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Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-208441

Resumo

A pele é a primeira barreira mecânica de proteção contra patógenos do ambiente. Na leishmaniose visceral canina (LVC), a infecção ocorre pelo rompimento da barreira da pele pelo flebotomíneo infectado que inocula o protozoário Leishmania infantum. Esses agentes infecciosos desencadeiam respostas imune e inflamatória severas no animal que podem ser avaliadas sistemicamente e no local da infecção. Na LVC, uma resposta inflamatória é desencadeada no sítio infeccioso por células sentinelas que liberam mediadores inflamatórios e citocinas e induzem ao recrutamento de células inflamatórias. Neste trabalho objetivou-se caracterizar o perfil hematológico e bioquímico e avaliar as expressões de VEGF+, COX-2+, TLR-2+ e TLR-4+ na pele de cães naturalmente infectados por L. infantum. Para tanto, cães soropositivos (n=33) foram divididos nos grupos assintomático (GA, n=10) e sintomático (GS, n=23), de acordo com a presença ou ausência de alterações dermatológicas, comparados com o grupo de animais soronegativos (GC, n=5). As principais manifestações clínicas observadas em GS foram alopecia, onicogrifose, ceratoconjuntivite e dermatites eritematosas, esfoliativas e ulcerativas. Amostras de sangue foram coletadas para avaliação dos parâmetros hematológicos e bioquímicos. Biópsias da pele foram coletadas da região escapular e da ponta de orelha, processados para histologia para avaliação do infiltrado inflamatório (ausente, leve, moderado e intenso) e imunoistoquímica com anticorpos monoclonais anti-VEGF+, anti-COX-2, anti-TLR-4 e anti-TLR-2 (ausente, leve, moderado e intenso). Os animais sintomáticos para LVC apresentaram albuminemia, leucocitose e outras alterações hematológicas compatíveis com descrições da literatura. A contagem diferencial leucocitária apontou para uma neutrofilia e linfopenia significativas do GS quando comparadas aos demais grupos (p < 0,05), estando esse resultado confirmado pela razão neutrófilo:linfócito, também significativamente aumentada. Na histologia foi evidenciado infiltrado inflamatório intenso em GS em relação ao GA e GC. As expressões de VEGF+, COX-2+ e TLR-2 estavam aumentadas na pele de animais GS (intenso) quando comparadas a GA (moderado) e GC (leve), enquanto que a marcação de TLR-4, não foi alterada entre os grupos avaliados. Estes dados indicam o envolvimento de VEGF+ e COX-2, pela ativação do TLR-2, o que pode sugerir uma relação da via de transcrição do NF-kB pelo TLR-2 e não pelo TLR-4 em resposta a infecção por L. infantum.

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The skin is a mechanical barrier in the protection against environmental pathogens. In Canine Leishmaniasis (CanL), the infection occurs through phlebotomine vectors that inoculate Leishmania infantum through the skin. These infectious agents elicit severe immune and inflammatory responses in the animal that can be assessed both systemically and at the site of infection. In response to the infection, sentinel cells triggered an inflammatory response trough the release of mediators and cytokines that induce recruitment of inflammatory cells to the local of infection. The objective of this study was to characterize the hematological biochemical profile and to evaluate the expression of VEGF+, COX-2+, TLR-2+ and TLR-4+ in the skin of dogs naturally infected by L. infantum. Therefore, seropositive dogs (n = 33) were divided into asymptomatic (AG, n = 10) and symptomatic (SG, n = 23) groups, according to the presence or absence of dermatological alterations, compared to the seronegative group (CG, n = 5). The main clinical manifestations observed in SG were alopecia/hypotrichosis, onychogryphosis, keratoconjunctivitis and erythematous, exfoliative and ulcerative dermatitis. Blood samples were collected for evaluation of hematological and biochemical parameters. Skin biopsies were collected from the scapular region and the ear tip, processed for histology to evaluate the inflammatory infiltrate (absent, mild, moderate and intense) and for immunohistochemistry to evaluate the expressions of VEGF+, COX-2, TLR-4 and TLR-2 (absent, mild, moderate and intense). The symptomatic animals for LVC presented albuminemia, leukocytosis and other hematological alterations compatible with descriptions in literature. The differential blood count shows a significant neutrophilia and lymphopenia in CG when compared to the other groups (p <0.05), and this result was confirmed by the neutrophil: lymphocyte ratio, also significantly increased. In the histological evaluation, both SG and AG presented inflammatory infiltrate. The expressions of VEGF +, COX-2 + and TLR-2 were increased at skin from dogs SG (intense) when compared to AG (moderate) and CG (mild), whereas TLR-4 was not detected between groups evaluated. These data indicate the involvement of TLR-2 in CanL and suggest the NF-kB transcription factor pathway to the VEGF + and COX-2 expressions in cutaneous immune system in response to L. infantum. TLR-4 not participate of this event in dogs naturally infected by L. infantum.

Biblioteca responsável: BR68.1