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Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-7760

Resumo

O objetivo deste trabalho foi desenvolver um protocolo de preservação de sêmen do piracanjuba (Brycon orbignyanus) através dos processos de resfriamento à 4ºC e congelamento. Os trabalhos foram realizados na Estação de Piscicultura da Companhia Energética de Minas Gerais (CEMIG), Itutinga-MG. No experimento 1 foram avaliados diversos diluidores, crioprotetores (DMSO, metanol e metil glicol) e antibiótico (sulfato de gentamicina) no resfriamento do sêmen. No experimento 2, os diluidores que melhor mantiveram a motilidade espermática no experimento 1 foram acrescidos de 10% de crioprotetor (DMSO, metanol ou metil glicol) e 5% de gema de ovo de galinha, e usados como meio diluidor para o congelamento de sêmen. O congelamento foi feito utilizando-se um botijão de vapor de nitrogênio líquido (Taylor-Warton, modelo CP 300, “dry shipper”). As amostras de sêmen foram descongeladas em banho-maria à 60ºC por 8 segundos. No experimento 3, avaliou-se a porcentagem de sobrevivência através do método de coloração diferencial e a capacidade de fertilização dos espermatozóides após o descongelamento. No Experimento 1, a solução de Saad (NaCl 200 mM; tris 30 mM) foi o diluidor que melhor manteve a motilidade espermática, proporcionando 80% de motilidade após 24 h de resfriamento, enquanto as amostras controle (não diluídas) apresentaram apenas 33%. A adição de crioprotetores nos diluidores não promoveu melhoria no meio de conservação durante o resfriamento, exceto nas amostras diluídas em NaCl 0,9% acrescida de DMSO que após 24 h produziu uma maior taxa de motilidade espermática (77%) em relação as amostras diluídas apenas em NaCl 0,9% (60%). Entretanto, as amostras de sêmen diluídas em Saad e NaCl 200 mM sem crioprotetor, apresentaram taxa de motilidade semelhante as amostras diluídas em NaCl 0,9% acrescida de DMSO, indicando não ser necessário o acréscimo de crioprotetores no processo de resfriamento, quando as soluções de Saad ou NaCl 200 mM são usadas como diluidores. A adição de gentamicina não melhorou a taxa de motilidade espermática durante o resfriamento. As soluções NaCl 200 mM e Saad acrescidas ou não de gentamicina, preservaram a motilidade espermática por um período de 7 dias de resfriamento, produzindo taxas de motilidade entre 37 e 40%, quando diluídas numa proporção 1:9 (sêmen:diluidor). No Experimento 2, as amostras que apresentaram as maiores taxas de motilidade espermática após o descongelamento foram NaCl 0,9% + gema de ovo + metil glicol (66%); M III? (glicose; citrato de sódio; EDTA; sulfato de gentamicina; NaHCO3); + gema de ovo + metil glicol (60%) e BTS? (glicose; citrato de sódio; EDTA; sulfato de gentamicina; NaHCO3; KCl) + metil glicol (70%). No Experimento 3, a porcentagem de sobrevivência dos espermatozóides após o descongelamento foi semelhante a porcentagem de espermatozóides móveis. Após a fertilização realizada com o sêmen congelado nesses criodiluidores, verificou-se uma boa taxa de eclosão dos ovos (58, 40 e 66%, respectivamente), no entanto, foram menores (P<0,05) que a taxa observada com o sêmen fresco (86%)

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