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Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-219689

Resumo

A caprinocultura brasileira é uma atividade de grande importância na produção de proteína animal, especialmente na região Nordeste, detentora de aproximadamente 90% do efetivo caprino brasileiro. As biotécnicas reprodutivas aplicadas e direcionadas a esta espécie ainda não são amplamente empregadas nos rebanhos de produção, entretanto, vemos suas aplicações em rebanhos cuja finalidade é a venda de animais de alto valor genético. Muitas das limitações das biotécnicas reprodutivas devem-se aos custos elevados e à falta de padronização na qualidade do sêmen congelado e descongelado de caprinos. Por isso, os objetivos dos estudos foram: (I) avaliar os efeitos do antioxidante anetol no diluente de criopreservação à base de água de coco em pó (ACP-101c); (II) avaliar os efeitos do extrato proteico do plasma seminal de caprinos adicionado ao diluente de criopreservação seminal à base de água de coco em pó (ACP-101c) na congelabilidade do sêmen de caprinos. Para tanto, um estudo prévio da técnica de congelação do sêmen caprino e diferentes diluentes que apresentam baixo custo e fácil preparo foi realizado. Os resultados das avaliações de cinética espermática e viabilidade demonstraram que o diluente ACP-101c apresentou resultados iguais ou superiores quando comparado aos demais diluentes. A partir desses achados, no experimento I foram utilizados 45 ejaculados caprinos diluídos em ACP-101c (tratamento controle) formulado para criopreservação adicionado de 30, 300 ou 2000 g/ml de anetol. As amostras foram descongeladas e avaliadas quanto à morfologia, cinética (sistema CASA), integridade de membranas e concentração de espécies reativas de oxigênio (citometria de fluxo). Os resultados da adição de anetol evidenciaram aumentou das anormalidades morfológicas (P < 0,05), no entanto, sem comprometer a cinética dos espermatozoides. Apesar dos demonstrados efeitos do anetol no controle na produção de ROS, não houve melhoria da qualidade do sêmen. No experimento II foram obtidas quatro frações de proteínas do plasma seminal de cabra (FPPS-A: 186 mg; FPPS-B: 329 mg; FPPS-C: 459 mg e FPPS-D; 48 mg), dentre as quais foi selecionada a fração FPPS-B, por apresentar maiores concentrações de proteínas com peso molecular equivalente a 14 - 15 kDa e 20 - 22 kDa e menores concentrações de outras proteínas, a qual foi adicionada na diluição de sêmen caprino das raças Anglo-Nubiana e Saanen. Na raça Anglo-Nubiana a concentração de 40 g/ml de FPPS-B foi superior ao controle na morfologia espermática, na cinética, na integridade da membrana plasmática e acrossoma e na população de espermatozoides com baixo potencial de membrana mitocondrial. Na raça Saanen a concentração de 10 g/ml de FPPS-B foi superior ao controle na morfologia espermática, motilidade progressiva e integridade do acrossoma. Em conclusão, o Anetol apresentou ação antioxidante no sêmen de caprino, entretanto não apresentou efeitos significativos quanto a cinética e nas maiores concentrações causou danos a morfologia espermática. Quanto a suplementação de proteínas do plasma seminal caprino ao diluente de criopreservação seminal ACP-101c demonstra diferentes efeitos positivos sobre os parâmetros seminais por raças, sendo benéfica para a conservação de todos os parâmetros de qualidade do sêmen pós-descongelamento em todos os níveis de adição para a raça Anglo-Nubiana e melhorando a qualidade cinética espermática de bodes Saanen.

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Brazilian goat farming is an activity of great importance in the production of animal protein, especially in the northeast region, which holds approximately 90% of the Brazilian population. The reproductive biotechnics applied and directed to this species have not yet effectively reached a large-scale applicability in production herds, however, it has been routinely used in herds with the purpose of selling animals of high genetic value. Many of the limitations of reproductive biotechnics are due to the lack of high costs and the lack of standardization in the quality of frozen and thawed goat semen. Therefore, the objectives of the studies were: (1) to evaluate the effects of the antioxidant anethole in the powdered coconut water-based cryopreservation diluent (ACP-101c); (2) to evaluate the effects of goat seminal plasma protein extract added to powdered coconut water-based cryopreservation extender (ACP-101c) on the freezeability of goat semen. A previous study of the technique of freezing goat semen and different diluents that are low cost and easy to prepare was carried out. The results of the evaluations of spermatozoa kinetics and viability showed that the ACP extender presented equal and superior results compared to the other extenders. At the experiment I, 45 ejaculates were used, in which all were submitted to a control treatment of ACP-101c formulated for cryopreservation; control with 30, 300 or 2000 g / ml of anethole. The samples were thawed and evaluated for morphology, kinetics (CASA), membrane integrity and concentration of reactive oxygen species (flow cytometry). The results of the addition of anethole evidenced an increased morphological abnormalities (P < 0.05), however, it did not affect spermatozoa kinetics. In flow cytometry, it evidenced a control in the production of ROS, however not enough to improve the quality of the semen. In experiment II, four fractions of goat seminal plasma proteins were obtained (FPPS-A: 186 mg; FPPS-B: 329 mg; FPPS-C: 459 mg and FPPS-D; 48 mg). FPPS-B had the highest concentrations of proteins with molecular weight equivalent to 14 - 15 kDa and 20 - 22 kDa and the lowest concentrations of other proteins, and this fraction was used in this study of semen cryopreservation. In the Anglo-Nubian breed, the concentration of 40 g / ml of FPPS-B was superior to the control in sperm morphology, kinetics, plasma membrane integrity and acrosome, in the spermatozoa population with mitochondrial membrane potential. In the Saanen breed, the concentration of 10 g / ml of FPPS-B was superior to the control in sperm morphology, progressive motility and acrosome integrity. In conclusion, the Anethole showed antioxidant action in goat semen, however it did not show significant effects on kinetics and at higher concentrations caused damage to sperm morphology. How much, caprine seminal plasma protein supplementation in seminal cryopreservation extender ACP101c demonstrates different positive effects on seminal parameters by breed, being beneficial for the conservation of all post-thaw semen quality parameters at all addition levels for the Anglo-Nubian breed, and improving the kinetic quality of Saanen breed semen.

Biblioteca responsável: BR68.1