Portal de Pesquisa da BVS Veterinária

Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-221887

Resumo

Objetivou-se avaliar e comparar a expressão de Bcl-xL, Bax e caspase-3 em células 12 tronco mesenquimais da medula óssea (CTM-MO) e do tecido adiposo (CTM-TA) de13 ratas submetidas à diferenciação condrogênica in vitro na ausência ou presença de 14 triiodotironina (T3). CTM foram submetidas à diferenciação condrogênica por 21 dias 15 sem T3 (grupo controle) e com diferentes concentrações de T3 (0,01; 1; 100 e 1000 16 nM). Ao final da diferenciação, foi realizada imunohistoquímica para marcação das 17 proteínas Bcl-xL, Bax e caspase-3. O software de análise de imagem digital IHC 18 profile foi utilizado para avaliação das imunomarcações. Realizou-se análise de 19 variância e os testes de Shapiro Wilk, Tukey e Teste t. T3 reduziu significativamente 20 a expressão de Bcl-xL nas concentrações de 0,01; 1 e 100 nM, nas CTM-MO, mas 21 aumentou sua expressão nas CTM-TA na concentração de 0,01 nM. T3 aumentou a22 expressão de Bax nas concentrações de 0,01 e 100 nM, nas CTM-MO e na 23 concentração de 1000 nM, nas CTM-TA. A T3 não alterou significativamente a 24 expressão de caspase 3 nas CTM-MO, mas a reduziu significativamente nas 25 concentrações de 1 e 1000 nM, nas CTM-TA. Comparando-se as duas fontes de 26 CTM, a expressão de Bax e de caspase-3 foi significativamente maior nas CTM-MO 27 tratadas com T3, quando comparadas às CTM-TA. Conclui-se que a T3 influencia de 28 forma distinta a imuno-expressão de marcadores anti- e pró-apoptóticos em CTM29 MO e CTM-TA submetidas à diferenciação condrogênica. A T3 reduz a expressão 30 de Bcl-xL, aumenta a expressão de Bax e não altera a expressão de caspase-3 nas 31 CTM-MO e aumenta a expressão de Bcl-xL e de Bax e reduz a expressão de 32 caspase 3 nas CTM-TA. Essa diferença de resposta pode ser um dos mecanismos 33 para explicar os efeitos diferentes da T3 durante a diferenciação condrogênica das 34 CTM da medula óssea e do tecido adiposo.

---

The aim of this study was to evaluate and compare the expression of Bcl-xL, Bax and 12 caspase-3 in mesenchymal stem cells from bone marrow (BMMSCs) and adipose 13 tissue (ADSCs) of female rats submitted to in vitro chondrogenic differentiation in the 14 absence or presence of triiodothyronine (T3). MSC were subjected to chondrogenic 15 differentiation for 21 days without T3 (control group) and with different concentrations 16 of T3 (0.01; 1; 100 and 1000 nM). At the end of differentiation, immunohistochemistry 17 was performed to label the Bcl-xL, Bax and caspase-3 proteins. The IHC profile 18 digital image analysis software was used to assess immunostaining. Analysis of 19 variance and Shapiro Wilk, Tukey and t-test were performed. T3 significantly reduced 20 Bcl-xL expression at concentrations of 0.01; 1 and 100 nM, in BMMSCs, but 21 increased its expression in ADSCs at a concentration of 0.01 nM. T3 increased Bax 22 expression at concentrations of 0.01 and 100 nM in BMMSCs and at a concentration 23 of 1000 nM in ADSCs. T3 did not significantly alter caspase 3 expression in 24 BMMSCs, but significantly reduced it at concentrations of 1 and 1000 nM in ADSCs. 25 Comparing the two MSC sources, the expression of Bax and caspase-3 was 26 significantly higher in BMMSCs treated with T3 when compared to ADSCs. It is 27 concluded that T3 distinctly influences the immunoexpression of anti- and pro28 apoptotic markers in BMMSCs and ADSCs submitted to chondrogenic differentiation. 29 T3 reduces the expression of Bcl-xL, increases the expression of Bax and does not 30 alter the expression of caspase-3 in the BMMSCs and increases the expression of 31 Bcl-xL and Bax and reduces the expression of caspase 3 in the ADSCs. This 32 difference in response may be one of the mechanisms to explain the different effects 33 of T3 during the chondrogenic differentiation of MSCs from bone marrow and 34 adipose tissue.

Biblioteca responsável: BR68.1