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Avaliação in vitro do efeito de preparações homeopáticas de Viscum album sobre células de melanoma murino

PRISCILA INHAUSER BALTUILLE.
Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-220340

Resumo

O melanoma é responsável pela maioria das mortes por câncer de pele, tendo alto potencial metastático, tratamento difícil e prognóstico reservado. O extrato de Viscum album (VA) é usado como terapia complementar no tratamento de pacientes oncológicos, com efeitos citotóxicos in vitro e in vivo sobre diversos tipos tumorais. No entanto, os efeitos e mecanismos de ação de preparações homeopáticas ultradiluídas do VA precisam ser melhor compreendidos. Objetivo: Assim, verificamos in vitro a ação de ultradiluições de VA em diferentes escalas de potência sobre células de melanoma murino. Métodos: Para a etapa I, tinturas mães de VA coletadas das árvores Abies alba e Quercus robur, tanto no verão quanto no inverno, foram ultradiluídas nas escalas decimal (D), centesimal (CH) e cinquenta-milesimal (LM) e em seguida submetidas a sucussão mecânica. Células de melanoma murino B16F10 foram tratadas com tintura mãe ou potências de VA na 3D, 12D, 30D, 6CH, 12CH, 200CH, 2LM, 3LM ou 5LM por 1, 24, 48, e 72 horas de incubação para análises de citotoxicidade pelos ensaios de brometo 3-(4,5-dimetil-tiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazólio (MTT), Cristal Violeta (atividade mitocondrial e viabilidade celular, respectivamente), avaliação de marcadores de morte por apoptose (Anexina) ou necrose (7AAD), produção de espécies reativas de oxigênio (DCFH-DA), citocinas do perfil inflamatório (IFN-, TNF, IL-10, IL-6, MCP-1, IL-12p-70), e os efeitos na morfologia celular e capacidade migratória destas células tumorais após cada tratamento. Resultado: As tinturas mães de VA causaram morte das células B16F10 por necrose principalmente, com resultados similares ao do tratamento com Carboplatina. As diluições homeopáticas tiveram resultados variados, porém, com efeitos de modulação de metabolismo e viabilidade celular, aumento de necrose, redução do estresse oxidativo e diminuição da migração celular.
Melanoma is responsible for most skin cancer deaths. It has a high metastatic potential, complex treatment, and a hopeless prognosis. The Viscum album extract (VA) is a complementary treatment in oncologic patients with in vitro and in vivo cytotoxic effects against different tumor types. However, ultra-diluted homeopathic preparations' effects and mechanisms need further study. Thus, this study aims to assess the in vitro effects of ultra-diluted VA on murine melanoma. Therefore, high dilutions of VA mother tinctures harvested from Abies alba and Quercus robur trees during summer (V.Av. and V.Qv.) and winter (V.Ai. and V.Qi.) were made in decimal (D), centesimal (CH), and fifth-millesimal (LM) scales, followed by mechanical succussion. B16F10 murine melanoma cells were treated with either mother tinctures or VA potencies of 3D, 12D, 30D, 6CH, 12CH, 200CH, 2LM, 3LM, or 5LM. Cells were incubated for 1, 24, 48, and 72 hours and submitted to 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) cytotoxicity (mitochondrial activity) and violet crystal (cellular viability) tests, cell apoptosis (Anexin) and necrosis (7AAD) markers, reactive oxygens species production (DCFH-A), inflammatory cytokines (IFN-, TNF, IL-10, IL-6, MCP-1, IL-12p-70), and post treatment cellular morphology and migration capacity. VA mother tinctures caused B16F10 cells death, mostly via necrosis, with similar results as Carboplatin treatment. Homeopathic dilutions showed variable results, however, cell metabolism and viability modulation, necrosis increase, oxidative stress reduction and cell migration decrease was observed.
Biblioteca responsável: BR68.1