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Efeitos da vitamina B12 e ômega 3 na temperatura do escroto, concentração de testosterona, qualidade espermática e histologia testicular de ratos Wistar submetidos à dose tóxica de ciclofosfamida

GUILHERME PEPINO BASTOS.
Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-213285

Resumo

O dano aos túbulos seminíferos e aos espermatozoides causados pelo fármaco ciclofosfamida é um dos fatores limitantes para seu uso, podendo levar a infertilidade, devido a toxicidade marcante nos órgãos associada ao estresse oxidativo, sendo necessário o uso de substâncias antioxidantes como é o caso do ômega 3 e da vitamina B12. Objetivou-se estudar a influência da vitamina B12 e ômega 3, na histologia e funções dos testículos de ratos tratados com ciclofosfamida. Foram utilizados 96 ratos Wistar, divididos em oito grupos; controle, ômega 3, ciclofosfamida, ômega 3 e ciclofosfamida, vitamina B12, ômega 3 e vitamina B12, vitamina B12 e ciclofosfamida, ômega 3 com vitamina B12 e ciclofosfamida; recebendo alimentação padrão, e os respectivos tratamentos e suplementações durante 30, 45 e 60 dias, a dose tóxica de ciclofosfamida foi aplicada no 59º dia. Foram realizadas análises histológica e morfométrica, dos túbulos seminíferos, determinando-se o diâmetro, diâmetro da luz, altura do epitélio, motilidade e morfologia espermática, com leituras em microscópio óptico considerando o número de espermatozoides normais, com patologia de cabeça e cauda, com gota distal e proximal e o número total de defeitos, concentração de testosterona, e imagens termográficas do escroto para mensurar a temperatura. Os resultados foram submetidos a análise de variância, seguido de teste de Tukey, com significância de 5% (P0,05). Foram obtidos valores de diferenças significativas para diâmetro da luz do túbulo seminífero e ciclofosfamida (valores médios de 155,40 ± 19,45 µm no grupo controle sem a ciclofosfamida, 112,00 ± 24,29 µm no grupo controle com a ciclofosfamida); diâmetro da luz do túbulo seminífero e suplementações (valores médios de 136,90 ± 11,96 µm no grupo vitamina B12 sem ciclofosfamida, 104,80 ± 8,10 µm no grupo ômega 3 sem ciclofosfamida, 119,00 ± 7,17 µm no grupo vitamina B12 e ômega 3 sem ciclofosfamida); diâmetro da luz do túbulo seminífero e suplementações com ciclofosfamida (valores médios de 116,30 ± 20,48 µm no grupo vitamina B12 com ciclofosfamida, 119,80 ± 11,69 µm no grupo ômega 3 com ciclofosfamida, 119,90 ± 9,58 µm no grupo vitamina B12 e ômega 3 com ciclofosfamida); altura do epitélio do túbulo seminífero e suplementações (valores médios de 77,08 ± 3,43 µm no grupo vitamina B12 sem ciclofosfamida, 81,8 ± 14,01 µm no grupo ômega 3 sem ciclofosfamida, 82,15 ± 4,58 µm no grupo vitamina B12 e ômega 3 sem ciclofosfamida); altura do epitélio do túbulo seminífero e suplementações com ciclofosfamida (valores médios de 75,58 ± 6,60 µm no grupo vitamina B12 com ciclofosfamida, 70,14 ± 4,15 µm no grupo ômega 3 com ciclofosfamida, 73,72 ± 4,92 µm no grupo vitamina B12 e ômega 3 com ciclofosfamida); motilidade espermática e ciclofosfamida; espermatozoides com gota distal e suplementação; e espermatozoides com gota distal e suplementação com ciclofosfamida. A suplementação realizada com ômega 3 demonstra eficiência para diminuir o número de espermatozoides com gota distal (12,50 ± 11,30%) dos grupos tratados com a ciclofosfamida. E a vitamina B12 tem melhor influência para baixar a incidência de espermatozoides com gota proximal (0,25 ± 0,46%) e com patologia de cauda (11,40 ± 4,70%), demonstrou ser a melhor para os níveis de testosterona no sangue dos ratos, quando comparados com as demais suplementações, se destacou na manutenção da altura do epitélio do túbulo seminífero (77,08 ± 3,43 µm, ciclofosfamida ausente, e 75,58 ± 6,60 µm, ciclofosfamida presente), a temperatura do escroto no 60º dia. A vitamina B12 e ômega 3 em conjunto geraram um efeito positivo para o diâmetro da luz do túbulo seminífero (119,00 ± 7,17 µm, ciclofosfamida ausente, e 119,90 ± 9,58 µm, ciclofosfamida presente), e para a temperatura do escroto. Pode-se concluir que a suplementação realizada com ômega 3 demonstra eficiência para diminuir o número de espermatozoides com gota distal dos grupos tratados com a ciclofosfamida. Observa-se que a vitamina B12 influenciou de forma benéfica na qualidade do sêmen por reduzir a porcentagem de gota citoplasmática proximal. Observou-se também que a presente suplementação com vitamina B12 e ômega 3, não influenciou para melhoria da qualidade do sêmen com relação a patologia de cauda, patologia de cabeça e concentração sérica de testosterona nos animais tratados ou não com ciclofosfamida. Para as temperaturas do escroto houve influência negativa da ciclofosfamida associada ao ômega 3 na temperatura do escroto aos 60 dias do experimento. O diâmetro do túbulo seminífero sofreu influência positiva da associação do ômega 3 com a vitamina B12 aos 45 dias do experimento em relação a esse mesmo momento para os demais grupos experimentais.
The damage to the seminiferous tubules and to the spermatozoa caused by the drug cyclophosphamide is one of the limiting factors for its use, which can lead to infertility due to marked toxicity in the organs associated with oxidative stress, being necessary the use of antioxidant substances as is the case of the omega 3 and vitamin B12. The aim of this study was to study the influence of vitamin B12 and omega 3 on the histology and functions of the testes of rats treated with cyclophosphamide. Wistar rats were divided into eight groups; control, omega 3, cyclophosphamide, omega 3 and cyclophosphamide, vitamin B12, omega 3 and vitamin B12, vitamin B12 and cyclophosphamide, omega 3 with vitamin B12 and cyclophosphamide; receiving standard feeding, and the respective treatments and supplements during 30, 45 and 60 days, the toxic dose of cyclophosphamide was applied on the 59th day. Histological and morphometric analyzes of the seminiferous tubules were performed, determining the diameter, light diameter, height of the epithelium, motility and sperm morphology, with optical microscope readings considering the number of normal spermatozoa with head and tail pathology, with distal and proximal drop and the total number of defects, testosterone concentration, and thermographic images of the scrotum to measure the temperature. The results were submitted to analysis of variance, followed by Tukey test, with significance of 5% (P0.05). Significant differences were obtained for the diameter of the seminiferous tubule and cyclophosphamide (mean values of 155.40 ± 19.45 m in the control group without cyclophosphamide, 112.00 ± 24.29 m in the control group with cyclophosphamide); seminiferous tubule light and supplements (mean values of 136.90 ± 11.96 m in the vitamin B12 group without cyclophosphamide, 104.80 ± 8.10 m in the omega 3 group without cyclophosphamide, 119.00 ± 7.17 m in the vitamin B12 and omega 3 group without cyclophosphamide); diameter of seminiferous tubule lumen and supplementation with cyclophosphamide (mean values of 116.30 ± 20.48 m in the vitamin B12 group with cyclophosphamide, 119.80 ± 11.69 m in the omega 3 group with cyclophosphamide, 119.90 ± 9, 58 m in the vitamin B12 and omega 3 group with cyclophosphamide); (mean values of 77.08 ± 3.43 m in the vitamin B12 group without cyclophosphamide, 81.8 ± 14.01 m in the omega-3 group without cyclophosphamide, 82.15 ± 4.58 m in the vitamin B12 and omega 3 group without cyclophosphamide); height of seminiferous tubule epithelium and supplementation with cyclophosphamide (mean values of 75.58 ± 6.60 m in the vitamin B12 group with cyclophosphamide, 70.14 ± 4.15 m in the omega 3 group with cyclophosphamide, 73.72 ± 4, 92 m in the vitamin B12 and omega 3 group with cyclophosphamide); sperm motility and cyclophosphamide; spermatozoa with distal gout and supplementation; and spermatozoa with distal gout and cyclophosphamide supplementation. Omega 3 supplementation demonstrates efficiency in decreasing the number of spermatozoa with distal gout (12.50 ± 11.30%) in the groups treated with cyclophosphamide. And vitamin B12 has a better influence in lowering the incidence of spermatozoa with proximal gout (0.25 ± 0.46%) and with tail pathology (11.40 ± 4.70%), has been shown to be the best for testosterone in the rats compared to the other supplements was observed in maintaining the height of the seminiferous tubule epithelium (77.08 ± 3.43 m, absent cyclophosphamide and 75.58 ± 6.60 m, cyclophosphamide present) , the temperature of the scrotum on the 60th day. Vitamin B12 and omega 3 together generated a positive effect on the diameter of the lumen of the seminiferous tubule (119.00 ± 7.17 m, absent cyclophosphamide, and 119.90 ± 9.58 m, cyclophosphamide present), and for the temperature of the scrotum. It can be concluded that the supplementation performed with omega 3 demonstrates efficiency to decrease the number of spermatozoa with distal gout in the groups treated with cyclophosphamide. It is observed that vitamin B12 had a beneficial influence on semen quality by reducing the percentage of proximal cytoplasmic droplet. It was also observed that the present supplementation with vitamin B12 and omega 3 did not influence the improvement of semen quality in relation to tail pathology, head pathology and serum testosterone concentration in animals treated with cyclophosphamide or not. For the scrotal temperatures, there was a negative influence of omega-3-associated cyclophosphamide at the temperature of the scrotum at 60 days of the experiment. The diameter of the seminiferous tubule was positively influenced by the association of omega 3 with vitamin B12 at 45 days of the experiment in relation to this same moment for the other experimental groups.
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