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Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-215498

Resumo

O objetivo deste estudo foi verificar a disseminação ambiental de cepas de Escherichia coli em propriedades suinícolas do Oeste de Santa Catarina e utilizá-la como biomarcadora para avaliar o perfil fenotípico da susceptibilidade aos antimicrobianos, a possível presença de ESBLs (Beta-Lactamases de Espectro Estendido) e genes responsáveis pela resistência às fluoroquinolonas. Foram utilizadas para o isolamento de E. coli o total de 306 amostras, sendo 103 amostras de fezes suínas, 105 de água e 98 de solo oriundas de propriedades suinícolas dos municípios com maior produção de suínos do oeste catarinense. Os isolados de E. coli foram submetidos ao antibiograma com os antimicrobianos: amoxicilina associada ao ácido clavulânico (20/10 g), ceftiofur (30 g), enrofloxacina (5 g), gentamicina (10 g), sulfametoxazol associado ao trimetoprim (1,25/23,75 g) e colistina (10 g). Os isolados também foram submetidos ao teste de disco aproximação indicador da produção de ESBLs e pesquisa via PCR dos genes blaCTY-M2, blaSHV-1, blaTEM-1, blaCTX-M2, blaOXA-1, blaPSE-1, responsáveis pela produção de ESBLs e dos genes qnrA, qnrB e qnrS que conferem resistência às quinolonas e fluoroquinolonas. O percentual de isolamento de E. coli encontrado para as amostras de fezes, água e solo foi de 66,02%, 30,48% e 35,71% respectivamente. Os maiores percentuais de resistência obtidos foram para os antimicrobianos sulfametoxazol associado ao trimetoprim (63,70%), colistina (45,19%) e enrofloxacina (39,26%). Quanto aos níveis de multirresistência foi possível observar que 37,04% dos isolados eram resistentes a três ou mais classes de antimicrobianos. Dos perfis de multirresistencia avaliados, o perfil A (GEM-SUT-ENO-COL) foi o mais comumente encontrado (16%). Detectamos valores de IRMA (Índice de Resistência Múltipla aos Antimicrobianos) acima de 0,2 em 78% das amostras multirresistentes. Dos 135 isolados foi possível detectar cepas produtoras de ESBLs (7,41%), onde destas, 60% apresentaram positividade para o gene blaTEM-1, 50% para o gene blaCMY-M2 e 90% para os genes qnrS. Das cepas resistentes à enrofloxacina não produtoras de ESBLs apresentaram positividade para o gene qnrS e qnrB, 17,39% e 2,17%, respectivamente e o gene qnrA não foi detectado. Os resultados obtidos neste estudo, utilizando a E. coli como biomarcadora, demonstraram a contaminação de amostras ambientais por microrganismos de origem fecal, além, dos altos índices de resistência, presença de genes produtores de beta-lactamases e de resistência a fluoroquinolonas, reforçando ainda mais a necessidade do uso consciente dos antimicrobianos e também do tratamento adequado de dejeto s e efluentes.

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The objective of this study was to verify the environmental dissemination of strains of Escherichia coli in pig farms in the West of Santa Catarina state and to use it as a biomarker to evaluate the phenotypic profile of antimicrobial susceptibility, the possible presence of ESBLs (Extended Spectrum Beta-Lactamases) and genes responsible for quinolone resistance. A total of 306 samples were used for the isolation of E. coli, of which 103 samples were from swine feces, 105 of water and 98 of soil from pig farms of few municipalities with the largest production of pigs from the west of Santa Catarina. The isolates of E. coli were submitted to antimicrobial antibiotics: amoxicillin associated with clavulanic acid (20/10 g), ceftiofur (30 g), enrofloxacin (5 g), gentamicin (10 g), trimethoprim sulfamethoxazole (1.25/ 23.75 g) and colistin (10 g). The isolates were also submitted to the ESBL-test approximation and the PCR test of the genes blaCTY-M2, blaSHV-1, blaTEM-1, blaCTX-M2, blaOXA-1, blaPSE-1, responsible for the production of ESBLs and the qnrA, qnrB and qnrS genes that confer resistance to quinolones and fluoroquinolones. The percentage of E. coli isolates found for feces, water and soil samples was 66.02%, 30.48% and 35.71%, respectively. The highest percentages of resistance were obtained for antimicrobial agents sulfamethoxazole associated with trimethoprim (63.70%), colistin (45.19%) and enrofloxacin (39.26%). Regarding the multiresistance levels, it was possible to observe that 37.04% of the isolates were resistant to three or more classes of antimicrobials. Out of all multiresistant profiles evaluated, profile A (GEM-SUT-ENO-COL) was the most commonly found (16%). We detected values of IRMA (Multiple Resistance Index to Antimicrobials) above 0.2 in 78% of the multiresistant strains. Out of 135 isolates, it was possible to detect ESBLs producers (7.41%), of which 60% showed positivity for blaTEM-1 gene, 50% for the blaCMY-M2 gene and 90% for the qnrS genes. Of the non-ESBL-producing enrofloxacin-resistant strains, the qnrS and qnrB genes, 17.39% and 2.17%, respectively were positives, and the qnrA gene was not detected. The results obtained in this study, using E. coli as a biomarker, demonstrated the contamination of environmental samples by fecal microorganisms, in addition to high resistance indexes, the presence of beta-lactamase genes and resistance to fluoroquinolones, reinforcing the need for a more conscious use of the antimicrobials and also for proper treatment of animal waste.

Biblioteca responsável: BR68.1