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Braz. j. biol; 83: e270335, 2023. tab, graf, ilus

Artigo em Inglês | VETINDEX | ID: biblio-1439639

Resumo

Degenerative diseases, such as osteoporosis, could be treated by stem cells. The aim of this study was to identify the gene expression of bone marrow mesenchymal stem cells (BM-MSC) derived from Sprague Dawley rats and to assess the effect of Cissus quadrangularis Salisb. extract on their maturation into bone cells. The BM-MSC were divided into three groups: (a) BM-MSCs + osteoblast cell growth basal medium as the positive control; (b) BM-MSCs + Dulbecco's modified eagle's medium (DMEM) + 0.3 mg/mL methanol extract of C. quadrangularis as methanol group; and (c) BM-MSC + DMEM + 0.3 mg/mL ethyl acetate extract of C. quadrangularis as ethyl acetate group. A relative quantification approach using was used to analyze the expression of the alp (alkaline phosphatase) gene, with the beta-actin gene was used to normalize the expression of the alp gene. The intra-assay variation was calculated to validate the RT-qPCR data. Our study found that the intra-assay variation value was acceptable, with most of the coefficients of variability (CV) value <5. Ethyl acetate solvent outperformed methanol solvent in extracting the active compound C. quadrangularis. In the ethyl acetate extract group, the expression of the alp gene increased three times compared to the positive control. In methanol extract group, the expression of alp gene was lower six times compared to positive control. This study suggests that C. quadrangularis extracts using ethyl acetate could induce the maturation of BM-MSCs. However, further studies are warrant to confirm this effect using different indicators.

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Doenças degenerativas, como a osteoporose, podem ser tratadas por células-tronco. O objetivo deste estudo foi identificar a expressão gênica de células-tronco mesenquimais da medula óssea (BM-MSCs) derivadas de ratos Sprague Dawley, bem como sua proliferação e diferenciação em células ósseas afetadas pelo extrato de Cissus quadrangularis Salisb. As BM-MSCs foram divididas em três grupos: (1) BM-MSCs + meio basal de crescimento de osteoblastos como controle positivo; (2) BM-MSCs + meio de Eagle modificado por Dulbecco (DMEM) + extrato de metanol; e (3) BM-MSCs + DMEM + extrato de acetato de etila de C. quadrangularis. Uma abordagem de quantificação relativa foi usada para analisar a expressão do gene alp (fosfatase alcalina), com o gene da beta-actina sendo usado para normalizar a expressão do gene alp em cada tratamento. A variação intraensaio foi calculada para validar os dados de RT-qPCR. Os resultados mostraram que o valor da variação intraensaio é aceitável, com a maioria dos valores dos coeficientes de variabilidade (CV) < 5. Além disso, no tratamento T2, a expressão do gene alp aumentou três vezes em relação ao controle positivo. No tratamento T1, o gene alp apresentou nível de expressão seis vezes menor em comparação com o controle positivo. Além disso, o solvente acetato de etila superou o solvente metanol na extração do composto ativo C. quadrangularis Salisb. Este estudo demonstra que extratos de C. quadrangularis Salisb., particularmente com acetato de etila como solvente, podem induzir a proliferação e diferenciação de BM-MSCs. Com base na expressão do gene alp, C. quadrangularis tem o potencial de corrigir a perda óssea.

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