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Tese em Inglês | VETTESES | ID: vtt-213147

Resumo

A tilápia do Nilo (Oreochromis niloticus L.) é a espécie de peixe mais cultivado no Brasil. A infecção causada pela bactéria Streptococcus agalactiae é uma das principais responsáveis por perdas na produção da espécie no país. Surtos de septicemia e meningoencefalite por S. agalactiae são comumente verificados em tilápias na fase de engorda (adultas; > 50 g), principalmente no Verão. Os programas de vacinação tem sido o único método eficiente de prevenção da doença nas fazendas nacionais. A primeira vacina contra a doença para tilápia do Nilo no país foi licenciada em 2011 e começou a ser amplamente empregada a partir de 2017. Apesar de ser operacionalmente laboriosa a vacina tem demonstrado bons resultados de proteção para tilápias cultivadas. A principal limitação da vacinação nos cultivos é o tamanho mínimo do peixe a ser vacinado (25g), pois a vacina é administrada por injeção intraperitoneal (i.p). Coincidentemente a implementação dos programas de vacinação, surtos de meningoencefalite acometendo alevinos e juvenis de tilápias do Nilo passaram a ser verificados de forma crescente no país. Os objetivos dessa dissertação foram descrever os casos de meningoencefalite em alevinos e juvenis em fazendas de tilápia no Brasil, bem como, realizar caracterização genética dos isolados e o desenvolvimento de vacina para imunoprofilaxia em formas jovens. Cinco de surtos de mortalidade em lotes de alevinos e juvenis foram acompanhados em fazendas localizadas nas regiões Nordeste e Sudeste. 50 peixes doentes (1 a 29 g) foram submetidos a exame bacteriológico. A diversidade genética dos isolados S.agalactiae foi avaliada por REP-PCR e detecção de 12 genes de virulência realizada para avalição do perfil de virulência das amostras. Foi desenvolvida uma vacina contendo S. agalactiae e adjuvante aquoso para administração por imersão. Células completas de S. agalactiae inativadas (bacterina) foram homogeneizadas com adjuvante aquoso MontanideTM IMS1312VG na proporção de 1:1. A eficiência da vacina foi avaliada pelo desafio dos animais vacinados com a amostra patogênica SA95-10. Foram isoladas 50 amostras de S. agalactiae sorotipo Ib. A análise de REP-PCR revelou que os 13 isolados selecionados de S. agalactiae foram clonalmente relacionados entre si e com amostra proveniente de tilápia adulta doente. Os isolados apresentaram diferentes padrões de genes de virulência, similar ao verificado para amostras associadas a casos clínicos em peixes adultos no país. A vacina contendo bacterina de S.agalactiae e MontanideTMIMS1312 VG administrada por imersão, apresentou porcentagem relativa de sobrevivência (PRS) de 40%. A vacina por imersão conferiu baixa proteção aos alevinos de tilápia do Nilo desafiados com S. agalactiae. Esse é o primeiro relato de surtos múltiplos causados por S. agalactiae em tilápias jovens. Os isolados de formas jovens apresentam perfil genético e de virulência similares ao de peixes adultos, sugerindo que os programas de vacinação são o fator de risco para os surtos em alevinos e juvenis. A vacina por imersão demonstrou baixa eficiência. Novas formulações e futuros testes de campo devem ser realizados para verificação da eficiência dessa no controle da estreptococose em formas jovens de tilápia do Nilo.

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Nile tilapia (Oreochromis niloticus L.) is the most cultivated fish species in Brazil. The infection caused by the bacterium Streptococcus agalactiae is one of the main cause of for losses in this specie production in the country. Outbreaks of septicemia and meningoencephalitis by S.agalactiae are commonly characterized in adult tilapia, especially during the summer. Vaccination programs have been the main method of disease prevention on farms. The first Nile tilapia vaccine against S. agalactiae in the country was licensed in 2011 and began to be widely used in 2017. Although operationally laborious the vaccine has been showing positive results in the farms. The main limitation of vaccination on farms is the minimum size of fish to be vaccinated (25g), since it is administered by intraperitoneal (i.p) injection. Coincidentally with the implementation of vaccination programs, outbreaks of meningoencephalitis affecting Nile tilapia fingerlings and juveniles started to be verified in the country. The aims of this dissertation were to describe cases of meningoencephalitis in fingerlings and juveniles of tilapia cultivated in Brazil, as well as, to carry out genetic characterization of the isolates and the development of vaccine for immunoprophylaxis of young fish. Five outbreaks were accompanied in tilapia fingerlings and juveniles herds raised in farms located at Northeast and Southeast regions. 50 diseased young fish (1 to 29 g) were submitted to bacteriology. The genetic diversity of isolates was evaluated by REP-PCR and detection of 12 virulence genes carried out by PCR. A vaccine containing S.agalactiae and aqueous adjuvant for immersion administration has been developed. Whole cells of S.agalactiae inactivated (bacterin) were homogenized with Montanide IMS1312VG aqueous adjuvant in the ratio of 1:1. Vaccine efficiency was assessed by the challenge of the animals vaccinated with the pathogenic sample SA95-10. Fifty strains of S. agalactiae serotype Ib were isolated. REP-PCR analysis revealed that the 13 isolates selected from S.agalactiae were clonally related to each other and with S. agalactiae isolate from diseased adult tilapia. The isolates presented different patterns of virulence genes, similar to those found in samples associated with cases in adult fish. Vaccine containing bacterin of S.agalactiae and MontanideTM IMS1312 VG showed a relative survival percentage (RPS) of 40%. This is the first report of multiple outbreaks caused by S. agalactiae in farm raised Nile tilapia fingerlings and juveniles. The similar genetic patterns and virulence profile of isolates with typical strains of adult tilapia suggest that vaccination programs are the main risk factor to young fish. Immersion vaccine resulted in low levels of protection. New preparations and future field trials should be carried out to assess the vaccine efficiency against estreptotococosis in young tilapia

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