Dynamics in global DNA methylation and endogenous polyamine levels during protocorm-like bodies induction of Cattleya tigrina A. Richard / Dinâmica da metilação do DNA global e níveis endógenos de poliaminas durante a induçãode estruturas semelhantes a protocormos de Cattleya tigrina A. Richard

ABSTRACT

Cattleya tigrina is endemic to the Atlantic forest biome and classified as vulnerable in the Red Book of Brazilian Flora. In vitro techniques comprise valuable tools for the conservation of endangered plant species. The aim of the present study was to evaluate the morphological features, global DNA methylation levels and free polyamines during protocorm-like bodies (PLBs) induction of C. tigrina. Along with that, an efficient protocol for in vitro propagation of this species is proposed. The first evidences of PLBs induction in C. tigrina occurred at seven days in culture, starting from the basal portion of the leaf abaxial surface. A hypomethylation marked the beginning of cell differentiation, followed by an increased global DNA methylation at 35 days in culture, coinciding with a subtle change in the structures morphogenetic development. During PLBs induction, putrescine exhibited higher levels as compared to spermidine and spermine, and apparently presents a major role during the PLBs induction in C. tigrina. Due to the apparent secondary PLBs formation, this protocol can represent a highly efficient method for in vitro propagation of this species.(AU)

RESUMO

Cattleya tigrina é uma espécie endêmica do bioma Mata Atlântica e classificada como vulnerávelno Livro Vermelho da Flora Brasileira. As técnicas in vitro compreendem ferramentas valiosas a seremempregadas na conservação de espécies de plantas ameaçadas. O objetivo do presente estudo foi avaliar ascaracterísticas morfológicas, os níveis globais de metilação do DNA e as poliaminas livres durante a induçãode estruturas semelhantes a protocormos (ESPs). Paralelamente, um protocolo eficiente para a propagaçãoin vitro desta espécie é apresentado. As primeiras evidências de indução de ESPs em C. tigrina foramobservadas aos sete dias de cultivo, a partir da porção basal da superfície abaxial da folha. Umahipometilação foi observada concomitante ao início da diferenciação celular, e um aumento da metilaçãoglobal do DNA foi encontrada aos 35 dias de cultivo, coincidindo com uma sutil mudança nodesenvolvimento morfogenético das estruturas. Durante a indução de ESPs, a putrescina exibiu níveisaumentados em comparação a espermidina e espermina e, aparentemente, apresenta um papel importantedurante a indução dessas estruturas em C. tigrina. Devido à aparente formação secundária de ESPs, esteprotocolo pode representar um método altamente eficiente para a propagação in vitro desta espécie.(AU)