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Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-213530

Resumo

O veado-catingueiro (Mazama gouazoubira) é uma espécie de cervídeo que apresenta maior distribuição nos biomas locais, estando presente em diversos ambientes. Porém, seu habitat vem sendo reduzido devido sobretudo às ações humanas. Esta situação poderá levar a uma redução importante da população desses animais. Sabendo-se da importância do conhecimento sobre fenômenos reprodutivos em programas de preservação, este trabalho teve por objetivo realizar um estudo do proteoma do fluido folicular ovariano de M. gouazoubira. Para isto, cinco fêmeas receberam um tratamento hormonal de estimulação ovariana para realização da colheita do fluido folicular. Através de videolaparoscopia foi colhido fluido de pequenos/médios (< 3,5 mm) e grandes ( 3,5 mm) folículos. As amostras foram centrifugadas e o sobrenadante foi armazenado a -80 ºC. As amostras foram submetidas primeiramente à eletroforese unidimensional seguido por digestão tríptica e espectrometria de massa em tandem. Os dados da lista de proteínas definida após a pesquisa MASCOT foram analisados por STRAP. Em relação à quantidade total de proteína, não foi observada diferença significativa (P > 0,05) entre os tamanhos dos folículos. Foram identificadas 13 proteínas principais, mas sem diferença significativa (P > 0,05) entre o tamanho dos folículos. A ontologia gênica revelou alta porcentagem de proteínas extracelulares (57%) e de ligação (47%) para componente celular e função molecular, respectivamente. Em uma segunda etapa, as amostras de fluido folicular foram submetidas à análise proteômica quantitativa realizada por cromatografia líquida multidimensional acoplada a espectrometria de massas (LC/LC-MS/MS). As buscas foram realizadas no banco de dados de proteínas (Deer_uniprot). A análise dos dados foi realizada utilizando o software Perseus. Um total de 226 proteínas foram identificadas. De acordo com os filtros do software, 25 proteínas foram consideradas relevantes. Verificou-se que a maioria das proteínas identificadas são provenientes da circulação sistêmica ou secretadas pelas células foliculares e pertencem a uma variedade de processos biológicos e funções moleculares. Em conclusão, o perfil proteômico do fluido folicular do veado-catingueiro assemelha-se ao de outras espécies de mamíferos. Além disso, não foi verificada diferença na expressão das proteínas das duas categorias foliculares estudadas. Caso tal diferença exista, deve ocorrer próximo ao momento da ovulação e, portanto, sendo de difícil detecção.

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Bronw brocket deer (Mazama gouazoubira) is a species of cervidae that presents greater distribution in the local biomes, being present in several environments. However, its habitat has been reduced mainly due to human actions. This situation could lead to a significant reduction in the population of these animals. It is important the knowledge about reproductive phenomena in preservation programs. Thus, this work aimed to perform a study of the ovarian follicular fluid proteome of M. gouazoubira. For this, five females received a hormonal treatment of ovarian stimulation to perform follicular fluid collect. Through video-laparoscopy fluid was collected from small/medium (<3.5 mm) and large ( 3.5 mm) follicles. The samples were centrifuged and the supernatant stored at -80 ° C. Samples were first submitted to one- dimensional electrophoresis followed by tryptic digestion and tandem mass spectrometry. Data from the list of proteins defined after the MASCOT survey were analyzed by STRAP. Regarding the total amount of protein, no significant difference (P > 0.05) was observed between the follicle sizes. Thirteen major proteins were identified, but no significant difference (P > 0.05) was found between the follicle sizes. Gene ontology revealed a high percentage of extracellular proteins (57%) and binding (47%) for cellular component and molecular function, respectively. In a second step, follicular fluid samples were submitted to quantitative proteomic analysis performed by multidimensional liquid chromatography coupled to mass spectrometry (LC/LC-MS/MS). The searche was performed in the protein database (Deer_uniprot). Data analysis was performed using Perseus software. A total of 226 proteins were identified. According to the software filters, 25 proteins were considered relevant. It has been found that most of the proteins identified are from the systemic circulation or secreted by follicular cells and belong to a variety of biological processes and molecular functions. In conclusion, the proteomic profile of the follicular fluid of the brown brocket deer is similar that of other species of mammals. In addition, no difference was observed in the expression of the proteins in the two follicular categories studied. If such a difference exists, it should occur close to the time of ovulation and, therefore, be difficult to detect.

Biblioteca responsável: BR68.1