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Escherichia coli isoladas em amostras de leite cru: Verificação da acurácia entre método microbiológico rápido e convencional, e verificação da capacidade em produzir fimbrias curli e biofilme

KETHIN RAIANNE NUNES.
Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-222051

Resumo

O leite é considerado um alimento de grande importância pois é um dos alimentos mais consumidos no mundo e tem um grande valor econômico sendo o Mato Grosso um Estado com alta produção leiteira. Sua composição abrange diversos componentes, tais como: proteínas, gordura, cálcio, entre outros. No entanto, estes componentes tornam o leite, um meio favorável para o crescimento de microrganismos patogênicos e não patogênicos. A qualidade microbiológica do leite é um dos fatores mais controlados para que o alimento seja classificado como saudável, no entanto, microrganismos patogênicos podem contaminar o leite, podendo provocar doença nos consumidores. Escherichia coli é uma bactéria da família Enterobactericeae que coloniza o intestino de homens e animais, podendo apresentar patogenicidade, dependendo do seu sorotipo. E. coli pode causar quadro de toxinfecções nos consumidores e é encontrada com frequência em amostras de leite devido às falhas no processo de higiene na ordenha ou no beneficiamento industrial desta matéria prima. É uma bactéria que tem capacidade de formar biofilme, comprometendo a sua eliminação no ambiente industrial. Neste contexto, o presente estudo teve como objetivo verificar o comportamento de cepas E. coli previamente isoladas de amostras de leite cru através de kit comercial rápido de cultivo microbiológico, comparado ao isolamento por cultivo microbiológico tradicional associado ao teste bioquímico IMVIC, além de verificar a formação de fímbrias curli e biofilme nos isolados de E. coli confirmados. Para isso,40 cepas de E. coli previamente isoladas de amostras de leite cru diretamente colhidas em tanque de refrigeração mecânico por teste rápido de cultivo, foram testadas através do cultivo tradicional e teste bioquímico IMVIC. Foi verificado também a capacidade das cepas em produzir fimbrias curli e biofilme. Das 40 cepas previamente isoladas no teste rápido, 57,5% (23/40) foram confirmadas como E. coli no cultivo tradicional. Quanto à produção de biofilme, 65% (15/23) das amostras apresentaram esta capacidade. Em relação à produção de fimbria curli, dentre as 23 cepas de E. coli, 43,5% (10/23) apresentaram essa capacidade de produção quando incubadas a 28ºC por 48 horas e 30% (07/23) apresentaram esta capacidade, quando incubadas a 35ºC por 24 horas. Conclui-se que apesar da boa eficiência para diagnóstico rápido, o kit comercial não apresentou uma boa diferenciação entre as bactérias termotolerantes e E. coli mostrando uma concordância entre os testes de 57,49%, demonstrando a necessidade de realização de teste bioquímico para a diferenciação das mesmas. Conclui-se também que mais da metade das cepas de E. coli isoladas de leite bovino apresentaram a capacidade em produzir biofilme, demonstrando capacidade de resistência ao ambiente e no hospedeiro, realçando seu potencial de virulência.
Milk is considered a food of great importance as it is one of the most consumed foods in the world and has a great economic value, Mato Grosso being a state with high milk production. Its composition includes several components, such as: proteins, fat, calcium, among others. However, these components make milk a favorable medium for the growth of pathogenic and non-pathogenic microorganisms. The microbiological quality of milk is one of the most controlled factors for the food to be classified as healthy, however, pathogenic microorganisms can contaminate the milk, causing illness in consumers. Escherichia coli is a bacterium of the Enterobactericeae family that colonizes the intestines of men and animals, and may present pathogenicity, depending on its serotype. E. coli can cause poisoning in consumers and is frequently found in milk samples due to failures in the hygiene process in milking or in the industrial processing of this raw material. It is a bacterium that has the capacity to form biofilm, compromising its elimination in the industrial environment. In this context, the present study aimed to verify the behavior of E. coli strains previously isolated from raw milk samples using a rapid commercial microbiological culture kit, compared to isolation by traditional microbiological culture associated with the IMVIC biochemical test, in addition to verifying the formation of curli fimbriae and biofilm in confirmed E. coli isolates. For this, 40 strains of E. coli previously isolated from raw milk samples directly collected in a mechanical refrigeration tank by rapid culture test, were tested through the traditional culture and the IMVIC biochemical test. The capacity of the strains to produce curli fimbriae and biofilm was also verified. Of the 40 strains previously isolated in the rapid test, 57.5% (23/40) were confirmed as E. coli in the traditional culture. As for the production of biofilm, 65% (15/23) of the samples showed this ability. Regarding the production of fimbria curli, among the 23 strains of E. coli, 43.5% (10/23) had this production capacity when incubated at 28ºC for 48 hours and 30% (07/23) had this capacity, when incubated at 35ºC for 24 hours. It is concluded that despite the good efficiency for rapid diagnosis, the commercial kit did not show a good differentiation between thermotolerant bacteria and E. coli, showing an agreement between the tests of 57.49%, demonstrating the need to perform a biochemical test for the differentiation of them. It is also concluded that more than half of E. coli strains isolated from bovine milk showed the ability to produce biofilm, demonstrating high potential for resistance to the environment and the host, enhancing its virulence potential.
Biblioteca responsável: BR68.1