Real time polymerase chain reaction to diagnose Anaplasma marginale in cattle and deer (Ozotoceros bezoarticus leucogaster) of the Brazilian Pantanal / Reação da polimerase em cadeia tempo real para diagnóstico de Anaplasma marginale em bovino e veado campeiro do Pantanal brasileiro Ozotoceros bezoarticus leucogaster
Picoloto, Graziela; Lima, Renileide F de; Olegário, Lílian Andressa O; Carvalho, Cristiano M. E; Lacerda, Ana Crystina R; Tomás, Walfrido M; Borges, Paulo André L; Pellegrin, Aiesca O; Madruga, Cláudio Roberto.
R. bras. Parasitol. Vet.;
19(3): 186-188, 2010. graf
Artigo
em Inglês
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| ID: vti-4769
Resumo
Epizootiological study of Anaplasma marginale in regions that contain various reservoir hosts, co-existence of rickettsiapathogens, and common vectors is a complicated task. To achieve diagnosis of this rickettsia in cattle and campeiro deer ofBrazilian Pantanal, a comparison was made between a real time polymerase chain reaction (RT-PCR) with intercalating SybrGreen fluorochrome and primers based on msp5 gene of A. marginale; a conventional PCR (C-PCR); and parasitologicalexamination using thin blood smear stained with Giemsa-MayGrunwald. Both PCRs showed good performance in thediagnosis of A. marginale in cattle, and were superior to the parasitological exam. The RT-PCR detected seven positive campeirodeer (16.3%). This rate was significantly higher compared to C-PCR, which identified one animal as positive (2.3%), andalso compared to parasitological diagnosis, which did not find any positive animals. The dissociation temperature average ofpositive reactions in cattle (81.72 °C ± 0.20) was identical to dissociation temperature found in the cervids (81.72 °C ± 0.12),suggesting that both animal species were infected with A. marginale. We concluded that RT-PCR can be used for A. marginalediagnosis and in epizootiological studies of cattle and cervids; in spite of the small number of campeiro deer samples, theresults indicated that this wildlife species has importance in the Anaplasma epizootiology in the Brazilian Pantanal.(AU)O estudo epizootiológico de Anaplasma marginale em regiões que existem vários reservatórios, co-existência de espéciesde riquétsias patógenas e vetores comuns é uma tarefa complicada. Com o objetivo de obter o diagnóstico dessa riquétsia embovinos e veado campeiro do Pantanal brasileiro foi avaliada uma reação da polimerase em cadeia em tempo real (PCR‑TR)com o fluoróforo intercalante de fita dupla de DNA Sybr Green e iniciadores baseados na seqüência do gene msp5 deA. marginale comparando-a a uma PCR convencional (PCR-C) e ao exame parasitológico de esfregaço fino de sangue coradocom Giemsa-MayGrunwald. Ambas PCRs apresentaram bom desempenho no diagnóstico de A. marginale nos bovinos,o qual foi superior ao exame parasitológico. O PCR-TR detectou sete veados campeiros positivos (16,3%), o que foisignificativamente maior comparado ao PCR-C identificando um animal como positivo (2,3%), e ao exame parasitológiconão encontrou nenhum animal positivo. A média da temperatura de dissociação das reações positivas para amostras debovinos (81,72 °C ± 0,20) foi idêntica àquelas dos cervídeos ( 81,72 °C ± 0,12), o que sugere que ambas espécies animaisforam infectadas por A. marginale. Concluímos que PCR-TR pode ser utilizada para diagnóstico e estudos epizootiológicosde A. marginale em bovinos e cervídeos. Apesar da pequena amostragem de veado campeiro os resultados indicam que essaespécie de animal selvagem tem importância na epizootiologia do Anaplasma no Pantanal brasileiro.(AU)
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