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Braz. J. Biol.; 75(2,supl): 75-80, May 2015. ilus

Artigo em Inglês | VETINDEX | ID: vti-13883

Resumo

Cytotoxicity assays using cell cultures may be an alternative to assess biological toxicity of surface waters and may help to improve the control of water quality. This study compared two methods to prepare culture media for the exposure of Hep-2 cells to water samples collected from the Rolante River, an important affluent of the Sinos River. The toxicity was evaluated using the MTT and neutral red assays. Two methods were used to prepare culture media. In method 1, the sample was diluted at 1:1, 1:10, 1:100, 1:1000, 1:10.000 (v/v, sample/medium) in a standard culture medium; in method 2, water samples were used as the solvent for the culture medium, which was prepared at concentrations of 100, 80, 60, 40 and 20%. Semi-confluent cultures were then exposed to the media test for 24 hours, and cytotoxicity was determined immediately using the MTT and NR assays. Mitochondrial activity (MTT) was significantly lower at all concentrations in both methods, except at 1:1000 in method 1. However, the lysosome viability (NR) results revealed cytotoxicity only in the 1:1 sample of method 1. Both culture preparation methods were efficient and sensitive to the MTT assay, but method 2 seemed to be more adequate for the NR assay. The Rolante River has cytotoxic contaminants to Hep-2 cells, which may be one of the explanations for the poor water quality of the Sinos River basin.(AU)

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Os ensaios de citotoxicidade utilizando culturas de células constituem uma alternativa para avaliar a toxicidade biológica de águas de superfície e podem auxiliar no controle da qualidade da água. Este estudo comparou dois métodos de preparação dos meios de cultura com amostras de água coletadas no rio Rolante, um importante afluente do Rio dos Sinos, para a exposição de células Hep-2. A toxicidade foi avaliada usando os ensaios do MTT e do vermelho neutro (VN). Dois métodos foram utilizados para preparar os meios de cultura. No método 1, a amostra foi diluída a 1:1, 1:10, 1:100, 1:1000 e 1:10.000 (v/v, amostra/ meio de cultivo) em um meio de cultura padrão; no método 2, as amostras de água foram utilizados como solventes para o meio de cultura, o qual foi preparado em concentração de 100% e nas diluições de 80, 60, 40 e 20%. Culturas semi-confluentes foram então expostas aos meios teste durante 24 horas, e a citotoxicidade foi determinada imediatamente usando os ensaios MTT e VN. A atividade mitocondrial (MTT) foi significativamente menor em todas as concentrações em ambos os métodos, exceto na diluição 1:1000 do método 1. No entanto, os resultados de viabilidade lisossomal (VN) revelaram citotoxicidade apenas no na diluição 1:1 do método 1. Ambos os métodos de preparação do meio cultura foram eficientes e sensíveis para o ensaio do MTT, mas o método 2 foi mais adequado para o ensaio do VN. O rio Rolante possui contaminantes citotóxicos para as células Hep-2, o que pode ser uma das explicações para a baixa qualidade da água da Bacia do Rio dos Sinos.(AU)

Biblioteca responsável: BR1.1

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