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Full confluency, serum starvation, and roscovitine for inducing arrest in the G0/G1 phase of the cell cycle in puma skin-derived fibroblast lines
Rodrigues, Luanna Lorenna Vieira; Moura, Yasmin Beatriz França; Viana, João Vitor da Silva; Oliveira, Lhara Ricarliany Medeiros de; Praxedes, Érika Almeida; Vieira Neto, José de Brito; Sales, Sarah Leyenne Alves; Silva, Herlon Victor Rodrigues; Luciano, Maria Claudia dos Santos; Pessoa, Claudia; Pereira, Alexsandra Fernandes.
Afiliação
  • Rodrigues, Luanna Lorenna Vieira; Universidade Federal Rural do Semi-Árido. Laboratório de Biotecnologia Animal. Mossoró. BR
  • Moura, Yasmin Beatriz França; Universidade Federal Rural do Semi-Árido. Laboratório de Biotecnologia Animal. Mossoró. BR
  • Viana, João Vitor da Silva; Universidade Federal Rural do Semi-Árido. Laboratório de Biotecnologia Animal. Mossoró. BR
  • Oliveira, Lhara Ricarliany Medeiros de; Universidade Federal Rural do Semi-Árido. Laboratório de Biotecnologia Animal. Mossoró. BR
  • Praxedes, Érika Almeida; Universidade Federal Rural do Semi-Árido. Laboratório de Biotecnologia Animal. Mossoró. BR
  • Vieira Neto, José de Brito; Universidade Federal do Ceará. Laboratório de Oncologia Experimental. Fortaleza. BR
  • Sales, Sarah Leyenne Alves; Universidade Federal do Ceará. Laboratório de Oncologia Experimental. Fortaleza. BR
  • Silva, Herlon Victor Rodrigues; Universidade Estadual do Ceará. Laboratório de Reprodução de Carnívoros. Fortaleza. BR
  • Luciano, Maria Claudia dos Santos; Universidade Federal do Ceará. Laboratório de Oncologia Experimental. Fortaleza. BR
  • Pessoa, Claudia; Universidade Federal do Ceará. Laboratório de Oncologia Experimental. Fortaleza. BR
  • Pereira, Alexsandra Fernandes; Universidade Federal Rural do Semi-Árido. Laboratório de Biotecnologia Animal. Mossoró. BR
Anim. Reprod. (Online) ; 20(1): e20230017, 2023. graf, ilus, tab
Article em En | VETINDEX | ID: biblio-1427272
Biblioteca responsável: BR68.1
ABSTRACT
The puma population is constantly decreasing, and cloning by somatic cell nuclear transfer can be used to conserve the species. One of the factors determining the success of the development of cloned embryos is the cell cycle stage of the donor cells. We evaluated the effects of full confluency (~100%), serum starvation (0.5% serum), and roscovitine (15 µM) treatments on the cell cycle synchronization in G0/G1 of puma skin-derived fibroblasts by flow cytometric analysis. Also, we assessed the effects of these synchronization methods on morphology, viability, and apoptosis levels using microscopy tools. The results showed that culturing the cells to confluence for 24 h (84.0%), 48 h (84.6%), and 72 h (84.2%) and serum starvation for 96 h (85.4%) yielded a significantly higher percentage of cells arrested in the G0/G1 (P < 0.05) phase than cells not subjected to any cell cycle synchronization method (73.9%). Nevertheless, while serum starvation reduced the percentage of viable cells, no difference was observed for the full confluence and roscovitine treatments (P > 0.05). Moreover, roscovitine for 12 h (78.6%) and 24 h (82.1%) was unable to synchronize cells in G0/G1 (P > 0.05). In summary, full confluency induces puma fibroblast cell cycle synchronization at the G0/G1 stage without affecting cell viability. These outcomes may be valuable for planning donor cells for somatic cell nuclear transfer in pumas.(AU)
Assuntos
Palavras-chave

Texto completo: 1 Base de dados: VETINDEX Idioma: En Revista: Anim. Reprod. (Online) Ano de publicação: 2023 Tipo de documento: Article

Texto completo: 1 Base de dados: VETINDEX Idioma: En Revista: Anim. Reprod. (Online) Ano de publicação: 2023 Tipo de documento: Article