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Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-208069

Resumo

As infecções intramamárias podem ser causadas por um grande número de agentes etiológicos e cursar com alterações no parênquima da glândula mamária, na composição no leite e no volume de leite produzido. Considerando o exposto, objetivou-se com o presente estudo avaliar o perfil eletroforético de proteínas de amostras de leite de vacas por meio da análise de eletroforese microfluídica lab-on-a-chip e suas alterações em relação às amostras de leite com diferentes CCS e à presença de microrganismos patogênicos. Foram coletadas 101 amostras de leite de vacas provenientes de duas propriedades leiteiras localizadas no estado de Goiás. Foram realizadas análises microbiológicas, contagem de células somáticas, composição centesimal e eletroforese microfluídica lab on a chip. Para o teste de correlação entre o perfil de proteínas e a CCS as amostras foram estratificadas em cinco grupos de Escores de Células Somáticas. Os dados foram analisados utilizando estatística descritiva por meio do teste de análise de variância e representações gráficas. Verificou-se um aumento significativo no valor do componente proteína em relação aos ECS 1 e 3, 1 e 4 e 1 e 5. Também foi possível observar diferença estatística nos resultados do componente Lactose quando se comparou os ECS 1 e 3 e 3 e 4. Na avaliação descritiva da variável Concentração das proteínas do leite foi possível observar diferenças nos valores das concentrações em função do ECS. Observou-se também diferença estatística para os resultados obtidos para as proteínas - LA, quando comparados os ECS 1,2 e 3 e o ECS 5; para a IgG, as amostras de ECS 4 e 5 apresentaram concentrações diferentes das amostras dos ECS 1,2 e 3; e a proteína LF, apresentou resultados diferentes entre as amostras de ECS 1 e 5. Os microrganismos isolados e identificados que apresentaram crescimento nas amostras coletadas foram bactérias coagula negativo do gênero Staphylococcus, Arcanobacterium pyogenes, Streptococcus spp., Staphylococcus aureus, Bacillus spp. e leveduras. Não há evidência estatística de que a média da concentração das proteínas presentes nas amostras de leite de vacas seja diferente entre nenhum grupo de amostras com diferentes microrganismos avaliados. Na comparação entre as concentrações de cada proteína expressa em cada grupo de amostras, verificou-se diferença estatística na concentração da proteína -lactalbumina entre as amostras do grupo de leveduras e amostras sem crescimento bacteriano. Concluiu-se que proteínas de alta abundância do soro de leite tem sua concentração diminuída em função da severidade da mastite; proteínas de defesa, como Lactoferrina, Lactoperoxidase e IgG e IgM têm aumento em suas concentrações quando se comparam amostras de leite de vacas com mastite subclínica e amostras de leite de vacas sadias; as proteínas Lactoferrina e IgG constituem alvos em potencial para identificar vacas com mastite subclínica a partir de amostras de leite, podendo ser consideradas biomarcadores. Concluiu-se ainda que infecções intramamárias causadas pelos microrganismos isolados e identificados no presente estudo não alteram a concentração das proteínas no soro de leite de vacas em lactação; as amostras de leite com altas CCS podem apresentar resultado negativo para cultura microbiológica; os SCN apresentaram maior frequência de isolamento em amostras de leite de vacas em lactação, revelando características de oportunistas e saprófitas; e a infecção da glândula mamária causada por leveduras provoca aumento significativo da proteína -lactoalbumina.

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Intramammary infections can be triggered by a large number of etiologic agents and may lead to changes in the mammary gland parenchyma, composition of milk and reduction of milk production. The aim of the present study was to evaluate the electrophoretic profile of cow milk proteins by the analysis of microfluidic electrophoresis lab-on-a-chip and its alterations in relation to milk samples with different SCC and the presence of pathogenic microorganisms. A total of 101 milk samples were collected from cows from two dairy farms located in the state of Goiás. Microbiological analyzes, somatic cell counts, centesimal composition and microfluidic electrophoresis were performed. For the correlation test between the protein profile and the SCC the samples were stratified into five groups of somatic cells scores. The data were analyzed using descriptive statistics through the analysis of variance and graphical representations. There was a significant increase in the value of the protein component in relation to the SCS 1 and 3, 1 and 4 and 1 and 5. It was also possible to observe statistical difference in the results of the Lactose component when comparing SCS 1 and 3 and SCS 3 and 4. The evaluation of the variable "Concentration" of milk proteins was possible to observe differences in the concentration values of SCS. Statistical difference was also observed for concentration of -LA when compared SCS 1,2 and 3 to SCS 5; For IgG, SCS samples 4 and 5 showed different concentrations of SCS samples 1,2 and 3; the LF protein showed different results among samples from the SCS 1 and 5. The microorganisms identified were Staphylococcus spp. Negative Coagulase, Arcanobacterium pyogenes, Streptococcus spp., Staphylococcus aureus, Bacillus spp. and yeast. There is no statistical evidence that the mean concentration of the proteins present in milk samples is different between any groups of samples with different microorganisms evaluated. In the comparison between the concentrations of each protein expressed in each group of samples, a statistical difference was observed in the concentration of -lactalbumin between samples from the yeast group and samples without bacterial growth. It was concluded that whey proteins of high abundance have their concentration decreased with the occurrence of mastitis; Defense proteins such as Lactoferrin, Lactoperoxidase, IgG and IgM have their concentration increased when comparing milk samples from cows with subclinical mastitis and milk samples from healthy cows; Lactoferrin and IgG proteins are potential targets for identifying cows with subclinical mastitis in milk samples and may be considered biomarkers. It was also concluded that intramammary infections caused by the microorganisms identified in the present study do not alter the concentration of whey proteins of lactating cows; Milk samples with high SCC may present negative results for microbiological culture; The SCN showed higher frequency of isolation in milk samples from lactating cows, revealing opportunistic and saprophytic characteristics; And infection of the mammary gland caused by yeast causes a significant increase of the -lactalbumin protein.

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