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Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-203509

Resumo

As diferentes formas de terapia celular, como as células-tronco mesenquimais (CTM) associadas ao plasma rico em plaquetas (PRP), têm sido amplamente utilizadas no tratamento de lesões condrais e da osteoartrite, apresentando resultados interessantes. Atualmente, a literatura já traz uma série de competências positivas inerentes às CTM e ao PRP. O emprego da terapia celular em associações com outros tipos de tratamento, como as microfraturas, possibilitou que os pesquisadores aproximassem-se de resultados muito próximos ao ideal. Sendo assim, este estudo teve como objetivo comparar a resposta clínica e a inflamação articular, a morfologia e a composição do tecido de reparação de lesões condrais experimentalmente induzidas em equinos, tratadas com microfraturas e CTM em gel de PRP de forma isolada ou com a associação desses tratamentos. Para isso, 12 equinos foram submetidos a uma primeira cirurgia artroscópica, considerada tempo zero do experimento (T0), onde foi induzida uma lesão condral de 15 mm de diâmetro na tróclea medial femoral de ambos os membros pélvicos. As 24 articulações femoropatelares desses animais foram divididas em quatro grupos. O defeito condral foi submetido ao tratamento conforme o grupo: GA: recebeu o tratamento apenas com microfraturas. GB recebeu o tratamento com microfraturas associadas ao implante de CTMs em arcabouço de PRP em gel. GC recebeu o tratamento apenas com o implante de CTM em gel de PRP, e o GD foi o grupo controle do experimento, sem a aplicação de tratamentos. As CTMs foram extraídas do tecido adiposo e o PRP em gel foi obtido por protocolo de dupla centrifugação seguido da adição de trombina liofilizada bovina para a formação do gel. As articulações foram acompanhadas até os cinco meses (T150) através de exames clínicos e laboratoriais. Em T150 foi realizada nova artroscopia para avaliação macroscópica e coleta de amostras do tecido de reparação para análises histopatológica, imunoistoquímica e qPCR. Observamos que o emprego de CTMs em gel de PRP no tratamento de lesões condrais experimentais altera as concentrações de IL-1 e PGE2 no líquido sinovial de equinos. Não houve diferença significativa na apresentação de claudicação e não houve diferença significativa nas análises de qPCR entre os grupos. O implante de CTM em gel de PRP associado às microfraturas demonstrou um melhor tecido de reparação no aspecto morfológico macro e microscópico, com maior organização tecidual e superior produção de glicosaminoglicanos. Sendo assim, o tratamento com microfraturas associado às CTMs em gel de PRP evidenciou os melhores resultados, apoiando a idéia que a terapia celular contribui de forma significativa na reparação, somada à perfuração do osso subcondral e um arcabouço em três dimensões rico em fatores de crescimento, consequentemente resultando em um tecido de reparação macroscopicamente semelhante à cartilagem articular, com preenchimento total da lesão, bem aderido e com melhores pontuações nos escores histológicos. Porém, estudos adicionais devem ser realizados objetivando o detalhamento da influência da inflamação articular sobre a expressão do potencial das CTMs e do PRP. Devemos observar que em determinadas condições inflamatórias, talvez as CTMs associadas ao arcabouço de PRP e microfraturas não exerçam o efeito desejado, seja ele imunossupressor, imunogênico ou anti-inflamatório.

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Several methods of cell therapy, such as mesenchymal stem cells (MSC) associated with platelet rich plasma (PRP), have been commonly used in the treatment of chondral articular defects and osteoarthritis, with satisfactory outcomes. Nowadays, the literature already shows an amount of positive features inherent to the MSC and the PRP. The use of cell therapy in association with other kinds of treatment, such as microfractures, allowed the researchers come closer to the ideal results. Thus, this study aimed to compare the clinical response and joint inflammation, the morphology and the structure of repair tissue from chondral defects experimentally induced in horses which were treated with microfractures, MSC, PRP alone or in combination of treatments. For this purpose, a first arthroscopic surgery was performed in 12 horses, which was considered time zero of the experiment (T0). A chondral defect of 15 mm diameter was created on medial femoral trochlea of both hindlimbs. The 24 patellofemoral joints of these animals were divided into four groups. The chondral defect was treated according to the group: GA: received treatment only with microfractures. GB received treatment with microfractures associated with MSC in PRP-gel scaffold. CG received treatment only with MSC in PRP-gel, and the GD was the control group, without treatments. MSCs were obtained from adipose tissue and PRP gel was obtained through double centrifugation method, followed by adding lyophilized bovine thrombin to achieve the gel consistency. The joints were followed during five months (T150) by clinical and laboratory assessment. At T150 there was performed a new arthroscopy aiming the macroscopic evaluation and repair tissue samples collection for histopathological, immunohistochemistry and qPCR analysis. We observed that the use of CTM in PRP-gel in the treatment of experimental chondral defects can modify the IL-1 and PGE2 concentrations in the synovial fluid. There was no significant difference in the lameness scores and there was no significant difference in qPCR assessment among the groups. The implant CTM in PRP-gel associated with microfractures showed the better tissue repair in morphological macro and microscopic appearance, with better tissue organization and higher production of proteoglycans. The treatment with microfractures, MSCs and PRP showed the best results, supporting the idea that cell therapy contributes significantly on the repair of chondral defects, and it may be combined with the stimulation of bone marrow and three dimensions scaffold rich in growth factors. However, further studies should be performed in order to study the influence of joint inflammation on the expression of MSCs potential and PRP activity. We should note that depending on the inflammatory environment, perhaps MSCs associated with PRP-gel and microfractures don¿t have the expected performance, whether immunosuppressive, anti-inflammatory or immunogenic.

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