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Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-203521

Resumo

A gema de ovo (EY) é utilizada como agente crioprotetor em diluentes para criopreservação de sêmen, mas seu uso apresenta desvantagens sanitárias e práticas. Assim, há um crescente interesse no desenvolvimento de novos diluentes, livres de componentes de origem animal, para preservação de sêmen. O objetivo deste trabalho foi o de avaliar, em um diluente comercial para sêmen equino, um crioprotetor alternativo, livre de componentes de origem animal, comparado à gema de ovo. O sêmen de cada ejaculado (n=14) foi dividido em três alíquotas: Controle - EquiPlus Freeze® com 2% de EY, T1 - EquiPlus Freeze® com 2% do substituto da EY (UDM®) a 0,01% e T2 - EquiPlus Freeze® com 2% de UDM® a 0,0001%. Ambos os diluentes experimentais foram igualmente eficientes em preservar os parâmetros de motilidade pós-descongelação. T2 foi mais eficiente em preservar a motilidade total (64% versus 53%) (P < 0,05) e a velocidade da trajetória média (VAP) que T1 (25 m/s versus 21 m/s) (P < 0,05), entretanto, não foram observadas diferenças significativas entre os dois diluentes experimentais e o Controle. Não houve diferenças quanto à PMOT, VCL, VSL, BCF e ALH entre o sêmen congelado com o Controle, T1 e T2. O sêmen preservado em T2 e no Controle reagiram similarmente ao teste hiposmótico (HOST), mas houve uma diferença significativa entre a reatividade ao HOST e o sêmen congelado no Controle e T1 (29% versus 24%, respectivamente) (P < 0,05). Não foram observadas diferenças na porcentagem de espermatozoides corados com iodeto de propídio e no acrossoma corado com FITC-PNA entre os diluentes testados e o Controle. O diluente no qual a EY foi substituída por 0,0001% de UDM® (T2) foi mais eficiente em preservar o potencial mitocondrial espermático em comparação ao diluente com 0,01% UDM® (T1) (21% versus 15%) (P < 0,05), entretanto, o Controle apresentou semelhante proteção ao potencial mitocondrial quanto os diluentes experimentais. A utilização do substituto da EY demonstrou resultados satisfatórios, podendo ser perfeitamente utilizado como um crioprotetor alternativo para sêmen equino.

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Egg yolk (EY) is normally used as a cryoprotective agent in semen freezing extenders, but its use has sanitary and practical disadvantages, thus there is increasing interest in developing novel extenders free of products from animal origin to store semen. The aim of this study was to assess in an equine commercial extender an alternative cryoprotector, free of products from animal origin, compared to whole EY. Semen of each ejaculate (n=14) was divided into three aliquots: Control - EquiPlus Freeze® supplemented with 2% of EY, T1 - EquiPlus Freeze® supplemented with 2% of egg yolk substitute (UDM®) at 0.01%, and T2 - EquiPlus Freeze® supplemented with 2% of UDM® at 0.0001%. Both experimental extenders were equally efficient in preserving post-thaw motility parameters. T2 was more efficient to preserve total motility (64% versus 53% respectively) (P < 0.05) and average path velocity (VAP) than T1 (25 m/s versus 21 m/s) (P < 0.05), however, no differences was detected between the two experimental extenders and the Control. There was no significant difference for PMOT, VCL, VSL, BCF and ALH between sperm frozen with control extender and experimental extenders (T1, T2). The sperm preserved in T2 and control reacted similarly to the hypoosmotic test, but there was a significant difference between the reactivity to the HOST when the sperm was frozen in Control and T1 (29% versus 24%) (P < 0.05). We did not observe any significant difference in the percentage of sperm stained with propidium iodide and in the acrosome fluoresced of FITC-PNA between the tested extenders and the control. The extender in which EY was replaced by 0.0001% UDM® (T2) was more efficient to preserve the mitochondrial status of spermatozoa than the extender replaced by 0.01% UDM® (T1) (21% versus 15%) (P < 0.05), however, the control extender presented similar protection to the mitochondrial status as the other two groups. The use of substitute of EY showed very satisfactory results, and it can be used perfectly as an alternative cryoprotector for equine semen.

Biblioteca responsável: BR68.1