Portal de Pesquisa da BVS Veterinária

Salvador; s.n; 2012. 88 p. ilus.

Tese em Inglês, Português | VETTESES | ID: vtt-410

Resumo

Neospora caninum e Besnoitia besnoiti são protozoários coccídeos, os quais estão associados a perdas econômicas na produção de bovinos. O primeiro é reconhecido mundialmente como importante causa de abortamentos e o segundo é considerado como re-emergente em alguns países. Os objetivos deste trabalho foram comparar a performance de anticorpos monoclonais (AcMo), individualmente e combinados, com soro policlonal (AcPo) contra N. caninum na imuno-histoquímica (IHC), bem como investigar a presença de anticorpos contra B. besnoiti em bovinos. Para isso, a IHC foi realizada com três AcMos (4.15.15, 4.11.5 e 1/24-12), combinações equitativas destes e um AcPo em cortes histológicos de controles positivos produzidos in vitro, nos quais se realizou a contagem dos parasitos detectados. Adicionalmente, o desempenho da melhor combinação de AcMos foi comparado ao AcPo em tecidos de animais naturalmente infectados por N. caninum, e a especificidade analítica destes anticorpos foram avaliadas utilizando controles positivos de parasitos correlatos (B. besnoiti e Sarcocystis spp.). O AcMo 4.15.15 detectou 57% do total de parasitos contados nos cortes, enquanto 4.11.5 e 1/24-12 identificaram 49% e 41% respectivamente. Um total de 79,4% dos parasitos foi detectado pela combinação de 1/24-12 e 4.15.15. Este cocktail e o soro AcPo identificaram 100% (18/18) dos animais naturalmente infectados. Sarcocystis spp. ou B. besnoiti não foram identificados pelos AcMos ou suas combinações, entretanto, o soro AcPo apresentou reação cruzada com estes parasitos na IHC e Immunoblotting respectivamente. Com relação a investigação sorológica de B. besnoiti em bovinos, um total de 2014 amostras sorológicas foram submetidas a imunofluorescência indireta. Destas, 70 animais (3,48%) apresentaram reações positivas com títulos variando de 1:200 a 1:800 [...] (AU)

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Here, we described the usefulness of monoclonal antibody (mAb) to detectNeospora caninum infection in cattle tissue and the comparison of the performance of N. caninum mAb and polyclonal antibody (pAb) by IHC in a quantitative assay with positive controls. In addition a Besnoitia besnoitiserological investigation of 2014 cattle serum samples from two states from Brazil was performed. Three mAbs (4.15.15, 4.11.5 and 1/24-12), equal combinations of them and one pAb were tested by IHC in sections of positive controls prepared in vitro. Performances of the best combination and pAb were evaluated in naturally infected tissues sections. To evaluate analytical specificity, naturally infected bovine tissues with B. besnoiti and Sarcocystisspp. were employed in IHC. The mAb 4.15.15 detected 57% of the total parasites in sections of quantitative assay while 4.11.5 and 1/24-12 could detect 49% and 41% respectively. The best mAb combination (1/24-12 and 4.15.15) labeled 79.4% of parasites in positive control sections. This combination and pAb serum detected 100% (18/18) of naturally-infected animals. Sarcocystis spp. or B. besnoitiwere not detected by mAb combination, however pAb cross-reacted with Sarcocystis spp. cysts. RegardingB. besnoiti investigation a total of 3.48% (70/2014) animals were considered positive by IFAT with titers of 200 (85.7%), 400 (10%) and 800 (4.3%).These results confirm the usefulness of mAb application in IHC. In addition, the rate of positive reactions, inB. besnoiti serological investigation shows a low exposition of the studied population to the parasite; however further studies must be performedto confirm the presence of B. besnoitiin Brazil. (AU)

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