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Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-204766

Resumo

Dados documentais científicos disponibilizados nas bases de dados tanto brasileira quanto mundial sobre as tartarugas representam valiosas contribuições a novos estudos sobre os répteis. Entretanto, as pesquisas sobre quelônios ainda necessitam de novas informações de sustentação científica em aspectos referentes à própria biologia que levem a tomadas de ações voltadas para a conservação das espécies. Diante disso, o capítulo I tem como objetivo fazer o delineamento do estado da arte para a espécie K. scorpioides, de forma a contribuir com informações científicas não somente para esta espécie, mas aos quelônios de forma em geral. O capítulo II visa descrever a morfologia do desenvolvimento do K. scorpioides em diferentes fases, tendo como base a descrição fenotípica e o capítulo III, validar a utilização de primers heterólogos descritos para Trachemys scripta, bem como a expressão do gene PP1 em K. scorpioides identificando assim um gene de referência para estudos no gênero Kinosternon. Tendo como base a descrição fenotípica, utilizou-se 169 ovos incubados em chocadeiras ajustadas a 26° e 30°C onde foram retirados três exemplares em intervalos regulares de 1 semana até a 25ª semana. Já na parte molecular, utilizou-se 27 amostras de cDNA e DNA total de embriões/fetos de K. scorpioides em diferentes estágios embrionários para validação do gene de interesse. Diante dos resultados, a eclosão do ovo se deu em 25 semanas e descrevemos fenotipicamente 54 amostras, a partir dos quais reconhecemos 25 estágios e descrevemos 8 destes. Os elementos morfológicos encontrados se assemelham aos das demais espécies de tartarugas mostrando-se os embriões de fêmeas mais pesados que os de macho ao longo do desenvolvimento. Já a amplificação por PCR convencional da PP1 mostrou resultados positivos em todos os indivíduos amostrados, tanto nas reações realizadas a partir dos cDNAs obtidos, quanto nas amostras de DNA total dos indivíduos adultos e a uniformidade da expressão do gene em diferentes fases foi comprovada a partir da análise da concentração de DNA amplificado. Dessa forma, tanto a amplificação cruzada do primer utilizado, quanto a efetividade de PP1 como um gene de referência foram validados em K. scorpioides, fornecendo uma ferramenta importante para os estudos de desenvolvimento embrionário e mecanismos genéticos envolvidos na Determinação Sexual Dependente da Temperatura/TSD.

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Scientific documentary data available in the databases both Brazilian and world about turtles represent valuable contributions to new studies on reptiles. However, research on turtles still need further support scientific information on issues relating to own biology that lead to taken actions aimed at the conservation of species. Thus, the chapter I aims to make the design of the state of the art for the species K. scorpioides in order to contribute to scientific information not only for this species, but the general shape of turtles. Chapter II aims to describe the morphology of the developing K. scorpioides in different phases based on the phenotypic description and Chapter III, validate the use of heterologous primers described for Trachemys scripta and the expression of the gene in K. PP1 scorpioides thus identifying a reference gene for studies on gender Kinosternon. Based on the phenotypic description, it used 169 eggs hatched in incubators set at 26 ° to 30 ° C where three copies were taken at regular intervals of 1 week until 25th week. In the molecular part, was used for cDNA and 27 samples of total DNA from embryos / fetuses K. scorpioides at different embryonic stages for validation of the gene of interest. Given the results, hatching egg occurred in 25 weeks and described phenotypically 54 samples, from which recognize 25 stages and 8 describe these. The morphological elements were similar to those of the other species of turtles showing up embryos of heavier females the male throughout the development. Since the conventional PCR amplification PP1 showed positive results in all individuals sampled in both the reactions performed from the cDNAs, the total DNA in samples of adult individuals and uniformity of gene expression in different stages was confirmed from analyzing the amplified DNA concentration. Thus, both the cross-amplification primer used, the effectiveness of PP1 as a reference gene in K. scorpioides been validated, providing an important tool for studies of embryonic development and genetic mechanisms involved in sex determination Temperature Dependent / TDS.

Biblioteca responsável: BR68.1