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ESTUDO CLÍNICO, LABORATORIAL E BIOMOLECULAR DE REBANHO LEITEIRO PARA PRODUÇÃO DE BIOTERÁPICO DE PAPILLOMAVIRUS BOVINO

PATRICIA GALLINDO CARRAZZONI.
Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-202271

Resumo

O Papillomavirus Bovino e a papilomatose cutânea estão amplamente difundidos no rebanho brasileiro causando perdas econômicas significativas. Os tratamentos existentes são dispendiosos, ineficazes e não há vacinas comerciais disponíveis, sugerindo a pesquisa por medicamentos viáveis e seguros. Dentre os medicamentos homeopáticos, os bioterápicos são produzidos a partir de produtos ou tecidos do paciente e utilizam o próprio agente causal da doença para estimular o organismo a promover a cura. Neste contexto, teve-se como objetivo acompanhar bovinos leiteiros naturalmente infectados por BPV, caracterizar os aspectos clínicos, epidemiológicos, laboratoriais e moleculares do rebanho, para, a partir do sangue e lesões dos animais estudados produzir e avaliar bioterápico de Papillomavírus Bovino. O trabalho foi desenvolvido no Instituto Agronômico de Pernambuco e no Laboratório de Estudos Moleculares e Terapia Experimental da Universidade Federal de Pernambuco. A propriedade foi avaliada quanto à localização, estrutura física, manejo nutricional, reprodutivo e sanitário do rebanho. Dentre os animais da propriedade, foram acompanhadas 92 fêmeas bovinas, das quais foram coletados 35 fragmentos de lesões cutâneas e 89 amostras sanguíneas. Destas amostras, foram realizados hemogramas, extração de DNA, identificação e genotipagem de BPV, e produzidos dois bioterápicos de Papillomavirus Bovino. BiotSan, produzido a partir do pool de amostras de sangue e BiotLes, produzido a partir de um pool de lesões cutâneas, ambos seguindo a Farmcopeia Homeopática Brasileira na diluição D30. Os bioterápicos prontos foram avaliados por biologia molecular quanto à presença do vírus nas diluições D1 a D30. O estudo caracterizou os aspectos epidemiológicos da propriedade, os aspectos clínicos e laboratoriais do rebanho, a infecção dos animais pelo BPV, o desenvolvimento, características e evolução clínica das lesões em 24 meses, a frequência e comparação dos tipos virais no sangue e lesões cutâneas. Os resultados mostraram que todos os animais estavam infectados pelo BPV, as avaliações hematológicas indicaram evidência de doença crônica no rebanho, semelhante entre animais sintomáticos e assintomáticos. Foi identificado comprometimento reprodutivo do rebanho, indicando ser causado pela infecção com os BPVs. A papilomatose cutânea leve com lesões do tipo atípico basal único foi a mais frequente e não houve regressão das lesões no período estudado. A presença de múltiplos tipos virais no sangue e lesões foi identificada em quase 100% das amostras, ocorreu com vários tipos virais, sem relação com localização, tipo ou gravidade das lesões e não foi determinante para o desenvolvimento de lesões cutâneas e sintomatologia clínica. Os tipos virais presentes no sangue e lesões do rebanho foram semelhantes e não diferiram entre animais sintomáticos e assintomáticos. BPV2 e BPV3 foram os tipos mais frequentes nas lesões e BPV10 e 12 no sangue. Os tipos virais BPV11 e 12 foram identificados pela primeira vez em Pernambuco em amostras de sangue e lesões. As técnicas empregadas para produção e avaliação dos bioterápicos BiotLes e BiotSan foram eficazes e a análise molecular mostrou composição por tipos virais dos gêneros Delta, Epsilon e Xipapillomavirus, ideal para indução de resposta imune específica do BPV. A diluição D30 destes bioterápicos, no entanto, apresenta fragmentos virais, não sendo recomendada para utilização no tratamento e prevenção da doença em bovinos, indicando a necessidade de novos estudos para determinar a diluição homeopática para qual inexistam partículas virais.
The Bovine Papillomavirus and cutaneous papillomatosis are widespread in the Brazilian herd causing significant economic losses. Existing treatments are costly, ineffective and there is no commercial vaccines available, suggesting the search for viable and safe medicines. Out of the homeopathic medicines, biotherapics are produced from products or tissues of the patient and use the causal agent of the disease to stimulate the body itself to promote healing. In this context , the aim of the study was to accompany dairy cattle naturally infected with BPV, characterize the clinical, epidemiological, laboratorial and molecular aspects of the herd, for, from the blood and lesions of animals studied produce and evaluate biotherapic of Bovine Papillomavirus. The study was conducted at the Agronomic Institute of Pernambuco and at the Laboratory of Molecular Research and Experimental Therapy (LEMTE) of the Federal University of Pernambuco. The property was evaluated as the location, physical structure, nutritional, reproductive and sanitary management of the herd. Among the animals of the property, 92 cows were accompanied, of these, 35 fragments of skin lesions and 89 blood samples were collected. From these samples, blood tests, DNA extraction, identification and genotyping of BPV were carried out, and two Bovine Papillomavirus biotherapics produced: BiotSan produced from a pool of blood samples and BiotLes produced from a pool of skin lesions, both following the Brazilian Homeopathic Farmcopeia in D30 dilution. The ready biotherapic were evaluated by molecular biology regarding the presence of the virus in D1 to D30 dilutions. The study characterized the epidemiological aspects of the property, clinical and laboratory aspects of the herd, the infection of animals by BPV, development, characteristics and clinical evolution of the lesions in 24 months, the frequency and comparison of viral types in the blood and cutaneous lesions. The results showed that all the animals were infected with BPV, hematologic evaluations indicated evidence of chronic disease in the herd , similar in symptomatic and asymptomatic animals. Reproductive impairment of the herd was identified and could be caused by infection with BPVs. A mild cutaneous papillomatosis with the single basal atypical type injury was the most frequent and there was no regression of the lesions during the study period. The presence of multiple viral types in the blood and lesions was detected in almost 100 % of the samples, took place with various viral types, without regard to location, type or severity of injuries and it was not decisive for the development of skin lesions and clinical symptoms. Viral types present in the blood and lesions were similar and did not differ between symptomatic and asymptomatic animals. BPV2 and BPV3 were the most frequent types of lesions and BPV10 and 12 in the blood. The viral types BPV11 and 12 were first identified in Pernambuco in samples of blood and lesions. The techniques employed for the production and evaluation of BiotLes and BiotSan biotherapic were effective and molecular analysis showed composition with viral types of genres Delta, Epsilon and Xipapillomavirus, ideal for induction of specific immune response of BPV. The dilution D30 of biotherapics, however, presents viral fragments, which does not recommend for use in the treatment and prevention of disease in cattle, indicating the need for further studies to determine the homeopathic dilution for which there be no viral particles.
Biblioteca responsável: BR68.1