Toxoplasma gondii in lactating animals: potential risk to milk consuming population in Khyber Pakhtunkhwa / Toxoplasma gondii em animais lactantes: risco potencial para população consumidora de leite em Khyber Pakhtunkhwa

Toxoplasma gondii is an intracellular zoonotic protozoan parasite usually infects human and animal worldwide. This study aimed to analyze the sero-prevalence of T. gondii in blood of lactating animals and human living in close proximity and also to detect Toxoplasma DNA in unpasteurized milk of the studied animals. A total of 233 blood and milk samples were collected from lactating animals, and 735 blood samples were taken from humans in District Upper Dir, Khyber Pakhtunkhwa, Pakistan. The blood samples were analyzed through ELISA while the milk samples were analyzed by PCR for the presence of T. gondii DNA. A standard questionnaire was introduced to collect the data from the participants. In animals, the reported sero-prevalence was 32.18% for IgM, 17.16% for IgG, and 6.4% for both IgM and IgG. The reported positivity for T. gondii DNA in milk was 14.44%, 34.8%, 20%, and 26% in sheep, goats, cows, and buffaloes, respectively. In the human blood samples, 9.8% were found positive for IgM and 11.2% for IgG while none of the samples was found positive for both IgM and IgG. Overall sero-prevalence reported in females was significantly higher than the male (p< 0.0001) were the significant risk factors associated with T. gondii infections in animals. In conclusion, T. gondii infection is prevalent in lactating animals and humans using their raw milk in the study area. It is suggested that raw milk should be considered as a vehicle for the transmission of T. gondii to humans. Proper pasteurization of milk is very useful in limiting the transmission of infection. Awareness and control programs should be implemented to prevent the infection.

Toxoplasma gondii é um protozoário parasita intracelular zoonótico que geralmente infecta humanos e animais em todo o mundo. Este estudo teve como objetivo analisar a soroprevalência de T. gondii no sangue de animais lactantes e humanos que vivem em proximidade, além de detectar o DNA de Toxoplasma no leite não pasteurizado dos indivíduos estudados. Um total de 233 amostras de sangue e leite foram coletadas de animais lactantes e 735 amostras de sangue foram coletadas de humanos no Distrito Upper Dir Khyber Pakhtunkhwa, no Paquistão. As amostras de sangue foram analisadas pelo método ELISA enquanto as amostras de leite foram analisadas por PCR para a presença de DNA de T. gondii. Um questionário padrão foi introduzido para coletar os dados dos participantes. Em animais, a soroprevalência relatada foi de 32,18% para IgM, 17,16% para IgG e 6,4% para IgM e IgG. A positividade relatada para DNA de T. gondii encontrada no leite foi de 14,44%, 34,8%, 20% e 26% em ovelhas, cabras, vacas e búfalas, respectivamente. Nas amostras de sangue humano, 9,8% foram consideradas positivas para IgM e 11,2% para IgG, enquanto nenhuma das amostras foi considerada positiva para IgM e IgG. A soroprevalência geral relatada em mulheres foi significativamente maior do que em homens (p < 0,05). Neste estudo, contato com gatos (p < 0,0001), hábitos alimentares (p < 0,0001), fonte de água para beber (p < 0,0001) e más condições de higiene (p < 0,0001) foram os fatores de risco significativos associados a infecções por T. gondii em animais. Em conclusão, a infecção por T. gondii é prevalecente em animais lactantes e humanos que utilizam leite cru, isto é, não-pasteurizado, na área de estudo. Sugere-se que o leite não-pasteurizado seja considerado um veículo de transmissão do T. gondii para humanos. A pasteurização adequada do leite é muito útil para limitar a transmissão de infecções. Programas de conscientização e controle devem ser implementados para prevenir a infecção.

Efeitos da castração imunológica no epitélio seminífero de machos bubalinos / Effects of immunological castration on the seminipheral epithelium of buffaloes males

O procedimento de imunocastração vem sendo utilizado como técnica alternativa amplamente favorável ao bem-estar animal, por ser indolor, pouco invasiva e com eficácia semelhante à da castração cirúrgica, que causa maior estresse aos animais, principalmente quando realizada de forma inadequada. A imunocastração estimula a produção de anticorpos contra o Hormônio Liberador de Gonadotrofina (GnRH), bloqueando temporariamente a produção da testosterona pelas gônadas masculinas. Face a escassez de informações sobre este procedimento em touros bubalinos, o estudo teve como objetivo analisar os possíveis efeitos da imunocastração no parênquima testicular de búfalos. Vinte touros bubalinos, com idade entre 2 a 3 anos, oriundos da ilha do Marajó ­ PA, foram avaliados e divididos aleatoriamente em dois grupos composto por dez animais no grupo controle (GC) e dez do grupo imunocastrado (GIM). O produto utilizado foi a vacina anti-GnRH Bopriva ® (Zoetis, SP, Brasil). O GIM recebeu duas doses de 1,0ml contendo 400µg da vacina Bopriva ® com intervalo de 8 semanas entre as aplicações e o grupo controle recebeu 1,0 ml de solução fisiológica. Após 14 dias da última dose, os animais foram abatidos e coletado os 20 pares de testículos para analises de parâmetros macroscópicos como: comprimento, largura, circunferência e peso. Além disso, foi realizada a retirada de fragmentos do parênquima testicular para confecção de lâminas histológicas. Para comparação dos dados foi aplicado o teste t de Student (Nonparametric Test) considerando a significância com p<0,05 e intervalo de confiança de 95%. Foi observado diferença significativa entre os dois grupos para grupos para peso (direto p<0001; esquerdo p≤ 0,0001), circunferência (direita p< <0,0001), 1; esquerda p<0,0001), ), largura (somente lado direito p<0,0372) e comprimento (direita p≤ 0,0013; esquerda p<0,0437). Na avaliação microscópica, os animais do GC não apresenteram alterações. Nos animais do GIM houve degeneração em todas as amostras, sendo visualizado descamação, tortuosidade e espessamento da membrana basal do túbulo seminífero, assim como vacuolização e atrofia das células de Sertoli. Foi observado também uma redução do número de células de Leydig, fibrose intertubular pronunciada, núcleos picnóticos, azoospermia e células multinucleadas no interior dos túbulos. Conclui-se a vacina anti-GnRH mostrou-se eficaz em provocar lesões no parênquima testicular, comprometendo significativamente a espermatogênese a partir da possível supressão de testosterona.(AU)

The immunocastration procedure has been used as an alternative technique widely favorable to animal welfare, as it is painless, minimally invasive and with similar efficacy to surgical castration, which causes greater stress to animals, especially when performed improperly. Immunocastration stimulates the production of antibodies against Gonadotropin Releasing Hormone (GnRH), temporarily blocking the production of testosterone by the male gonads. Due to the scarcity of information about this procedure in buffalo bulls, the study aimed to analyze the possible effects of immunocastration on the testicular parenchyma of buffaloes. Twenty buffalo bulls, aged between 2 and 3 years, from the island of Marajó - PA, were evaluated and randomly divided into two groups consisting of ten animals in the control group (CG) and ten from the immunocastrated group (GIM). The product used was the anti-GnRH vaccine Bopriva ® (Zoetis, SP, Brazil). The GIM received two doses of 1.0ml containing 400µg of Bopriva ® vaccine with an interval of 8 weeks between applications and the control group received 1.0 ml of saline solution. After 14 days of the last dose, the animals were slaughtered and the 20 pairs of testes were collected for analysis of macroscopic parameters such as: length, width, circumference and weight. In addition, fragments of the testicular parenchyma were removed for the preparation of histological slides. To compare the data, Student's t test (Nonparametric Test) was applied, considering the significance with p< 0.0372) and length (right p≤ 0.0013; left p<0.0437). In the microscopic evaluation, the animals of the CG showed no alterations. In the GIM animals there was degeneration in all samples, with desquamation, tortuosity and thickening of the seminiferous tubule basement membrane, as well as vacuolization and atrophy of Sertoli cells. A reduction in the number of Leydig cells, pronounced intertubular fibrosis, pyknotic nuclei, azoospermia and multinucleated cells within the tubules were also observed. In conclusion, the anti-GnRH vaccine proved to be effective in causing lesions in the testicular parenchyma, significantly compromising spermatogenesis from the possible suppression of testosterone.(AU)

Compressive lesions in the central nervous system of buffaloes / Lesões compressivas no sistema nervoso central de bubalinos

This study describes, through a retrospective study, the epidemiological and clinical-pathological findings of compression in the central nervous system (CNS) of buffaloes. The study includes observations made in 15 animals from 1998 to 2021 by reviewing the clinical records of animals with compressive injuries of the CNS treated at the Veterinary Hospital of the Veterinary Medicine Institute of the Federal University of Pará. The animals treated with clinical signs compatible with CNS compressive lesions were subjected to general and specific clinical examinations of the nervous system. Blood samples were collected from four animals for complete blood counts, and cerebrospinal fluid (CSF) samples were collected from three animals for physical evaluation. Thirteen animals were necropsied. The age range of the affected animals ranged from four months to 11 years of age, with a greater frequency over age 12 months (80%, 13/15). The most affected vertebral segment was between T3 and L3 (60%, 9/15), followed by brain injury (20%, 3/15), the L4-S2 segment (13.3%, 2/15) and the C1-C5 segment (6.7%, 1/15). The clinical findings varied according to the location of the lesion. The necropsy findings revealed paraypophyseal abscess in the brainstem and vertebral body, subarachnoid hematoma, lymphoma and vertebral fractures. The performance of a thorough clinical examination of the CNS combined with the necropsy findings was important to characterize the clinical picture and to locate the cause and the affected CNS segments in the buffaloes studied. It is important to include CNS compressive lesions among the neurological diseases of buffaloes.

Esse trabalho descreve, através de estudo retrospectivo, os achados epidemiológicos e clínico-patológicos de compressão no sistema nervoso central (SNC) de bubalinos. O estudo compreendeu as observações realizadas em 15 animais, durante os anos de 1998 a 2021, por meio da revisão dos arquivos de fichas clínicas de animais com lesões compressivas no SNC atendidos pelo Hospital Veterinário do Instituto de Medicina Veterinária da Universidade Federal do Pará. Os animais atendidos com sinais clínicos compatíveis com lesões compressivas no SNC foram submetidos a exames clínicos geral e específico do sistema nervoso. Foram coletadas amostras de sangue de quatro animais para realização de hemograma e amostras de líquido cefalorraquidiano (LCR) de três animais para avaliação física. Foram necropsiados 13 animais. A faixa etária dos animais acometidos variou de quatro meses a 11 anos de idade, com maior frequência na faixa acima de 12 meses (80%, 13/15). O segmento vertebral mais acometido foi entre T3-L3 (60%, 9/15), seguida por lesão no encéfalo (20%, 3/15), pelo segmento L4-S2 (13,3%, 2/15) e pelo segmento C1-C5 (6,7%, 1/15). Os achados clínicos variaram de acordo com a localização da lesão. Os achados de necropsia revelaram abscesso parahipofisário, no tronco encefálico e no corpo da vértebra, hematoma subaracnoidea, linfoma e fraturas vertebrais. A realização de um minucioso exame clínico do SNC associado aos achados de necropsia foram importantes para caracterizar o quadro clínico e localizar a causa e os seguimentos acometidos do SNC nos búfalos estudados. Torna-se importante incluir as lesões compressivas do SNC entre as enfermidades neurológicas dos bubalinos.

Estudo soroepidemiológico de alphaherpesvírus bovino 1 (BoHV-1) em bubalinos (Bubalus bubalis) de corte da Região Sul do Brasil / Seroepidemiology survey of bovine alphaherpesvirus 1 (BoHV-1) in unvaccinated beef bubalines (Bubalus bubalis) from Southern Brazil

Background: The bovine alphaherpesvirus type 1 (BoHV-1) belonging to the order Herpesvirales, family Herpesviridae,subfamily Alphaherpesvirinae and genus Varicellovirus. Bovine alphaherpesvirus 1 (BoHV-1) infections have a great importance due to the high rates of dissemination in cattles worldwide. Although, the BoHV-1 was largely related in cattle,buffaloes were also classified as host for the virus. However, studies that determine seroepidemiological data in this species are scarce and necessary. The aim of the present study was to determine the presence of antibodies against BoHV-1in healthy beef buffaloes using the virus neutralization (VN) technique.Cases: This work portrays an epidemiological survey, based on a sectional study characterized by blood samples collectedfrom 54 Murrah buffalo, aged 6 to 24 months, from the municipalities of Guaraqueçaba, Ponta Grossa, Antonina andDoutor Ulysses, located in Paraná state, being 20, 14, 10 and 10 samples from each location, respectively. Thirty-sevenpercent (20/54) of the samples were collected at slaughterhouse with registration at the Federal Inspection Service (SIF)of the Ministry of Agriculture, Livestock and Food Supply (MAPA), and 63% (34/54) at the buffalo’s farms. The serumsamples were collected in sterile tubes without anticoagulant in stored isothermal boxes, with serum separation and storedat -20ºC. The samples were sent to the Animal Virology Laboratory of Universidade Estadual de Londrina, UEL for serological analysis. Serological diagnosis using the virus neutralization (VN) technique was performed according the OIEmanual of diagnostic tests and vaccines for terrestrial animals, using the BoHV-1 Los Angeles strain. Forth-five of the 54samples (83.3%) evaluated generated titers of antibodies against BoHV-1 present in all evaluated herds, and the samplescollected in herd from Antonina city were 100% positive, following by 80% in Guaraqueçaba...

Estudo soroepidemiológico de alphaherpesvírus bovino 1 (BoHV-1) em bubalinos (Bubalus bubalis) de corte da Região Sul do Brasil / Seroepidemiology survey of bovine alphaherpesvirus 1 (BoHV-1) in unvaccinated beef bubalines (Bubalus bubalis) from Southern Brazil

Background: The bovine alphaherpesvirus type 1 (BoHV-1) belonging to the order Herpesvirales, family Herpesviridae,subfamily Alphaherpesvirinae and genus Varicellovirus. Bovine alphaherpesvirus 1 (BoHV-1) infections have a great importance due to the high rates of dissemination in cattles worldwide. Although, the BoHV-1 was largely related in cattle,buffaloes were also classified as host for the virus. However, studies that determine seroepidemiological data in this species are scarce and necessary. The aim of the present study was to determine the presence of antibodies against BoHV-1in healthy beef buffaloes using the virus neutralization (VN) technique.Cases: This work portrays an epidemiological survey, based on a sectional study characterized by blood samples collectedfrom 54 Murrah buffalo, aged 6 to 24 months, from the municipalities of Guaraqueçaba, Ponta Grossa, Antonina andDoutor Ulysses, located in Paraná state, being 20, 14, 10 and 10 samples from each location, respectively. Thirty-sevenpercent (20/54) of the samples were collected at slaughterhouse with registration at the Federal Inspection Service (SIF)of the Ministry of Agriculture, Livestock and Food Supply (MAPA), and 63% (34/54) at the buffalos farms. The serumsamples were collected in sterile tubes without anticoagulant in stored isothermal boxes, with serum separation and storedat -20ºC. The samples were sent to the Animal Virology Laboratory of Universidade Estadual de Londrina, UEL for serological analysis. Serological diagnosis using the virus neutralization (VN) technique was performed according the OIEmanual of diagnostic tests and vaccines for terrestrial animals, using the BoHV-1 Los Angeles strain. Forth-five of the 54samples (83.3%) evaluated generated titers of antibodies against BoHV-1 present in all evaluated herds, and the samplescollected in herd from Antonina city were 100% positive, following by 80% in Guaraqueçaba...(AU)

Use of cooled buffalo semen as a strategy to increase conception rates in fixed-time artificial insemination programs during unfavorable reproductive periods / [Uso de sêmen resfriado de búfalo como estratégia para aumentar as taxas de concepção em programas de inseminação artificial em tempo fixo, durante períodos reprodutivos desfavoráveis]

The objective of this study was to compare the reproductive efficiency of dairy buffaloes undergoing fixed-time artificial insemination (FTAI) protocols based on progesterone/estrogen (P4/E2) and eCG during unfavorable breeding season using cooled (CS) and frozen semen (FS). A total of 446 buffaloes (> 40 days postpartum) were randomly distributed into four blocks (years): B1-2014 (n = 143), B2-2015 (n = 34), B3-2016 (n = 90), and B4-2017 (n = 179). Each block was subdivided into two (AI with CS and FS using the same ejaculate of each bull). Thus, the block subdivision was as follows: B1 (CS = 71 and FS = 72); B2 (CS = 18 and FS = 16); B3 (CS = 47 and FS = 43); and B4 (CS = 90 and FS = 89). The ejaculates of eight Murrah bulls collected using an artificial vagina were divided into two aliquots: one aliquot was diluted in Botu-Bov® commercial extender and cooled (BB-CS), and the other was diluted in the same extender and frozen (BB-FS). BB-CS aliquots were cooled at 5 °C/24 h using a refrigerator. BB-FS group aliquots were also cooled, and after equilibrating at 5 °C for 4 h, were placed in a 21-L Styrofoam box, 5 cm above the surface of liquid nitrogen. In the afternoon (A) on D0 (2:00 p.m.) the animals received EB 2.0 mg IM (Estrogin®) and an ear implant (CRESTAR® 3.0 mg P4). At D9 (A), the implant was removed, and the animals received eCG 400 IU IM (Folligon® 5000) + Cloprostenol PGF2α 0.530 mg IM (Sincrocio®). At D10 (A), the animals received EB 1.0 mg IM (Estrogin®), and at D12 (8:00 a.m.), AI was performed. At D42, pregnancy was diagnosed via ultrasonography. Total CRs were 48.2% CS and 34.6% FS for years 2014 to 2017, with a significant difference of 13.7% (P<0.05). In conclusion, cooled semen resulted in higher CR than frozen semen in dairy buffaloes under the P4/E2 and eCG FTAI during the unfavorable reproductive season.(AU)

O objetivo deste estudo foi comparar a eficiência reprodutiva de búfalas leiteiras submetidas a protocolos de inseminação artificial em tempo fixo (IATF) à base de progesterona/estrogênio (P4/E2) e eCG, durante a estação reprodutiva desfavorável, usando-se sêmen resfriado (SR) e congelado (SC) Um total de 446 búfalas (> 40 dias após o parto) foi distribuído aleatoriamente em quatro blocos (anos): B1-2014 (n = 143), B2-2015 (n = 34), B3-2016 (n = 90) e B4-2017 (n = 179). Cada bloco foi subdividido em dois (IA com SR e SC utilizando-se a mesma ejaculação de cada touro). Assim, a subdivisão do bloco foi a seguinte: B1 (SR = 71 e SC = 72); B2 (SR = 18 e SC = 16); B3 (SR = 47 e SC = 43); e B4 (SR = 90 e SC = 89). Os ejaculados de oito touros Murrah coletados com vagina artificial foram divididos em duas alíquotas: uma alíquota diluída em diluente comercial Botu-Bov® e resfriada (BB-SR), e a outra diluída no mesmo diluente e congelada (BB-SC). As alíquotas de BB-SR foram resfriados a 5°C/24h usando-se um refrigerador. As alíquotas do grupo BB-SC também foram resfriadas e, após equilíbrio a 5°C por 4h, foram colocadas em uma caixa de isopor de 21L, 5 cm acima da superfície do nitrogênio líquido. À tarde (A), no D0 (14h), os animais receberam BE 2,0 mg IM (Estrogin®) e um implante auricular (Crestar® 3,0 mg P4). No D9 (A), o implante foi retirado e os animais receberam eCG 400 UI IM (Folligon® 5000) + cloprostenol PGF2α 0,530 mg IM (Sincrocio®). No D10 (A), os animais receberam BE 1,0mg IM (Estrogin®), e, no D12 (8h da manhã), foram realizadas as IAs. No D42, a gestação foi diagnosticada por ultrassonografia. As taxas de concepção (TC) totais foram 48,2% SR e 34,6% SC para os anos de 2014 a 2017, com uma diferença significativa de 13,7% (P<0,05). Em conclusão, o sêmen resfriado resultou em maior TC do que o sêmen congelado em bubalinos leiteiros sob P4/E2 e eCG FTAI durante a estação reprodutiva desfavorável.(AU)

Spirulina platensis extract addition to semen extender enhances cryotolerance and fertilizing potentials of buffalo bull spermatozoa

The objective of this study was to investigate the effect of Spirulina platensis extract (SPE) addition to the freezing extender on freezability, lipid peroxidation, ultrastructure alterations and fertilizing potentials of frozen-thawed buffalo bull spermatozoa. Semen samples were collected with artificial vagina from five adult fertile bulls and diluted with Tris-base extender containing SPE (1, 5, 10 and 20 μg/mL) or without SPE (control). Diluted semen was cooled to 4 °C throughout one hour and frozen in 0.25 mL straws: prior to being stored in liquid nitrogen. Cryopresreved spermatozoa were assessed for post-thawing sperm motility, viability, acrosomal integrity, ultrastructure changes, antioxidant activities, lipid peroxidation and fertility rate. The current results clearly indicated that adding 10μg/mL SPE to the freezing extender significantly improved (P< 0.05) post-thawing motility and decrease the percentage of acrosomal damage (51.67±6.02% and 16.33±1.46%, respectively) compared with the control (28.33±4.41% and 26.33±1.77%, respectively). Moreover, addition of 10 μg/mL SPE to the semen extender significantly diminished (P< 0.05) MDA concentration (10.66±2.40 nmol/109) compared with the control (22.66±4.26 nmol/109). Therefore, the present results revealed that addition of 10μgl/mL SPE to the freezing extender might improve semen quality and reduce cryodamage of the buffalo bull spermatozoa.(AU)

Intoxicação por lasalocida em bezerros búfalos no Estado do Pará, Brasil / Lasalocid poisoning in buffalo calves in the state of Pará, Brazil

Background: Ionophore antibiotics are food additives with coccidiostatic or antimicrobial action; they are also used as growth promoters, ruminal pH regulators, volatile fatty acid molar modifiers, and methanogenesis reducers. However, these compounds have the potential to cause microbial resistance, in addition to the risk of intoxication. Ionophore poisoning may be caused by excessive intake, sensitivity of certain animal species, and concomitant use with other drugs. In Brazil, cases of ionophore poisoning in buffalos are rare. This study aims to describe the epidemiological, clinical, and pathological findings of lasalocid poisoning in buffalo calves. Case: A visit was made to a farm in the municipality of Mojú, Pará state to care for Murrah buffalo calves. After weaning, the buffalos were grazed in paddocks with Panicum spp., and received a supplement of mineral, protein, and vitamin. This supplement contained, per kg, 250 g PB, 50 g Ca, 20 g P, 8 g S, 39 g Na, 20 mg Co, 557 mg Cu, 200 mg Fe, 12.4 mg Se, 2040 mg Zn, 0.19 mg biotin, 26750 IU of vitamin A, 4175 IU of vitamin D, 155 IU of vitamin E and 300 mg/kg of lasalocid. The product was made available to all calves, at 1-2 g/kg body weight (BW), according to the manufacturer's recommendations. Older calves were raised together with those less than 30 days old; as a result, the older calves tended to eat more, which could lead to a supplementation consumption of more than 1 kg body weight per animal per day. It was reported that between 40 and 60 days after the introduction of this supplement, 16 calves fell ill and died due to apathy, motor instability, tremors, and distended neck. The herd had a mortality rate of 33.3%. Two calves underwent a necroscopic examination at the Pathology Section of the Veterinary Institute of the Federal University of Pará. Macroscopic examination revealed extensive pale areas in the skeletal muscles, myocardium, and tongue. Fragments of these muscles and various organs were collected, fixed in 10% buffered formalin, processed according to the routine histological technique, and stained with hematoxylin-eosin and Masson's trichrome stain. Microscopic examination of the histologic samples revealed foci of muscle atrophy and necrosis characterized by an increase in cytoplasmic eosinophilia associated with the loss of stretch marks, and hyperchromatic nuclei that were displaced to the periphery. The necrosis of the muscle fibers was highlighted by Masson's trichrome staining. Discussion: The diagnosis of lasalocid poisoning in buffalo calves was based on epidemiological data, clinical findings, results of macroscopic and histopathological examination, and based on the estimated ionophore intake, obtained directly from the supplement label and by the calf's handler. Based on the absence of stratification of the calves by similarity of age and because the buffalo calves older than 30 days could eat more than 1 kg of the supplement (containing 300 mg/kg of lasalocid), it was possible to estimate the intake of lasalocid per kg CP (body weight). Therefore, the intake of lasalocid by a 70-kg buffalo calf in approximately 90 days and daily supplement consumption between 1 and 1.5 kg would be between 4.2 and 6.4 mg/kg of body weight. This report reinforces that notion that buffalo calves should never ingest ionophores; however, if necessary, strict protocols must be followed to avoid poisoning in these animals. This study highlighted the fact that stratification of buffaloes by different age groups during feeding became a risk factor that allowed greater consumption by older animals; this led to the estimated consumption of 4.2-6.4 mg/kg of lasalocid.

Identification of candidate genes associated with milk yield trait in buffaloes ( Bubalus bubalis ) by restriction-site-associated DNA sequencing

The objectives of our present study included the screening of single nucleotide polymorphisms (SNP) that show significant differences in allelic frequencies between two buffalo populations (Egyptian and Chinese buffaloes), categorization of functional genes associated with these SNP by gene ontology, and pathway analyses to further understand their potential values as candidate genes closely associated with milk yield trait in buffaloes. In this study, double digest restrictionsite associated DNA sequencing was performed on Illumina HiSeq 2500 platform for 20 and 25 female buffaloes from Egypt and China, respectively. Approximately 118 Gb of sequencing data were obtained, and a total of 110,129 and 150,535 putative SNP were detected in Egyptian and Chinese buffaloes, respectively. Focused only on those SNP that differed significantly in allelic frequencies between the two populations, we found that genes associated with these SNP were significantly over-represented in the ionotropic glutamate receptor pathway, the endothelin signaling pathway, and the gonadotropin-releasing hormone receptor pathway, which contained a total of 29 genes. Of these, nine genes (ADCY5, CACNA1A, CREB1, INHBA, INHBB, PIK3R1, PLCB1, PRKCE, and SMAD2) participating in the hormonal regulation of lactation, were considered to be promising candidate genes worthy of further investigations for favorable alleles associated with milk yield. Our results provide useful information about genetic variations in Egyptian and Chinese buffaloes. The potential influences of nine candidate genes and their associated SNP on milk yield need to be validated in more buffalo populations.(AU)

Different times to perform timed artificial insemination when using a P4/E2/eCG-based protocol in buffalo / Momentos diferentes para executar a inseminação artificial em tempo fixo utilizando o protocolo à base de P4/E2/eCG em búfalas

The aim of this study was to evaluate different times for timed artificial insemination (TAI) in buffalo submitted to a P4/E2/eCG-based protocol. In this study, 204 buffaloes were distributed into one of two groups (TAI56, n=103 and TAI64, n=101). At a random stage of the oestrous cycle (Day 0 = D0), in the morning (TAI56, a.m.) or afternoon (TAI64, p.m.), buffaloes received an intravaginal progesterone device (P4; 1.0 g) plus EB (2.0 mg i.m.). On D9 a.m. (TAI56) or p.m. (TAI64), the P4 was removed and buffaloes received PGF2a (0.53 mg i.m. sodium cloprostenol) and eCG (400 IU i.m.). On D10 a.m. (TAI56) or p.m. (TAI64), 24 h after P4 removal, buffaloes were treated with EB (1.0 mg i.m.). Buffaloes from TAI56 and TAI64 were inseminated 56 and 64 h after P4 removal (D11, p.m. and D12, a.m., respectively). Ultrasound examinations were performed on D0 to ascertain ovarian follicular status, at TAI to measure the diameter of the dominant follicle (DF) and D42 for pregnancy diagnosis. The statistical analysis was performed using the GLIMMIX procedure of SAS®. There was no difference between TAI56 and TAI64 for the diameter of the DF at TAI and the pregnancy per TAI. It was concluded that TAI 56 or 64 h after P4 removal did not affect fertility in buffaloes submitted to the induction of ovulation with EB. The present research supports that is possible to perform TAI at any time throughout the day in buffalo synchronized during the non-breeding season.(AU)

O objetivo deste estudo foi avaliar diferentes momentos para a realização da IATF em búfalas submetidas a um protocolo à base de P4/E2/eCG. Neste estudo, 204 búfalas foram distribuídas em um de dois grupos (IATF56, n=103 e IATF64, n=101). Em estágio aleatório do ciclo estral (Dia 0 = D0), pela manhã (IATF56, manhã) ou pela tarde (IATF64, tarde), as búfalas receberam um dispositivo intravaginal de progesterona (P4; 1,0 g) e BE (2,0 mg i.m.). No D9 pela manhã (IATF56) ou pela tarde (IATF64), a P4 foi removida e as búfalas receberam PGF2a (0,53 mg i.m. cloprostenol sódico) e eCG (400 UI i.m.). No D10 pela manhã (IATF56) ou pela tarde (IATF64), 24 h após a remoção da P4, as búfalas foram tratadas com BE (1,0 mg i.m.). As búfalas dos grupos IATF56 e IATF64 foram inseminadas 56 e 64 h após a remoção da P4 (D11, pela tarde e D12, pela manhã, respectivamente). Avaliações ultrassonográficas foram realizadas no D0 para verificar o status folicular ovariano, na IATF para medir o diâmetro do folículo dominante (FD) e no D42 para o diagnóstico de gestação. A análise estatística foi realizada utilizando o procedimento GLIMMIX do SAS®. Não houve diferença entre os grupos IATF56 e IATF64 no diâmetro do FD na IATF e na prenhez por IATF. Conclui-se que a IATF 56 ou 64 h após a remoção da P4 não afeta a fertilidade de búfalas submetidas à indução da ovulação com BE. A presente pesquisa evidencia que é possível realizar a IATF durante todo o dia em búfalas sincronizadas durante a estação reprodutiva desfavorável.(AU)

Particularidades na inseminação artificial em tempo fixo de bubalinos na Amazônia / Particularities in fixed-time artificial insemination of buffaloes in the Amazon

A Inseminação artificial em bubalinos na Amazônia completa 39 anos, a primeira ocorreu 1981, na ilha do Marajó. Entre 1976 a 1980 pesquisas se concentraram nas particularidades do comportamento sexual e das estratégias de colheita do sêmen e posteriormente na criopreservação. Aproximadamente 6.000 búfalas já foram inseminadas, na Amazônia, e ainda não, insemina-se mais de 0,87% do rebanho. Na inseminação convencional em detrimento da fraca expressão no cio, o uso do rufião é fundamental. Em criações extensivas a inseminação deve ser precedida de vacinações e esterilização uterina. O dispositivo intra-vaginal de progesterona de 2° e 3° usos e dose única, apresentaram bons resultados. Búfalas com ECC 3,0 a 3,75 é dispensável o uso do eCG. A hidrografia do rio Amazonas influencia na logística da IATF. Setembro a dezembro (época de vazante) consideramos a estação de reprodução favorável em criações na várzea. Em criações de terra firme a estação favorável ocorre entre os meses de janeiro a junho, (estação mais chuvosa). O protocolo mais usado é o Ovsynch, Ovsynch associado aprogesterona e o protocolo (-D30) primeira dose de vacina; no dia zero (D0); reforço vacinal e dispositivo intravaginal de progesterona, BE ou GnRH; (D9) PGF2α, eCG; (D11) GnRH e no dia doze (D12), IATF. Evitar estresse e traumas antes das inseminações, usar locais sombreado, água a vontade e liberação imediata após o serviço, evitar novilhas imaturas sexualmente, usar vacas multíparas mantendo ou ganhando o peso. A taxa de prenhes está entre 20 a 70% e a média em 52,6%.

Artificial insemination in buffaloes in the Amazon is 39 years old, the first occurred in 1981, on the island of Marajo. Between 1976 and 1980, research focused on the particularities of sexual behavior and semen collection strategies and later on cryopreservation. Approximately 6.000 buffaloes have already been inseminated in the Amazon, and not yet, more than 0.87% of the herd were inseminated. In conventional insemination to the at the expense of weak expression in heat, the use of the heat detector bull is essential. In extensive breeding, insemination should be preceded by vaccinations and uterine sterilization. The intra-vaginal progesterone deviceof 2nd and 3rd uses and single dose, showed good results. Buffaloes with ECC 3.0 to 3.75 the use of eCG is not necessary. The hydrography of the Amazon River influences the logistics of the IATF. September to December (dry river season) we consider the breeding season to be favorable for breeding in the creations in flooded area. In high land creations, the favorable season occurs between the months of January to June, (rainiest season). The most used protocol is Ovsynch, Ovsynch associated with progesterone and the protocol (-D30) first vaccine dose; on day zero (D0); vaccine booster and intravaginal progesterone, BE or GnRH device; (D9) PGF2α, eCG; (D11) GnRH and on the 12th (D12) IATF. Prevent stress and trauma before insemination, use shaded places, water at will and immediate release after the service avoid sexually immature heifers, use multíparas cows to maintain orgain weight. The pregnancy rate is between 20 and 70% and the average is 52.6%.

Particularidades na inseminação artificial em tempo fixo de bubalinos na Amazônia / Particularities in fixed-time artificial insemination of buffaloes in the Amazon

A Inseminação artificial em bubalinos na Amazônia completa 39 anos, a primeira ocorreu 1981, na ilha do Marajó. Entre 1976 a 1980 pesquisas se concentraram nas particularidades do comportamento sexual e das estratégias de colheita do sêmen e posteriormente na criopreservação. Aproximadamente 6.000 búfalas já foram inseminadas, na Amazônia, e ainda não, insemina-se mais de 0,87% do rebanho. Na inseminação convencional em detrimento da fraca expressão no cio, o uso do rufião é fundamental. Em criações extensivas a inseminação deve ser precedida de vacinações e esterilização uterina. O dispositivo intra-vaginal de progesterona de 2° e 3° usos e dose única, apresentaram bons resultados. Búfalas com ECC 3,0 a 3,75 é dispensável o uso do eCG. A hidrografia do rio Amazonas influencia na logística da IATF. Setembro a dezembro (época de vazante) consideramos a estação de reprodução favorável em criações na várzea. Em criações de terra firme a estação favorável ocorre entre os meses de janeiro a junho, (estação mais chuvosa). O protocolo mais usado é o Ovsynch, Ovsynch associado aprogesterona e o protocolo (-D30) primeira dose de vacina; no dia zero (D0); reforço vacinal e dispositivo intravaginal de progesterona, BE ou GnRH; (D9) PGF2α, eCG; (D11) GnRH e no dia doze (D12), IATF. Evitar estresse e traumas antes das inseminações, usar locais sombreado, água a vontade e liberação imediata após o serviço, evitar novilhas imaturas sexualmente, usar vacas multíparas mantendo ou ganhando o peso. A taxa de prenhes está entre 20 a 70% e a média em 52,6%.(AU)

Artificial insemination in buffaloes in the Amazon is 39 years old, the first occurred in 1981, on the island of Marajo. Between 1976 and 1980, research focused on the particularities of sexual behavior and semen collection strategies and later on cryopreservation. Approximately 6.000 buffaloes have already been inseminated in the Amazon, and not yet, more than 0.87% of the herd were inseminated. In conventional insemination to the at the expense of weak expression in heat, the use of the heat detector bull is essential. In extensive breeding, insemination should be preceded by vaccinations and uterine sterilization. The intra-vaginal progesterone deviceof 2nd and 3rd uses and single dose, showed good results. Buffaloes with ECC 3.0 to 3.75 the use of eCG is not necessary. The hydrography of the Amazon River influences the logistics of the IATF. September to December (dry river season) we consider the breeding season to be favorable for breeding in the creations in flooded area. In high land creations, the favorable season occurs between the months of January to June, (rainiest season). The most used protocol is Ovsynch, Ovsynch associated with progesterone and the protocol (-D30) first vaccine dose; on day zero (D0); vaccine booster and intravaginal progesterone, BE or GnRH device; (D9) PGF2α, eCG; (D11) GnRH and on the 12th (D12) IATF. Prevent stress and trauma before insemination, use shaded places, water at will and immediate release after the service avoid sexually immature heifers, use multíparas cows to maintain orgain weight. The pregnancy rate is between 20 and 70% and the average is 52.6%.(AU)

Influence of seasonality on the physiological and seminal parameters of buffaloes in the western region of Pará1 / Influência da sazonalidade nos parâmetros fisiológicos e seminais de búfalos da região oeste do Pará

Awareness of the physiological changes that occur when animals are subjected to climatic changes that are considered stressful is essential to maintain animal welfare and to be able to exploit their reproductive potential efficiently and rationally. The present study was carried out to evaluate climatic variables' influence on physiological parameters, and Murrah buffalo ejaculates reared in a humid tropical climate in the Amazon. The immediate analyzes pertinent to the physical and morphological characteristics of the ejaculates were carried out and corresponded in the rainy season (RS) volume of 3.4±2.0mL; the mass activity of 4.4±0.5; motility of 80.4±5.6%; vigor of 4.4±0.4; concentration of 657,300±237,865.1 x 106sptz/mL; major defects of 9.0±2.6%; minor defects of 11.2±3.9%; total defects 20.2±5.3% and sperm plasma membrane integrity (SPMI) 84.8±5.6%, whereas in the non-rainy season (nRS), the results were 4.0±2.1mL; the mass activity of 3.0±1.0; motility of 56.2±13.4%; vigor of 3.0±1.0; concentration of 586,000±291,925.9 x 106sptz/mL; major defects of 20.8±9.9%; minor defects of 27.5±6.3%; total defects 48.3±9.3% and SPMI of 57.9±12.4%. Furthermore, a statistical difference (P<0.05) was observed for the parameters mass activity, motility, vigor, major defects, minor defects, total defects, and sperm plasma membrane integrity between both periods. The data on heart frequency, superficial temperature (head, back, groin, and scrotal pouch) showed a statistical difference between both periods (P<0.05). To conclude is necessary specific management in the non-rainy season that thermal stress is not a determining factor in reducing the reproductive quality of buffaloes; it is necessary to use means to improve animal welfare; one alternative is to use baths regularly for these animals or provide constant access to areas of rivers or lakes, as well as shading, preventing the buffaloes from being directly exposed to the unfavorable thermal environment.(AU)

O conhecimento das alterações fisiológicas que ocorrem quando os animais são submetidos a alterações climatológicas consideradas estressantes é fundamental para manter o bem-estar animal, e poder explorar o seu potencial reprodutivo de forma eficiente e racional. O presente estudo foi realizado com o objetivo de avaliar a influência de variáveis climáticas sobre parâmetros fisiológicos e de ejaculados de búfalos, da raça Murrah, criados em clima tropical úmido da Amazônia. As análises imediatas pertinentes às características físicas e morfológicas dos ejaculados foram realizadas e corresponderam no período chuvoso (PCh) o volume de 3,4±2,0mL, turbilhonamento de 4,4±0,5; motilidade de 80,4±5,6%; vigor de 4,4±0,4; concentração de 657.300±237.865,1 x 106sptz/mL; defeitos maiores de 9,0±2,6%; defeitos menores de 11,2±3,9%; defeitos totais de 20,2±5,3% e integridade da membrana plasmática (IMP) de 84,8±5,6%, enquanto que no período não chuvoso (PnCh), os resultados foram de 4,0±2,1mL; turbilhonamento de 3,0±1,0; motilidade de 56,2±13,4%; vigor de 3,0±1,0; concentração de 586.000±291.925,9 x 106sptz/mL; defeitos maiores de 20,8±9,9%; defeitos menores de 27,5±6,3%; defeitos totais de 48,3±9,3% e IMP de 57,9±12,4%. Observou-se diferença estatística (P<0,05) para os parâmetros movimento de massa, motilidade, vigor, defeitos maiores, defeitos menores, defeitos totais e integridade da membrana plasmática entre os dois períodos. Dados de frequência cardíaca, temperatura superficial (cabeça, dorso, virilha e bolsa escrotal) diferiram estatisticamente entre os períodos (P<0,05). Conclui-se que se faz necessário usar de um manejo específico no período não chuvoso para que o estresse térmico não seja um fator determinante na redução da qualidade reprodutiva dos búfalos, para isto se faz necessário utilizar de meios para melhorar o bem-estar animal, sendo uma das alternativas fazer uso de banhos regularmente para estes animais, ou disponibilizar acesso constante destes a áreas de rios ou lagos, assim como sombreamentos, evitando que os búfalos fiquem expostos diretamente ao ambiente térmico desfavorável.(AU)

Influence of seasonality on the physiological and seminal parameters of buffaloes in the western region of Pará1 / Influência da sazonalidade nos parâmetros fisiológicos e seminais de búfalos da região oeste do Pará

Awareness of the physiological changes that occur when animals are subjected to climatic changes that are considered stressful is essential to maintain animal welfare and to be able to exploit their reproductive potential efficiently and rationally. The present study was carried out to evaluate climatic variables' influence on physiological parameters, and Murrah buffalo ejaculates reared in a humid tropical climate in the Amazon. The immediate analyzes pertinent to the physical and morphological characteristics of the ejaculates were carried out and corresponded in the rainy season (RS) volume of 3.4±2.0mL; the mass activity of 4.4±0.5; motility of 80.4±5.6%; vigor of 4.4±0.4; concentration of 657,300±237,865.1 x 106sptz/mL; major defects of 9.0±2.6%; minor defects of 11.2±3.9%; total defects 20.2±5.3% and sperm plasma membrane integrity (SPMI) 84.8±5.6%, whereas in the non-rainy season (nRS), the results were 4.0±2.1mL; the mass activity of 3.0±1.0; motility of 56.2±13.4%; vigor of 3.0±1.0; concentration of 586,000±291,925.9 x 106sptz/mL; major defects of 20.8±9.9%; minor defects of 27.5±6.3%; total defects 48.3±9.3% and SPMI of 57.9±12.4%. Furthermore, a statistical difference (P<0.05) was observed for the parameters mass activity, motility, vigor, major defects, minor defects, total defects, and sperm plasma membrane integrity between both periods. The data on heart frequency, superficial temperature (head, back, groin, and scrotal pouch) showed a statistical difference between both periods (P<0.05). To conclude is necessary specific management in the non-rainy season that thermal stress is not a determining factor in reducing the reproductive quality of buffaloes; it is necessary to use means to improve animal welfare; one alternative is to use baths regularly for these animals or provide constant access to areas of rivers or lakes, as well as shading, preventing the buffaloes from being directly exposed to the unfavorable thermal environment.(AU)

O conhecimento das alterações fisiológicas que ocorrem quando os animais são submetidos a alterações climatológicas consideradas estressantes é fundamental para manter o bem-estar animal, e poder explorar o seu potencial reprodutivo de forma eficiente e racional. O presente estudo foi realizado com o objetivo de avaliar a influência de variáveis climáticas sobre parâmetros fisiológicos e de ejaculados de búfalos, da raça Murrah, criados em clima tropical úmido da Amazônia. As análises imediatas pertinentes às características físicas e morfológicas dos ejaculados foram realizadas e corresponderam no período chuvoso (PCh) o volume de 3,4±2,0mL, turbilhonamento de 4,4±0,5; motilidade de 80,4±5,6%; vigor de 4,4±0,4; concentração de 657.300±237.865,1 x 106sptz/mL; defeitos maiores de 9,0±2,6%; defeitos menores de 11,2±3,9%; defeitos totais de 20,2±5,3% e integridade da membrana plasmática (IMP) de 84,8±5,6%, enquanto que no período não chuvoso (PnCh), os resultados foram de 4,0±2,1mL; turbilhonamento de 3,0±1,0; motilidade de 56,2±13,4%; vigor de 3,0±1,0; concentração de 586.000±291.925,9 x 106sptz/mL; defeitos maiores de 20,8±9,9%; defeitos menores de 27,5±6,3%; defeitos totais de 48,3±9,3% e IMP de 57,9±12,4%. Observou-se diferença estatística (P<0,05) para os parâmetros movimento de massa, motilidade, vigor, defeitos maiores, defeitos menores, defeitos totais e integridade da membrana plasmática entre os dois períodos. Dados de frequência cardíaca, temperatura superficial (cabeça, dorso, virilha e bolsa escrotal) diferiram estatisticamente entre os períodos (P<0,05). Conclui-se que se faz necessário usar de um manejo específico no período não chuvoso para que o estresse térmico não seja um fator determinante na redução da qualidade reprodutiva dos búfalos, para isto se faz necessário utilizar de meios para melhorar o bem-estar animal, sendo uma das alternativas fazer uso de banhos regularmente para estes animais, ou disponibilizar acesso constante destes a áreas de rios ou lagos, assim como sombreamentos, evitando que os búfalos fiquem expostos diretamente ao ambiente térmico desfavorável.(AU)

Evaluation of teaser buffaloes subjected to surgical technique for fixation of the caudal curvature of the sigmoid flexure with myectomy of the penis retractor muscle / Avaliação de rufiões bubalinos submetidos à técnica cirúrgica de fixação da curvatura caudal da flexura sigmóide com miectomia do músculo retrator do pênis

The objective of this work was to evaluate the efficiency technique of fixation of the caudal curvature of the sigmoid flexure with myectomy of the penis retractor muscle and the performance of teaser bulls after surgery, through the detection of females in estrus, without performing the copulation. 12 teaser buffaloes were used without defined breed, with an average age of 20 months, weighing on average 200 kg. The animals were subjected to food and water fasting for 12 hours to provide tranquilization in advance. The surgical procedure consisted of the exteriorization of the sigmoid flexure, myectomy of  penis retractor muscle and fixation of the caudal curvature of the penis sigmoid flexure. Of the 12 evaluated teaser buffaloes in the libido test, 100% performed  the  flehmen reflex, mount attempt, incomplete and complete jump  with total inability of  the penis exposure.    It was concluded that this technique can be used safely, having  simplicity in its execution, effective results and mainly low cost, not interfering in the animals libido. The animals when tested as teaser buffaloes kept the libido during the experimental period with total inability of exposure of the penis.

O objetivo do presente trabalho foi avaliar a técnica de fixação da curvatura caudal da flexura sigmóide com miectomia do músculo retratordo pênis e o desempenho de rufiões bubalinos após cirurgia, através da detecção de fêmeas em estro, sem executar a cópula. Foram utilizados 12 bubalinos sem raça definida, com idade média de 20 meses, pesando em média 200 kg. Os animais foram submetidos ajejum alimentar e hídrico de 12 horas para tranquilização prévia. O procedimento cirúrgico constou naexteriorização da flexura sigmóide, miectomia do músculo retrator do pênis e fixação da curvatura caudal da flexura sigmóide do pênis. Dos 12 rufiões avaliados no teste de libido, 100% realizaram reflexode flehmen, tentativa de monta, salto incompleto e completo com total incapacidade de exposição do pênis. Conclui-se que esta técnica pode ser utilizada com segurança, apresentando simplicidade na sua execução, eficácia nos resultados e principalmente baixo custo, não interferindo na libidodos animais. Os animais quando testados como rufiões mantiveram a libido durante o período experimental com total incapacidade de exposição do pênis.

Evaluation of teaser buffaloes subjected to surgical technique for fixation of the caudal curvature of the sigmoid flexure with myectomy of the penis retractor muscle / Avaliação de rufiões bubalinos submetidos à técnica cirúrgica de fixação da curvatura caudal da flexura sigmóide com miectomia do músculo retrator do pênis

The objective of this work was to evaluate the efficiency technique of fixation of the caudal curvature of the sigmoid flexure with myectomy of the penis retractor muscle and the performance of teaser bulls after surgery, through the detection of females in estrus, without performing the copulation. 12 teaser buffaloes were used without defined breed, with an average age of 20 months, weighing on average 200 kg. The animals were subjected to food and water fasting for 12 hours to provide tranquilization in advance. The surgical procedure consisted of the exteriorization of the sigmoid flexure, myectomy of  penis retractor muscle and fixation of the caudal curvature of the penis sigmoid flexure. Of the 12 evaluated teaser buffaloes in the libido test, 100% performed  the  flehmen reflex, mount attempt, incomplete and complete jump  with total inability of  the penis exposure.    It was concluded that this technique can be used safely, having  simplicity in its execution, effective results and mainly low cost, not interfering in the animals libido. The animals when tested as teaser buffaloes kept the libido during the experimental period with total inability of exposure of the penis.(AU)

O objetivo do presente trabalho foi avaliar a técnica de fixação da curvatura caudal da flexura sigmóide com miectomia do músculo retratordo pênis e o desempenho de rufiões bubalinos após cirurgia, através da detecção de fêmeas em estro, sem executar a cópula. Foram utilizados 12 bubalinos sem raça definida, com idade média de 20 meses, pesando em média 200 kg. Os animais foram submetidos ajejum alimentar e hídrico de 12 horas para tranquilização prévia. O procedimento cirúrgico constou naexteriorização da flexura sigmóide, miectomia do músculo retrator do pênis e fixação da curvatura caudal da flexura sigmóide do pênis. Dos 12 rufiões avaliados no teste de libido, 100% realizaram reflexode flehmen, tentativa de monta, salto incompleto e completo com total incapacidade de exposição do pênis. Conclui-se que esta técnica pode ser utilizada com segurança, apresentando simplicidade na sua execução, eficácia nos resultados e principalmente baixo custo, não interferindo na libidodos animais. Os animais quando testados como rufiões mantiveram a libido durante o período experimental com total incapacidade de exposição do pênis.(AU)

Ingestive behavior of buffaloes fed increasing levels of concentrate in sugarcane based diets / Comportamento ingestivo de búfalos alimentados com níveis crescentes de concentrado em dietas com cana-de-açúcar

The experiment was conducted to evaluate the ingestive behavior of buffalo fed sugarcane with different levels of concentrate. Twenty four Murrah buffaloes with body weight of 219±23 kg and nine months old were assigned to completely randomized design. Animals were placed in individual pens where they received diets ad libitum, twice a day. The experimental period has divided into 30 d for adaptation and 84 d for observations and samples collection. Four treatments were used: 1) 80% sugarcane (SC) + 20% concentrate (C); 2) 60% SC + 40% C; 3) 40% SC + 60% C; 4) 20% SC + 80% C. The diets were isoproteics and urea/ammonium sulfate was used at 9:1 ratio to correct the protein level of sugarcane. The evaluated variables were time spent feeding (TSF), ruminating (TSR), idle (TSI), dry matter intake (DMI), feeding efficiency of dry matter (FEDM), rumination efficiency of dry matter (REDM), number of meals, duration of meal and duration of breaks between meal. A regression analysis was performed using the MIXED procedure. DMI was positively affected (P<0.05) by concentrate levels. The treatments had no effect (P>0.05) on TSF. However, the TSR and number of meals decreased linearly (P<0.05) as the dietary levels of concentrate increased.TSI, duration of meal and duration of breaks between meals increased linearly (P<0.05). Increasing levels of concentrate up to 80% in sugarcane based diets influence directly the feeding behavior of buffaloes resulting in fewer daily meals and more time in the trough, improving the feeding and rumination efficiencies.(AU)

O experimento foi conduzido para avaliar o comportamento ingestivo de búfalos alimentados com cana-de-açúcar e diferentes níveis de concentrado. Vinte e quatro búfalos Murrah com peso corporal de 219 ± 23 kg e nove meses de idade foram distribuídos em delineamento inteiramente casualizado. Os animais foram manejados em baias individuais, onde receberam dietas ad libitum, duas vezes ao dia. O período experimental foi dividido em 30 dias para adaptação e 84 dias para observações e coleta de amostras. Foram utilizados quatro tratamentos: 1) 80% de cana-de-açúcar (SC) + 20% de concentrado (C); 2) 60% SC + 40% C; 3) 40% SC + 60% C; 4) 20% SC + 80% C. As dietas foram isoproteicas e uma mistura de ureia/sulfato de amônio na proporção de 9:1 foi utilizada para corrigir o nível de proteína da cana-de-açúcar. As variáveis avaliadas foram: tempo gasto na alimentação (TSF), ruminação (TSR), ócio (ETI), consumo de matéria seca (DMI), eficiência alimentar em função do consumo de matéria seca (FEDM), eficiência da ruminação em função do consumo de matéria seca (REDM), número de refeições, duração da refeição e duração dos intervalos entre as refeições. Uma análise de regressão foi realizada usando o procedimento MIXED. O DMI foi afetado positivamente (P<0,05) pelos níveis de concentrado. Os tratamentos não tiveram efeito (P>0,05) no TSF. No entanto, o TSR e o número de refeições diminuíram linearmente (P<0,05) à medida que os níveis alimentares de concentrado aumentaram. A ETI, a duração da refeição e a duração dos intervalos entre as refeições aumentaram linearmente (P<0,05). Níveis crescentes de concentrado em até 80% em dietas à base de cana-de-açúcar influenciam diretamente o comportamento alimentar dos búfalos, resultando em menos refeições diárias e mais tempo no cocho, melhorando a eficiência de alimentação e de ruminação.(AU)

Ingestive behavior of buffaloes fed increasing levels of concentrate in sugarcane based diets / Comportamento ingestivo de búfalos alimentados com níveis crescentes de concentrado em dietas com cana-de-açúcar

The experiment was conducted to evaluate the ingestive behavior of buffalo fed sugarcane with different levels of concentrate. Twenty four Murrah buffaloes with body weight of 219±23 kg and nine months old were assigned to completely randomized design. Animals were placed in individual pens where they received diets ad libitum, twice a day. The experimental period has divided into 30 d for adaptation and 84 d for observations and samples collection. Four treatments were used: 1) 80% sugarcane (SC) + 20% concentrate (C); 2) 60% SC + 40% C; 3) 40% SC + 60% C; 4) 20% SC + 80% C. The diets were isoproteics and urea/ammonium sulfate was used at 9:1 ratio to correct the protein level of sugarcane. The evaluated variables were time spent feeding (TSF), ruminating (TSR), idle (TSI), dry matter intake (DMI), feeding efficiency of dry matter (FEDM), rumination efficiency of dry matter (REDM), number of meals, duration of meal and duration of breaks between meal. A regression analysis was performed using the MIXED procedure. DMI was positively affected (P0.05) on TSF. However, the TSR and number of meals decreased linearly (P<0.05) as the dietary levels of concentrate increased.TSI, duration of meal and duration of breaks between meals increased linearly (P<0.05). Increasing levels of concentrate up to 80% in sugarcane based diets influence directly the feeding behavior of buffaloes resulting in fewer daily meals and more time in the trough, improving the feeding and rumination efficiencies.

O experimento foi conduzido para avaliar o comportamento ingestivo de búfalos alimentados com cana-de-açúcar e diferentes níveis de concentrado. Vinte e quatro búfalos Murrah com peso corporal de 219 ± 23 kg e nove meses de idade foram distribuídos em delineamento inteiramente casualizado. Os animais foram manejados em baias individuais, onde receberam dietas ad libitum, duas vezes ao dia. O período experimental foi dividido em 30 dias para adaptação e 84 dias para observações e coleta de amostras. Foram utilizados quatro tratamentos: 1) 80% de cana-de-açúcar (SC) + 20% de concentrado (C); 2) 60% SC + 40% C; 3) 40% SC + 60% C; 4) 20% SC + 80% C. As dietas foram isoproteicas e uma mistura de ureia/sulfato de amônio na proporção de 9:1 foi utilizada para corrigir o nível de proteína da cana-de-açúcar. As variáveis avaliadas foram: tempo gasto na alimentação (TSF), ruminação (TSR), ócio (ETI), consumo de matéria seca (DMI), eficiência alimentar em função do consumo de matéria seca (FEDM), eficiência da ruminação em função do consumo de matéria seca (REDM), número de refeições, duração da refeição e duração dos intervalos entre as refeições. Uma análise de regressão foi realizada usando o procedimento MIXED. O DMI foi afetado positivamente (P0,05) no TSF. No entanto, o TSR e o número de refeições diminuíram linearmente (P<0,05) à medida que os níveis alimentares de concentrado aumentaram. A ETI, a duração da refeição e a duração dos intervalos entre as refeições aumentaram linearmente (P<0,05). Níveis crescentes de concentrado em até 80% em dietas à base de cana-de-açúcar influenciam diretamente o comportamento alimentar dos búfalos, resultando em menos refeições diárias e mais tempo no cocho, melhorando a eficiência de alimentação e de ruminação.

Virulence factors and phylotyping of Escherichia coli isolated from non-diarrheic and diarrheic water buffalo calves / Caracterização dos fatores de virulência e filogrupos de Escherichia coli isoladas de bezerros bubalinos sem diarreia e diarréicos

This study aimed to determine the virulence factors, phylogenetic groups, and the relationships between pathovars and phylogenetic groups of E. coli strains isolated from feces of buffalo calves. A total of 217 E. coli strains were obtained from feces after culture and were screened by PCR for detection of virulence factors EAST-1, enterohemolysin, Saa, CNF2, F41, F5, STa, intimin, Stx1 and Stx2. One hundred and thirty-four isolates were positive for one or more virulence factors: eighty-four from diarrheic animals, and fifty from non-diarrheic calves. The pathovars of E. coli identified in diarrheic feces were ETEC (F5+) (2/84), NTEC (16/84), STEC (20/84), EPEC (3/84), EHEC (3/84), and EAEC (EAST-1+) (33/84). Pathovars identified in non-diarrheic animals were NTEC (21/50), STEC (17/50), EHEC (1/50) and EAEC (7/50). E. coli strains positive for EAST-1 (P=0.008) and phylogroup C (P = 0.05) were associated with the presence of diarrhea. Phylogenetic analysis showed that 58.95% of the isolates belonged to phylogroup B1, followed by E (9.70%), B2 (5.90%), C (5.90%), D (5.22%), A (2.24%), and F (1.50%). Phylogroup B1 predominated in pathogenic E. coli isolated from water buffalo, and phylogroup C constituted an enteropathogenic E. coli for water buffalo calves.(AU)

O objetivo foi determinar os fatores de virulência, os grupos filogenéticos e as possíveis relações entre os patovares e os grupos filogenéticos identificados de cepas de Escherichia coli isoladas de fezes de bezerros bubalinos. Um total de 217 amostras de E. coli foram identificadas a partir de cultura das fezes e submetidas a reação em cadeia da polimerase (PCR) para detecção dos fatores de virulência EAST-1, enterohemolisina, Saa, CNF2, F41, F5, STa, intimina, Stx1 e Stx2. Foram identificadas 134 cepas positivas para um ou mais fatores de virulência: 84isoladas de bezerros bubalinos diarreicos e 50 de bezerros bubalinos saudáveis. Os patovares de E. coli obtidos de fezes diarreicas foram ETEC (F5+) (2/84), NTEC (16/84), STEC (20/84), EPEC (3/84), EHEC (3/84), e EAEC (EAST-1+) (33/84). Os patovares isolados de fezes não diarreicas foram NTEC (21/50), STEC (17/50), EHEC (1/50) e EAEC (7/50). Cepas de E. coli positivas para EAST-1 (P = 0,008) e filogrupo C (P = 0,05) foram associadas com a presença de diarreia. A análise de filogrupos revelou que 58,95% dos isolados pertencem ao filogrupo B1, seguido por E (9,70%), B2 (5,90%), C (5,90%), D (5,22%), A (2,24%) e F (1,50%). O filogrupo B1 predomina em cepas de E. coli patogênicas isoladas de bezerros búfalos e o filogrupo C constitui um filogrupo de E. coli patogênica entérica para bezerros.(AU)

Epidemiologia de helmintos gastrintestinais em búfalos / Epidemiology of gastrointestinal helminths in buffaloes

Este trabalho objetivou avaliar a prevalência e a sazonalidade da infecção natural por parasitos gastrintestinais em bubalinos de aptidão leiteira de diferentes categorias, no município de Bandeirantes, Mato Grosso do Sul. Foram avaliados 41 búfalos da raça Murrah, divididos em três categorias, sendo 11 lactentes, com idade de 0 a 8 meses, 10 desmamados, de 8 a 18 meses, e 20 fêmeas adultas com idade superior a 18 meses. Os animais adultos apresentaram-se livres de parasitismo ou com carga parasitária muito baixa. A categoria lactente apresentou pico de contagem de ovos por grama de fezes (OPG=2038) em novembro, quando a precipitação acumulada foi de 69,3 mm e a temperatura 25,95 °C, enquanto a menor contagem de ovos (167) ocorreu em maio, dois meses após pico de 234,68 mm e 20,59 °C. Os búfalos desmamados apresentaram dois picos de OPG, de 1288 e 875, em setembro e junho, com precipitação de 41,45 e 18,4 mm e temperatura de 24,16 e 20,69 °C, respectivamente. Foi observada correlação significativa (p=0,01) e negativa (r=-0,33) entre o OPG dos bezerros lactentes e precipitação pluviométrica. Os parasitos gastrintestinais mais frequentes foram Haemonchus sp. e Cooperia sp.

This study evaluated the prevalence and seasonality of natural infection by gastrointestinal parasites and the susceptibility of different dairy buffalo categories in Bandeirantes, state of Mato Grosso do Sul, Brazil. Forty-one Murrah buffaloes were divided into three categories, 11 suckling calves (0-8 months old), 10 weaned calves (8-18 months old), and 20 adult females over the age of 18 months. Adult animals were free from parasitism or showed very low parasite load. The suckling calves showed a peak of egg per gram of feces (EPG = 2038) in November, when the average rainfall was 69.3 mm and the temperature 25.95 °C, while the lowest egg count (167) occurred in May, two months after the peak of 234.68 mm and 20.59 °C. Weaned calves showed two peaks of EPG from 1288.89 and 875 in September and June, with rainfall of 41.45 and 18.4 mm, temperature 24.16 and 20.69 °C, respectively. Significant (p = 0.01) and negative (r = -0.33) correlation between the EPG of suckling calves and precipitation was observed. The most common gastrointestinal parasites were Haemonchus sp. and Cooperia sp.