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Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-201836

Resumo

No microambiente tumoral, os macrófagos podem estimular a proliferação das células malignas, mediante produção de fatores de crescimento que favorecem a angiogênese. Embora a relação entre angiogênese e macrófagos tenha sido reconhecida em diversas pesquisas envolvendo tumores mamários de mulheres, esta relação na espécie canina permanece sob investigação. O objetivo deste estudo foi avaliar a marcação de macrófagos associados ao tumor (TAM) e do fator de crescimento endotelial vascular (VEGF) em carcinomas mamários de cadelas mediante técnica de imuno-histoquímica. Foram selecionados do setor de patologia do Hospital Veterinário da Universidade de Franca/SP (UNIFRAN), 99 blocos de parafina de carcinomas mamários de cadelas. As amostras foram submetidas a reações de imuno-histoquímica com os anticorpos anti-VEGF (VG-1, Abcam) e anti-macrófago (MAC 387, DBS). Para a determinação do VEGF, foi realizada a soma dos escores dos percentuais de células tumorais coradas cujo percentual de marcação variou de um a quatro, sendo 1: até 25% das células positivas, 2: 25 a 50% das células positivas, 3: 50 a 75% das células positivas e 4: mais de 75% das células positivas. Para a quantificação de macrófagos, avaliou-se o número absoluto de células positivas que se apresentaram entremeadas ao tumor. Os resultados foram avaliados,por análise de variância seguida pelo teste de Tukey, Kruskal-Wallis, seguido pelo teste de Dunns e teste t de Student, considerando-se nível de significância de 5%. Comparando-se os escores de marcação do VEGF, observou-se que carcinomas tubulares, papilares e carcinomas em tumor misto apresentaram médias de escores superiores ao carcinoma sólido (p<0,001). Avaliando-se as contagens de macrófagos entre os tipos histológicos, os carcinomas tubulares apresentaram média (13,52±16,38) superior aos carcinomas sólidos (2,77±3,59) (p<0,01). Contudo, não houve diferença na contagem de VEGF e de macrófagos entre os graus histológicos I, II e III (p>0,05). Quando categorizados em dois grupos de arcação de VEGF (50% e >50%), a média de TAM foi maior nos animais com marcação acima de 50% de VEGF (p=0,002). Conclui-se que, apesar do VEGF e de macrófagos não terem se apresentado aumentados nos tumores considerados agressivos, ambos demonstraram estar relacionados, uma vez que marcações de VEGF acima de 50% revelaram maiores contagens de macrófagos nas neoplasias mamárias caninas.

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Mammary gland tumors are the most common malignancies in dogs. In the tumor 8 microenvironment, macrophages can stimulate the proliferation of malignant cells through production of growth factors that promote angiogenesis. Although the 10 relationship between angiogenesis and macrophages has been recognized in several studies involving mammary tumors in women, this relationship remains under 12 investigation in dogs. The objective of this study was to evaluate the immunostaining of 13 tumor-associated macrophages (TAM) and vascular endothelial growth factor (VEGF) in 14 mammary carcinomas of female dogs by means of immunohistochemistry technique. Ninety-nine 99 paraffin blocks of mammary carcinomas of female dogs were selected 16 from Veterinary Hospital of the University of Franca / SP (UNIFRAN). The samples under went immunohistochemical reactions with antibodies anti-macrophage (MAC 387, 18 DBS) and anti-VEGF (VG-1, Abcam). macrophages quantification was evaluated by the absolute number of positive cells around the tumor. VEGF analysis was performed by 20 percentage scores as follow: 1: up to 25% of positive cells, 2: 25 to 50% of positive cells 21 3: 50-75% of positive cells and 4: more than 75% of the positive cells. Analysis of 22 variance plus Tukey's test or Kruskal-Wallis plus Dunn's test was performed considering 23 5% significance level. Macrophages counts between histologic types showed higher 24 mean of tubular carcinomas (13,52 ± 16,38) that the solid carcinomas (2,77 ± 3,59) 25 (p<0,01). When comparing VEGF scores, it was observed that tubular, papillary and 26 mixed tumor carcinomas showed higher mean scorethat the solid carcinoma (p<0,001). 27 However, there was no difference to macrophages count or VEGF scores means 28 between tumor grades I, II and III (p> 0,05). When classified into two groups VEGF 29 labeling (50% and> 50%), the TAM mean was higher in animals with VEGF labelling 30 above 50% (p = 0,002). In conclusion, although VEGF and macrophages were not 31 increased in aggressive tumors, both markers could be related, since VEGF labeling over 50% showed higher macrophages density in canine mammary tumors.

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