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Biospeckle Laser na Análise de Alguns Parâmetros Cinéticos do Sêmen Equino

Miron, Deborah Moreno.
Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-8682

Resumo

Os parâmetros de motilidade e vigor de espermatozóides são utilizados na avaliação de um ejaculado, entretanto, esta técnica apresenta alta subjetividade. A utilização da luz laser na avaliação da qualidade do sêmen mostrou-se uma técnica eficiente para avaliação de ejaculados in natura de ovinos (Nasciemento, 2005) e sêmen congelado de bovinos (Carvalho et al., 2006). O objetivo deste trabalho foi avaliar o sêmen eqüino pela técnica do biospeckle, utilizando o momento de inércia (MI) como forma de quantificação na variação temporal e correlacioná-lo com parâmetros físicos e morfológicos dos espermatozóides. Foram coletados ejaculados de 20 garanhões com idade entre 3 e 15 anos. Após avaliação das características físicas seminais, diluiram-se as amostras em meio Kenney modificado retiraram-se alíquotas para avaliação morfológica e 10ml de sêmen diluído foi iluminado pela luza laser, após 30 segundos de estabilização. As iluminações das amostras foram realizadas com o laser He-Ne (vermelho 632 nm - 10mW), que era captado por uma câmera CCD ligada a um computador. As imagens foram tranformadas em padrões STS, a partir do qual calculou-se o MI. A integridade funcional da membrana plasmática foi avaliada utilizando-se o teste hiposmótico (HO) descrito por Melo & Henry (1999). Observou-se correlação significativa e positiva entre o MI e o vigor (p=0,05;r=0,44), mas não com a motilidade total (p=0,09). Entre MI e HO (r=18) e MI e porcentagem de espermatozóides morfologicamente normais (r=0,43) as correlações não forma significativas (p>0,05). A caracterização da atividade biológica feita análise do biospeckle é complexa. Para a compreensão do fenômeno faz-se necessário o conhecimento da interação da luz com o material iluminado, pois o MI é o resultado desta interação e de vários fatores, tais como dimensões e velocidade das células, rotação da cabeça do espermatozóide e padrão de deslocamento, concentração espermática, composição do diluidor e configuração experimental do laser, que podem interferir no processo de avaliação. Apesar de term sido observadas correlações altas, em sêmen de ruminantes, entre MI e motilidade individual, na espécie eqüina estas correlações não foram significativas. O espermatozóide eqüino apresenta dimensões inferiores em relação ao ovino e bovino, fato que pode explicar esta diferença. Entretanto a luz laser pode detectar a intensidade de movimento dos espermatozóides, e o MI pode ser utilizado na avaliação do vigor de sêmen eqüino. Configurações do equipamento devem ser testadas para obtenção de um padrão de análise de sêmen nesta espécie
Biblioteca responsável: BR68.1