Retrospective diagnosis of childhood ADHD using the Wender Utah Rating Scale.

OBJECTIVE: An external validation of the Wender Utah Rating Scale (WURS) against a clinical assessment is lacking, especially for French-speaking populations. METHOD: Participants completed three subsets of the WURS-61 and were assessed for ADHD using the DIVA 2.0 semi-structured interview. Exploratory factor analyses were performed. Logistic regression models and Receiver-Operating Curves were used to determine the cut-off scores that predicted childhood ADHD with best accuracy. RESULTS: One hundred three adults were included. Three factors were extracted for the WURS-25 and WURS-K, and four for the WURS-29. Cut-off scores are 44, 24 and 42, respectively. When considering DSM-5 rather than DSM-IV criteria, these values changed to 44, 36 and 44, respectively. More than 83% of the participants had been correctly classified. CONCLUSION: All three subsets of the WURS-61 retrospectively predict the presence of ADHD in childhood. This result might prove to be useful in screening and research procedures.

Supervised oral HIV self-testing is accurate in rural KwaZulu-Natal, South Africa.

OBJECTIVES: To achieve UNAIDS 90-90-90 targets, alternatives to conventional HIV testing models are necessary in South Africa to increase population awareness of their HIV status. One of the alternatives is oral mucosal transudates-based HIV self-testing (OralST). This study describes implementation of counsellor-introduced supervised OralST in a high HIV prevalent rural area. METHODS: Cross-sectional study conducted in two government-run primary healthcare clinics and three Médecins Sans Frontières-run fixed-testing sites in uMlalazi municipality, KwaZulu-Natal. Lay counsellors sampled and recruited eligible participants, sought informed consent and demonstrated the use of the OraQuick(™) OralST. The participants used the OraQuick(™) in front of the counsellor and underwent a blood-based Determine(™) and a Unigold(™) rapid diagnostic test as gold standard for comparison. Primary outcomes were user error rates, inter-rater agreement, sensitivity, specificity and predictive values. RESULTS: A total of 2198 participants used the OraQuick(™) , of which 1005 were recruited at the primary healthcare clinics. Of the total, 1457 (66.3%) were women. Only two participants had to repeat their OraQuick(™) . Inter-rater agreement was 99.8% (Kappa 0.9925). Sensitivity for the OralST was 98.7% (95% CI 96.8-99.6), and specificity was 100% (95% CI 99.8-100). CONCLUSION: This study demonstrates high inter-rater agreement, and high accuracy of supervised OralST. OralST has the potential to increase uptake of HIV testing and could be offered at clinics and community testing sites in rural South Africa. Further research is necessary on the potential of unsupervised OralST to increase HIV status awareness and linkage to care.

Improving survey data on pregnancy-related deaths in low-and middle-income countries: a validation study in Senegal.

OBJECTIVE: In low- and middle-income countries (LMICs), siblings' survival histories (SSH) are often used to estimate maternal mortality, but SSH data on causes of death at reproductive ages have seldom been validated. We compared the accuracy of two SSH instruments: the standard questionnaire used during the demographic and health surveys (DHS) and the siblings' survival calendar (SSC), a new questionnaire designed to improve survey reports of deaths among women of reproductive ages. METHODS: We recruited 1189 respondents in a SSH survey in Niakhar, Senegal. Mortality records from a health and demographic surveillance system (HDSS) constituted the reference data set. Respondents were randomly assigned to an interview with the DHS or SSC questionnaires. A total of 164 respondents had a sister who died at reproductive ages over the past 15 years before the survey according to the HDSS. RESULTS: The DHS questionnaire led to selective omissions of deaths: DHS respondents were significantly more likely to report their sister's death if she had died of pregnancy-related causes than if she had died of other causes (96.4% vs. 70.9%, P < 0.007). Among reported deaths, both questionnaires had high sensitivity (>90%) in recording pregnancy-related deaths. But the DHS questionnaire had significantly lower specificity than the SSC (79.5% vs. 95.0%, P = 0.015). The DHS questionnaire overestimated the proportion of deaths due to pregnancy-related causes, whereas the SSC yielded unbiased estimates of this parameter. CONCLUSION: Statistical models informed by SSH data collected using the DHS questionnaire might exaggerate maternal mortality in Senegal and similar settings. A new questionnaire, the SSC, could permit better tracking progress towards the reduction in maternal mortality.

Evaluation of anthropometric measurements at birth in predicting birthweight less than 2000 g in African and Asian newborns: a meta-analysis.

BACKGROUND: Particularly in developing countries, lower birthweight may be associated with higher neonatal mortality, and deliveries frequently take place at home where scales are not always available. Therefore, surrogate measurements for birthweight are necessary as a primary screening measure. The aim of this study was to determine whether newborn chest and arm circumferences can predict birthweight less than 2000 g. METHODS: The selection criteria were studies published in English that could provide all the true- and false-positive and true- and false-negative results with regard to the prediction of birthweight less than 2000 g by other anthropometric measurements among apparently healthy neonates. Ten bibliographic databases (e.g., PubMed) were searched and a bivariate meta-analysis was conducted with hierarchical summary receiver operating characteristic (ROC) curves. A total of 36,987 participants in 24 studies for chest circumference and 16,164 participants in 15 studies for arm circumference were included. The study regions were limited to Africa and Asia. RESULTS: For chest and arm circumferences (24 and 15 studies, respectively), pooled sensitivity (0.94 and 0.89, respectively) and specificity (0.94 and 0.96, respectively), and diagnostic odds ratios (263 and 174, respectively) were sufficiently high to allow good predictions. The diagnostic odds ratio for chest circumference was significantly higher than for arm circumference (P<0.001). The generalizability of the findings is to some extent guaranteed. CONCLUSION: Newborn chest and arm circumferences may be useful predictors of birthweight less than 2000 g, with chest circumference possibly better.

Diagnosis of treponemal co-infection in HIV-infected West Africans.

OBJECTIVES: To evaluate the performance of two enzyme immunoassays (EIA), Murex and ICE, and the Determine TP point-of-care test (POCT) in diagnosing treponemal infection (syphilis or yaws) in patients attending a large HIV clinic in Ghana; to determine the prevalence of treponemal co-infections; and to characterise demographic and clinical features of patients with infection. METHODS: Samples were tested with EIAs and rapid plasma reagin (RPR), then POCT and reference assays for Treponema pallidum to determine prevalence of active and past infection. Sensitivity and specificity of each assay were calculated and demographic and clinical characteristics of patients compared. Data were collected from case notes of patients retrospectively. RESULTS: Overall, 45/284 patient samples (14.8%, 95% CI, 11.1-19.4%) were Treponema pallidum particle agglutination (TPPA) positive, and of these, 27 (64.3%) were RPR positive and 4 (8.9%) were treponemal IgM positive. Both EIAs and Determine TP POCT showed high sensitivities and specificities for identifying infection although RPR was less reliable. Clinical features of syphilis or yaws were rarely identified in TPPA-positive patients suggesting most had previous or late latent infection. Treatment of various intercurrent infections using short courses of antibiotics active against T. pallidum was common in the clinic. CONCLUSIONS: A high proportion of this HIV-infected cohort showed evidence of treponemal infection. Both EIAs as well as the POCT were practical and effective at diagnosing treponemal co-infection in this setting. RPR alone was unreliable at identifying active treponemal co-infection, however might be useful in some settings where treponemal-specific assays are unaffordable.

Poor performance of albumin or protein-adjusted plasma calcium to diagnose dyscalcemia in hospitalized patients: A confirmatory study in a general internal medicine department.

INTRODUCTION: Hypo- and hypercalcemia are common and some causes require urgent diagnosis and treatment. Measurement of ionized calcium is the reference test to diagnose calcium disorders but total calcium adjusted for protein or albumin concentration is more often used. METHODS: Patients hospitalised in a general internal medicine department from September 2013 to December 2015 who had a total plasma calcium concentration and a serum albumin or protein concentration measured within 24h of a ionized calcium blood measurement were included. Total calcium was adjusted for protein or albumin concentration using widely used formulas and compared to ionized calcium as the gold standard. RESULTS: Among 210 included patients, 46 (22%) had hypocalcemia, 124 (59%) normocalcemia and 40 (19%) hypercalcemia according to ionized calcium concentration. Total calcium had 50% sensitivity and 95% specificity to diagnose hypocalcemia and a 93% sensitivity and 89% specificity to diagnose hypercalcemia. Adjusting total calcium for protein or albumin concentrations did not increase and sometimes decreased diagnostic accuracy. CONCLUSION: Total calcium, with or without albumin/protein adjustment, is poorly sensitive to screen for hypocalcemia. Unadjusted total calcium is as sensitive as protein- or albumin-adjusted total calcium to screen for hypercalcemia. These data argue against the use of albumin- or protein-adjusted calcium. Ionized calcium measurement should be performed to confirm dyscalcemia in patients with abnormal total calcium concentration and to rule out hypocalcemia in patients with total calcium concentration in the lower range of normal values.

Desenvolvimento de ELISA indireto para detecção de anticorpos IgG Anti-RBD da linhagem de referência B (Hu-1) do SARS-CoV-2 e análise deste anticorpo com a gravidade da COVID-19

A avaliação da soropositividade dos infectados pelo Coronavírus da síndrome respiratória aguda grave (SARS-CoV-2) mostra-se importante para o aprimoramento da interpretação clínica da presença de anticorpos IgG nas diferentes formas da Doença do Coronavírus 2019 (COVID-19). Para isto, faz-se necessário a construção de testes sorológicos acurados que possam auxiliar na compressão da imunopatogênese da COVID-19. O objetivo deste trabalho consiste em desenvolver e avaliar um ELISA indireto para a detecção de anticorpos IgG anti-RBD da linhagem B (Hu-1) do SARS-CoV-2 e analisar estes anticorpos com a severidade da COVID-19. A proteína RBD da linhagem B (Hu-1) do SARS-CoV-2 foi produzida in vitro e utilizada como antígeno no ensaio imunoadsorvente ligado à enzima indireto (ELISA) para detecção de anticorpos IgG séricos em amostras obtidas por conveniência de um biorrepositório. Os soros foram provenientes de pacientes internados no Hospital dos Servidores do Estado de Pernambuco (HSE-PE), com sintomatologia, RT-PCR e/ou sorologia positiva para infecção pelo SARS-CoV-2. O ELISA produzido foi submetido aos testes de validação demostrando 92,4% sensibilidade, 97% especificidade e 95% de acurácia. Dos 100 indivíduos hospitalizados por COVID-19 avaliados, 72 foram inclusos no estudo, dos quais 90% foram positivos para anticorpos IgG anti-RBD da linhagem B (Hu-1) do SARS-CoV-2 e 10% negativos. Entre os soropositivos, 55% desenvolveram a forma leve da COVID-19 e 45% progrediram para a COVID-19 grave, estando o desenvolvimento da forma grave da COVID-19 associada a presença de hipertensão, asma, anemia, linfocitopenia, leucocitose, aumento dos níveis de CK, AST e glicemia. Portanto, o teste de ELISA indireto desenvolvido e aplicado neste trabalho apresentou-se acurado para classificação de indivíduos quanto a presença de anticorpos IgG anti-RBD da linhagem B (Hu-1) do SARS-CoV-2. Como também, a detecção destes anticorpos demostra-se associada a COVID-19 leve e ao desfecho clínico de alta.

Desenvolvimento de sistemas baseados em amplificação isotérmica em alça (LAMP) para o diagnóstico da doença de Chagas

A doença de Chagas representa um importante problema de saúde pública, principalmente na América Latina. O diagnóstico precoce durante a fase aguda é crucial, pois permite o tratamento imediato, podendo interferir no prognóstico. A técnica de amplificação isotérmica em alça (LAMP) vem demonstrando potencial, por ser sensível, específica, de fácil execução e baixo custo. O presente trabalho teve como objetivo desenvolver sistemas baseados em LAMP para o diagnóstico da doença de Chagas. Inicialmente foram avaliados dois sistemas descritos na literatura: Thekisoe et al. e Ordóñez et al. O sistema de Ordóñez et al. demonstrou elevada sensibilidade e especificidade, sendo utilizado como sistema de LAMP convencional e para o desenvolvimento de um sistema de LAMP em tempo real. O sistema de LAMP convencional foi aplicado em amostras de 77 indivíduos expostos ao surto agudo ocorrido em Ibimirim/PE e comparado ao diagnóstico parasitológico, sorológico e ao sistema de qPCR (TcSAT-IAM). Segundo critérios da Secretaria Estadual de Saúde de Pernambuco, 28 casos foram confirmados pelo critério laboratorial e 10 pelo clínico-epidemiológico. Considerando o critério laboratorial, a sensibilidade e especificidade do sistema de LAMP foi de 39,29% e 83,67%, respectivamente. Considerando o diagnóstico pelo sistema TcSAT-IAM, o sistema de LAMP apresentou sensibilidade de 60,87%, especificidade de 90,74%, acurácia de 81,82% e concordância considerada moderada. A coleta das amostras após o início do tratamento e o tempo de armazenamento representaram importantes limitações do estudo. Estes resultados demonstram a importância da coleta e armazenamento adequados das amostras e sugerem um "padrão-ouro composto", considerando os testes preconizados em conjunto com técnicas moleculares, sendo a técnica de LAMP mais acessível para áreas de recursos limitados. Para facilitar a implementação na rotina laboratorial, foi desenvolvido um kit baseado em LAMP para o diagnóstico da doença de Chagas aguda .

Desenvolvimento e validação de plataformas do tipo "Point-of-Care" para o diagnóstico molecular de arbovírus emergentes

As arboviroses, como as provocadas pelo o vírus Zika (ZIKV) e o vírus chikungunya (CHIKV), têm sido associadas a surtos em larga escala e epidemias em vários países de clima tropical e subtropical nos últimos anos. Atualmente, o diagnóstico dos pacientes infectados por estes vírus é realizado em laboratórios centralizados utilizando a reação de transcriptase reversa seguida da reação em cadeia da polimerase quantitativa (RT-qPCR), que, embora seja o método molecular padrão-ouro para o diagnóstico molecular, tem várias desvantagens para uso em áreas remotas e de poucos recursos, como alto custo e necessidade de equipamentos especializados. Essas desvantagens dificultam a aplicação e utilização para um grande número de amostras. As plataformas de diagnóstico point-of-care (POC) têm o potencial de superar essas limitações, especialmente em países em desenvolvimento. Com isso em mente, nós desenvolvemos e validamos duas plataformas de diagnóstico baseadas em RT-LAMP e biossensores moleculares para a detecção rápida do ZIKV e CHIKV em amostras de pacientes e amostras de mosquitos. O RT-LAMP foi capaz de detectar o ZIKV em diversos tipos de amostras (soro, urina, saliva e sêmen) em apenas 20 minutos, sem extração de RNA. O ensaio RT-LAMP foi altamente específico e até 100 vezes mais sensível do que RT-qPCR. Em seguida, validamos o ensaio com 100 amostras de soro de pacientes coletadas de casos suspeitos de infecção por arbovírus no estado de Pernambuco, epicentro da última epidemia de Zika. Comparado com a RT-qPCR, o ensaio RT-LAMP forneceu sensibilidade de 100%, especificidade de 93,75% e uma precisão geral de 95,00%. Por outro lado, os biossensores moleculares apresentaram sensibilidade similar e alta especificidade quando comparado a RTqPCR. Na sequência, validamos os biossensores com 268 amostras clínicas e as análises demonstraram sensibilidade de 94,52%, especificidade de 100% e uma precisão geral de 98,51%. Demonstrando a programabilidade e extensibilidade de ambas as plataformas de diagnóstico, alcançamos um desempenho de diagnóstico semelhante para a detecção do CHIKV em soro, saliva, urina e amostras de mosquitos. Por fim, também foi otimizado um método alternativo de extração do RNA baseado em fervura acoplado a técnica de RT-qPCR para a detecção molecular do ZIKV. Tomados em conjunto, o ensaio RT-LAMP e os biossensores moleculares fornecem duas alternativas promissoras e de baixo custo para o diagnóstico rápido do ZIKV e CHIKV e possuem o potencial de aumentar a capacidade diagnóstica em áreas afetadas por estes arbovírus emergentes, particularmente em países com baixa infraestrutura laboratorial.

Aplicação da técnica de amplificação isotérmica em alça (LAMP) para o diagnóstico da Leishmaniose visceral

A Leishmaniose Visceral (LV) é uma infecção causada por protozoários do complexo Leishmania donovani, no Brasil o agente etiológico é a espécie Leishmania infantum, e encontra-se entre as seis endemias consideradas prioritárias no mundo. O diagnóstico precoce desta parasitose é de grande importância, pois quando não tratados ou tratados tardiamente os casos têm maior letalidade. A visualização do parasito em amostras de punção de medula óssea é definida como método de diagnóstico padrão ouro, entretanto, é considerado um procedimento invasivo e necessita de ambiente adequado e profissionais capacitados. A técnica de Amplificação Isotérmica em Alça (LAMP) é um teste molecular de amplificação de DNA que não requer o uso de termocicladores, podendo ser realizado em banho-maria, pois toda a reação acontece a uma temperatura constante. Tendo em vista todas as vantagens do método LAMP, este estudo propôs a otimização e aplicação desta técnica para diagnóstico da LV em indivíduos residentes no município de Tamandaré, no estado de Pernambuco. Nesta pesquisa, foram coletadas amostras de sangue periférico de 83 indivíduos residentes do município em questão. Nos ensaios de otimização do LAMP foi avaliada a sensibilidade, sendo possível detectar o DNA de Leishmania infantum até a concentração de 100ag e, nos ensaios de especificidade, apenas amostras contendo DNA de Leishmania infantum foram positivas. Quando o sistema LAMP foi aplicado para o diagnóstico da LV nas amostras coletadas, não houve resultados positivos. Na aplicação da Reação em Cadeira da Polimerase (PCR) utilizando o sistema ITS1 para diagnóstico da LV, todos os pacientes também foram negativos. A partir desta pesquisa, o sistema de LAMP pode ser considerado sensível e específico para detecção molecular de DNA de Leishmania infantum no Brasil. Estudos posteriores aplicando amostras clínicas positivas são necessários afim de definir a sensibilidade e especificidade analítica deste sistema .