Atividade antimicrobiana do óleo de copaíba (Copaifera langsdorffii) e seus constituintes, e avaliação do bioproduto obtido na inibição de bactérias da placa dental de cães
Pieri, Fabio Alessandro.
Tese
em Português
| VETTESES
| ID: vtt-868
Resumo
PIERI, Fabio Alessandro, D. Sc., Universidade Federal de Viçosa, fevereiro de 2012. Atividade antimicrobiana do óleo de copaíba (Copaifera langsdorffii) e seus constituintes, e avaliação do bioproduto obtido na inibição de bactérias da placa dental de cães. Orientadora: Maria Aparecida Scatamburlo Moreira. Co-orientadores: Abelardo Silva Junior, Andréa Pacheco Batista Borges, Luis Augusto Nero e Valdir Florêncio da Veiga Junior A doença periodontal acomete cerca de 85% dos cães com mais de quatro anos de idade e é causada pelo acúmulo de placa bacteriana na superfície dos dentes e pela reação do organismo a esta. O óleo de copaíba apresentou, anteriormente, resultados positivos na inibição da placa dental em cães, entretanto faltam estudos que identifiquem esta atividade sobre as bactérias oriundas de cães in vitro e que estabeleçam as substâncias ativas do óleo. O objetivo deste trabalho foi verificar a atividade antimicrobiana do óleo de copaíba (Copaifera langsdorffii) e seus constituintes, e avaliar o bioproduto obtido na inibição de bactérias da placa dental de cães. Foi utilizado um óleo de C. langsdorffii, submetido a fracionamento guiado por bioensaio e sua última fração teve seus compostos identificados. Para confecção da bacterioteca deste trabalho a placa dental supragengival de dez cães com idade entre um e dois anos foi obtida, cultivada em ágar Mitis Salivarius com diluições seriadas para obterem-se colônias isoladas e culturas puras a partir delas. As bactérias foram identificadas utilizando a técnica de PCR para amplificação de parte do gene 16S do rDNA e os fragmentos amplificados foram sequenciados e comparados com as seqüências depositadas no GenBank. O óleo íntegro teve sua capacidade antimicrobiana testada, por teste de difusão em ágar, contra 27 isolados de Escherichia coli provenientes de leite mastítico, um isolado de campo de Actinobacilus pleuropneumoniae e de Haemophilus parasuis além de cepas de referência de Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Proteus mirabilis, Klebsiella pneumoniae, Shigella flexneri e Citrobacter freundi. A capacidade antibacteriana do óleo íntegro e de suas frações iniciais foi testada contra 20 isolados da bacterioteca da placa dental com a mesma metodologia. Dos compostos majoritários identificados na última fração obtida foi selecionado um que teve sua concentração inibitória mínima avaliada sobre 34 isolados da bacterioteca e testado em ensaio com cães para verificar sua capacidade de inibir a formação de placa in vivo comparado a um controle negativo e um positivo com clorexidina 0,125%. Da placa dental dos 10 cães foi obtida uma bacterioteca de 183 isolados com predominância dos gêneros Staphylococcus (20,2%), Enterococcus (19,1%) e Streptococcus(18%). O óleo integro inibiu o crescimento das cepas padrão de E. coli, S. flexneri, P. aeruginosa e S. aureus com halos de inibição de 17, 18, 15 e 18mm respectivamente. Oito isolados selvagens de E. coli foram sensíveis ao óleo apresentando halos que variaram de 12 a 34mm. Quando testado sobre isolados da placa dental de cães, o óleo de copaíba inibiu 16/20 isolados de diversos gêneros com halos variando entre 10 e 15mm, e com relação às suas frações, a não ácida se apresentou superior, com atividade sobre 17/20 isolados e foi refracionada, por ter ação contra mais isolados do que a fração ácida, que inibiu apenas 8/20 isolados. A última fração foi obtida da não ácida e foi capaz de inibir 18/20 isolados d
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