INFLUÊNCIA DO PRÉ-TRATAMENTO E DA CONCENTRAÇÃO DE LACTOSE NA VIABILIDADE DE MÓRULAS Mus musculus CONGELADAS PELO MÉTODO ULTRA-RÁPIDO
Mezzalira, Alceu; Iolanda Batistella Rubin, Mara.
Ci. Rural;
21(2)1991.
Artigo
em Português
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| ID: vti-702729
Resumo
SUMMARY Two hundred and twenty five morulae were submitted to a ultra rapid freezing in four different treatments. In treatment I (n=57), the embryos were first exposed to a 5.0M glycerol pre treatment, and later to a glycerol 5.0M + lactose 0.25M freezing solution. In the treatment II (n=54) the procedure was similar to the treatment I, but with 0.5M of lactose instead 0.25M. In the treatment III (n=57), the embryos were exposed directly to a glycerol 5.0M + lactose 0.25M freezing solution. In the treatment IV (n=57) the procedure was similar to the treatment III, but with lactose 0.5M instead 0.25M. The embryos were maintened 5 minutes in each solution, and then loaded in groups of 6 to 12, in 0.25ml plastic straws. After thawing in a water bath at 37 °C, the cryoprotector was removed by five minutes exposure to a lactose solution in the same concentration than that used in the freezing procedure. After 48 hours of culture, the highest viability was observed in treatment IV (80.7%), followed by treatment III (66.7%), treatment II (66.7%) and treatment I (31.6%). Pretreatment determined a decrease in the viability (49.2%) when compared with the viability of groups without pre treatment (73.7%). The embryo viability was higher with lactose 0.5M (73.7%) than with lactose 0.25M (49.2%).RESUMO Duzentos e vinte e cinco embriões de camundongos foram congelados em vapor de nitrogênio, em quatro diferentes tratamentos. No tratamento I (n=57), os embriões foram submetidos a um pré-tratamento em glicerol 5,0, sendo posteriormente colocados em uma solução de glicerol 5,0M + lactose 0,25M. No tratamento II (n=54), o procedimento foi semelhante, porém com a utilização de 0,5M de lactose. No tratamento III (n=57), os embriões foram colocados diretamente na solução de glicerol 5,0M + lactose 0,25M. No tratamento IV (n=57), o procedimento foi semelhante ao tratamento III, porém com a utilização de lactose 0,5M. Os embriões foram mantidos por 5 minutos em cada solução, sendo em seguida envasados em grupos de 6 a 12, em palhetas de 0,25ml. O descongelamento foi realizado em banho-maria a 3 7 °C e a remoção do crioprotetor realizada pela exposição, por 5 minutos, a uma solução de lactose na mesma concentração utilizada no congelamento. Após 48 horas de cultivo, os melhores resultados foram obtidos com o tratamento IV (80,7%), quando comparados ao tratamento III (66, 7%), tratamento II (66,7%) e tratamento I (31,6%). O pré-tratamento exerceu uma influência negativa, determinando menor viabilidade média (49,2%) em relação aos grupos sem pré-tratamento (73,7%). A concentração de lactose 0,5M proporcionou maior viabilidade média (73,7%) que a lactose 0,25M (49,2%).
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BR68.1
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