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ESTUDO DA MICROBIOTA VAGINAL E O EFEITO DO CLORIDRATO DE CEFTIOFUR EM VACAS LEITEIRAS SUBMETIDAS AO USO DE DISPOSITIVOS INTRAVAGINAIS DE PROGESTERONA

DANIEL LAZZARI QUADROS.
Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-208540

Resumo

A indução e sincronização do estro utilizando dispositivos intravaginais impregnados com progesterona são estratégias de manejo reprodutivo utilizadas em rebanhos bovinos com pretensão de diminuir o intervalo entre partos ou corrigir deficiências hormonais das vacas no pico lactacional. Entretanto, a presença dos dispositivos na mucosa vaginal podem acarretar traumas mecânicos e/ou químicos que podem predispor à proliferação microbioana e interferir negativamente na concepção. O objetivo deste experimento foi identificar quais os microrganismos que se proliferam na presença dos dispositivos intravaginais impregnados com progesterona e o efeito do cloridrato de ceftiofur sobre a microbiota vaginal. Para o experimento foram utilizadas 20 vacas em lactação que receberam protocolo hormonal para inseminação artificial em tempo fixo (IATF) utilizando dispositivo impregnado com progesterona. Os animais foram divididos em dois grupos, GI (n=10) receberam 2mg/kg de cloridrato de ceftiofur no dia da retirada do dispositivo de progesterona, o GII (n=10) receberam 25 ml de solução fisiológica (placebo) pela via intramuscular no dia da retirada do dispositivo com progesterona. Para avaliação da microbiota intravaginal foi coletado conteúdo com auxílio de suabes imediatamente antes da implantação e imediatamente depois da retirada do dispositivo. As amostras foram mantidas refrigeradas e transportadas até o Laboratório de Biotecnologia da Reprodução do Hospital Veterinário da Universidade de Passo Fundo. As análises da microbiota foram realizadas utilizando a técnica de sequenciamento parcial do gene 16S ribossomal RNA (rRNA) com a tecnologia de sequenciamento de nova geração através do equipamento MiSeq (Illumina San Diego, EUA). Após a avaliação adicional das sequencias, verificou-se que, entre os 135 diferentes gêneros de bactérias identificados na microbiota vaginal das fêmeas bovinas, o grupo bacteriano correspondente ao gênero das Marvinbryantia sp. e das Provotellaceae sp. apresentaram aumento em suas proliferações no dia 9, correspondente ao momento da retirada do dispositivo quando comparadas com o dia zero P=1,81x10-3 e 2,23x10-3 respectivamente. As bactérias pertencentes ao gênero Feacalibacterium sp. e Candidatus soleaferrea também apresentaram um aumento significativo no dia da retirada do implante de progesterona (D=9) quando comparados com o dia zero (P=0,03 e 0,024 respectivamente). Estes resultados indicam que a utilização de dispositivos intravaginais com progesterona pode modular a proliferação de alguns grupos bacterianos. Porém ainda não é conhecido se o efeito é em decorrência da ação mecânica dos dispositivos ou se é uma ação direta da progesterona na proliferação bacteriana. Este foi o primeiro trabalho realizado em investigar o efeito de dispositivos intravaginais na microbiota vaginal de fêmeas bovinas utilizando o sequenciamento metagenômico da região 16S.
The induction and synchronization of estrus using progesterone-impregnated intravaginal devices are strategies of reproductive management used in bovine herds with the intention of shortening the interval between calving or correcting hormonal deficiencies of cows at the lactational peak. However, the presence of the devices in the vaginal mucosa can lead to mechanical and / or chemical traumas that may predispose microbiological proliferation and negatively interfere in conception. For the experiment, 20 lactating cows that received hormonal protocol for artificial insemination at fixed time (IATF) using progesterone impregnated devices were used. The animals were divided into two groups, GI (n = 10) received 2 mg / kg of ceftiofur hydrochloride on the day of the progesterone withdrawal, GII (n = 10) received 25 ml of physiological solution (placebo) intramuscularly on the day of withdrawal of the progesterone device. For evaluation of the intravaginal microbiota, content was collected using Swabs immediately before implantation and immediately after removal of the device. The Swabs were kept refrigerated and transported to the Reproductive Biotechnology Laboratory of the Veterinary Hospital of the University of Passo Fundo. Microorganism analyzes were performed using the 16S ribosomal RNA (Rrna) partial sequencing technique with new generation sequencing technology using the MiSeq (Illumina - San Diego, USA) equipment. The objective of this experiment was to identify which microorganisms proliferate in the presence of intravaginal devices impregnated with progesterone and the effect of ceftiofur hydrochloride on the vaginal microbiota. After the additional evaluation of the species-level sequences, it was verified that among the 135 different bacterial genera identified in the vaginal microbiota of bovine females, the bacterial group corresponding to the genus Marvinbryantia sp. and Provotellaceae sp. showed increase in their proliferations on day 9, corresponding to the moment of withdrawal of the device when purchased with zero day P = 1.81x10-3 and 2.23x10-3 respectively. Bacteria belonging to the genus Candidatus soleaferrea and Feacalibacterium sp. also showed a significant increase on the day of progesterone implant withdrawal (D = 9) when compared with day zero (P = 0.024 and 0.03, respectively). These results indicate that the use of intravaginal progesterone devices may modulate the proliferation of some bacterial groups. However, it is not yet known if the effect is due to the mechanical action of the devices or if it is a direct action of progesterone on bacterial proliferation. This was the first work to investigate the effect of intravaginal devices on the growth of the vaginal microbiota of bovine females using the 16S region metagenomic sequencing.
Biblioteca responsável: BR68.1