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EPIDEMIOLOGIA MOLECULAR DE CRYPTOSPORIDIUM SPP EM FRANGOS (GALLUS GALLUS DOMESTICUS LINNAEUS, 1758) CRIADOS SOB O SISTEMA COLONIAL/CAIPIRA

MARIA PAULA DE CARVALHO EWALD.
Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-204712

Resumo

O Cryptosporidium é um protozoário que infecta os seres humanos e uma grande variedade de animais vertebrados, e pode ser adquirido através de várias vias: contato pessoa-a-pessoa, contato com animais de companhia e animais de produção, ingestão de alimentos contaminados, água de consumo e água de recreio. Em aves, este parasita já foi diagnosticado em diferentes espécies, incluindo frangos. Dentre as espécies encontradas em aves podemos citar o Cryptosporidium baileyi, C. meleagridis e C. galli, além de 11 genótipos. O objetivo deste estudo foi determinar a prevalência de espécies e genótipos de Cryptosporidium em frangos criados em sistema Colonial/caipira. 351 amostras de fezes foram coletadas em 20 propriedades. As amostras foram obtidas a partir do intestino grosso de frangos abatidos para consumo, e armazenadas congeladas até a extração do DNA. Análises moleculares foram realizadas utilizando nested-PCR para a amplificação de fragmentos da subunidade 18S do rRNA. O sequenciamento foi realizado para determinar as espécies. As fitas reverse e forward foram sequenciadas. As sequências foram comparadas com as sequências padrão de Cryptosporidium depositados no Genbank, utilizando o sistema BLAST e alinhadas manualmente pelo programa BioEdit. Um questionário epidemiológico foi aplicado em todas as propriedades para determinar os fatores associados à infecção por Cryptosporidium. Observou-se a amplificação de fragmentos de DNA de Cryptosporidium em 25,6% (90/351) das amostras. O sequenciamento de fragmentos amplificados permitiu a identificação de duas espécies que infectam aves: C. meleagridis em 60 (67,7%), uma espécie zoonótica, e C. baileyi em 15 (16,6%) amostras. Além disso, foram identificadas duas espécies que infectam mamíferos: o C. parvum em 3 (3,3%) e C. bovis em 3 (3,3%) amostras. A identificação de C. bovis em aves é inédita. No questionário epidemiológico, a liberação de pintainhos com mais de 30 dias apresentou diferenças estatisticamente significativas como fator de risco, aumentando as chances de infecção animal.
Cryptosporidium are protozoans that infect humans and a wide variety of vertebrate animals, and can be acquired through several routes: person-to-person contact, contact with companion animals and livestock, ingestion of contaminated food, drinking water and recreational water. In birds, the infection has been diagnosed in different species, including chicken. Among the species found in birds we can mention the Cryptosporidium baileyi, C. meleagridis and C. galli, and 11 genotypes. The aim of this study was to determine the prevalence of Cryptosporidium species and genotypes in chickens raised under free-range system in Brazil. A total of 351 fecal samples were collected from 20 properties. The fecal samples were obtained from the large intestine of slaughtered chicken, and stored at freezer temperature until DNA extraction. Molecular analyses were performed using nested-PCR for amplification of fragments of the 18S subunit of rRNA gene. Sequencing was performed to determine the species in both direction. Nucleotide sequences were compared to standard sequences of Cryptosporidium deposited in Genbank using BLAST system and manual alignment by BioEdit program. An epidemiological survey was applied to all properties to determine the factors associated with Cryptosporidium infection. It was observed amplification for Cryptosporidium DNA fragments in 90 (25.6%) samples. Sequencing of amplified fragments allowed the identification of two species that infect birds: C. meleagridis in 61 (67.7%), an zoonotic specie, and C. baileyi, in 15 (16.6%) samples. Besides, were identified two species that infect mammal: C. parvum in 3 (3.3%) and C. bovis in 3 (3.3%) samples. Its the first.identification of C. bovis in birds. At the epidemiological survey, the release of chicks over 30 days showed statistically significant differences as a risk factor, increasing the chances of animal infection.
Biblioteca responsável: BR68.1