Criopreservação do sêmen de truta arco-íris: diluente, palheta e a coluna de vapor / Cryopreservation of rainbow trout semen: diluent, straw and the vapor column

ABSTRACT

The present paper concerns to the development of a simple semen freezing technique to be used in commercial systems. Fresh milt was obtained from two years-old adult males of rainbow trout. The samples were previously cooled (4°C), then diluted, packaged in straws, and frozen in liquid nitrogen vapor. The freezing system was composed by a 33 L StyrofoamTM box with a graduated metal web; straws of 0.5 mL and 4 mL were tested and two types of extenders were used V2e with 10% DMSO and modified Cortland solution with 24% DMSO. Two experiments were performed the first one evaluated the effect of the extenders and straw type on the fertility of the frozen/thawed semen, and the second one verified the effect of the vapor column and straw position on the viability of the frozen/thawed semen, using 0.5 mL-straws and V2e extender. The sperm viability was tested by checking eyed eggs production. In the first experiment, there were no statistical differences (P>0.05) between the two tested straws and the modified Cortland solution. However, the V2e solution treatment showed a significantly higher fertilization rate when associated to 0.5 mL straw. In the second experiment, a remarkable statistical interaction (P>0.05) was observed between the straw cargo and vapor column (freezing point) effects on the percentage of eyed eggs.

RESUMO

A presente investigação visou ao desenvolvimento de uma técnica de congelação de sêmen, simples para ser aplicada em sistemas de produção. O sêmen fresco foi obtido de machos adultos de truta arco-íris com dois anos de idade. As amostras foram previamente resfriadas (4°C), diluídas, envasadas em palhetas e congeladas em vapor de nitrogênio líquido. O sistema de congelação foi composto de uma caixa de isopor de 33 L e uma estante de metal graduada, utilizando-se palhetas de 0,5 e 4,0 mL e dois tipos de diluentes V2e com 10% de DMSO e solução modificada de Cortland com 24% de DMSO. Dois experimentos foram realizados o 1° verificou o efeito dos diluentes e dos tipos de palhetas em relação à fertilidade do sêmen descongelado e o 2° estudou o efeito da coluna de vapor e da carga de palhetas, usando palhetas de 0,5 mL e o diluente V2e, na efetividade do sêmen descongelado. A viabilidade espermática foi testada por sua capacidade de produzir ovos-olhados. No primeiro experimento não houve diferença estatística (P>0,05) entre as duas palhetas testadas em relação à solução modificada de Cortland. Entretanto, o tratamento com a solução V2e demonstrou aumento significativo das taxas de fertilização, quando associado à palheta de 0,5 mL. No segundo experimento ocorreu interação estatística significativa (P>0,05) entre os efeitos da carga de palhetas e da coluna de vapor (po