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Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-204205

Resumo

O conhecimento sobre o microbioma intestinal de aves clinicamente saudáveis mantidas como pet é auxiliar na compreensão da epidemiologia das doenças bacterianas que acometem aves e humanos, tendo em vista o contato estreito que proprietários mantêm com seus animais de companhia. Este trabalho objetivou a pesquisa de Salmonella spp. e Escherichia coli com potencial zoonótico em material cloacal de calopsitas (Nymphicus hollandicus) saudáveis mantidas como animais de companhia (pet), bem como o estudo de sua sensibilidade aos antimicrobianos. Foram colhidos swabs cloacais de 94 aves clinicamente saudáveis, mantidas em criatórios comerciais, pet shops ou domiciliadas. As amostras foram semeadas em água peptonada e ágar MacConkey. Após identificação fenotípica, três cepas de E. coli de cada indivíduo foram submetidas à pesquisa dos genes relacionados às extraintestinal pathogenic E. coli (ExPEC) (papC, papEF, sfa, cnf1, malX, fyuA, cvaC, sfa, hly), incluindo os genes preditores de virulência para aves (APEC) (ironN, ompT, hlyF, iss e iutA); à pesquisa de marcadores de E. coli diarreiogênica (ST, LT, ial, eagg, eae, stx1 e stx2) e classificadas de acordo com os grupos filogenéticos A, B1, B2 e D. Realizou-se a sorotipagem dos isolados com o sorotipo O157 H7. A pesquisa de sensibilidade aos antimicrobianos seguiu padronização internacional. Pesquisaram-se os seguintes genes nas amostras resistentes: blaTEM, blaSHV, blaOXA, CMY, CTX-M, tetA, tetB, aadA, aphA, strAB, sul1, sul2, sul3, qnrA, qnrD, qnrB, qnrS, oqxAB, aac, qnrC e qepA e os marcadores para os plasmídeos de grupo Inc K/B, W, FIIA, FIA, FIB, Y, I1, F, X, HI1, N, H12 e L/M. Não se verificou Salmonella spp. nos animais pesquisados. Isolou-se 27 cepas de E. coli de nove dos 94 animais (10%). A combinação de 4 genes APEC (ironN, ompT, iss e hlyF) foi detectada em duas cepas (2/27-7%); iss (1/27-4%) em um isolado. Dos 27 isolados, seis (22%) foram classificados no grupo filogenético A; 18 (67%) em B1, três cepas (11%) em B2 e nenhum em D. Não houve soroaglutinação com o antissoro O157 H7. Os maiores índices de resistência foram observados perante amoxicilina (22/27-82%), ampicilina (21/27-79%), estreptomicina (18/27-67%) e tetraciclina (11/27-40,7%). Dezesseis isolados (59%) de sete animais diferentes apresentaram multirresistência. Os genes de resistência observados foram strAB, blaTEM, tetA, tetB, aadA, aphaA, sul1, sul2 e sul3. Plasmídeos de resistência estiveram presentes em 20 cepas, sendo eles IncFIB (18/27), IncFIA (3/27), IncY (2/27) e IncI1(4/27). Apesar da baixa percentagem de isolados com potencial patogênico, foi significativa a resistência antimicrobiana das cepas isoladas de calopsitas saudáveis mantidas em cativeiro, incluindo multirresistência. O papel dos pets na manutenção e disseminação de bactérias resistentes a antimicrobianos tem sido tema relevante na Saúde Pública. Ressalta-se, portanto, a importância de cuidados sanitários entre os proprietários e suas aves, bem como um maior controle na utilização de antimicrobianos em animais.

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Understanding the composition of the intestinal microbiome of clinically healthy pet birds offers an important insight into the epidemiology of bacterial diseases affecting captive birds and humans, mainly for the close contact that owners have with their pets. This research evaluated the presence and antimicrobial sensitivity of Salmonella spp. and Escherichia coli with zoonotic potential isolated from cloacal swabs of healthy pet cockatiels (Nymphicus hollandicus). Samples from 94 clinically healthy birds from commercial breeders and private homes were seeded in peptone water and agar MacConkey. After phenotypic identification, three E. coli strains from each individual underwent extraintestinal pathogenic E. coli (ExPEC) (papC, papEF, sfa, cnf1, malX, fyuA, cvaC, sfa, hly) genes research, including genes of avian virulence predictor (AVP) (ironN, ompT, hlyF, iss e iutA); research of diarreiogenic E. coli (ST, LT, ial, eagg, eae, stx1 and stx2) markers; and phylogenetic classification into groups A, B1, B2 and D. Serotyping of isolates with serotype O157 H7 was carried out. Antimicrobial sensitivity was conducted according to international standards. It was researched the following genes in resistant strains: blaTEM, blaSHV, blaOXA, CMY, CTX-M, tetA, tet B, aadA, aphA, strAB, sul1, sul2, sul3, qnrA, qnrD, qnrB, qnrS, oqxAB, aac, qnrC and qepA and markers to the plasmids Inc group K/B, W, FIIA, FIA, FIB, Y, I1, F, X, HI1, N, H12 and L/M. There was no Salmonella spp. in animals studied. Twenty-seven E. coli strains were isolated from nine out of the 94 evaluated animals (10%). Combinations of 4 AVP genes (ironN, ompT, iss e hlyF) were detected in two strains (2/27-7%); and iss (1/27-4%) was detected once. From the 27 isolations, six (22%) were classified as phylogenetic group A; 18 (67%) as B1, three (11%) as B2 and none as D. There was no agglutination with O157 H7 antiserum. The highest resistance rates were observed to amoxicillin (22/27-82%), ampicillin (21/27-79%), streptomycin (18/27-67%) and tetracycline (11/27-40.7%). Sixteen isolates (59%) of seven different animals showed multidrug resistance. Resistance genes strAB, blaTEM, tetA, tetB, aadA, aphaA, sul1, sul2 and sul3 were detected. Resistance plasmids were verified in 20 strains, IncFIB (18/27), IncFIA (3/27), IncY (2/27) and IncI1 (4/27). Despite the low percentage of strains with zoonotic potential originating in healthy captive cockatiels, antimicrobial resistance and multidrug resistance were significant features. The role of pets in the perpetuation and dissemination of resistant bacteria is relevant in Public Health. Our findings emphasize the importance of proper sanitary habits between owners and their pet birds, as well as a restrict regulation over the use of antimicrobials in animals.

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