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Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-222083

Resumo

O uso de primatas não humanos (PNH) em pesquisas constitui ferramenta excepcional no conhecimento sobre inúmeras patologias que afetam os humanos. É imperioso que o seu emprego como biomodelos esteja em consonância com as normas vigentes, priorizando os métodos de substituição, refinamento e redução na busca de minimizar ao máximo o uso dos animais de laboratório. Neste intuito, o estudo morfológico das diferentes espécies envolvidas na Ciência em Animais de Laboratório (CAL) é de extrema relevância para a evolução do processo científico. Apesar dos PNH serem modelos amplamente utilizados na CAL, existem poucos estudos sobre as diferentes estruturas morfológicas de órgãos e tecidos, surgindo possíveis vieses e resultados falso-positivos na rotina histopatológica. Em criadouros científicos, em situações em que esses animais têm como desfecho o óbito, muitas vezes, não há possibilidade de realizar um exame necroscópico imediato, havendo a necessidade de congelar a carcaça do animal para posterior análise. Diante dessa abordagem e tendo em vista que o tegumento é o maior órgão dos organismos vivos, este trabalho objetivou descrever a estrutura morfológica de diferentes regiões anatômicas do sistema tegumentar de macacos rhesus (Macaca mulatta), verificar a influência do congelamento na arquitetura celular da pele destes animais, bem como estudar potenciais efeitos autolíticos do tecido cutâneo. Os animais foram divididos em três grupos: G1 - animais submetidos à eutanásia, tendo sido feita a necropsia imediatamente; G2 - animais submetidos à eutanásia e imediatamente congelados a - 20ºC, para posterior análise necroscópica; e G3 - animais que vieram ao óbito e expostos a condições ambientais por até 24h e posteriormente congelados a -20ºC. Foram coletadas seis regiões do tegumento: parietal superior medial, cervical posterior, torácica intermamária, torácica interescapular, ventral quadrante esquerdo inferior e sacral. As amostras foram processadas por técnicas histológicas habituais de inclusão em parafina e coradas pelo método Hematoxilina-Eosina, mensurando 30 regiões da epiderme e da camada córnea de forma randomizada. A quantificação do colágeno na derme foi feita pelo método Picrosírius Red, com captura de 10 regiões da derme. Os resultados mostraram que o processo de congelamento foi capaz de preservar as carcaças dos animais dos grupos G2 e G3, sem alterações histopatológicas, com exceção das regiões ventral e cervical. Evidenciou-se uma tendência de dermatite nas regiões palmar, plantar e calosidade isquiática, constatando-se que estas não são consideradas regiões viáveis para submissão de estudo histológico. Os achados sugerem que o congelamento é um importante processo de preservação do sistema tegumentar, podendo inferir, por conseguinte, uma possível preservação dos demais sistemas.

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The use of nonhuman primates (NHP) in research is an exceptional tool in the knowledge of pathologies that affect humans. It is imperative that their use as biomodels are in line with current regulations, prioritizing replacement, refinement and reduction methods in order to minimize the use of laboratory animals as much as possible. In this regard, the morphological study of the different species involved in Laboratory Animal Science (LAS) is extremely important to the evolution of the scientific process. Despite the fact that NHP are models widely used in the LAS, there are few studies on the different morphological structures of organs and tissues, resulting in possible biases and false-positive results in the histopathological routine. In scientific breeding sites, in situations where these animals have death as an outcome, there is often no possibility of carrying out an immediate necroscopic examination, with the need to freeze the animal's carcass for further analysis. Given this approach and considering that the integument is the largest organ of living organisms, this study aimed to describe the morphological structure of different anatomical regions of the integumentary system of rhesus monkeys (Macaca mulatta), to verify the influence of freezing on the skin cell architecture of these animals, as well as to study potential autolytic effects of the cutaneous tissue. The animals were divided into three groups: G1 - animals that were submitted to euthanasia and the necropsy was performed immediately; G2 - animals that were submitted to euthanasia and immediately frozen at -20ºC, for subsequent necroscopic analysis; and G3 - animals that died and exposed to environmental conditions for up to 24 hours and then frozen at -20ºC. Six regions of the integument were collected: medial superior parietal, posterior cervical, intermammary thoracic, interscapular thoracic, ventral left inferior quadrant and sacral. Samples were processed by usual histological techniques of embedding in paraffin and stained by the Hematoxylin-Eosin method, measuring 30 regions of the epidermis and stratum corneum in a random way. The collagen quantification in the dermis was performed using the Picrosirius Red method, capturing 10 regions of the dermis. Results showed that the freezing process was able to preserve the animal carcasses in G2 and G3 groups, with no histopathological changes, except for the ventral and cervical regions. A trend of dermatitis was evidenced in the palmar, plantar and sciatic callosity regions, noting that these are not considered viable regions for histological study submission. The findings suggest that freezing is an important process of preservation of the integumentary system, which can therefore infer a possible preservation of the other systems.

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