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Uso de diferentes gonadotrofinas na maturação in vitro de oócitos ovinos

BRUNA DIAS MANGUEIRA BASTOS.
Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-221033

Resumo

O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito do uso das gonadotrofinas eCG e hCG, comparado ao FSH, na maturação in vitro de oócitos ovinos. Para tanto, ovários ovinos foram transportados do matadouro local para o laboratório, em solução salina, a 0,9%, a 30°C, até duas horas após o abate. Após a colheita, os oócitos foram avaliados e divididos em três grupos: grupo CON, onde os oócitos foram imersos em meio MIV base: TCM-199, suplementado com EGF (20 ng/mL), cisteamina (100 L/mL); E2 (1 g/mL); L glutamina (1 mM), Piruvato (40 mM); Soro Fetal Bovino (10%v/v); nos grupos ECG e HCG, os oócitos foram imersos em meio MIV base, adicionado, respectivamente, de 10 UI/mL de eCG e de 10 UI/mL de hCG; já no grupo FSH, os oócitos foram imersos em meio MIV base, adicionado de 10 g/mL de FSH-p. A MIV dos oócitos foi realizada a 38,5°C em atmosfera umidificada de 5% de CO2 em ar, durante 24 horas. Não foram observadas diferenças significativas com relação à taxa de expansão de células do cumulus. Todavia, ao se comparar os grupos dentro de cada grau de expansão, no grupo FSH, foi obtido o maior percentual de oócitos com expansão total de células do cumulus (P<0,05). Já o grupo eCG foi superior para expansão moderada (P<0,05), enquanto o grupo HCG foi superior para expansão leve (P<0,05). A percentagem de oócitos em MII foi maior no grupo ECG do que no grupo CON e HCG (P<0,05), mas foi semelhante ao grupo FSH. Em conclusão, 10 UI de eCG podem ser utilizadas em substituição ao FSH na MIV de oócitos ovinos.
The aim of this study was to evaluate the effect of using gonadotropins eCG and hCG, compared to FSH, on in vitro maturation of sheep oocytes. To this end, sheep ovaries were transported from the local slaughterhouse to the laboratory in 0.9% saline at 30 °C within two hours of slaughter. After harvest, the oocytes were evaluated and allocated into three groups: CON group, where the oocytes were immersed in IVM base medium: TCM-199, supplemented with EGF (20 ng / mL), cysteamine (100 L / mL); E2 (1 g / mL); L - glutamine (1 mM), Pyruvate (40 mM); Fetal Calve Serum (10% v / v); in the ECG and HCG groups, the oocytes were immersed in IVM base medium, added, respectively, 10 IU / mL eCG and 10 IU / mL hCG; In the FSH group, the oocytes were immersed in IVM base medium, added with 10 g / mL pFSH. The IVM was performed at 38.5 °C, in a humidified atmosphere of 5% CO2 in air, for 24 hours. No significant differences were observed with respect to cumulus cell expansion rate. However, when comparing the groups within each degree of expansion, in the FSH group, the highest percentage of oocytes with total cumulus cell expansion was obtained (P<0.05). The eCG group was superior for moderate expansion (P<0.05), while the HCG group was superior for mild expansion (P<0.05). The percentage of oocytes in MII was higher in the ECG group than in the CON and HCG groups (P <0.05), but was similar to the FSH group. In conclusion, 10 IU eCG can be used in place of FSH in sheep oocyte IVM.
Biblioteca responsável: BR68.1