acordo com as diretrizes internacionais em relação à redução de animais utilizados em pesquisa. Testes de toxicidade aguda e crônica aplicados em ambas espécies utilizadas neste estudo demostraram segurança da formulação nas doses e vias administradas, pois não ocorreram alterações significativas nos parâmetros avaliados, bem como não foram observadas macro e microscopicamente alterações nos órgãos alvos de metabolismo. Após realização dos protocolos de toxicidade reprodutiva, não se observou alteração nos parâmetros de fertilidade e reprodução, bem como também nos fetos oriundos das fêmeas submetidas aos tratamentos propostos. Tais resultados nos fornecem preditivos para a segurança da formulação com CBD 200 mg/ml para administração oral, de acordo com os protocolos experimentais realizados neste estudo. Os testes pré-clínicos fazem parte de uma etapa dentro da grande complexidade que é o processo para obtenção do registro de medicamento a partir de substâncias ativas. Tais testes são primordiais, pois são eles que nos indicam a possibilidade da continuidade dos estudos clínicos com substâncias ativas.

Brazil has historically presented in its daily life the use of plants and substances with calming actions, analgesics, among other effects. Advances in research with medicinal plants have shown the effectiveness of such substances, and the use of actives extracted from plants such as Cannabis sativa, marijuana as it is popularly known, has shown efficacy in several treatments, being a potential alternative for diseases of the central nervous system, however its use is limited due to political and cultural issues. The aim of this study was to prove the safety of a formulation containing Cannabidiol (CBD) 200mg/ml in a solution for oral administration, with pre-clinical evaluation tests aimed at verifying possible changes in biochemical and hematological parameters, changes in target organs of metabolism and evaluation of the reproductive profile of the animals to be tested. Rats and rabbits were subjected to acute and chronic treatments with different dosages of the CBD formulation, calculated via allometric extrapolation (33, 99 and 297 mg/kg orally, and 297 mg/kg intraperitoneally in rats, and 17, 51 and 153 mg /kg orally, and 153 mg/kg intraperitoneally in rabbits). All experimental protocols were carried out in accordance with the guidelines of the Organization for Economic Co- Operation and Development OECD and the National Health Surveillance Agency ANVISA, as well as with approval by the Ethics Committee on Research Involving Animals CEPEA at UNIPAR. The numbers of animals used in both protocols were minimized in accordance with international guidelines regarding the reduction of animals used in research. Acute and chronic toxicity tests applied to both species used in this study demonstrated the safety of the formulation in the doses and routes administered, as there were no significant changes in the evaluated parameters, as well as macro and microscopic changes in Organs target organs of metabolism were not observed. After carrying out the reproductive toxicity protocols, there was no change in fertility and reproduction parameters, as well as in fetuses from females submitted to the proposed treatments. These results provide us with predictors for the safety of the formulation with CBD 200 mg/ml for oral administration, according to the experimental protocols carried out in this study. Pre-clinical tests are part of a step within the great complexity of the process for obtaining drug registration from active substances. Such tests are essential, as they indicate the possibility of continuing clinical studies with active substances.

AVALIAÇÃO DA TOXICIDADE CRÔNICA E REPRODUTIVA DA OLEUROPEÍNA (SEGMENTO I) EM RATOS WISTAR

A Olea europaea L. (oliveira) é uma árvore frutífera, originária do mediterrâneo e disseminada por diversos países, incluindo o Brasil, onde seu cultivo encontra-se em ascensão. É considerada um dos cultivares mais antigos do planeta, sendo reconhecida por sua ampla gama de atividades biológicas, as quais são atribuídas aos seus compostos fenólicos. A oleuropeína é o composto fenólico majoritário da Olea europaea L., presente em grandes concentrações na planta. Com o objetivo de determinar a segurança no uso dessa substância, o presente estudo avaliou o potencial de toxicidade crônica e reprodutiva da oleuropeína, sobre a fertilidade e o desenvolvimento ponderal de ratos Wistar machos e fêmeas, sendo o segmento I de um estudo mais amplo, composto por 3 segmentos. Constituíram-se quatro grupos experimentais compostos por 30 fêmeas e 10 machos cada: CN (controle negativo água destilada), G1(oleuropeína 500 mg/kg/dia), G2 (oleuropeína 1000 mg/kg/dia) e G3 (oleuropeína 2000 mg/kg/dia). Os machos foram tratados antes (70 dias) e durante o acasalamento (21 dias), e as fêmeas antes (14 dias) e durante o acasalamento (máximo de 21 dias), gestação (21 dias) e lactação (21 dias). Para identificar alterações toxicológicas nos animais, foram avaliados: consumo relativo de água e ração, evolução do peso corporal, peso relativo dos órgãos e histopatologia, taxas reprodutivas e sinais de toxicidade. Nos machos foi avaliado ainda, dosagem de testosterona, número e morfologia espermática. Os resultados não demonstraram prejuízos nos parâmetros reprodutivos avaliados em nenhum grupo tratado, contrariamente nos machos, foram observados aumentos significativos na produção diária de espermatozoides em G2 (275,59 ± 27,20) e G3 (261,94 ± 47,84). O G2 também apresentou as maiores dosagens de testosterona (6,47±1,42) e menor número de espermatozoides anormais (5,61 ± 0,69). Nas fêmeas, o G2 apresentou elevação nas taxas de gestação (95,85%) e natalidade (100%). Os machos dos três grupos tratados com oleuropeína apresentaram aumento do peso relativo do fígado (G1 = 3,92 ± 0,11; G2 = 3,89 ± 0,09; G3 = 4,29 ± 0,16), quando comparados ao grupo controle (3,31 ± 0,10), todavia não foram observadas alterações histopatológicas hepáticas ou em qualquer outro órgão avaliado. Foram observadas oscilações nos consumos de água e alimento dos três grupos experimentais durante esse estudo, mais evidenciado nos animais do G3 no início do período pré-acasalamento, onde machos e fêmeas tiveram menores consumos de alimento e menores ganhos de peso, diminuições que não se mantiveram ao longo do tempo bem como não ocorreram outras alterações sistêmicas, sugerindo uma adaptação por parte dos animais. Ninhadas mais leves ao nascer foram observadas em G2 (6,90 ± 0,05) e G3 (6,52 ± 0,07), além disso, as fêmeas de G3 tiveram menor ganho de peso durante os últimos dias do período gestacional, sinais que podem sugerir toxicidade materna. Esses resultados fazem da oleuropeína uma substância promissora devido a sua ação benéfica sobre parâmetros de fertilidade masculina, todavia sugere-se cautela no seu uso durante o período gestacional, especialmente em altas doses.

Olea europaea L. (olive tree) is a fruit tree of Mediterranean origin and disseminated in several countries, including Brazil, where its cultivation is growing. It is considered one of the oldest cultivars on the planet, being recognized for its wide range of biological activities, which are attributed to its phenolic compounds. Oleuropein is the major phenolic compound of Olea europaea L., present in high concentrations in the plant. In order to determine its safety use, the present study evaluated the chronic and reproductive potential toxicity of oleuropein, over fertility and body development of male and female Wistar rats. It was segment I of a larger study, which comprised 3 segments. Four experimental groups were formed: CN (negative control - distilled water), G1 (oleuropein 500 mg / kg / day), G2 (oleuropein 1000 mg / kg / day) and G3 (oleuropein 2000 mg / kg /day). Males were treated before (70 days) and during mating (21 days), and females before (14 days) and during mating (21 days maximum), gestation (21 days) and lactation (21 days). To identify male and female reproductive system changes, we evaluated relative water and feed consumption, body weight evolution, relative organs weight and histopathology, reproductive rates and toxicity sings. In males, we also evaluated testosterone dosage, sperm number and morphology. Results showed no impairment on evaluated reproductive parameters in any treated group, contrary in males were observed a significant increase in daily sperm production in G2 (275,59 ± 27,20) and G3 (261,94 ± 47,84). G2 also presented higher testosterone levels (6,47 ± 1,42) and lower number of abnormal sperm (5,61 ± 0,69). In females, G2 showed an increase in pregnancy (95,85%) and birth (100%) rates. Males of the three oleuropein treated groups showed relative liver weight increase (G1 = 3,92 ± 0,11; G2 = 3,89 ± 0,09; G3 = 4,29 ± 0,16), when compared to the control group (3,31 ± 0,10), however, no histopathological changes in liver or any other evaluated organs were observed. Fluctuations in water and food consumption of the three experimental groups were observed during this study, which was more evident at the beginning of pre-mating period in G3 animals, were males and females had lower food consumptions and lower weight gains, decreases that were not maintained over time and there were no other systemic changes, suggesting an adaptation of these animals. Litters birth weights were lower in G2 (6,90 ± 0,05) and G3 (6,52 ± 0,07), moreover, G3 females also had less weight gain during the latest gestational days, signs that may suggest maternal toxicity. These results make oleuropein a promising substance due its beneficial action on male fertility parameters, however caution is suggested in its use during pregnancy, especially in high doses.