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AVALIAÇÃO SOROLÓGICA E MOLECULAR DA INFECÇÃO POR BVDV EM REBANHOS BUBALINOS LEITEIROS DA REGIÃO NOROESTE DO ESTADO DO MARANHÃO, BRASIL

SONALIA FERREIRA DA PAIXAO.
Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-208199

Resumo

Evidências sorológicas demonstram que a infecção pelo vírus da diarreia viral bovina (BVDV) é generalizada em rebanhos bubalinos leiteiros e de corte em todas as regiões geográficas do Brasil. No entanto, poucos estudos descrevem o perfil de infecção por BVDV em rebanhos bubalinos, assim como a caracterização molecular de cepas de BVDV que infectam búfalos. Os objetivos deste estudo foram avaliar o perfil de infecção por BVDV em rebanhos bubalinos leiteiros e definir o subgenotipo da cepa de BVDV infectante. O estudo foi conduzido em rebanhos bubalinos da região noroeste do Maranhão, nordeste do Brasil. As amostras de sangue (n = 304) foram obtidas de búfalos assintomáticos com 6 a 12 meses de idade provenientes de quatro rebanhos leiteiros não vacinados contra BVDV e identificados aleatoriamente como rebanho A (n = 106), B (n = 62), C (n = 119) e D (n = 18). A detecção e titulação de anticorpos neutralizantes anti-BVDV foram realizadas em amostras de soro por meio do teste de vírus neutralização desenvolvido de acordo com o Manual de Testes de Diagnóstico e Vacinas para Animais Terrestres escrito pela Organização Mundial de Saúde Animal (OIE). A análise dos resultados permitiu definir duas situações epidemiológicas distintas. A primeira é representada pelos rebanhos A e C, em que as altas taxas de animais soropositivos (A = 39,6% (42/106); C = 51,3% (61/119)), a alta variabilidade e os altos títulos de anticorpos anti-BVDV sugerem infecção ativa. Outra situação é representada pelos rebanhos B e D com baixas taxas de animais soropositivos (B = 8,1% (5/62); D = 11,1% (2/18)), com pequena variação e baixos títulos de anticorpos neutralizantes anti-BVDV sugerindo uma condição epidemiológica de estabilidade da infecção. Os rebanhos com evidência sorológica de infecção ativa pelo BVDV foram selecionados para identificar animais virêmicos. A presença do RNA de BVDV foi avaliada por RT-PCR em 44 amostras de soro de búfalos jovens assintomáticos sendo 31 amostras provenientes do rebanho A e 13 amostras do rebanho B. Produtos com 288 pb da região 5'UTR do genoma do BVDV foram obtidos em sete (15,9%) amostras de soro, sendo que cinco amostras foram provenientes do rebanho A e duas amostras do rebanho C. O melhor produto de RT-PCR de cada rebanho foi selecionado para o sequenciamento. A análise filogenética demonstrou que as cepas de BVDV descritas nesse estudo agrupavam-se com cepas de BVDV do subgenotipo 1b. Embora que, estudos sorológicos anteriores tenham demonstrado a presença de infecção pelo BVDV em rebanhos bubalinos, este estudo identificou pela primeira vez a infecção ativa (viremia) pelo BVDV subgenotipo 1b em dois rebanhos bubalinos leiteiros do Brasil. Esses resultados destacam a importância da avaliação e monitoramento da infecção por BVDV também em rebanhos bubalinos.
Serological evidence shows that infection by bovine viral diarrhea virus (BVDV) is widespread in dairy and beef buffalo herds from all Brazilian geographical regions. However, few studies describe the BVDV infection profile in water buffalos herds as the molecular characterization of BVDV strains that infect water buffalo. The aims of this study were to evaluate the BVDV infection profile in dairy water buffalo herds and characterize the subgenotype of the infecting BVDV strains. The study was conducted in dairy water buffalo herds from the Northwest region of Maranhão state, Northeastern Brazil. Blood samples (n=305) were obtained from asymptomatic young water buffalos (6 to 12 month-old) from four dairy herds unvaccinated against BVDV and randomly identified as herd A (n=106), B (n=62), C (n=119), and D (n=18). The detection and titration of anti-BVDV neutralizing antibodies were performed in serum samples by virus neutralization test according with Manual of Diagnostic Tests and Vaccines described by the World Organization for Animal Health (OIE). Analysis of the results allowed to define two distinct epidemiological situations. The first is represented by the herds A and C where the high rates of seropositive in young animals (A= 39.6% (42/106); C= 51.3% (61/119)), the high variability, and the high titers of anti-BVDV antibodies suggesting active infection. Another situation is represented by the herds B and D with low rates of seropositive animals (B= 8.1% (5/62); D=11.1% (2/18)), a small variation and low titers of anti-BVDV neutralizing antibodies suggesting an epidemiological condition of infection stability. The herds with serological evidence of BVDV active infection were selected to identify viremic animals. The presence of RNA of BVDV was evaluated by RT-PCR in 44 serum samples of asymptomatic young water buffalos being 31 samples from herd A and 13 samples from herd B. Products with 288 bp of BVDV 5UTR region was obtained in seven (15.9%) serum samples being that five were from herd A and two from herd C. The better quality RT-PCR product in each herd was selected for sequencing. The phylogenetic analysis demonstrated that the BVDV strains described in this study grouped with BVDV strains of subgenotype 1b. Although, previous serological studies have demonstrated the presence of BVDV infection in water buffalos herds, this study identified for the first time the active infection (viremia) by BVDV subgenotype 1b in two Brazilian dairy water buffalo herds. These results highlights for the importance of evaluation and monitoring of BVDV infection also in buffalo herds. Key words: Water buffalo. BVDV.VN test. Genotyping. 5 UTR.
Biblioteca responsável: BR68.1