RAPD-PCR na identificação molecular de plantas medicinais regulamentadas pelo Sistema Único de Saúde do Brasil / RAPD-PCR in molecular identification of medicinal plants regulated by the Unified Health System in Brazil

Terapêutica devido ao uso de matéria prima de identidade duvidosa. Por isto, foi utilizado o método RAPD-PCR para a elaboração de um perfil genético de três espécies de plantas medicinais regulamentadas pelo SUS do Brasil: Mikania glomerata, Maytenus ilicifolia e Schinus terebinthifolius, a partir de exemplares destas plantas, que foram cedidas pela Coleção Temática de Plantas Medicinais do Instituto de Pesquisas do Jardim Botânico do Rio de Janeiro. Os 60 iniciadores utilizados no RAPD-PCR com o DNA das três espécies geraram 1284 produtos amplificados que variaram de 100-1500 pb. Foram selecionados cinco iniciadores que geraram no total 76 fragmentos entre 200-1100 pb com as três espécies, sendo os iniciadores OPG18, OPA7 e OPG17 para a Mikaniaglomerata, os iniciadores OPG20, OPC13 e OPA11 para a Maytenus ilicifolia e OPA4, OPA18 e OPG14 para a Schinus terebinthifolius e os iniciadores OPA17 e OPC6 para as três espécies. Os perfis resultantes permitiram a identificação eficiente das espécies. Foram identificados iniciadores que geraram um único fragmento que poderão servir para desenhar um iniciador específico, que poderá ser usado na identificação da planta em produtos como monofarmacos e associações.

Estudo das propriedades físico-químicas da glibenclamida e excipientes que influem sobre resultados do ensaio de dissolução para medicamento similar e genérico / Effect of the physicochemical properties of glyburide on the results of dissolution test for generic and similar drugs

Alguns insumos farmacêuticos ativos (IFA) possuem como característica, a possibilidade de apresentarem o polimorfismo, que pode se desenvolver em alguma das etapas do processo de produção na indústria. No caso deste não ser caracterizado e especificado, um diferente polimorfo poderá ser utilizado equivocadamente durante o processo de fabricação. A ocorrência de polimorfismo pode originar importantes variações nas propriedades físico-químicas dos IFAs, principalmente quanto à solubilidade. Alguns medicamentos de glibenclamida (GLIB) apresentaram denúncias de ineficácia terapêutica e a presença de polimorfos pode ser uma das possíveis causas. Neste trabalho foram analisados cinco medicamentos e cinco IFAS de diferentes fornecedores. Para os medicamentos foram feitos testes característicos de verificação de equivalência farmacêutica. Nos IFAS, as diversas técnicas empregadas não evidenciaram presença de polimorfos ou alterações importantes nas propriedades físico-químicas e na velocidade de dissolução intrínseca. Entretanto, os perfis de dissolução dos medicamentos, principalmente, entre os dois similares A e B demonstraram diferenças apontadas pelos valores do fator f2, respectivamente, de 20 e 42, os quais indicaram associação destes valores com a presença de distintos excipientes, como por exemplo o manitol e diferentes processos de produção industrial.

Validação intralaboratorial de um novo método analítico por cromatografia líquida em fase reversa do ácido acetilsalicílico e do ácido salicílico em comprimidos / Development of a new analytical method for the determination of acetylsalicylic acid and salicylic acid into tablets by a reversed phase chromatography

O ácido acetilsalicílico (AAS) é um fármaco utilizado como analgésico, anti-inflamatório, antipirético, sendo amplamente comercializado e consumido no Brasil e no mundo. Como precursor de sua síntese utiliza-se o ácido salicílico (AS) que também é produ-zido através de sua degradação. O objetivo deste trabalho foi a validação de um novo método por cromatografia em fase líquida para determinar os teores tanto do ácido acetilsalicílico quanto do salicílico em comprimidos. Os parâmetros da adequação do sistema cromatográfico para o AAS (fator de alargamento = 1,20; fator de retenção = 1,61; número de pratos = 2485 e desvio padrão relativo = 0,3%) e para o AS (fator de alargamento = 1,26; fator de retenção = 2,72; número de pratos = 4177 e desvio padrão relativo = 0,2%) foram satisfatórios e a resolução foi de 5,06. A seletividade foi verifi-cada por comparações dos espectros de absorção no ultravioleta (UV) antes, durante e depois do tempo de retenção das substâncias com os espectros obtidos a partir das substâncias puras (padrões). A faixa linear de trabalho para o AAS foi de 0,21 a 0,39 mg/mL e a do AS foi de 6,3 a 11,7 µg/mL. Foi verificado para o AAS e para o AS que a regressão obtida nas curvas analíticas foi significativa e não apresentou desvio da linearidade, que os resíduos seguem a normal, são independentes e seguem compor-tamento homoscedástico, os coeficientes de correlação (r) das curvas analíticas do AAS e do AS foram de 0,9995 e 0,9988, respectivamente. A sensibilidade foi de 1,88 mAbs/(µg/mL) para o AAS e de 1,84 mAbs/(µg/mL) para o AS. Os limites de detecção e quantificação para o AS foram 0,23 e 0,69 µg/mL respectivamente. Não foi verificada a presença do efeito matriz pelas comparações das inclinações e interseções das três curvas de adição padrão com a curva analítica para o AAS e para o AS. A recuperação média em cada uma das três curvas de adição padrão foi de 99,9%, 96,4% e 100,1% para o AAS e de 100,3%, 100,1% e 101,2% para o AS. A repetitividade expressa pelo desvio padrão relativo de repetitividade (DPRr) na analise do AAS do produto A execu-tada pelos analistas 1, 2 e 3 foram de 2,5%, 1,2% e 1,2%, respectivamente, e na análise do AS foi de 2,9%, 2,2% e 2,0% respectivamente. A precisão intermediária expressa pelo desvio padrão de reprodutibilidade (DPRR) entre três analistas em dias e equipa-mentos diferentes para o AAS foi de 1,7%, 1,4% e 1,6% nas análises dos produtos A, B e C, respectivamente, e para o AS foi de 2,4%, 7,5% e 8,0% nas análises dos produtos A, B e C, respectivamente. O método mostrou-se ser robusto, em relação a pequenas alterações no pH da fase móvel (2,3 e 2,6), composição da fase móvel (30 e 20% de or-gânico), temperatura da coluna (30 e 25ºC), vazão da fase móvel (1,0 e 1,2 mL/minuto), diferente fabricante de coluna (Waters e Merck) e tempo de extração no ultrassom (5 e 10 minutos). O método foi aplicado na determinação do teor de AAS e de AS em dez lotes de um medicamento industrial.

Estudo das propriedades físico-químicas da glibenclamida e excipientes que influem sobre resultados do ensaio de dissolução para medicamento similar e genérico / Effect of the physicochemical properties of glyburide on the results of dissolution test for generic and similar drugs

Alguns insumos farmacêuticos ativos (IFA) possuem como característica, a possibilidade de apresentarem o polimorfismo, que pode se desenvolver em alguma das etapas do processo de produção na indústria. No caso deste não ser caracterizado e especificado, um diferente polimorfo poderá ser utilizado equivocadamente durante o processo de fabricação. A ocorrência de polimorfismo pode originar importantes variações nas propriedades físico-químicas dos IFAs, principalmente quanto à solubilidade. Alguns medicamentos de glibenclamida (GLIB) apresentaram denúncias de ineficácia terapêutica e a presença de polimorfos pode ser uma das possíveis causas. Neste trabalho foram analisados cinco medicamentos e cinco IFAS de diferentes fornecedores. Para os medicamentos foram feitos testes característicos de verificação de equivalência farmacêutica. Nos IFAS, as diversas técnicas empregadas não evidenciaram presença de polimorfos ou alterações importantes nas propriedades físico-químicas e na velocidade de dissolução intrínseca. Entretanto, os perfis de dissolução dos medicamentos, principalmente, entre os dois similares A e B demonstraram diferenças apontadas pelos valores do fator f2, respectivamente, de 20 e 42, os quais indicaram associação destes valores com a presença de distintos excipientes, como por exemplo o manitol e diferentes processos de produção industrial.

Some active pharmaceutical ingredients (API) might present polymorphism at any stage of the industryproduction process. In caseit is not characterized and specified, a different polymorph might beerroneously used during the manufacturing procedure. Polymorphisms cause some variations in thephysicochemical properties of APIs, especially in solubility. Therapeutic inefficacy was detected in someglyburide drug products, and the occurrence of polymorphs might be one of the possible reasons. Thisstudy analyzed five drug products and five APIs., The characteristic pharmaceutical equivalence testswere used for analyzing the drug products. The techniques employed to evaluate the APIs showed nodifferences in polymorphism, no significant changes in the physicochemical properties or in the intrinsicdissolution rate. However, the dissolution profiles of the drug products, mainly between two similarproducts A and B, showed significant differences in the f2 factor values, being 20 and 42, respectively,indicating that these values were related to the occurrence of different excipients, such as mannitol.

Contribuições para a avaliação da qualidade dos medicamentos fitoterápicos no Brasil / Contributions to the quality assessment of herbal medicines in Brazil

O desenvolvimento de metodologia altamente discriminatória para a identificação e caracterização das espécies de plantas medicinais regulamentadas pelo sistema público de saúde brasileiro (SUS) é de suma importância para o controle de qualidade destas espécies como matérias-primas na produção de medicamentos fitoterápicos, consequentemente, minimizar o risco sanitário para o consumidor. No primeiro estudo foi utilizado o método RAPD-PCR para a elaboração de um perfil genético de três espécies diferentes de plantas medicinais regulamentadas pelo SUS do Brasil: Mikania glomerata Sprengel, Maytenus ilicifilia (Schrad)Planch e Schinus terebenthifolia Raddi, a partir de exemplares destas plantas, que foram cedidas pela Coleção Temática de Plantas Medicinais do Instituto de Pesquisas do Jardim Botânico do Rio de Janeiro, os perfis resultantes permitiram a identificação eficiente das espécies diferentes. No segundo estudo o método RAPD-PCR foi utilizado para a elaboração de um perfil de fragmentos de DNA ("fingerprint") de Mikania glomerata coletadas no Horto Refúgio Biológico Bela Vista no Paraná e a cedida pela Coleção Temática de Plantas Medicinais do Instituto de Pesquisas do Jardim Botânico no Rio de Janeiro, os perfis resultantes permitiram a caracterização eficaz das duas plantas de mesma espécie de origem diferente (PR e RJ). No terceiro estudo foi desenvolvido um sistema de extração em água das plantas do primeiro estudo com detecção em CLAE-UV/VIS que gerou um perfil químico de cada planta, os perfis resultantes permitiram a identificação eficiente das três espécies diferentes.

Development of a new analytical method for determination of acetylsalicylic and salicylic acids in tablets by reversed phase liquid chromatography / Desenvolvimento de um novo método analítico para determinação de ácidos salicílico e acetilsalicílico em comprimidos por cromatografia líquida de fase invertida

Acetylsalicylic acid (AAS) is a drug utilized as analgesic, anti-inflammatory, and antipyretic medication, available worldwide and commonly used in Brazil. Salicylic acid (AS) is a precursor in AAS synthesis and is also produced during its degradation. The official United States Pharmacopoeia (USP) suggests the determination of these drugs by high performance liquid chromatography (HPLC), with ultraviolet detection, but this method has neither a high sensitivity (S AAS=0.12 mAbs/(μg/mL) and S AS=0.48 mAbs/(μg/mL)) nor resolution (Rs=1.61). The purpose of this study was to develop a new more adequate, accurate method by liquid phase chromatography than the current official methodology, and to use this new method in the determination of the tenors of acetylsalicylic, as of salicylic acids in tablets. The parameters of the chromatographic system for both the AAS and AS were satisfactory. Selectivity was verified by absorption spectra comparison in the ultraviolet (UV) range, during and after substance retention time. The linear range for AAS was 0.21 to 0.39 mg/mL, and that for AS was 6.3 to 11.7 μg/mL. The correlation coefficients (r) of the analytical curves of AAS and AS were 0.9995 and 0.9988, respectively; and the detection and quantification limits for the AS were 0.23 and 0.69 μg/mL. The sensitivity (S AAS=1.88 mAbs/(μg/mL) and S AS=1.84 mAbs/(μg/mL)) and the resolution (Rs =5.06) show the improvement obtained using this method over that described by the USP.

O ácido acetilsalicílico (AAS) é um fármaco utilizado como analgésico, antiinflamatório, antipirético, sendo amplamente comercializado e consumido no Brasil e no mundo. Como precursor de sua síntese utiliza-se o ácido salicílico (AS) que também é produzido através de sua degradação. A metodologia oficial da Farmacopéia Americana (USP) preconiza a determinação destes fármacos por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) com detecção por ultravioleta, mas este método não possui boa sensibilidade (S AAS=0,12 mAbs/(μg/mL) e S AS=0,48 mAbs/(μg/mL)) e resolução (Rs =1,61). O objetivo deste trabalho, visando a melhor adequação do sistema cromatográfico em relação à metodologia oficial, foi o desenvolvimento e otimização de um novo método por cromatografia em fase líquida para determinar os teores tanto do ácido acetilsalicílico quanto do salicílico em comprimidos. Os parâmetros da adequação do sistema cromatográfico para o AAS e para o AS foram satisfatórios. A seletividade foi verificada por comparações dos espectros de absorção no ultravioleta (UV) antes, durante e depois do tempo de retenção da substância. A faixa linear de trabalho para o AAS foi de 0,21 a 0,39 mg/mL e a do AS foi de 6,3 a 11,7 μg/mL. Os coeficientes de correlação (r) das curvas analíticas do AAS e do AS foram de 0,9995 e 0,9988, respectivamente e os limites de detecção e quantificação para o AS foram 0,23 e 0,69 μg/mL. A sensibilidade (S AAS=1,88 mAbs/(μg/mL) e S AS=1,84 mAbs/(μg/mL)) e a resolução (Rs=5,06) atestam a melhoria em relação ao método descrito na USP.

Development of a new analytical method for determination of acetylsalicylic and salicylic acids in tablets by reversed phase liquid chromatography / Desenvolvimento de um novo método analítico para a determinação de ácidos acetilsalicílico e ácido salicílico em comprimidos por meio de cromatografia líquida de fase invertida

O ácido acetilsalicílico (AAS) é um fármaco utilizado como analgésico, antiinflamatório, antipirético, sendo amplamente comercializado e consumido no Brasil e no mundo. Como precursor de sua síntese utiliza-se o ácido salicílico (AS) que também é produzido através de sua degradação. A metodologia oficial da Farmacopéia Americana (USP) preconiza a determinação destes fármacos por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) com detecção por ultravioleta, mas este método não possui boa sensibilidade (SAAS=0,12 mAbs/(µg/mL) e SAS=0,48 mAbs/(µg/mL)) e resolução (Rs =1,61). O objetivo deste trabalho, visando a melhor adequação do sistema cromatográfico em relação à metodologia oficial, foi o desenvolvimento e otimização de um novo método por cromatografia em fase líquida para determinar os teores tanto do ácido acetilsalicílico quanto do salicílico em comprimidos. Os parâmetros da adequação do sistema cromatográfico para o AAS e para o AS foram satisfatórios. A seletividade foi verificada por comparações dos espectros de absorção no ultravioleta (UV) antes, durante e depois do tempo de retenção da substância. A faixa linear de trabalho para o AAS foi de 0,21 a 0,39 mg/mL e a do AS foi de 6,3 a 11,7 µg/mL. Os coeficientes de correlação (r) das curvas analíticas do AAS e do AS foram de 0,9995 e 0,9988, respectivamente e os limites de detecção e quantificação para o AS foram 0,23 e 0,69 µg/mL. A sensibilidade (SAAS=1,88 mAbs/(µg/mL) e SAS=1,84 mAbs/(µg/mL)) e a resolução (Rs=5,06) atestam a melhoria em relação ao método descrito na USP.

Avaliação de ensaios do programa de monitoramento pós mercado da qualidade de medicamentos sintéticos com amoxicilina

A Amoxicilina é um antimicrobiano beta-lactâmico registrado na Agência Nacional de Vigilância Sanitária (Anvisa) para venda no território brasileiro. Ela age em microrganismos gram positivo e negativo, desta forma possuindo ação de amplo espectro. Em 2020, a Anvisa recebeu várias queixas técnicas via sistema Notivisa relatando a alteração de coloração em medicamentos contendo amoxicilina. Neste cenário, a Gerência de Laboratórios de Saúde Pública - GELAS/DIRE4 e a Gerência de Inspeção e Fiscalização de Medicamentos e Insumos Farmacêuticos - GIMED/GGFIS iniciaram tratativas junto ao Laboratório de Medicamentos, Cosméticos e Saneantes do INCQS/Fiocruz para discutir a viabilidade técnica da execução de um programa de monitoramento analítico de medicamentos sintéticos contendo amoxicilina. Em 2021, a Anvisa instituiu o Programa de monitoramento analítico de medicamentos sintéticos contendo amoxicilina, com a participação do INCQS, que teve o objetivo de avaliar a qualidade pós mercado destes medicamentos. No período de março a agosto de 2021 foram recolhidas 34 amostras de diferentes regiões do Brasil de Amoxicilina e Amoxicilina+clavulanato e analisadas no INCQS. As análises foram realizadas com as formas farmacêuticas de comprimidos revestidos, cápsulas, cápsulas duras e pó para solução injetável. Foram realizados os ensaios de rotulagem, análises de aspecto, determinação de peso, identificação da amoxicilina, teor de amoxicilina, uniformidade por variação de peso e dissolução. As referências utilizadas para a realização dos testes foram a resolução Anvisa RDC n° 71, de 22 de dezembro de 2009, a bula do medicamento, a Farmacopeia Brasileira 6a ed. 2019 e a United States Pharmacopeia - Online (USP). De todas as amostras analisadas, apenas uma apresentou laudo insatisfatório. A amostra foi reprovada no teste de análise de aspecto pois apresentava comprimidos quebrados na embalagem. Com 97,0% das amostras satisfatórias, pode-se concluir que os medicamentos analisados neste programa de monitoramento apresentam elevado índice de qualidade. Desta forma, o programa atinge seus objetivos de promover a proteção da saúde da população, uma vez que este medicamento é amplamente utilizado para o tratamento de infecções bacterianas.

Validação intralaboratorial de um novo método analítico por cromatografia em fase líquida do ácido acetilsalicílico e do ácido salicílico em comprimidos / Validation of a novel HPLC method applied to the analytical determination of acetylsalicylic and salicylic acid in tablets

Na rotina do Laboratório Oficial, no que concerne ao Controle de Qualidade de medicamentos, não é fato pouco comum à obtenção de resultados de qualidades discutíveis, mesmo seguindo com todo rigor a metodologia descrita em um compêndio tomado como referencial. Alguns métodos de análise que utilizam Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE), cujos resultados, por vezes, causam espécie ao analista em termos de adequação do sistema (retenção, número de pratos teóricos, seletividade, resolução e simetria), inviabilizando os resultados finais, comparados ao que consta na monografia os dados referentes à conformidade e adequação do cromatograma. O trabalho aqui apresentado tem como objetivo mostrar a validação intralaboratorial de um novo método por cromatografia em fase líquida para dosar o ácido acetilsalicílico e o ácido salicílico em comprimidos que apresentou dados referentes a adequação do sistema melhores do que a metodologia por cromatografia em fase líquida da Farmacopéia Americana (USP 30) e vantagens metodológicas sobre a metodologia volumétrica da Farmacopéia Brasileira (FB 2002). (AU)

Validação intralaboratorial de um novo método analítico por cromatografia em fase líquida do ácido acetilsalicílico e do ácido salicílico em comprimidos / Validation of a novel HPLC method applied to the analytical determination of acetylsalicylic and salicylic acid in tablets

Na rotina do Laboratório Oficial, no que concerne ao Controle de Qualidade de medicamentos, não é fato pouco comum à obtenção de resultados de qualidades discutíveis, mesmo seguindo com todo rigor a metodologia descrita em um compêndio tomado como referencial. Alguns métodos de análise que utilizam Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE), cujos resultados, por vezes, causam espécie ao analista em termos de adequação do sistema (retenção, número de pratos teóricos, seletividade, resolução e simetria), inviabilizando os resultados finais, comparados ao que consta na monografia os dados referentes à conformidade e adequação do cromatograma. O trabalho aqui apresentado tem como objetivo mostrar a validação intralaboratorial de um novo método por cromatografia em fase líquida para dosar o ácido acetilsalicílico e o ácido salicílico em comprimidos que apresentou dados referentes a adequação do sistema melhores do que a metodologia por cromatografia em fase líquida da Farmacopéia Americana (USP 30) e vantagens metodológicas sobre a metodologia volumétrica da Farmacopéia Brasileira (FB 2002). (AU)

Validação intralaboratorial de um novo método analítico por cromatografia em fase líquida do ácido acetilsalicílico e do ácido salicílico em comprimidos / Validation of a novel HPLC method applied to the analytical determination of acetylsalicylic and salicylic acid in tablets

Na rotina do Laboratório Oficial, no que concerne ao Controle de Qualidade de medicamentos, não é fato pouco comum à obtenção de resultados de qualidades discutíveis, mesmo seguindo com todo rigor a metodologia descrita em um compêndio tomado como referencial. Alguns métodos de análise que utilizam Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE), cujos resultados, por vezes, causam espécie ao analista em termos de adequação do sistema (retenção, número de pratos teóricos, seletividade, resolução e simetria), inviabilizando os resultados finais, comparados ao que consta na monografia os dados referentes à conformidade e adequação do cromatograma. O trabalho aqui apresentado tem como objetivo mostrar a validação intralaboratorial de um novo método por cromatografia em fase líquida para dosar o ácido acetilsalicílico e o ácido salicílico em comprimidos que apresentou dados referentes a adequação do sistema melhores do que a metodologia por cromatografia em fase líquida da Farmacopéia Americana (USP 30) e vantagens metodológicas sobre a metodologia volumétrica da Farmacopéia Brasileira (FB 2002).

Laboratório oficial na avaliação crítica das monografias farmacopeicas

O trabalho aqui apresentado tem como objetivo principal mostrar que na rotina do laboratório, no que concerne ao Controle de Qualidade de medicamentos, não é fato pouco comum a obtenção e resultados de qualidades discutíveis, mesmo seguindo com todo rigor a metodologia descrita em um compêndio tomado como referencial. Foram citados, por exemplo, alguns métodos de análise que utilizam Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE), cujos os resultados, por vezes, causam espécie ao analista em termos de "System Suitability"(retenção, número de pratos teóricos, seletividade, resolução e simetria), inviabilizando os resultados finais, não obstante constem na monografia os dados referentes à conformidade e adequação do cromatograma. Com esta finalidade, foi dado enfoque à Metodologia Farmacopeica do Maleato de Enalapril, a do Ácido Acetilsalicílico e à Metodologia Farmacopeica da Rifampicina e Isoniazida. Foi apresentada alguma situação em que não se obtiveram resultados satisfatórios, mesmo utilizando os materiais e equipamentos validados e seguindo as técnicas analíticas oficiais acima. Depois de feita uma avaliação e comentários de possíveis causas, foram propostas alterações/modificações que, efetivamente, possam trazer vantagens metodológicas e que se reflitam, obviamente, em resultados mais apreciáveis. Foi desenvolvida uma metodologia por CLAE para dosar o ácido acetilsalicílico e o ácido salicílico na Aspirina que apresentou dados referentes ao "System Suitability" melhores do que a metodologia por CLAE da Farmacopéia Americana (USP 28) e vantagens metodológicas sobre a metodologia volumétrica da Farmacopéia Brasileira (FB 2002). Essa temática foi proposta para a discussão da importância do senso crítico que o profissional que trabalha na rotina do laboratório de Controle de Qualidade voltado para Vigilância Sanitária de medicamentos (sendo no INCQS ou nos LACENS), deve possuir ao analisar criticamente algumas metodologias "Farmacopeicas", quanto ao "System Suitability" e ao Risco Sanitário para a população